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7 기능 자기 공명 분광학 수염 활성화 중 쥐 신 피 질에서 T
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JoVE Journal Neuroscience
Functional Magnetic Resonance Spectroscopy at 7 T in the Rat Barrel Cortex During Whisker Activation

7 기능 자기 공명 분광학 수염 활성화 중 쥐 신 피 질에서 T

Full Text
8,959 Views
09:26 min
February 8, 2019

DOI: 10.3791/58912-v

Jordy Blanc1, Hélène Roumes1, Leslie Mazuel1, Philippe Massot1, Gérard Raffard1, Marc Biran1, Anne-Karine Bouzier-Sore1

1Centre de Résonance Magnétique des Systèmes Biologiques (CRMSB), Unités Mixtes de Recherche (UMR) 5536,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)/Université Bordeaux

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

혈액 산소-레벨-종속적 기능 자기 공명 영상 (대담한 fMRI)는 해당 somatosensory 배럴 필드 피 질 영역 (S1BF 라고 함)가 올바르게 활성화, 주요 검사 후 젖 산 콘텐츠를 계량 하는 것입니다이 연구의 목표 지역화 된 양성자 자기 공명 분광학 (1H 부인) 7 t.에 의해 활성화 된 쥐 두뇌에 있는 동요

Transcript

이 방법은 신경 유전학의 필드에 있는 중요한 질문에 대답하고 휴식과 활성화된 상태 사이에서 생기는 신진 대사 변경을 해독하는 것을 도울 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 비침습적 방식으로 실시간으로 생체 내 이러한 변화를 따르는 것입니다. 특히 이 기술은 병리학적 또는 유전자 변형 동물, 예를 들어 뉴런과 리오셀 사이의 대사 상호 작용에서 특정 단백질의 역할을 결정하기 위해 적용될 수 있다. 먼저 자석 침대에 호흡 센서를 배치하고 이소플루란 마스크에 코가 있는 경향이 있는 위치에 있는 자석 침대로 쥐를 옮기고 흉곽과 자석 침대 사이에 호흡 센서를 배치하여 시작합니다. 올바른 수염이 무료인지 확인하고 테이프로 쥐를 고정하십시오. 테이프를 사용하여 오른쪽 수염을 모두 트랩하고 쥐 MRI 침대를 따라 공기 퍼프 시스템의 유연한 출구 파이프를 정렬하여 튜브를 빠져나가는 부품이 수직이고 판매로부터 약 1cm 반 센티미터가 되도록 판매합니다. 그런 다음 더 많은 테이프로 파이프를 제자리에 고정합니다. 그런 다음 압축 된 공기 소스에서 솔레노이드 제어 밸브 입력 및 출구 파이프를 솔레노이드 제어 밸브 출력에 연결하여 솔레노이드 제어 밸브가 자석 방 외부에 남아 있음을 주의하십시오. 트랜지스터 트랜지스터-로직 포트를 사용하여 맥동 장치를 솔레노이드 밸브및 자석에 연결하고 맥동 주파수가 8Hertz, 펄스 시간이 20초이고 휴식 시간이 10초되도록 장치를 구성합니다. 수염 자극의 경우 뇌와 쥐를 똑바로 세워 귀 막대로 동물을 고정시하십시오. 볼륨 어레이 코일을 머리 위에 놓고 테이프로 배열을 수정합니다. 에어 퍼프 시스템을 켜서 회전없이 마찰없이 판매가 전방 방향으로 이동하는지 확인합니다. 그런 다음 공기 퍼프 시스템을 끄고 침대 끝 코일을 자석 중앙에 놓습니다. 혈액 산소 수준 종속 기능 공명 이미징의 경우, 판매 움직임을 다시 확인하고 국소화 서열을 사용하여 쥐가 잘 배치되어 있는지 확인합니다. 지역화 시퀀스 탭을 사용 법 이름으로 드래그하고 계속 클릭합니다. 위치가 괜찮은 경우 T2 Star FID EPI 서열 탭을 명령 이름으로 드래그하고 뇌 중앙의 시야를 중앙으로 드래그하고 조정 플랫폼을 클릭하여 편집된 스캔 명령을 엽니다. 그런 다음 B0 맵을 기록하고 T2 스타 FID EPI 시퀀스를 시작합니다. 첫 번째 와 비교하고 T2 Star FID EPI 서열 중에 쥐가 이동했는지 여부를 확인하는 것으로 입증 된 것처럼 다른 현지화 시퀀스를 획득하십시오. 그런 다음 침대를 초기 위치로 되돌리고 볼륨 어레이 코일을 제거합니다. 이미지를 처리하려면 T2 Star FID EPI 파일을 열고 이미지 디스플레이에서 T2 Star FID EPI 이미지를 읽습니다. 기능 컨트롤러의 시작 창을 열고 처리 탭에서 기능 이미징 창을 선택합니다. 자극 프로토콜을 정의하고 프로토콜 창을 선택하고, 기간의 기간을 40으로 설정하고 오프 기간을 20.클릭 역 기여로 설정하고 자극 상태 슬라이더를 왼쪽으로 드래그하여 값을 선택합니다. 사전 처리 창에서 전처리를 위해 중앙값 필터를 일반으로 설정하고 후처리를 위한 중앙필터 2D 3D를 설정한다. 그런 다음 실행을 클릭합니다. 커서를 드래그하여 오버레이 조회 테이블을 조정하고 활성화된 뇌 영역을 시각화합니다. 양성자 자기 공명 분광기 또는 MRS에 대한 표면 코일을 정확하게 배치하려면, 표면 코일이 수평 위치에 왼쪽 배럴 피질 바로 위에 배치하고 자석 내부에 있을 때 자석 중앙에 위치할 수 있도록 머리를 시계 방향으로 약 30도 회전시. 표면 코일을 연결하고 테이프로 코일을 제자리에 고정합니다. 에어 퍼프 시스템이 켜지면 판매가 정상적으로 이동할 수 있는지 확인합니다. 그런 다음 침대를 자석에 넣고 판매 움직임을 다시 확인하십시오.설명된 대로 국소화 시퀀스를 가진 동물의 올바른 위치를 확인하고 T2-TurboRARE 시퀀스 탭을 명령 명 창으로 드래그합니다. 그런 다음 계속 클릭하여 스캔 프로그램을 실행하고 소마토 감각 배럴 필드 피질 내에서 복셀의 올바른 국소화를 허용합니다. 스캔의 끝에 레이저 시퀀스 탭을 지시 명 창으로 드래그하고 somatosensory 배럴 필드 피질 영역의 중심에 복셀을 배치합니다. 조정 플랫폼을 클릭하여 편집된 스캔 명령을 열고 흔들림을 클릭하여 튜닝을 위해 수신기 코일의 임피던스를 약간 변경합니다. 튜닝이 완료되면 사용 설명서 편집기를 닫고 편집된 명령에서 변경 내용을 적용하려면 적용을 클릭합니다. B0 맵을 기록하고 휴식 기간 동안 pro diem MRS 인수를 시작합니다. 다른 국소화 서열을 획득하여 첫 번째 와 비교하여 레이저 획득 중에 쥐가 움직이지 않았는지 확인합니다. 그런 다음 공기 퍼프 시스템을 켜고 레이저 시퀀스를 사용하여 두 번째 양성자 MRS를 수행합니다. 최종 현지화 시퀀스를 수행하여 침대를 초기 위치로 되돌리기 전에 쥐가 이동했는지 확인합니다. 그런 다음 표면 코일을 제거하고 전체 복구될 때까지 모니터링하여 쥐를 벤치로 돌려보습니다. MRS 이미지를 처리하려면 모델 스펙트럼 또는 LC 모델 소프트웨어의 선형 조합을 열고 적절한 데이터 유형 및 파일을 선택합니다. 확인을 클릭하고 제목 섹션에서 수동으로 제목을 입력하고 밀리리터 범위당 적절한 부품을 정의합니다. 그런 다음 LC 모델을 실행하여 LC 모델 정량화를 시작합니다. 오른쪽 수염이 수제 공기 퍼프 시스템을 사용하여 자극될 때, 왼쪽 배럴 피질에서 양성 BOLD 신호가 검출되는 것을 입증하여 소마토 감각 배럴 필드라고도 한다. 해부학적 자기 공명 이미지와 쥐 뇌 아틀라스 를 사용하여 BOLD 기능 MRI에 의해 시각화된 활성화된 뇌 영역을 사용하면 수염 자극 중에 활성화되는 소마토감각 배럴 필드 영역에 복셀을 배치할 수 있습니다. 수염 자극에 대한 패러다임이 켜지면 왼쪽 소마토 감각 배럴 필드에서 젖산 함량의 증가가 관찰된다. 휴식 과 활성화 된 기간 사이의 신진 대사 변동을 더 잘 시각화하기 위해 스펙트럼 뺄셈을 수행 할 수 있습니다. 이 빼진 스펙트럼에서 뇌 활성화와 젖산 함량의 증가는 훨씬 더 쉽게 시각화 할 수 있습니다. 예를 들어 이 쥐에서 N-아세틸라스파르타테 신호가 약간 감소하였다. 젖산 피크는 이에 대해 거의 감지되지 않지만, LC 모델은 좋은 정확도와 크램으로 피크를 정량화할 수 있었습니다.

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신경 과학 문제 144 대뇌 활성화 수염 자극 뇌 대사 vivo에서1H-부인 LCModel 쥐 젖 대담한 fMRI

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