Name: 호스트 병원 체 응답 및 쥐에 백신의 효능 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: 배우세요 쥐 모델을 활용한 백신 효능 평가 및 숙주 면역 반응 분석 방법을. 이 기술은 생체 내 세균 부담과 면역 반응을 동시에 측정하여 다양한 병원체 백신 연구에 활용됩니다.

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이 작품에 오하이오 주립 대학에서 1R01AI125560-01 시작 자금에 의해 지원 되었다.

<ol><li>Tacken, P. J., Figdor, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+antigen+delivery+and+activation+of+dendritic+cells+in+vivo%3A+steps+towards+cost+effective+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Targeted antigen delivery and activation of dendritic cells in vivo: steps towards cost effective vaccines.</a> Seminars in Immunology. 23 (1), 12-20 (2011).</li>
<li>Kilgore, P. E., Salim, A. M., Zervos, M. J., Schmitt, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis%3A+Microbiology%2C+Disease%2C+Treatment%2C+and+Prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Pertussis: Microbiology, Disease, Treatment, and Prevention.</a> Clinical Microbiology Reviews. 29 (3), 449-486 (2016).</li>
<li>Dorji, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+Pertussis+virulence+factors+in+the+continuing+evolution+of+whooping+cough+vaccines+for+improved+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Microbiology+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Bordetella Pertussis virulence factors in the continuing evolution of whooping cough vaccines for improved performance.</a> Medical Microbiology and Immunology. 207 (1), 3-26 (2018).</li>
<li>Feldstein, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Routine+Vaccination+Coverage%2C+2016%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Global Routine Vaccination Coverage, 2016.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 66 (45), 1252-1255 (2017).</li>
<li>Cherry, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemic+pertussis+in+2012--the+resurgence+of+a+vaccine-preventable+disease%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemic pertussis in 2012--the resurgence of a vaccine-preventable disease.</a> New England Journal of Medicine. 367 (9), 785-787 (2012).</li>
<li>Celentano, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resurgence+of+pertussis+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22The+Pediatric+Infectious+Disease+Journal%22%5BJournal%5D)">Resurgence of pertussis in Europe.</a> The Pediatric Infectious Disease Journal. 24 (9), 761-765 (2005).</li>
<li>McNabb, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+of+notifiable+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report+p%22%5BJournal%5D)">Summary of notifiable diseases.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report p. 54 (53), 1-92 (2007).</li>
<li>Sealey, K. L., Belcher, T., Preston, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+pertussis+epidemiology+and+evolution+in+the+light+of+pertussis+resurgence%5BTitle%5D)+AND+%22Infection%2C+Genetics%2C+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Bordetella pertussis epidemiology and evolution in the light of pertussis resurgence.</a> Infection, Genetics, and Evolution. 40, 136-143 (2016).</li>
<li>Warfel, J. M., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+baboon+model+of+pertussis%3A+effective+use+and+lessons+for+pertussis+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Reviews+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">The baboon model of pertussis: effective use and lessons for pertussis vaccines.</a> Expert Reviews of Vaccines. 13 (10), 1241-1252 (2014).</li>
<li>Jennings-Gee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adjuvant+Bordetella+Colonization+Factor+A+attenuates+alum-induced+Th2+responses+and+enhances+Bordetella+pertussis+clearance+from+mouse+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">The adjuvant Bordetella Colonization Factor A attenuates alum-induced Th2 responses and enhances Bordetella pertussis clearance from mouse lungs.</a> Infection and Immunity. , (2018).</li>
<li>Sukumar, N., Mishra, M., Sloan, G. P., Ogi, T., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Bvg+phase-dependent+regulation+and+combinatorial+role+in+pathogenesis+of+two+Bordetella+paralogs%2C+BipA+and+BcfA%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Differential Bvg phase-dependent regulation and combinatorial role in pathogenesis of two Bordetella paralogs, BipA and BcfA.</a> Journal of Bacteriology. 189 (10), 3695-3704 (2007).</li>
<li>Stainer, D. W., Scholte, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+chemically+defined+medium+for+the+production+of+phase+I+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A simple chemically defined medium for the production of phase I Bordetella pertussis.</a> Journal of General Microbiology. 63 (2), 211-220 (1970).</li>
<li>Bordet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Le+microbe+de+le+coqueluche%5BTitle%5D)+AND+%22Annales+de+l%27Institut+Pasteur%22%5BJournal%5D)">Le microbe de le coqueluche.</a> Annales de l'Institut Pasteur. 20, 731-741 (1906).</li>
<li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCook%2C+MJ+%22The+Anatomy+of+the+Laboratory+Mouse%22">The Anatomy of the Laboratory Mouse</a>. , Academic Press. (1965).</li>
<li>Sutton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+Plate+Counts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Validation+Techniques%22%5BJournal%5D)">Accuracy of Plate Counts.</a> Journal of Validation Techniques. 17 (3), 42-46 (2011).</li>
<li>Conover, M. S., Sloan, G. P., Love, C. F., Sukumar, N., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Bps+polysaccharide+of+Bordetella+pertussis+promotes+colonization+and+biofilm+formation+in+the+nose+by+functioning+as+an+adhesin%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The Bps polysaccharide of Bordetella pertussis promotes colonization and biofilm formation in the nose by functioning as an adhesin.</a> Molecular Microbiology. 77 (6), 1439-1455 (2010).</li>
<li>Cattelan, N., Jennings-Gee, J., Dubey, P., Yantorno, O. M., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbiofilm+Formation+by+Bordetella+pertussis+Strains+Correlates+with+Enhanced+Virulence+Traits%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Hyperbiofilm Formation by Bordetella pertussis Strains Correlates with Enhanced Virulence Traits.</a> Infection and Immunity. 85 (12), (2017).</li>
<li>Andreasen, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis+toxin+inhibits+early+chemokine+production+to+delay+neutrophil+recruitment+in+response+to+Bordetella+pertussis+respiratory+tract+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Pertussis toxin inhibits early chemokine production to delay neutrophil recruitment in response to Bordetella pertussis respiratory tract infection in mice.</a> Infection and Immunity. 76 (11), 5139-5148 (2008).</li>
<li>Mills, K. H., Gerdts, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+and+pig+models+for+studies+of+natural+and+vaccine-induced+immunity+to+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Mouse and pig models for studies of natural and vaccine-induced immunity to Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 209, Suppl 1 16-19 (2014).</li>
<li>Dunne, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+TLR2+agonist+from+Bordetella+pertussis+is+a+potent+adjuvant+that+promotes+protective+immunity+with+an+acellular+pertussis+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">A novel TLR2 agonist from Bordetella pertussis is a potent adjuvant that promotes protective immunity with an acellular pertussis vaccine.</a> Mucosal Immunology. 8 (3), 607-617 (2015).</li>
<li>Denoel, P., Godfroid, F., Guiso, N., Hallander, H., Poolman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+acellular+pertussis+vaccines-induced+immunity+against+infection+due+to+Bordetella+pertussis+variant+isolates+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Comparison of acellular pertussis vaccines-induced immunity against infection due to Bordetella pertussis variant isolates in a mouse model.</a> Vaccine. 23 (46-47), 5333-5341 (2005).</li>
<li>Marr, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+activity+of+the+Bordetella+pertussis+BrkA+autotransporter+in+the+murine+lung+colonization+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Protective activity of the Bordetella pertussis BrkA autotransporter in the murine lung colonization model.</a> Vaccine. 26 (34), 4306-4311 (2008).</li>
<li>Feunou, P. F., Bertout, J., Locht, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-+and+B-cell-mediated+protection+induced+by+novel%2C+live+attenuated+pertussis+vaccine+in+mice.+Cross+protection+against+parapertussis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">T- and B-cell-mediated protection induced by novel, live attenuated pertussis vaccine in mice. Cross protection against parapertussis.</a> PLoS One. 5 (4), 10178(2010).</li>
<li>Mills, K. H., Ryan, M., Ryan, E., Mahon, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+in+which+protection+correlates+with+pertussis+vaccine+efficacy+in+children+reveals+complementary+roles+for+humoral+and+cell-mediated+immunity+in+protection+against+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">A murine model in which protection correlates with pertussis vaccine efficacy in children reveals complementary roles for humoral and cell-mediated immunity in protection against Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 66 (2), 594-602 (1998).</li>
<li>Higgs, R., Higgins, S. C., Ross, P. J., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunity+to+the+respiratory+pathogen+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Immunity to the respiratory pathogen Bordetella pertussis.</a> Mucosal Immunology. 5 (5), 485-500 (2012).</li>
<li>Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+selection+of+vaccine+adjuvants%3A+animal+models+and+human+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Design and selection of vaccine adjuvants: animal models and human trials.</a> Vaccine. 20, Suppl 3 56-64 (2002).</li>
<li>Ipp, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+reactions+to+diphtheria%2C+tetanus%2C+pertussis-polio+vaccination+at+18+months+of+age%3A+effect+of+injection+site+and+needle+length%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Adverse reactions to diphtheria, tetanus, pertussis-polio vaccination at 18 months of age: effect of injection site and needle length.</a> Pediatrics. 83 (5), 679-682 (1989).</li>
<li>Fessard, C., Riche, O., Cohen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+versus+subcutaneous+injection+for+hepatitis+B+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Intramuscular versus subcutaneous injection for hepatitis B vaccine.</a> Vaccine. 6 (6), 469(1988).</li>
<li>Bergeson, P. S., Singer, S. A., Kaplan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+injections+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Intramuscular injections in children.</a> Pediatrics. 70 (6), 944-948 (1982).</li>
<li>Zhang, L., Wang, W., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+vaccine+administration+modality+on+immunogenicity+and+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of vaccine administration modality on immunogenicity and efficacy.</a> Expert Review of Vaccines. 14 (11), 1509-1523 (2015).</li>
<li>Ross, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+Contribution+of+Th1+and+Th17+Cells+in+Adaptive+Immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+Towards+the+Rational+Design+of+an+Improved+Acellular+Pertussis+Vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Relative Contribution of Th1 and Th17 Cells in Adaptive Immunity to Bordetella pertussis: Towards the Rational Design of an Improved Acellular Pertussis Vaccine.</a> PLoS Pathogens. 9 (4), 1003264(2013).</li>
<li>Warfel, J. M., Zimmerman, L. I., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acellular+pertussis+vaccines+protect+against+disease+but+fail+to+prevent+infection+and+transmission+in+a+nonhuman+primate+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+USA%22%5BJournal%5D)">Acellular pertussis vaccines protect against disease but fail to prevent infection and transmission in a nonhuman primate model.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 111 (2), 787-792 (2014).</li>
<li>Allen, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+protective+immunity+against+Bordetella+pertussis+nasal+colonization+by+intranasal+immunization+with+a+vaccine-adjuvant+combination+that+induces+IL-17-secreting+TRM+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Sustained protective immunity against Bordetella pertussis nasal colonization by intranasal immunization with a vaccine-adjuvant combination that induces IL-17-secreting TRM cells.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Solans, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-17-dependent+SIgA-mediated+protection+against+nasal+Bordetella+pertussis+infection+by+live+attenuated+BPZE1+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">IL-17-dependent SIgA-mediated protection against nasal Bordetella pertussis infection by live attenuated BPZE1 vaccine.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Miller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+murine+intranasal+dosing+efficiency+using+luminescent+Francisella+tularensis%3A+effect+of+instillation+volume+and+form+of+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia.</a> PLoS One. 7 (2), 31359(2012).</li>
<li>Sato, Y., Izumiya, K., Sato, H., Cowell, J. L., Manclark, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerosol+infection+of+mice+with+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Aerosol infection of mice with Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 29 (1), 261-266 (1980).</li>
<li>Warfel, J. M., Beren, J., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airborne+transmission+of+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Airborne transmission of Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 206 (6), 902-906 (2012).</li>
<li>Scanlon, K. M., Snyder, Y. G., Skerry, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+Pertussis+in+the+Neonatal+Mouse+Model+Is+Associated+with+Pertussis+Toxin-Mediated+Pathology+beyond+the+Airways%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Fatal Pertussis in the Neonatal Mouse Model Is Associated with Pertussis Toxin-Mediated Pathology beyond the Airways.</a> Infection and Immunity. 85 (11), (2017).</li>
<li>Martinez de Tejada, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neither+the+Bvg-+phase+nor+the+vrg6+locus+of+Bordetella+pertussis+is+required+for+respiratory+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Neither the Bvg- phase nor the vrg6 locus of Bordetella pertussis is required for respiratory infection in mice.</a> Infection and Immunity. 66 (6), 2762-2768 (1998).</li>
<li>Higgins, S. C., Jarnicki, A. G., Lavelle, E. C., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TLR4+mediates+vaccine-induced+protective+cellular+immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+role+of+IL-17-producing+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">TLR4 mediates vaccine-induced protective cellular immunity to Bordetella pertussis: role of IL-17-producing T-cells.</a> Journal of Immunology. 177 (11), 7980-7989 (2006).</li>
<li>Mahon, B. P., Brady, M. T., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Bordetella+pertussis+in+mice+in+the+absence+of+detectable+circulating+antibody%3A+implications+for+long-term+immunity+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Protection against Bordetella pertussis in mice in the absence of detectable circulating antibody: implications for long-term immunity in children.</a> Journal of Infectious Diseases. 181 (6), 2087-2091 (2000).</li>
<li>Karlsson, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+ELISPOT+and+cytokine+flow+cytometry+assays+for+the+enumeration+of+antigen-specific+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of the ELISPOT and cytokine flow cytometry assays for the enumeration of antigen-specific T-cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283 (1-2), 141-153 (2003).</li>
<li>Hagen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+Multi-Donor+Study+of+IFNgamma+Secretion+and+Expression+by+Human+PBMCs+Using+ELISPOT+Side-by-Side+with+ELISA+and+Flow+Cytometry+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Comparative Multi-Donor Study of IFNgamma Secretion and Expression by Human PBMCs Using ELISPOT Side-by-Side with ELISA and Flow Cytometry Assays.</a> Cells. 4 (1), 84-95 (2015).</li>
<li>Raeven, R. H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+cellular+signatures+underlying+superior+immunity+against+Bordetella+pertussis+upon+pulmonary+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Molecular and cellular signatures underlying superior immunity against Bordetella pertussis upon pulmonary vaccination.</a> Mucosal Immunology. 11 (3), 1009(2018).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

B. 백 일 해 감염을 백신 유도 면역 연구를 설명 하는 포괄적인 프로토콜 또한 다양 한 다른 병원 균에 대 한 호스트 응답의 평가 수 있도록 합니다. 프로토콜 제공 예방 접종, 백신 효능 다음 결정 하는 방법에 설명 합니다 병원 체, 그리고 면역 기능의 병렬 해 부. 다른 병원 체를 연구 하기 위해 프로토콜을 적응, 여러 매개 변수 수정 되어야 할 것 이다. 이 포함 되지만 국한 되지 않습니다, 동물 마 취, 백신, 복용량, 구성과 관리의 경로 모드. 또한, 투여 및 관심, 수확, 선택한 조직 장애인된 병원 체 및 면역 반응의 다운스트림 평가 관리의 경로 요소가 관심의 병원 체/질병에 대 한 수정할 수 있습니다.
B. 백 일 해 감염 마우스 모델은 널리 이용 되 고 pathogenesis 및 백신 연구16,17,<sup c...

백신 대표, 20 세기의 가장 큰 공중 보건 업적 중 아직 우리 여전히 완전히 이해가 안는 성공적인 백신 보호 면역을 자극 하는 메커니즘. 분자 서명 식별 (예., 세포 활성화 마커, 확장, 세포의 유전자 발현의 패턴) 유도 후 예방 접종을 예측 하는 효과 생성에 대 한 정보 제공 면역 응답입니다. 호스트 병원 체 응답의 복잡성은 체 외에서 세포 문화 시스템1을 사용 하 여 적절 하 게 복제 수 없습니다. Vivo에서 백신 모델은 수반 호스트 내의 여러 면역 세포 유형 평가 하도록 설계 되었습니다. 백신 항 원 처리 및 프레 젠 테이 션, 차동 cytokine 분 비 및 면역 세포의 확장을 특성화 할 때 이점을 제공 합니다. 여기에 설명 된 프로토콜 체계 및 면역 반응의 평가 관심의 조직에 병원 체 부담의 정량화를 통해 백신 효능을 결정 하는 자세한 방법을 제공 합니다. 여기에 제공 된 예제에서는 병원 체 Bordetella 백 일 해 (B. 백 일 해)에 대 한 실험 백신의 효능을 테스트 합니다.
B. 백 일 해 는 호흡기 질환 백 (백 일 해)2,3의 etiological 대리인은 그램 음성 박테리아. 전송, 식민지, 및 질병에 감염 된 개인 (증상 또는 무 증상) 리드와 접촉을 닫습니다. 중요 한 글로벌 백신 범위4에 불구 하 고 백 일 해 전 세계의 많은 국가에서 불거진 질병 이라고 여겨진다 고 예방 가능한 유년기 죽음5,6,7, 의 주요 원인입니다. 8. 2015 년에 B. 백 일 해 및 백 일 해에 포함 된 알레르기의 국가 학회 및 감염 증 (NIAID) 신흥 전염병 병원 체 목록, 수 여 하는 더 나은 백신의 개발에 대 한 필요성을 강조 수명이 긴 보호 면역입니다.
현재, 백 일 해의 부활을 제어 하는 조사의 활성 영역 소설 adjuvants 및 항 원 면역 반응 elicited 전체 셀에 의해 모방의 최적의 조합으로 다음-세대 acellular 백 일 해 백신 (aPV)의 개발은 백 일 해 백신 (wPV)9. 설명 된 프로토콜을 사용 하 여, 우리 최근 보고는 현재 FDA 승인 aPV 소설 보조 Bordetella 식민 요소 A의 추가 의해 (BcfA)의 수정 B. 백 일 해 세균 부하에서의 보다 효율적인 감소에 있는 결과 마우스 폐10,11. 이 보호는 더 보호 Th1/Th17 면역 프로필10졸업생 유도 Th1/Th2 면역 응답의 기울이기 동행 했다. 이 프로토콜은 상세 하 고 포괄적인, 호스트와 병원 체의 다양 한 면역 반응의 동시 평가 통해 최대한 정보를 얻을 수 있도록.
여기에 설명 된 프로토콜 최적의 호스트 면역 응답을 보장 하기 위해 그림 1에 나온 대표적인 백신 일정을 따릅니다.

<table><tbody><tr><td>2L 유도 챔버</td><td>Vet 장비</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso</td><td>Vet One</td><td>V1</td><td>501017 모든 브랜드가 적합합니다</td></tr>. <tr><td>Bordet Gengou Agar Base</td><td>, BD bioscience</td><td>248200</td><td></td></tr><tr><td>Casein</td><td>Sigma</td><td>C-7078</td><td></td></tr><tr><td>Casamino acids</td><td>VWR</td><td>J851-500G</td><td>스트레이너 Scholte (SS) 매체 구성 요소</td></tr><tr><td>L- 글루탐산</td><td>Research Products Int</td><td>G36020-500</td><td></td></tr><tr><td>L-Proline</td><td>Research Products Int</td><td>P50200-500</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨</td><td>Fisher</td><td>BP358-10</td><td></td></tr><tr><td>인산칼륨 일염기</td>성 <td>Fisher</td><td>BP362-1</td><td></td></tr><tr><td>염화칼</td>륨 <td>Fisher</td><td>P217-500</td><td></td></tr><tr><td>염화마그네슘 육수화물</td><td>Fisher</td><td>M2670-500G</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘</td><td>Fisher</td><td>C75-500</td><td></td></tr><tr><td>트리스 베이스</td><td>Fisher</td><td>BP153-1</td><td></td></tr><tr><td>L-시스테인 HCl</td><td>Fisher</td><td>BP376-100</td><td>SS 매체 공급</td></tr> 철 <tr><td>황산염 헵타하이드레이트</td><td>시그마</td><td>F-7002</td><td></td></tr><tr><td>나이아신</td><td>연구 제품 Int</td><td>N20080-100</td><td></td></tr><tr><td>글루타티온</td><td>연구 제품 Int</td><td>G22010-25</td><td></td></tr><tr><td>Ascorbic acid</td><td>연구 제품 Int</td><td>A50040-500</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Sigma</td><td>F2442-500mL</td><td>&nbsp; 어떤 미국 소스든지, 비열 비활성화</td></tr><tr><td>겐타마이신</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15710064</td><td></td></tr><tr><td>B-메르캅토에탄올</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>BP176-100</td><td></td></tr><tr><td>15mL dounce 조직 분쇄</td>기 <td>Wheaton</td><td>357544</td><td>유사한 브랜드가 적절합니다</td></tr><tr><td>. 무선 핸드 호모게나이저</td><td>Kontes/Sigma&nbsp;</td><td>Z359971-1EA</td><td>어떤 유사한 브랜드든지 적합합니다</td></tr><tr><td>- 가위, 곡선 가위, 펜치, 세밀한 펜치, 삼각형 스프레더</td><td></td><td></td><td>어떤 브랜드든지 적합합니다</td></tr><tr><td>3mL 주사기</td><td>BD 바이오사이언</td><td></td>스 309657 <td></td></tr><tr><td>15mL 원뿔형 튜브</td><td>Fisher&nbsp;</td><td></td><td></td>339651</tr><tr><td>1.5mL 마이크로퓨지 튜브</td><td>Denville</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>70um 셀 여과기</td><td>Fisher&nbsp;</td><td></td><td></td>22363548</tr><tr><td>60mm 플레이트</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>130181</td><td></td></tr><tr><td>48웰 조직 배양 플레이트</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>08-772-1C</td><td></td></tr><tr><td>1mL 인슐린 주사기 28G1/2</td><td>Fisher Scientific/Excel Int.</td><td>14-841-31</td><td></td></tr><tr><td>마우스 IFN-감마 ELISA 레디-셋-고! Kit</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-21</td><td></td></tr><tr><td>마우스 IL-17 ELISA Ready-SET-Go! 키트</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-77</td><td></td></tr><tr><td>마우스 IL-5 ELISA Ready-SET-Go! 키트</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-172-09</td><td></td></tr></tbody></table>

호스트 병원 체 응답 및 쥐에 백신의 효능 평가

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

백신은 20번째 세기 의료 마블. 그들은 극적으로 병 적 상태와 사망률 감소는 전염 성 질환에 의해 발생 하 고 전세계 평균 수명이 눈에 띄는 증가에 기여. 그럼에도 불구 하 고, 백신 효능을 결정 도전 남아 있습니다. 증거를 신흥 Bordetella 백 일 해 (B. 백 일 해)에 대 한 현재 acellular 백신 (aPV) 차선 면역 유도 나왔다. 따라서, 주요 과제는 전체 세포 백신 (wPV)의 불리 한 부작용 없이 보호 면역을 유도 하는 차세대 백신을 디자인 하 고 있다. 여기는 우리가 유망, 소설 보조 보호 Th1/Th17 표현 형에 대 한 면역 응답을 왜곡 하 고 murine 호흡기에서 B. 백 도전 더 나은 정리를 촉진의 효능을 테스트 하는 데 사용 하는 프로토콜에 설명 합니다. 이 문서에서는 마우스 예방접종, 세균 접종, 조직 수확, 및 면역 반응의 분석을 위한 프로토콜을 설명 합니다. 우리의 모델 내에서이 메서드를 사용 하 여 우리 성공적으로 유망한, 다음-세대 acellular 백 일 해 백신으로 elicited 중요 한 메커니즘을 해명 했습니다. 이 메서드는 백신 효능을 결정 하기 위하여 어떤 전염병 모델에 적용할 수 있습니다.

설명 모델 호스트 병원 체 상호 작용 동안 백신 효율과 면역 응답을 평가 하는 방법을 보여 줍니다. 그림 1 에 면역 및 감염 쥐 조직 분석을 위한 수확 하는 데 사용 하는 대표적인 백신 일정을 순서 다. 그림 2 예방접종 및 세균성 inoculums 수사를 사용 마우스를 유도 하는 마 취 시스템의 설정을 보여 줍니다. 그림 3 예 세600 측정 및 쥐에 게 배달 100 희석된 세균성 inoculum을 준비 하는 1 OD 세균성 정지를 달성 하기 위해 계산을 보여준다. 그림 4 묘사 inoculum 준비 감염에 대 한 사용, 마우스 직렬 희석 도금 기반 직렬 희석 및 CFUs를 열거 하는 데 사용 하는 예제 계산의 도금 계획 전달. <str...

여기 선물이 vivo에서 백신의 평가 위한 우아한 프로토콜 효과 호스트 면역 반응. 이 프로토콜은 바이러스 성, 세균성, 백신 모델 또는 기생 병원 균에 대 한 적응 될 수 있다.

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

이 프로토콜은 다양한 병원체 및 백신 제형에 대한 숙주 반응의 평가를 가능하게 한다. 이 기술의 주요 장점은 인가 성 동물 모델을 사용하여 생체 내에서 세균적 부담과 면역 반응을 평가할 수 있다는 것입니다. 이 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원생 인 Kacy Yount입니다.예방 접종을 위해, 마취, 6-12 주 된 마우스에 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인하고, 관심의 백신의 0.1 밀리리터와 28.5 게이지 바늘을 장착 한 1 밀리리터 인슐린 주사기를로드. 주사기를 45도 각도로 잡고, 벨이 위로 향하도록, 마우스의 망상에 약 5밀리미터 바늘을 삽입하고 백신을 주입한다. 5~10초 동안 근육에 삽입된 바늘을 유지한 다음 주사기 180도 회전하여 벨이 아래로 향하도록 밀봉을 만들고 백신 누출을 방지한 후 주사 부위에서 바늘을 천천히 철회합니다.그런 다음 마우스를 전체 복구할 때까지 모니터링하여 케이지에 반환합니다. 증폭 후 약 2 주, 면역 마우스를 감염. 등대 흉부의 스크러프에 의해 마취 된 마우스를 잡고, 견갑골과 목 뒤에 마우스를 똑바로 배치하여 코에 액세스합니다.200 마이크로리터 파이펫 팁을 사용하여, 동물의 각 nare에 관심있는 세균 접종의 20 ~ 25 마이크로 리터를 천천히 적용하여 전체 접종이 흡입 될 때까지 마우스를 유지합니다. 그런 다음 음의 대조군으로서 한 무리의 마우스에 멸균 PBS의 동일한 부피를 전달한다. 적절한 실험 적 종점에서 감염된 마우스 복부 면을 해부 보드에 올려 놓고 팔다리를 고정시하십시오.70%에탄올로 몸을 적시고, 집게를 사용하여 골반 의 중앙에 있는 복부 아래 피부를 걸이세요. 날카로운 가위를 사용하여 하악까지 수직으로 자르고 피부가 수막 벽에서 해부합니다. 시체를 옆으로 이동하여 멸균 기관 수확을 위한 방해받지 않는 필드를 만들고 간 에서 또는 그 근처에서 흉곽 아래의 그대로 회대를 잡습니다.관장을 흉곽쪽으로 자르고 하부 소화관을 노출시키고 결장을 왼쪽으로 이동하여 비장을 드러냅니다. 구부러진 집게를 사용하여 비장을 잡고 결합 조직을 가위로 해부합니다. 그런 다음 비장을 RPMI 3 밀리리터, 5%의 태아 소 혈청이 들어 있는 15밀리리터 원추형 튜브에 놓습니다.집게를 사용하여 xyphoid 공정에서 흉곽을 안정화하고 다이어프램을 열어 줍니다. 폐는 수축하고 척추쪽으로 떨어져야 합니다. 유방판을 제거하기 위해 측면에 흉곽을 열고, 폐 동맥과 정맥을 잘라 오른쪽 폐의 우수한 엽을 분리하고 제거합니다.15밀리리터 원내 형질관에서 10% 중성 버퍼링 포머린을 실온에서 24시간 이상 고정하고, 좌우 폐의 나머지 엽을 분리한다. 그런 다음 15 밀리리터 원내 튜브에 로브를 배치하여 PBS에서 1%의 카제인 2마리를 얼음 위에 놓습니다. 팁이 있는 1밀리리터 피펫맨을 사용하여 가슴 구멍을 채우는 혈액을 수집하고 혈액을 얼음 위에 1.5 밀리리터 미세센심분리기 튜브로 이송합니다.기관지를 덮고 있는 파로티드, 설하 및 하막및 림프절을 제거하고 기관 주변의 보호 막을 열고 제거합니다. 미세 한 집게와 가위를 사용 하 여, 정중 하 게 식도에서 기관, 그리고 다른 결합 조직 쇄골의 상단에서 하악의 바닥에. 집게를 사용하여 기관지의 상단에서 기관을 잘라냅니다.기관체를 아래로 당겨 탄력을 극대화하고 하악의 바닥에있는 기관체를 후두 바로 위에 자르고 조직의 약 1 센티미터를 격리시합니다. 그런 다음 전자 제품PBS에서 1%카제인의 0.3 밀리리터를 함유한 사전 라벨이 부착된 1.5 밀리리터 미세원심분리기 튜브에 기관을 놓습니다. 이제 마우스를 돌려 코에 대한 명확한 접근을 하고 머리를 70%에탄올로 스프레이합니다.두개골 바로 뒤에 동물을 수동으로 잡고 가위를 사용하여 주둥이의 부드러운 살을 잘라 코 바닥에서 시작하여 위쪽으로 이동합니다. 코 주위에서 모피, 피부, 수염을 제거하고 곡선이 아래쪽으로 뾰족한 나레에 곡선한 가위 쌍의 팁을 삽입합니다. 눈을 향해 비강 통로를 열어 V와 같은 형성을 만듭니다.그런 다음 미세 포셉을 사용하여 비강 중격및 형성 내의 연조직을 수집하고, PBS에서 1%카제인의 0.3 밀리리터를 함유한 사전 표지된 1.5 밀리리터 미세원심분리기 튜브에 얼음에 배치한다. 폐 조직을 처리하기 위해, 전체 폐 샘플 튜브 내용을 멸균 15 밀리리터 두근화제로 옮기고 유봉을 사용하여 조직을 균질화한다. 조직의 큰 입자가 남아 있지 때까지 샘플을 해리하고, 원래 15 밀리리터 튜브에 균질화 현탁액을 반환합니다.도금 콜로니 성형 유닛에 대한 0.3 밀리리터 알리쿼트를 제거하고 원심분리에 의해 나머지 균동형을 수집합니다. Aliquot 0.5 밀리리터는 엘리자에 의한 사이토카인 발현 분석전까지 섭씨 20도에서 보관하기 위해 미리 표지된 미세 원심분리기 튜브로 고정합니다. 이어서, 희석당 멸균 PBS0.9 밀리리터에서 균질화된 폐 현탁액을 따로 0.1 밀리리터 알리쿼트, 멸균 삼각형 스프레더를 사용하여 각 경험적으로 선택된 10%의 희석제에 10%의 보르데-겐구플러스 스트렙토미크플레이트를 부착한다.여기서, 대표적인 광학밀도(600)는 1개의 광학 밀도 세균현탁액을 달성하기 위한 측정 및 계산을, 마우스에 전달되는 100배의 희석된 세균 접종을 제조하는 것으로, 도시된다. 7일간의 백신 항원 자극 후, 조합 백신 그룹에서 면역비진 세포는 인터페론 감마및 IL17을 생성하며, IL5를 크게 조절하고 T 도우미를 촉진하고, 1T 도우미 17편광은 B 백일해 감염 시 면역 반응의 편광을 일으킨다. B 백일해 감염 마우스의 호흡기 문제로부터 회수된 박테리아의 콜로니 형성 단위 열거형은 관심 있는 백신의 보호 효과를 평가하는 데 사용될 수 있다.조직 괴사를 피하기 위해 가능한 한 신속하고 효율적으로 작동하고, 복구 된 박테리아의 생존력을 보존하기 위해 얼음에 고립 된 조직을 저장합니다. ELISpot 흐름 세포질과 DNA 및 RNA 격리는 면역 세포, 분석 생성을 평가하고 후생유전학 및 전사 분석을 가능하게 하기 위해 수행될 수 있다. 보르데텔라 등일해와 같은 전염성 제제와 함께 작업할 때는 적절한 PPE를 착용하고 병원균 전염을 방지하기 위해 인증된 생물 안전 캐비닛에서 일하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.이 프로토콜은 호흡기, 특히 비강 인두에서 CFU 열거를 자세히 설명합니다. 백신 및 전염병 분야에서 코의 세균 성 식민지를 대상으로하는 것에 대한 질문을 해결합니다.

evaluation-of-host-pathogen-responses-and-vaccine-efficacy-in-mice

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오에서는 생쥐의 Bordetella 백일해 감염에 대한 무세포 백일해 백신의 효능을 테스트하는 프로토콜에 대해 설명합니다. 백신 접종 후, 생쥐는 감염을 겪었고, 생쥐의 조직 균질액을 배양하여 박테리아 군체를 분석하여 백신으로 인한 보호 면역을 판독했습니다.

마우스 모델에서 박테리아 감염에 대한 백신 유도 면역 평가

병원균 감염에 대한 숙주 면역 반응은 긴밀하게 규제 과정이다. 생쥐의 리포 다당류 폐 노광 모델을 이용해서, 그 질병 병인과 관련된 복잡한 메커니즘은 고해상도 평가를 수행하는 것이 가능하다.

마우스의 호스트 면역 반응을 평가하기 위해 구인두 기관 내 PAMP 관리 및 폐포의 활용

동물 모델은 만성 염증의 발달에 기여하는 호스트와 병원체의 특정 메커니즘을 규정하는 매우 중요한 도구로 입증되었다. 여기서 우리는 로컬 및 전신성 염증 부위에서의 진행을 평가하기 위해 인간 병원체 Porphyromonas 진지 발리 및 세부 방법론 경구 감염 마우스 모델을 설명한다.

로컬 및 전신 사이트에서 병원체에 의한 만성 염증을위한 마우스 모델

본 문서에서는 마우스 모델에서 BCG를 사용하여 비강 내 및 피하 면역에 의해 유도된 보호 효능 및 폐 면역 반응을 비교하기 위해 따랐던 방법론을 자세히 설명합니다. 본 연구의 결과는 폐 백신 접종의 이점을 보여주며, 백신 유도 보호에서 IL17 매개 반응의 역할을 시사한다.

보호 효능 및 폐 면역 반응은 마우스에 피하 및 비강 BCG 관리에 따라

이 프로토콜은, 리스테리아의 EGD 균주 (L. 모노 사이토 겐)을 C57BL / 6J 마우스에 접종하고, 자연 살해 (NK) 세포, 자연 살해 T (NKT) 세포에 의한 인터페론 - γ (IFN-γ) 응답을 측정하는 방법을 설명 적응 T 포스트 감염 림프구. 이 프로토콜은 또한 병원균의 수정 된 LD (50) 투여로 감염 후 쥐에서 생존 연구를 수행하는 방법에 대해 설명합니다.

와 실험 감염<em&gt; 리스테리아</em&gt; 호스트 인터페론-γ 응답 유학을위한 모델로

인플루엔자 A 바이러스 (IAVs)는 중요 한 인간의 호흡기 병원 균. IAVs pathogenicity 이해 하 고 새로운 백신 접근의 전 임상 시험 수행 인간의 생리를 흉내 낸 동물 모델은 필요. 여기, 우리가 IAV pathogenesis, 체액 성 반응과 감염 마우스 모델을 사용 하 여 백신 효능을 평가 하는 기법을 설명 합니다.

감염 마우스 모델에서 인플루엔자 A 바이러스 연구

선물이 여기 표준 면역학 기술에 대 한 응용 프로그램 (CFSE 스테인드 OT-내가 확산) 빠르게 보조 중재 된 세포 독성 T 림프 구 (CTL) 세대를 모니터링 하기 위한 vivo에서. 이 빠른 CTL 용량 추정 세포내 병원 체에 대 한 예방 백신으로 치료 암 백신의 개발에 대 한 유용합니다.

급속 한 비보에 평가 보조의 세포 독성 T 림프 톨 생성 기능의 백신 개발에 대 한

피부 부상에 타고 난 면역 반응의 실시간 탐지 및 쥐의 포도 상 구 균 감염에 대 한 접근 방식을 설명 합니다. 비교 LysM EGFP 여 쥐 (형광 neutrophils 보유) LysM EGFP와 잡종 immunodeficient 마우스 스트레인, 우리가 미리 감염에 대 한 우리의 이해 및 감염을 방지 하는 방법의 개발.

마우스 모델을 평가 타고 난 면역 반응 포도 상 구 균 감염

이 논문은 인플루엔자 바이러스 감염의 마우스 모형에 있는 Tfh 및 GC B 반응을 평가하는 프로토콜을 기술합니다.

인플루엔자 A 바이러스 감염 중 T 여포 도우미 세포 및 발아 센터 반응 평가

여기에서, 우리는 독특하게 디자인된 온난화/억제 장치를 사용하여 설치류 꼬리 정맥 주사를 위한 효과적이고 효율적인 방법을 제시합니다. 혈관 확장 및 억제 과정의 개시를 간소화함으로써,이 프로토콜은 최소한의 고통을 가진 동물의 큰 그룹의 정확하고 적시에 정맥 주사를 허용합니다.

뮤린 곰팡이 패혈증 모델에서 효율적인 꼬리 정맥 주사를위한 현대 온난화 / 억제 장치

본 프로토콜은 새로운 나노에멀젼 보조제 백신의 물리적 특성, 면역 반응 및 생체 내 보호 효과를 준비하고 평가합니다.

메티실린 내성 황색포도상구균 (MRSA) 감염에 대한 나노에멀젼 보조제 백신의 면역 반응 평가

배우세요 쥐 모델을 활용한 백신 효능 평가 및 숙주 면역 반응 분석 방법을. 이 기술은 생체 내 세균 부담과 면역 반응을 동시에 측정하여 다양한 병원체 백신 연구에 활용됩니다.

호스트 병원 체 응답 및 쥐에 백신의 효능 평가

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