Name: GC-MS 열 탈착 샘플링을 위한 헤드스페이스 휘발성 수집 기법을 사용한 신속한 플로랄 향수 휘발성 수집 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: 학습하세요 꽃 향기 휘발성 화합물을 비파괴적으로 신속하게 수집하는 방법을. GC-MS 열 탈착 샘플링을 활용하여 수분 매개 생물학 연구에 활용할 수 있습니다.

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USDA-ARS 연구 프로젝트 번호 6036-22000-028-00D. 이 출판물에서 거래, 회사 또는 법인 이름을 사용하는 것은 독자의 정보와 편의를 위한 것입니다. 이러한 사용은 미국 농무부 또는 농업 연구 서비스에서 적합할 수 있는 다른 제품 또는 서비스를 배제하는 공식적인 승인 또는 승인을 구성하지 않습니다. 또한, 플로리다 생물학 부 루이스와 발리나 본 교제의 대학 난초 생물학 (2017), 플로리다 대학 대학원 연구 펠로우십 (2014-2018) 뿐만 아니라 자금을 제공. 우리는 또한이 비디오의 촬영 중에 사용되는 오키드 식물에 대한 Stetson 대학에서 신디 베닝턴 감사합니다.

참고: 향수 나 향이 나는 로션 및 제품은 이러한 절차 중 착용해서는 안됩니다.
1. 꽃 선택
참고: 사용되는 꽃은 자연적으로 환경에서 자라거나 인공 환경 조건하에서 보관될 수 있습니다. 수집 중 온도, 습도 및 조명 수준은 사용되는 특정 꽃 종과 수집되는 데이터의 유형에 따라 달라질 수 있습니다. 예를 들어, 같은 꽃에 대해 낮과 밤에 데이터를 수집하여 향기가 하루 중 시간에 따라 달라지는지 확인하고, 현장에서 온실 꽃에서 수집되었습니다.
<ol><li>처음에 개봉되지 않은 꽃을 선택하여 샘플 수집 시간을 표준화합니다. 이것은 시간이 지남에 따라 향기를 변화하는 꽃에 대한 제어합니다.</li>
	<li>개화 시간의 지속 시간에 따라 가능하면, 모든 샘플에 대한 표준 시간을 설정, 샘플을 수집하기 위해 개화 후 적어도 24 시간을 기다립니다.</li>
	<li>식물에 여러 개의 꽃이 피는 경우, 같은 꽃의 반복 샘플링을 보장하기 위해 플래그 테이프 또는 유사한 것과 함께 사용되는 꽃을 표시합니다.</li>
</ol>2. 재료 준비
<ol><li>오븐 백 (약 40.5 cm × 44.5 cm)과 골판지 PTFE 튜브를 사용합니다.</li>
	<li>처음에는 오븐 백을 물에 30분 동안 끓여 잔류 플라스틱 화합물을 제거합니다. 말리려면 175 °C의 오븐에서 굽습니다.</li>
	<li>가방이 건조되면 오븐 봉투의 닫힌 끝 모서리에 폴리 프로필렌 격벽 유니온을 추가합니다. 이러한 부착물은 튜브를 연결하여 숯으로 여과된 공기를 밀어 내고 헤드스페이스에서 향기를 끌어낼 수 있게 합니다.</li>
	<li>75% 에탄올로 모든 가방과 튜브를 헹구십시오. 헹구고 나서 두 공기를 모두 말리십시오.</li>
	<li>오븐 백을 건조 한 후, 낮은 열에서 오븐에 가방과 튜브를 구워, 약 74-85 °C 에 대 한 30 분.</li>
</ol>3. 휘발성 수집
참고: 가방이나 필터 카트리지에 접촉하면 시료가 오염될 수 있기 때문에 멸균 네오프렌 장갑은 이 과정 전반에 걸쳐 착용해야 합니다.
<ol><li>구운 오븐 가방으로 선택한 꽃을 덮습니다. 꽃 아래에 플라스틱 지퍼 넥타이로 가방을 단단히 끼워 가방에 원치 않는 공기가 유입되는 것을 방지합니다.</li>
	<li>수집 장비의 공기 출구에서 튜브를 부착하고 오븐 가방에 격벽 유니온 중 하나에 연결합니다.</li>
	<li>다른 격벽 결합체에 다공성 폴리머 흡착제가 포함된 유리 필터 카트리지를 부착합니다.</li>
	<li>진공 입력의 수집 장비에 두 번째 튜브를 부착합니다. 두 번째 튜브의 끝을 유리 휘발성 수집 필터 카트리지에 연결합니다.</li>
	<li>~0.05 L/min으로 설정된 에어 펌프와 진공을 동시에 켭니다. 꽃 주위의 헤드 스페이스는 공기로 채워지지만 과도하게 팽창되지는 않습니다. 시스템은 필터를 통해 가방에서 공기를 끌어, 꽃 휘발성 을 트래핑합니다.</li>
	<li>기기가 10분 동안 실행되도록 한 다음 에어 펌프와 진공 을 모두 끕니다. 참고: 더 적은 양의 향을 생산/방출하는 꽃 종은 더 오랜 기간 동안 샘플링해야 할 수도 있습니다.</li>
	<li>튜브와 유리 필터 카트리지를 분해합니다. 필터를 나사식 캡이 있는 유리 병에 넣습니다. 캡이 켜지면 PTFE 파이프 스레드 테이프로 바이알을 밀봉합니다.</li>
	<li>GC-MS를 사용하여 분석할 때까지 샘플을 냉동실에 보관합니다.</li>
	<li>깨끗한 오븐 가방과 유리 필터로이 과정을 반복, 빈 오븐 가방이 시간, 제어로 빈 공기 샘플을 수집합니다. 이렇게 하면 수집된 모든 배경 휘발성을 식별할 수 있습니다. 참고: 일부 꽃은 하루 동안 다양한 향기 수준을 생성하기 때문에 샘플 수집을 반복하는 것은 매일 거의 같은 시간에 수행되어야합니다.</li>
</ol>4. GC-MS
<ol><li>냉동고에서 유리 필터 카트리지를 분리하고 인젝터 포트의 GC-MS에 넣습니다.</li>
	<li>열 수집 트랩(TCT)에서 가열하여 흡착제에서 흡착제상에 수집된 헤드스페이스 휘발성 물질은 헬륨 가스의 흐름 내에서 8분 동안 220°C(속도: 1.2 mL/min)로 방출한다.</li>
	<li>-130 °C에서 TCT 콜드 트랩 유닛에서 탈착 화합물을 수집합니다. 콜드 트랩 온도는 GC-MS 프로그램에 의해 조절됩니다.</li>
	<li>플래시는 TCT 콜드 트랩 유닛이 연결된 가스 크로마토그래프의 모세관 기둥에 화합물을 주입하기 위해 TCT 콜드 트랩 유닛을 가열합니다. TCT에 대한 방법은 -20 °C에서 시작하여 150 °C에서 끝납니다.</li>
	<li>GC-MS를 15°C/min에서 40°C에서 280°C로 상승하도록 프로그래밍하고 40°C에서 5분 간 유지합니다.</li>
</ol>5. 데이터 분석
<ol><li>식별을 위해, 질량 스펙트럼 라이브러리 (NIST 및 화학 생태학과, 고테보그 대학, 스웨덴11)에서그와 샘플의 질량 스펙트럼뿐만 아니라 본격적인 화합물 표준의 시간에 휘발성 물질의 보존 시간을 비교12.</li>
	<li>수집된 휘발성 물의 크로마토그램을 비교하여 일반적인 재발 피크를 식별합니다.</li>
	<li>피크 휘발성 물질을 식별 한 후, 그들은 이전에 꽃 향기10에설명 된 경우 를 결정하기 위해 Pherobase (반화학 및 페로몬의 온라인 데이터베이스)를 사용합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+scents-+A+checklist+of+volatile+compounds+isolated+by+head-space+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques.</a> Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).</li>
<li>Dudareva, N. A., Pichersky, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDudareva%2C+NA+%22Biology+of+floral+scent%22">Biology of floral scent</a>. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).</li>
<li>Altenburger, R., Matile, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhythms+of+fragrance+emission+in+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Rhythms of fragrance emission in flowers.</a> Planta. 174, 242-247 (1988).</li>
<li>Dodson, C. H., Dressler, R. L., Hills, H. G., Adams, R. M., Williams, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+active+compounds+in+orchid+fragrances%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biologically active compounds in orchid fragrances.</a> Science. 164, 1243-1249 (1969).</li>
<li>Theis, N., Raguso, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pollination+on+floral+fragrance+in+thistles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">The effect of pollination on floral fragrance in thistles.</a> Journal of Chemical Ecology. 31 (11), 2581-2600 (2005).</li>
<li>Heath, R. R., Manukian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+systems+to+collect+volatile+semiochemicals+from+insects+and+plants+using+a+charcoal-infused+medium+for+air+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of systems to collect volatile semiochemicals from insects and plants using a charcoal-infused medium for air purification.</a> Journal of Chemical Ecology. 18, 1209-1226 (1992).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+floral+fragrance+components+of+species+of+Encyclia+and+Prosthechea+%28Orchidaceae%29+from+Soconusco%2C+southeast+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Lankesteriana%22%5BJournal%5D)">Comparison of floral fragrance components of species of Encyclia and Prosthechea (Orchidaceae) from Soconusco, southeast Mexico.</a> Lankesteriana. 6, 83-139 (2006).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+analysis+of+euglossine+bee+pollinated+orchids+from+Soconusco%2C+south-east+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Species+Biology%22%5BJournal%5D)">Fragrance analysis of euglossine bee pollinated orchids from Soconusco, south-east Mexico.</a> Plant Species Biology. 22, 129-134 (2007).</li>
<li>Sadler, J. J., Smith, J. M., Zettler, L. W., Alborn, H. T., Richardson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+composition+of+Dendrophylax+lindenii+%28Orchidaceae%29+using+a+novel+technique+applied+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Environmental+Science%22%5BJournal%5D)">Fragrance composition of Dendrophylax lindenii (Orchidaceae) using a novel technique applied in situ.</a> European Journal of Environmental Science. 1, 137-141 (2011).</li>
<li>Ray, H. A., Stuhl, C. J., Gillett-Kaufman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+fragrance+analysis+of+Prosthechea+cochleata+%28Orchidaceae%29%2C+an+endangered+native%2C+epiphytic+orchid%2C+in+Florida%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Floral fragrance analysis of Prosthechea cochleata (Orchidaceae), an endangered native, epiphytic orchid, in Florida.</a> Plant Signaling and Behavior. , (2018).</li>
<li>National Institute of Standards and Technology. U.S. Department of Commerce. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nist.gov/">https://www.nist.gov/</a> (2019).</li>
<li>The Pherobase: Databse of Pheromones and Semiochemicals. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.pherobase.com/">http://www.pherobase.com/</a> (2019).</li>
</ol>

저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.

이 기술은 샘플링 속도와 휴대성에 매우 유용하지만, 한 가지 제한은 epiphytic 종, 또는 나무에서 자라는 것을 위해 그것을 사용하는 것이지 땅에서 자라지 않습니다. 본래 의10에서,샘플링된 꽃 중 하나는 골상이었다. 기계가 너무 무거워서 자유롭게 걸 수 없기 때문에 샘플링을 위해 안정적이고 높은 베이스를 만들어야 합니다. 또한 기기를 전기 콘센트또는 배터리 전원에 연결할 수 있으므로 필드 샘플링이 길어지면 기기를 사용하지 않을 때 배터리를 충전할 전원이 있어야 합니다.
여기서 의 방법을 사용하면 빠른 반복 샘플링과 훨씬 더 빠른 샘플링 시간으로 내부 비파괴 샘플링을 할 수 있습니다. 일부 꽃 향기 연구는 한 샘플에 대해 2-3 시간 동안 수집되는 향기를 필요로하지만, 제시 된 방법은 유리에 사용되는 수집 물질 (다공성 폴리머 흡착제)으로 인해 약 10 분 에서 휘발성 물질을 정확하게 수집 할 수 있습니다. 필터.
<p cl...

꽃은 일반적으로 수분 공급자를 유치하는 데 사용되는 향기를 생산하고 있습니다. 이 향기는 모두 꽃 혼합1,2,3로함께 작용하는 많은 화학 화합물로 구성되어 있습니다. 이러한 향기가 없다면 꽃은 꽃가루를 사용하여 유전 정보를 전달할 가능성이 적습니다. 꽃 향기는 많은 꽃 식물 가족에 문서화되어 있으며, 오키다과는 4연구 된 일반적인 가족 중 하나입니다. 수분에서 꽃 향기의 역할을 이해하려면, 비파괴적으로 수집하고 하루 중 다른 시간에 꽃에서 방출되는 화학 화합물을 분석하는 것이 중요하다 몇 일에서 몇 주 동안 꽃이 열려, 향기는 시간이 지남에 따라 다를 수 있기 때문에5.
이러한 종류의 샘플링에 대한 초기 프로토콜은 히스와 마누키안6에의해 개발되었습니다. 그들의 샘플링 방법의 목표는 연구되는 표본 (예를 들어, 식물, 곤충)에 대한 스트레스를 줄이는 것이었습니다. 이전 논문은 향기를 수집하기 위해 꽃꽃을 제거하는 등 식물에 파괴적인 절차가 필요하다고 문서화했다. 최근 칸치노와 데이먼7,8에 의해 꽃 향기 간행물은 유사한 방법을 사용했다. 이 연구는 유리 챔버에 꽃을 넣고 그 위에 정화 된 공기를 전달; 이어서 챔버로부터의 향료 화합물을 투명한 파스퇴르 피펫에서 다공성 폴리머 흡착제 에 흡수되었다. 향료는 본 연구 기간 동안 적어도 2시간 동안 수집되었다. Sadler et al.9는 원래 연구10과마찬가지로 플로리다 남부의 에피피틱 난초에 대한 꽃 향기 연구를 수행했습니다. 다시, 이 연구는 다공성 폴리머 흡착제에 수집 된 향기와 함께, 향기 휘발성을 수집하기 위해 2 시간 이상 꽃을 샘플링할 것을 요구했다. 이 백서는 훨씬 더 빠른 샘플링을 허용하는 비파괴 방법을 제시하며 10분 만 지속됩니다. 또한, 대신 유리 챔버 오븐 베이킹 백을 사용하는 챔버의 보다 유연한 움직임을 허용하고 꽃에 손상의 가능성을 줄일 수 있습니다 사용된다. 이 가방은 여러 가지 크기로 제공되므로 샘플이나 주변 재료를 손상시키지 않고 개별 샘플에 쉽게 맞을 수있는 가방 크기를 선택할 수 있습니다. 본 연구에 사용된 흡착제는 테낙스 다공성 폴리머 흡착제였다. 이는 샘플을 분석을 위해 GC-MS 컬럼에 열적으로 탈착할 수 있기 때문에 Porapak과 다르므로 화학 용매의 사용을 제거합니다.
이 연구의 방법은 꽃에 의해 생성된 향수 휘발성을 신속하게 샘플링하는 방법을 제공하며 곤충 페로몬 또는 버섯 휘발성 물질과 같은 다른 표본의 휘발성 물질도 샘플링하는 데 사용될 수 있습니다. 샘플링 시간이 단축되면 샘플에 대한 스트레스가 줄어들고 단기간에 많은 샘플을 수집할 수 있습니다. 예를 들어, Sadler et al.9에서는밤에만 꽃이 향기가 나기 때문에 매일 밤 2~3개의 샘플만 수집할 수 있었습니다. 이 방법을 사용하면 같은 꽃에서 15-20 분 간격으로 밤새 샘플을 채취할 수 있습니다. 또한 유리 챔버 대신 가방을 사용하여 위험에 처한 식물 종에 대한 현장 수집을 위해 현장에서 샘플링하기 위해 헤드 스페이스를 쉽게 일시 중단 할 수 있습니다. 여기에 제시된 방법을 사용하여 지상 1.5~2m높이의 꽃을 시음할 수 있었습니다. 이러한 방법은 실험실과 현장에서 향수 수집에 매우 유용하며, 연구원들에게 샘플에 빠르고 비파괴적인 샘플링 기술을 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>벌크헤드 유니온</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06390-10</td><td></td></tr><tr><td>FEP 튜빙</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06407-60</td><td></td></tr><tr><td>가스 크로마토그래피</td><td>Hewlett Packard</td><td>6890</td><td></td></tr><tr><td>유리솜, 실란화된</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>20411</td><td></td></tr><tr><td>입구 라이너</td><td>Agilent</td><td>5062-3587</td><td></td></tr><tr><td>질량 분석기</td><td>Hewlett Packard</td><td>5973</td><td></td></tr><tr><td>레이놀즈 오븐 백</td><td>Reynolds Consumer Products</td><td>터키 크기</td><td></td></tr><tr><td>Tenax 다공성 폴리머 흡착제</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>11982</td><td></td></tr></tbody></table>

gc-ms 열 탈착 샘플링을 위한 헤드스페이스 휘발성 수집 기법을 사용한 신속한 플로랄 향수 휘발성 수집

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

많은 꽃 가문의 향기가 샘플링되고 휘발성 물질분석되었습니다. 향기를 구성하는 화합물을 아는 것은 위협적이거나 멸종 위기에 처한 꽃을 보존하는 중요한 단계가 될 수 있습니다. 꽃 향기는 꽃가루를 유치하는 데 매우 중요하기 때문에이 방법은 수분을 더 잘 이해하거나 향상시키는 데 사용할 수 있습니다. 우리는 휴대용 숯 공기 필터와 진공을 사용하여 꽃 향기 휘발성을 수집하는 프로토콜을 제시한 다음 GC-MS에 의해 분석됩니다. 이 방법을 사용하면 쉽게 운반할 수 있는 기계를 사용하여 무파괴 방법을 사용하여 향수 휘발성을 샘플링할 수 있습니다. 이 방법론은 빠른 샘플링 절차를 사용하여 샘플링 시간을 2-3시간에서 약 10분으로 단축합니다. GC-MS를 사용하여, 향수 화합물은 본격적인 기준에 따라 개별적으로 식별 될 수있다. 재료 설정에서 데이터 출력 수집에 이르기까지 향기 및 제어 데이터를 수집하는 데 사용되는 단계가 표시됩니다.

GC-MS의 대표적인 데이터는 도 1에서크로마토그램으로 나타내고 있다. 크로마토그램 외에도 결과의 데이터 파일도 제공됩니다(보충파일 1). 이 데이터 파일은 각 피크(RT)에 대한 보존 시간을 제공하고 해당 피크가 어떤 화합물인지 식별합니다(라이브러리/ID). 10:00에서 15:00 분 사이의 피크는화합물10의분자량으로 인해 꽃 휘발성이다. 피크 위의 숫자는 결과의 데이터 파일을 참조하는 식별 된 화합물의 보존 시간을 의미합니다(보충 파일 1). 각 향기 샘플에 대한 크로마토그램 및 데이터 파일을 획득함으로써, 화합물을 비교할 수 있고 각 꽃 샘플에 대해 재발하는 화합물을 식별할 수 있습니다. 컬렉션은 샘플링된 꽃을 나타내는 이름인 "샘플" 범주, 컬렉션의 시간 및 날짜(예: UF1 8AM 03/16/15)에서 이 문서에서 식별할 수 있습니다. 본 문서의 1페이지는 또한 ...

여기서, 우리는 비파괴 샘플링 절차를 사용하여 꽃꽃에서 꽃 향기 휘발성을 수집하기위한 프로토콜을 제시한다.

GC-MS 열 탈착 샘플링을 위한 헤드스페이스 휘발성 수집 기법을 사용한 신속한 플로랄 향수 휘발성 수집

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

꽃 향기는 수분 공급에 매우 중요하기 때문에 이 방법은 토착 꽃 종의 수분을 더 잘 이해하거나 향상시키는 데 사용될 수 있습니다. 이 방법을 통해, 향수 휘발성은 쉽게 운반 할 수있는 기계와 비 파괴적 방법을 사용하여 샘플링된다. 이 방법론은 빠른 샘플링을 사용하여 샘플링 시간을 2~3시간에서 10분으로 단축합니다.이러한 방법은 꽃에 의해 생성된 휘발성을 신속하게 샘플링하는 방법을 제공하며 곤충 페로몬과 같은 다른 표본의 휘발성 물질도 샘플링하는 데 사용될 수 있습니다. 시작하려면 처음에는 미개봉되지 않은 꽃을 선택하고 같은 꽃의 반복 샘플링을 보장하기 위해 플래그 테이프로 꽃을 표시합니다. 오븐 봉투를 물에 30분간 끓여 서 두면 플라스틱 화합물을 제거합니다.건조하려면 오븐에서 섭씨 175도에서 60분간 구워줍니다. 가방이 건조되면 오븐 가방의 닫힌 끝 모서리에 폴리 프로필렌 벌크 헤드 조합을 추가하십시오. 모든 가방과 튜브를 75%에탄올로 헹구고 공기 건조시 합니다.그런 다음 가방과 튜브를 74~85도 의 낮은 불에서 오븐에 넣고 30분간 굽습니다. 개화 시간의 기간에 따라, 가능한 경우 샘플을 수집하기 위해 개화 후 적어도 24 시간을 기다립니다. 선택한 꽃을 구운 오븐 가방으로 덮습니다.원치 않는 공기가 가방에 유입되는 것을 방지하기 위해 꽃 아래에 플라스틱 지퍼 넥타이와 함께 가방을 단단히 치우세요. 멸균 네오프렌 장갑을 착용하고, 수집 장비의 공기 콘센트에서 튜브를 부착하고 오븐 가방에 있는 격벽 조합 중 하나에 연결합니다. 다른 격벽 조합에, 다공성 폴리머 흡착을 포함하는 유리 필터 카트리지를 부착.진공 입력의 수집 장비에 두 번째 튜브를 부착합니다. 두 번째 튜브의 끝을 유리 휘발성 수집 필터 카트리지에 연결합니다. 에어 펌프와 진공을 동시에 켜고 분당 0.05 리터로 설정합니다.꽃 주위의 머리 공간은 공기로 가득하지만 과장되지 않습니다. 이 시스템은 필터를 통해 가방에서 공기를 끌어내어 꽃 휘발성 을 가중시합니다. 기기를 10분 동안 실행하도록 허용합니다.그런 다음 공기 펌프와 진공을 모두 끕니다. 튜브와 유리 필터 카트리지를 분해합니다. 필터를 유리 유리 유리병에 넣고 뚜껑에 나사를 놓습니다.PTFE 파이프 스레드 테이프로 유리병을 밀봉합니다. GCMS 분석될 때까지 샘플을 냉동실에 저장합니다. 빈 오븐 가방으로 이 프로세스를 반복하여 빈 공기 샘플을 컨트롤로 수집합니다.동일한 휘발성 의 일관된 복제를 위해, 일부 꽃은 하루 동안 다양한 향기 수준을 생성하기 때문에, 매일 동시에 샘플 수집을 반복합니다. 먼저, 냉동고에서 유리 필터 카트리지를 제거하고 인젝터 포트의 GCMS에 넣습니다. 흡착물에서 다공성 폴리머 흡착물에서 수집된 헤드 스페이스 휘발성을 방출하기 위해, 분당 1.2 밀리리터에서 헬륨 가스의 흐름 내에서 8분 동안 열 수집 트랩을 섭씨 220도로 가열한다.수집된 휘발성기의 크로마토그램을 비교하여 일반적인 재발피크를 식별합니다. 피크 휘발성을 식별한 후 Pherobase를 사용하여 이전에 플로럴 향수에 설명되어 있는지 확인합니다. 이 연구에서는 GCMS의 대표적인 데이터가 크로마토그램으로 표시됩니다.10분에서 15분 사이의 봉우리들은 꽃휘발성입니다. 수집된 휘발성 물질은 이전에 플로럴 향수에 설명되어 있었는지 확인하기 위해 Pherobase에서 참조되었습니다. 예를 들어, 화합물 번호 21, 10.311의 보존 시간을 가진 벤잘데히드로 확인되었다.벤잘데히드는 Pherobase에서 식물 가문이 조직한 모든 꽃 종 목록을 검색할 수 있으며, 그 향기 화합물이 확인되었습니다. 이 곳의 나초종은 이곳에서 볼 수 있으며, 이 종은 벤잘데히드가 꽃 향기에 존재하기로 결정했습니다. 이전 방법은 샘플 당 2 ~ 4 시간이 걸렸습니다.필터에서 샘플을 제거하기 위해 용매를 사용하면 GCMS에서 용매 피크가 발생합니다. 이렇게 하면 화합물이 0에서 3.5분까지 숨깁니다. 이 방법을 사용하면 모든 화합물을 볼 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

간단한 방법이 작은 조직 샘플에서 여러 식물 호르몬의 급격한 추출 및 분석을위한 허용 제공됩니다. 절차는 엄숙한 정화 단계로 증기 위상 추출을 사용합니다. 샘플은 GC / 주로 생산하는 화학 이온화 (M +1)과 MS + 이온에 의해 분석됩니다.

스트레스 응답하는 동안 식물 호르몬을 모니터링

보조 전기 분무 이온화 질량 분석계 (SESI - MS)은 샘플 전처리가 필요하지 않고 휘발성 유기 화합물 (휘발성 유기 화합물)의 검출이 가능합니다. 이 프로토콜은 SESI - MS를 사용하여 세균 휘발성 유기 화합물의 급속한 (분 이내) 특성화하기위한 지침을 제공합니다.

보조 전기 분무 이온화 질량 분석법 (SESI - MS)를 사용하여 특성화 세균 휘발성 물질

열매의 휘발성 화합물 분석을위한 신속한 방법을 설명합니다. 샘플의 homogenate의 헤드 스페이스에 존재하는 휘발성 화합물은 급속하게 분리되어 표면 탄성파 (SAW) 센서와 결합 초고속 가스 크로마 토그래피 (GC)로 검색됩니다. 데이터 처리 및 분석을위한 절차도 논의하고 있습니다.

전자 코를 사용하여 과일 휘발성 분석

후각 신호는 곤충의 여러 가지 행동을 중재하고, 휘발성 화합물의 수백 수십 구성 종종 복합 혼합물이다. 곤충 antennal 엽의 멀티 채널 녹음과 가스 크로마토 그래피를 사용하여, 우리는 bioactive 화합물의 식별하는 방법을 설명합니다.

곤충 Antennal 엽에 가스 크로마토 그래피 - 멀티 유닛 레코딩 (GCMR)를 사용하여 강한 휘발성 물질의 식별

흡착제 충진 열탈착 튜브에 수집 TNT 및 RDX의 폭발성 증기 트레이스 전자 포획 검출기 (GC)에 결합 된 온도 프로그래밍 탈착 시스템을 이용하여 분석 하였다. 기기 분석은 계측 드리프트 및 손실에 대한 샘플의 변화와 계정을 줄이기 위해 직접 액체 증착 방법과 결합됩니다.

프로그램 된 온도 탈착 가스 크로마토 그래피 - 전자 캡처 검출기에 의해 추적 폭발성 증기의 양이 감지

개미 종 Colobopsis explodens 의 작은 노동자는 가스 크로마토그래피-질량 분석에 의해 이후 용 매 추출 및 분석에 대 한 그들의 hypertrophied 악의 선 저수지에 저장 된 왁 스와 같은 콘텐츠를 분리 해 부. 주석 및 오픈 소스 소프트웨어 MetaboliteDetector를 사용 하 여 휘발성 성분의 식별도 설명 되어 있습니다.

악의 선 저수지 내용 보에서의 절연 ' 개미 (Formicidae) GC-MS와 MetaboliteDetector Volatilome 분석에 대 한 폭발

우리는 동물 통신에서 어떻게 사용될 수 있는지 이해하기 위해 악취 신호를 샘플링하고 분석하기위한 효과적인 방법론을 개발했습니다. 특히, 우리는 동물 냄새와 향기 표시의 휘발성 성분을 분석하기 위해 가스 크로마토그래피 질량 분석과 결합 된 헤드 스페이스 고체 위상 미세 추출을 사용합니다.

동물 향 신호 샘플링 및 분석

총 기화 고체 위상 미세 추출(TV-SPME)은 액체 샘플을 완전히 기화하고 분석체는 SPME 섬유에 스며들게 됩니다. 이를 통해 용매 증기와 SPME 섬유 코팅 사이에만 해석물을 분할할 수 있습니다.

가스 크로마토그래피 질량 분광법은 토탈 기화 고체-위상 미세 추출과 결합하여 법의학 도구로 사용됩니다.

헤드스페이스 고형 미세 추출 가스 크로마토그래피 플랫폼은 잘 익은 블랙커런트 과일의 빠르고 신뢰할 수 있으며 반자동 휘발성 식별 및 정량화를 위해 여기에 설명되어 있습니다. 이 기술은 과일 향에 대한 지식을 높이고 번식을 목적으로 향상된 맛으로 품종을 선택하는 데 사용할 수 있습니다.

헤드스페이스 고체-위상 미세 추출을 사용하여 블랙커런트 과일의 휘발성 화합물 프로파일링

이 프로토콜은 진공 보조 흡착제 추출 방법을 사용하여 생물학적 샘플에서 휘발성 유기 화합물을 추출하는 방법, Entech 샘플 준비 레일을 사용한 질량 분광법과 결합 된 가스 크로마토그래피 및 데이터 분석을 설명합니다. 또한 생물학적 샘플 및 안정한 동위원소 프로빙의 배양을 기술한다.

진공 보조 흡착제 추출을 통해 인간 관련 샘플에서 활발히 생산된 미생물 휘발성 유기 화합물 포획

여기에 제시된 것은 모든 유형의 차 샘플에 적용할 수 있는 용매 보조 풍미 증발 및 용매 추출에 이어 가스 크로마토그래피-질량 분석법을 사용하여 차 추출물의 휘발성 성분을 농축하고 분석하는 방법입니다.

용매 보조 풍미 증발 농축을 기반으로 한 차 향 분석

학습하세요 꽃 향기 휘발성 화합물을 비파괴적으로 신속하게 수집하는 방법을. GC-MS 열 탈착 샘플링을 활용하여 수분 매개 생물학 연구에 활용할 수 있습니다.

GC-MS 열 탈착 샘플링을 위한 헤드스페이스 휘발성 수집 기법을 사용한 신속한 플로랄 향수 휘발성 수집

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