Name: 클러스터 Stomata 애기 thaliana 묘에 설탕 솔루션 집중 치료에 의해 위한 유도 시스템 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-15T14:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 32 s
Description: 학습하세요 Arabidopsis thaliana 묘에서 설탕 용액으로 군집 기공을 유도하는 방법을. 공초점 레이저 현미경으로 기공 세포 내 엽록체와 미세소관을 관찰하여 식물 기공 발달과 기능을 연구할 수 있습니다.

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우리는 우리의 일의 그의 종류 지원을 위한 교수 Seiichiro Hasezawa에 감사입니다. 이 작품은 과학 진흥 (JSP) KAKENHgrant 숫자 17 K 19380 18 H 05492, 기본적인 과학 연구 프로젝트에 대 한 보조금은 스미 토모 재단에서 부여 번호 160146, 및 캐논 재단 남에 대 한 일본 사회에서 교부 금에 의해 지원 되었다 이 실험적인 시스템 K. a JSP KAKENHgrant 번호 26891006에서에서 재정 지원 아래 개발 되었다 우리는 로비 루이스, MSc, 원고의 초안을 편집 하기 위해 Edanz 그룹 (www.edanzediting.com/ac)에서 감사 합니다.

1. 3% 자당 포함 된 1/2 重 Skoog 중간 솔루션의 준비
<ol><li>비 커에 1.1 g 重 Skoog 중간 소금의 고 자당의 15 g을 추가 합니다.</li>
	<li>490 mL 증류수를 추가 하 고 잘 저 어 막대를 사용 하 여 혼합.</li>
	<li>코를 사용 하 여 5.8에 pH를 조정 합니다.</li>
	<li>500 mL 증류수와 묽 게 하십시오 그리고 중간 병으로 솔루션을 전송.</li>
	<li>압력가 마로 소독 (121 ° C, 20 분) 하 여 솔루션을 소독. 즉시 사용 하지이 솔루션 살 균 후 4 ° C에서 보관 될 수 있습니다.</li>
</ol>2. 유도 자당을 포함 하 여 클러스터 된 Stomata의 중간 솔루션 집중 치료
<ol><li>씨앗을 소독.<ol>
<li>5% 활성 염소 NaClO 솔루션의 500 µ L 10%의 1 µ L을 추가 하 여 살 균 솔루션 준비 500 µ L 살 균 물 트라이 톤 X-100.</li>
		<li>장소 ca. 50 유전자 변형 A. thaliana 씨앗 1.5 mL 튜브에 CT GFP11 등 GFP TUB612 형광 마커를 들고.</li>
		<li>잘 5 번을 반전 하 여 70% 에탄올 솔루션와 섞어 1 mL를 추가 합니다. 1 분 동안 둡니다.</li>
		<li>씨는 튜브의 하단 싱크대 것입니다. 깨끗 한 벤치에 부드럽게 micropipette를 사용 하 여 70% 에탄올을 제거 하 고 살 균 솔루션의 1 mL을 추가. 5 번을 반전 하 여 잘 혼합 하 고 5 분 동안 둡니다.</li>
		<li>씨앗을 씻어. 여전히 깨끗 한 벤치에 무 균 조건 하에서 작동, 부드럽게 micropipette를 사용 하 여 솔루션을 제거 하 고 살 균 물의 1 mL을 추가. 5 번이이 단계를 반복 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>깨끗 한 벤치에 24-잘 접시의 각 우물을 소독된 3% 자당 포함 된 1/2 重 Skoog 중간 솔루션의 1.5 mL를 추가 합니다.</li>
	<li>각 음에 두 소독된 씨앗을 추가 합니다. Parafilm의 두 레이어를 사용 하 여 24-잘 접시에 뚜껑 테이프.</li>
	<li>100 µmol m−2의 − 1 흰색 빛을 사용 하 여 12/12-h 빛 어두운 주기와 성장 챔버 세트 23.5 ° C에서 24-잘 접시를 전송 하 고 14 일에 품 어.</li>
</ol>3. 클러스터 된 Stomata의 현미경 관찰
<ol><li>3% 자당 포함 된 1/2 重 Skoog 중간 솔루션의 유리 슬라이드 중심에 24-잘 접시의 우물에서 장소 30 µ L (크기: 76 × 26 mm, 두께: 1.0-1.2 m m).</li>
	<li>해가 위를 사용 하 여 14 일 된 묘에서 한 떡을 제거 합니다. 관찰 면이 솔루션 방울에는 떡을 부동.</li>
	<li>우리의 이전 방법13에 따라 떡 견본을 준비 합니다. 기본적으로, 커버 유리의 센터에 솔루션의 30 µ L를 배치 (크기: 18 × 18 m m, 두께: 0.12-0.17 m m). 뒤집어서 커버 유리를 부드럽게는 떡에 넣습니다. 보풀이 티슈를 사용 하 여 초과 버퍼를 닦아내십시오.</li>
	<li>공초점 레이저 현미경의 스테이지 표본을 설정 하 고 밝은 분야 조명을 사용 하 여 관찰에 대 한 클러스터 된 가드 셀을 선택 합니다.</li>
	<li>Confocal 현미경 제조업체의 지침에 따라 붙일 이라는 세포내 구조 이미지를 취득 합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Raschke, K., Fellows, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stomatal+movement+in+Zea+mays%3A+shuttle+of+potassium+and+chloride+between+guard+cells+and+subsidiary+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Stomatal movement in Zea mays: shuttle of potassium and chloride between guard cells and subsidiary cells.</a> Planta. 101 (4), 296-316 (1971).</li>
<li>Higaki, T., Hashimoto-Sugimoto, M., Akita, K., Iba, K., Hasezawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+and+environmental+responses+of+PATROL1+in+Arabidopsis+subsidiary+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Dynamics and environmental responses of PATROL1 in Arabidopsis subsidiary cells.</a> Plant and Cell Physiology. 55 (4), 773-780 (2013).</li>
<li>Bergmann, D. C., Sack, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stomatal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Stomatal development.</a> Annual Review of Plant Biology. 58, 163-181 (2007).</li>
<li>Pillitteri, L. J., Torii, K. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+stomatal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of stomatal development.</a> Annual Review of Plant Biology. 63, 591-614 (2012).</li>
<li>Sakai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chemical+compound+bubblin+induces+stomatal+mispatterning+in+Arabidopsis+by+disrupting+the+intrinsic+polarity+of+stomatal+lineage+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The chemical compound bubblin induces stomatal mispatterning in Arabidopsis by disrupting the intrinsic polarity of stomatal lineage cells.</a> Development. 144 (3), 499-506 (2017).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S., Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breaking+of+plant+stomatal+one-cell-spacing+rule+by+sugar+solution+immersion%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Breaking of plant stomatal one-cell-spacing rule by sugar solution immersion.</a> PLOS One. 8 (9), 72456(2013).</li>
<li>Chen, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Arabidopsis+callose+synthase+gene+GSL8+is+required+for+cytokinesis+and+cell+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">The Arabidopsis callose synthase gene GSL8 is required for cytokinesis and cell patterning.</a> Plant Physiology. 150 (1), 105-113 (2009).</li>
<li>Guseman, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulation+of+cell-to-cell+connectivity+and+stomatal+patterning+by+loss-of-function+mutation+in+Arabidopsis+chorus+%28glucan+synthase-like+8%29%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Dysregulation of cell-to-cell connectivity and stomatal patterning by loss-of-function mutation in Arabidopsis chorus (glucan synthase-like 8).</a> Development. 137 (10), 1731-1741 (2010).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S., Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+microtubules+and+fusicoccin+response+in+clustered+stomatal+guard+cells+induced+by+sucrose+solution+immersion%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Cortical microtubules and fusicoccin response in clustered stomatal guard cells induced by sucrose solution immersion.</a> Plant Signaling and Behavior. 13 (4), 1454815(2018).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sugar+solution+induces+clustered+lips%5BTitle%5D)+AND+%22Cytologia%22%5BJournal%5D)">Sugar solution induces clustered lips.</a> Cytologia. 79 (2), 125-126 (2014).</li>
<li>Holzinger, A., Buchner, O., Lütz, C., Hanson, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-sensitive+formation+of+chloroplast+protrusions+and+stromules+in+mesophyll+cells+of+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Temperature-sensitive formation of chloroplast protrusions and stromules in mesophyll cells of Arabidopsis thaliana.</a> Protoplasma. 230 (1-2), 23-30 (2007).</li>
<li>Abe, T., Hashimoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+microtubule+dynamics+by+expression+of+modified+%CE%B1-tubulin+protein+causes+right-handed+helical+growth+in+transgenic+Arabidopsis+plants%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%22%5BJournal%5D)">Altered microtubule dynamics by expression of modified α-tubulin protein causes right-handed helical growth in transgenic Arabidopsis plants.</a> The Plant Journal. 43 (2), 191-204 (2005).</li>
<li>Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+imaging+of+plant+cell+surface+dynamics+with+variable-angle+epifluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Real-time imaging of plant cell surface dynamics with variable-angle epifluorescence microscopy.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), 53437(2015).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

우리는 제시한 클러스터 stomata의 유도 대 한 프로토콜 A. thaliana 묘에 자당 포함 된 중간 솔루션으로 집중 치료. 다음과 같이,이 방법은 매우 간단 하 고 없는 전문된 기술이 필요로 하지만 효율적으로 클러스터 stomata를 일으킬 수 있다. 가드 셀의 45% 이상 3% 자당 포함 된 클러스터는 중간 솔루션 (20 개 이상의 독립적인 관측의 평균 값)6. 또한,이 실험 시스템 적용할 수 있는 직접 유전자 변형 또는 돌연변이 라인 유전자 변형 라인 표현 CT-GFP (그림 1) 또는 GFP-TUB6 (그림 2)와 같이. 비록만 스냅숏 이미지는 여기에 표시 됩니다, 그것은 또한 stomatal 개발 하는 동안 시간 연속 관측을 수행할 수 것입니다.
참고 우리 자당 솔루션 집중 치료에 의해 stomatal...

공장 stoma는 광합성과 증발, 가스 교환에 대 한 필수적인 기관 이다 그리고 stomatal 운동 이온 기반 통풍 관 및 물의 출시를 통해 감시 세포에 중요 한 변화에 의해 수행 됩니다. 현미경, 우리는 나뭇잎과 줄기의 표면에는 stomata의 간격된 분포 패턴을 관찰할 수 있다. Stomata의이 간격된 분포 stomatal 운동, 가드 셀과 표 피 세포1,2이웃 간의 이온 그리고 물 교류에 의해 규제 됩니다 있도록 간주 됩니다. 클러스터 된 stomata에 대 한 실험 유도 시스템은 stomata의 간격된 분포의 중요성을 조사 하는 데 유용 합니다.
그것은 그 stomata의 공간 클러스터링 유도 될 수 있다 감시 세포 감 별 법3,4 또는5화학 복합 치료에 대 한 핵심 유전자의 유전 수정에 의해 보고 되었습니다. 우리는 또한 중간 솔루션으로 집중 치료 설탕 자당, 포도 당를 포함 하 여 보충 및과 당 발생 stomatal 클러스터링 cotyledons 애기 thaliana 묘6의에서 보고 했다. 자당 솔루션 집중 치료는 누설을 방지 하는 세포 벽을 부정적인 영향을 제안 자당 취급 떡 표 피에서 감소 callose meristemoids와 표 피 세포를 분리 하는 새로운 세포 벽에 관찰 하 고 표 피 인접으로 가드 세포 분화 (예: 녹음 방송 요인)에 대 한 주요 유전자 제품의 소성 행동6세포. 비슷한 메커니즘은 gsl8/쵸 돌연변이7,8에 대 한 연구에서 제안 했다. 자당 포함 된 중간 솔루션을 사용 하 여 클러스터 된 stomata의 재현 유도 대 한 우리의 실험 시스템은 매우 간단 하 고 저렴 한. 그것은 또한 세포 및 표현 형광 마커 그 레이블 세포내 구조9, 유전자 변형 라인에 적용 될 때 클러스터 된 가드 셀에 골격 같은 세포내 구조를 조사 하 사용할 수 있습니다. 10.

<table><tbody><tr><td>24웰 플레이트</td>, <td>Sumitomo, 베이클라이트</td>, <td>MS-0824R</td><td></td>,</tr><tr><td>488nm 레이저</td>, <td>Furukawa Denko</td><td>HPU-50101-PFS2</td><td></td></tr>, <tr><td>488nm 레이저</td>, <td>Olympus</td><td>Sapphire488-20/O</td><td></td></tr>, <tr><td>510nm 장역 통과 필터</td><td>, Olympus</td><td></td> BA510IF <td></td></tr><tr><td>524 - 546nm 대역 통과 필터</td>, <td>Semrock</td><td>FF01-535/22-25</td><td></td></tr>, <tr><td>530nm 단역 통과 필터</td><td>올림푸스</td><td>BA530RIF</td><td></td></tr><tr><td>561 nm 레이저</td><td>CVI Melles Griot</td><td>85-YCA-025-040</td><td></td></tr><tr><td>604 - 644 nm 대역 통과 필터</td><td>Semrock</td><td>FF01-624/40-25</td><td></td></tr><tr><td>컨포칼 레이저 스캐닝 헤드</td><td>Yokogawa</td><td>CSU10</td><td></td></tr><tr><td>컨포칼 레이저 스캐닝 헤드</td><td>Olympus</td><td>FV300</td><td></td></tr><tr><td>냉각 CCD 카메라</td><td>광도 측정</td><td>CoolSNAP HQ2</td><td></td></tr><tr><td>이미지 수집 소프트웨어</td><td>Molecular Devices</td><td>MetaMorph 버전 7.8.2.0</td><td></td></tr><tr><td>이미지 수집 소프트웨어</td><td>Olympus</td><td>FLUOVIEW v5.0</td><td></td></tr><tr><td>이멀젼 오일</td><td>올림푸스</td><td>이멀젼 오일 Type-F</td><td>ne = 1.518 (23도)</td></tr><tr><td>도립 현미경</td><td>Olympus</td><td>IX-70</td><td></td></tr><tr><td>도립 현미경</td><td>Olympus</td><td>IX-71</td><td></td></tr><tr><td>Murashige and Skoog Plant Salt Mixture</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>392-00591</td><td>Murashige T and Skoog F (1962) 담배 조직 배양을 통한 빠른 성장 및 바이오 분석을 위한 개정 배지. Physiologia Plantarum 15 (3), 473-497.</td></tr><tr><td>대물 렌즈&nbsp;</td><td>Olympus</td><td>UPlanApo 100x / 1.35 NA 오일 아이리스 1.35</td><td>NA = 1.35</td></tr><tr><td>대물 렌즈&nbsp;</td><td>올림푸스</td><td>UPlanAPO 40x / 0.85 NA</td><td>NA = 0.85</td></tr><tr><td>자당</td><td>후지필름 Wako Pure Chemical Corporation</td><td>196-00015</td><td></td></tr></tbody></table>

클러스터 stomata 애기 thaliana 묘에 설탕 솔루션 집중 치료에 의해 위한 유도 시스템

An Induction System for Clustered Stomata by Sugar Solution Immersion Treatment in Arabidopsis thaliana Seedlings

Stomatal 운동 중재 공장 가스 교환, 광합성과 증발을 위해 필수적 이다. Stomatal 열고 닫는 중요 한 증가 의해 달성 되 고 각각 가드 셀 볼륨 감소. 때문에 이온과 물의 셔틀 수송 가드 셀과 큰 이웃 상피 세포 간의 stomatal 운동 하는 동안, 식물 stomata의 간격된 분포 stomatal 움직임을 위해 최적의 배포를 간주 됩니다. Stomata의 간격된 패턴 perturbing에 대 한 실험 시스템은 간격 패턴의 의미를 검사 하는 데 유용 합니다. 간격된 stomatal 배포와 관련 된 몇 가지 핵심 유전자 확인 되었습니다, 그리고 클러스터 stomata를 실험적으로이 유전자를 변경 하 여 유도 될 수 있다. 또는 클러스터 stomata 또한 유전 수정 없이 exogenous 치료에 의해 유도 될 수 있다. 이 문서에서는, 우리 자당 포함 된 중간 솔루션으로 집중 치료에 의해 클러스터 stomata 애기 thaliana 묘 목에 대 한 간단한 유도 시스템을 설명합니다. 우리의 방법은 간단 하 고 유전자 변형 또는 돌연변이 라인에 직접 적용 합니다. 더 큰 엽록체 자당 유도 된 클러스터 가드 셀의 셀 생물 학적 특징으로 표시 됩니다. 또한, 대뇌 피 질의 microtubules의 대표적인 confocal 현미경 이미지 클러스터 된 가드 세포의 세포내 관찰의 예제로 표시 됩니다. 대뇌 피 질의 microtubules의 레이디얼 방향 간격된 가드 셀 제어 조건에서와 같이 클러스터 된 가드 셀에 유지 됩니다.

여기, A. thaliana 묘에 자당 포함 된 중간 솔루션 stomatal 클러스터링 유도의 간단한 방법에 대 한 프로토콜 제시 하고있다. 자당 포함 된 중간 솔루션 (그림 1B) 성장 클러스터 된 가드 셀 가드 셀 자당 무료 제어 조건 (그림 1A)에서 성장 보다 더 큰 엽록체 있다. 엽록체의 확대와 CT GFP11, 엽록체 스트로 마 마커, 엽록소 autofluorescence (그림 1C-F), 자당 치료에서 전 분 곡물 축적 결과 제안 확인 됐다 고 엽록체를 통해 자당 솔루션 이해. 또한, GFP TUB612...

이 프로토콜의 목표는 포함 하는 설탕 중간 솔루션으로 집중 치료에 의해 애기 thaliana 묘 cotyledons 클러스터 stomata를 유도 하는 방법 및 엽록체와 같은 세포내 구조를 관찰 하는 방법 그리고 confocal를 사용 하 여 클러스터 된 가드 셀에 microtubules 레이저 현미경 검사 법.

클러스터 Stomata 애기 thaliana 묘에 설탕 솔루션 집중 치료에 의해 위한 유도 시스템

Stomatal movement mediates plant gas exchange, which is essential for photosynthesis and transpiration. Stomatal opening and closing are accomplished by a ...

이 방법은 식물 발달 생물학의 중요한 질문에 대답했습니다. 즉, 스토마타의 공간 분포의 중요성은 무엇입니까? 자당 솔루션을 사용하여 클러스터 된 스토마타에 대한 우리의 유도 시스템은 매우 쉽고 직접 아라비도시스 탈리아나의 형질 전환 또는 돌연변이 라인에 적용할 수 있습니다.시작하려면 무라시게-스쿠그 중간 소금 1.1그램과 15그램의 자당을 비커에 넣으세요. 증류수 490밀리리터를 비커에 넣고 저어주바와 섞어줍니다. 수산화 칼륨을 사용하여 pH를 5.8로 조정합니다.그런 다음 500 밀리리터의 증류수로 용액을 희석하고 희석된 용액을 중간 병으로 옮기습니다. 이 후 솔루션을 자동 복제합니다. 텍스트 프로토콜에 따라 멸균 솔루션을 준비합니다.그런 다음, 무균 조건하에서 작동, 약 배치 50 형질형 A.thaliana 씨앗1.5 밀리 리터 튜브에 형광 마커를 들고. 다음으로 튜브에 70%에탄올1밀리리터를 넣고 튜브를 5번 반전시켜 섞는다. 씨앗이 튜브 의 바닥에 가라 앉도록 허용 한 후, 마이크로 피펫으로 에탄올을 부드럽게 제거합니다.씨앗에 살균 용액 1 밀리리터를 추가하고 튜브를 5번 반전하여 혼합합니다. 마이크로피펫으로 씨앗에서 살균 용액을 부드럽게 제거합니다. 그런 다음 멸균 물 1 밀리리터를 추가합니다.무라시게 스쿠오 용액 1.5밀리리터를 24웰 플레이트의 각 웰에 추가합니다. 그런 다음 각 우물에 두 개의 멸균 된 씨앗을 추가합니다. 파라필름의 두 층을 사용하여, 플레이트에 뚜껑을 테이프.다음으로, 14일 동안 배양하기 위해 접시를 성장 챔버로 옮기다. 먼저 무라시게-스쿠그 용액 30마이크로리터를 24웰 플레이트에서 유리 슬라이드의 중심으로 옮긴다. 해부 가위를 사용하여 14일 된 모종에서 코틸레곤을 제거합니다.무라시게스쿠오그 용액의 낙하를 향한 관찰면으로 코틸레던을 떠보아 보실 수 있습니다. 이전에 시각화된 실험 저널에 설명된 방법에 따라 코틸레곤을 준비합니다. 공초점 레이저 현미경의 단계에 표본을 설정합니다.마지막으로 밝은 필드 조명을 사용하여 관측을 위해 클러스터된 가드 셀을 선택합니다. 이 프로토콜에서, 구내 클러스터링은 A.thaliana 모종에서 유도되었다. 자당없는 조건에서 자란 가드 세포보다 더 큰 엽록체를 갖는 배지를 함유하는 자당에서 자란 클러스터된 가드 셀.엽록소의 확대는 엽록소 스트로마 마커 및 엽록소 자동 플루오레스센트로 확인되었으며, 이는 자당 처리로 엽록소에 전분 곡물이 축적되었다는 것을 시사한다. 추가적으로, GFP tub-6의 공초점 관측은 지혈 마이크로투알이 자당 없는 가드 세포에서와 같이 자당 처리된 세포에서 복사로 지향되었다는 것을 밝혔습니다. 사실 우리는 우연히이 방법을 발견했다.발견 후, 우리는 클러스터 된 스토마타의 환경 반응을 조사했습니다. 우리는 우리의 시스템이 스토마타 분포의 중요성을 조사하는 데 도움이 될 수 있다고 믿습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

우리는 애기 장대 씨앗에서 씨앗 코트 침구 분석 (SCBA)를 조립하는 절차를 제시한다. SCBA는 유전자와 체외에서 탐색 할 수있는 강력한 도구가 될 수 있도록 표시 방식 휴면 종자의 빛 신호에 대한 응답으로 배유 컨트롤 종자 발아. SCBA는 배유가 배아의 성장에 영향을 미칠 것으로 의심되는 모든 상황에서 적용 할 수있는 원리입니다.

유전자 탐구하는 종피 침구 분석<em&gt; 체외</em&gt; 어떻게 배젖 컨트롤 종자 발아에<em&gt; 애기 장대</em

칼슘 신호는 식물에서 다양한 생물학적 과정을 조절한다. 여기에 우리가 공간과 시간 칼슘에 의한 비 생물 적 스트레스를 모니터링하기위한 방법을 제시 애기 세포와 유전자 인코딩 칼슘 지표 애큐 오린 또는 Case12를 사용하여 조직에 2 + 신호.

측정 공간적 칼슘 2 + 신호

LRIS(Lateral Root Inducible System)는 측근의 동기 유도를 허용하며 Arabidopsis, thaliana 및 maize에 대해 제공됩니다.

의 측면 루트 유도 성 시스템<em&gt; 애기 장대</em&gt;과 옥수수

이 문서에서는 열대 응답 중 plasmodesmal 투과성 때문에 옥신 기울기를 제어하는​​ 유전자를 선별하기위한 방법을 설명합니다. 이것은 배축 트로픽 반응의 정도의 측정을 포함   애기 장대와 8-hydroxypyrene-1,3,6- trisulfonic 산 (HPTS)로드 그리고 마지막으로 callose 수준의 평가에 의해 plasmodesmal 투과성을 체크.

전략은 트로픽 응답에 Callose 매개 Plasmodesmal 게이팅의 역할을 확인하려면

이 프로토콜 embryogenesis 애기 에 난 허가 뒤에 현미경으로 배아 패턴 형성의 검사를 통해 관찰 하는 방법을 설명 합니다.

애기 에서 Embryogenesis를 특성화 하는 방법

부드러운 터치 포스 로딩 기계는 인간의 머리 브러시, 로봇 팔 과 컨트롤러에서 내장되어 있습니다. 헤어 브러쉬는 기계에 설치된 로봇 팔에 의해 구동되며 주기적으로 이동하여 식물에 터치 포스를 가합니다. 기계 구동 헤어 터치의 강도는 수동으로 적용된 터치의 강도와 비슷합니다.

모델 식물 애기장대 의 Thigmomorphogenesis의 연구를 위한 노동 절약 및 반복 가능한 터치 포스 신호 돌연변이 스크린 프로토콜

여기, 우리 세대를 설명 하 고 유전자 변형 애기 thaliana 의 집합의 응용 프로그램 세 가지 주요 meristems, 싹 정점 분열 조직, 뿌리 정점 분열 조직에는 레이어의 활성화 유도할 수 있는, 조직 관련 식 라인.

유도할 수 있는, 애기 thaliana 통해 LhGR 중재 트랜스에 셀 형식 관련 식-활성화

우리는 화합물 라이브러리의 대규모 스크리닝에 의한 엽간 증발의 변조기를 식별하는 방법을 제공한다.

헬리안투스 아누스의 대규모 열화상 스크리닝에 의한 새로운 식물 증발 규제 기관 식별

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이 논문은 기공 발달을 제어하는 유전자를 특성화하기 위해 표피 껍질을 사용하지 않는 두 가지 표현형 방법을 설명합니다. 첫 번째 방법은 톨루이딘 블루 O-염색 식물 표피를 사용하여 기공 표현형을 분석하는 방법을 보여줍니다. 두 번째 방법은 기공 리간드를 식별하고 생물학적 활성을 모니터링하는 방법을 설명합니다.

표피 표현형 점수를 통한 기공 발달에 관여하는 유전자 식별

여기에서는 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 박테리아 침입에 대한 기공 반응을 직접 관찰하고 자동으로 측정하는 간단한 방법을 제시합니다. 이 방법은 휴대용 기공 영상 장치와 장치에서 캡처한 잎 이미지를 위해 설계된 이미지 분석 파이프라인을 활용합니다.

Pseudomonas syringae pv에 대한 기공 반응의 직접 관찰 및 자동 측정. 토마토 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 DC3000

학습하세요 Arabidopsis thaliana 묘에서 설탕 용액으로 군집 기공을 유도하는 방법을. 공초점 레이저 현미경으로 기공 세포 내 엽록체와 미세소관을 관찰하여 식물 기공 발달과 기능을 연구할 수 있습니다.

클러스터 Stomata 애기 thaliana 묘에 설탕 솔루션 집중 치료에 의해 위한 유도 시스템

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