Name: 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: 배우세요 대뇌 국소 빈혈 재관류의 2혈관 폐색 마우스 모델을 이용한 뇌졸중 병태생리학 연구 방법을. 이 기법은 쥐의 피질 영역에서 안정적인 경색 부피를 유도하고 면역세포 침윤 및 행동 결손을 평가하여 치료 전략 개발에 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 작품은 사역의 과학 및 기술, 대만 (가장 106-2320-B-038-024, 대부분 105-2221-E-038-007-MY3, 그리고 가장 104-2320-B-424-001) 및 타이페이 의학 대학 병원 (107TMUH-SP-01)에 의해 지원 되었다. 이 원고는 월 러 스 학술 편집 편집 했습니다.

제도 동물 보호와 사용 위원회 학계 Sinica와 타이베이 의과대학의 실험 동물의 사용을 위해이 프로토콜을 승인 했다.
1. MCAO/reperfusion 모델
<ol><li>수술까지 쥐 물과 차에 대 한 무료 액세스를 제공 합니다.</li>
	<li>압력솥에 수술 도구와 수술 및 장비 70% 에탄올을 사용 하 여 청소. 수술 용 마스크와 멸 균 장갑을 착용 하십시오. 비드 건조 살 균 기를 사용 하 여 여러 마우스 수술 한 실험 실시 됩니다 경우 수술 도구를 resterilize.</li>
	<li>8 월에 12 주 된 마우스 anesthetize (대량: 25-30 g) 0.8 %chloral 하이드 레이트, 복 주사를 통해를 사용 하 여. 마 취 마우스는 페달 반사 (로 회사 발가락 핀치를 사용 하 여 테스트) 후에 anesthetization 다는 것을 확인 하십시오.</li>
	<li>수 의사 연 고를 사용 하 여 마 취 동안 마우스에 대 한 눈 건조를 방지 하기 위해.</li>
	<li>비 침 투 적인 혈액 압력 시스템을 사용 하 여 마우스의 혈압을 모니터링.</li>
	<li>생리 적 모니터링 시스템을 사용 하 여 그것의 직장 온도 및 동맥 혈 가스 모니터링. 36.5 ±에서 체온 유지 0.5 ° c.</li>
	<li>예방 항생제 (25 mg/kg cefazolin)8마우스를 피하 주사.</li>
	<li>난방 장치 패드에서 부정사 위치에 마우스를 놓습니다.</li>
	<li>전기 면도기를 사용 하 여 마우스의 모피 오른쪽 눈과 오른쪽 귀 사이 지역에서 뿐만 아니라 복 부 목 지역에 면도 하 여 피부를 노출.</li>
	<li>제 모 크림을 사용 하 여 마우스의 시체에서 모피를 취소 하 고 scrbus povidione-요오드와 70% 에탄올을 번갈아 수술 부위의 소독.</li>
	<li>아이리스가 위를 사용 하 여 목에 1 cm 긴 중간 절 개를 잘라.</li>
	<li>홍 채 집게를 사용 하 여 신중 하 게 신체 상해를 일으키는 원인이 되기 없이 미주 신경에서 CCA를 해 부.</li>
	<li>CCA을 5-0 비단 봉합을 사용 합니다.</li>
	<li>오른쪽 눈과 오른쪽 귀 사이 중간점에서 두 피에서 0.3 cm 절 개를 확인 합니다.</li>
	<li>Microscissors를 사용 하 여 zygomatic과 squamosal 뼈 노출 temporalis 근육을 잘라.</li>
	<li>해 스테레오 현미경 오른쪽 원심 MCA에 직접 2 m m 직경 구멍을 생성 하는 microdrill를 사용 합니다.</li>
	<li>10-0 봉합 사를 사용 하 여 오른쪽 원심 MCA의 트렁크 선</li>
	<li>Nontraumatic 동맥 류 클립을 사용 하 여 오른쪽 CCA 막다</li>
	<li>허 혈의 10 또는 40 분, 후 동맥 류 클립 및 MCA와 CCA에 혈액 흐름을 복원에 봉합 사를 제거 합니다.</li>
	<li>봉합 클립을 사용 하 여 머리에 피부 절 개를 봉인.</li>
	<li>하나의 봉합 사 봉합 사 또는 물림 쇠9목 피부를 폐쇄 하 여 다음을 사용 하 여 자 궁 경부 피부 절 개를 봉인.</li>
	<li>피하 주사 통증 릴리프9에 대 한 buprenorphine (0.1 mg/kg).</li>
	<li>그것은 완전히 마 취에서 복구 될 때까지 마우스의 체 온도 36.5 ± 0.5 ° C에 난방 패드를 유지 합니다. 그것은 완전히 복구 될 때까지 다른 동물의 회사를 수술을 겪고 있다 동물을 반환 하지 않습니다. 두지 마십시오 동물 무인 충분 한 의식 회복 될 때까지.</li>
	<li>자유롭게 물에 액세스 하 고 완은 후 밥 수 압력가 마로 소독으로 마우스를 놓습니다.</li>
</ol>2. 2,3,5-triphenyltetrazolium 염화와 얼룩
<ol><li>복 주사를 통해 0.8 %chloral 하이드 레이트와 마우스 anesthetize</li>
	<li>운영가 위를 사용 하 여 동물을 목을 벨.</li>
	<li>머리의 피부에 절 개를 만들기 위해 아이리스가 위를 사용 하 여 두개골을 노출 합니다.</li>
	<li>운영가 위를 사용 하 여 정면 뼈의 앞쪽을.</li>
	<li>아이리스가 위를 사용 하 여 화살 봉합을 따라 두개골을 잘라.</li>
	<li>뼈 rongeur를 사용 하 여 우선 정면 그리고 정수 리 뼈와 뇌를 노출.</li>
	<li>홍 채 집게를 사용 하 여 뇌를 해 부.</li>
	<li>2mm 코로나 슬라이스를 마우스 뇌 매트릭스와 면도날을 사용 합니다.</li>
	<li>인산 염 버퍼 염 분 x 1에서 2 %2,3,5-triphenyltetrazolium 염화 (TTC) 37 ° C에서 10 분 동안 뇌 조각 얼룩.</li>
	<li>2 뇌를 씻어 x 10% 포 르 말린.</li>
	<li>24 h에 대 한 실 온에서 10% 포 르 말린에 뇌를 수정 합니다.</li>
</ol>3입니다. 경색 크기의 측정
<ol><li>깨끗 한 플라스틱 슬라이드에 섹션을 정렬 하 고 오리엔트는 섹션 rostral 꼬리.</li>
	<li>스캐너를 사용 하 여 슬라이드를 검사 합니다. 메트릭 눈금자 놓고 스캔 한 이미지에 표시 되어 있는지 확인 합니다. 슬라이드를 뒤집어 하 고 뒷면을 스캔.</li>
	<li>ImageJ 소프트웨어를 사용 하 여 각 섹션의 경색 영역을 계산 합니다.<ol>
<li>이미지 파일 열고 이미지에 대 한 규모를 설정 합니다.</li>
		<li>경색 영역을 선택 하려면 자유형 선택을 사용 합니다.</li>
		<li>관심 (ROI) 관리자의 영역을 사용 하 여 관심 영역을 측정.</li>
	</ol>
</li>
	<li>각 섹션에 대 한 경색 영역을 합계 하 고 섹션 두께 총 경색 볼륨 추정 결과 곱하십시오.</li>
</ol>4. 통계 분석
<ol><li>GraphPad Prism 6를 사용 하 여 학생의 t통계적 의미를 확인-테스트. 참고: 막대 그래프에 오차 막대 (SEMs) 의미의 표준 오류를 나타냅니다.</li>
	<li>사용 G * 전원 3.1 적절 한 샘플 크기를 계산 하 여 전력 분석10를 수행.</li>
</ol>

<ol><li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology%2C+treatment%2C+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurodegeneration%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11(2011).</li>
<li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunology+of+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neurology%22%5BJournal%5D)">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423(2011).</li>
<li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice%3A+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
<li>Wellons, J. C. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li>
<li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+hypoxic+stroke%3A+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput%2C+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li>
<li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia%3A+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li>
<li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106(2016).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%3A+The+Journal+of+the+American+Society+for+Experimental+NeuroTherapeutics%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li>
<li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li>
<li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li>
<li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li>
<li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

MCAO/reperfusion 마우스 모델은 일반적으로 인간의 일시적인 허 혈을 모방 하기 위해 고용 하는 동물 모델. 이 동물 모델 조사 선의 이상 유전자 변형 및 녹아웃 쥐 계통에 적용할 수 있습니다. 프로토콜의 여러 단계는 특히 중요 합니다. (1) microdrill 쉽게 MCA에서 출혈을 일으키는 부적절 한 행동으로, 두개골에 구멍을 만들 때 신중 하 게 사용 되어야 한다. (2) MCA 손상 되지 해야한다, 그리고 전과 결 찰 수술 후 출혈 피해 야 한다. MCA에 손상을7허 혈 성 뇌 reperfusion의 수준을 영향을 줍니다. MCA reperfusion 상태는 MCAO 후 확인 해야 합니다. 폐색 및 MCA 복원 혈액 흐름의 레이저 도플러를 사용 하 여 분석할 수 있습니다. (3)는 CCA CCA 격리 동안 하지 출혈 한다. (이 경색 크기와 사망률의 확률을 높일 수 있기 때문에 CCA 격리 중 4) 미주 신경 손상 하지 해야 합니다. (5) 마우스의 체온 36.5 ±...

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 마우스 모델 허 혈 유발 뇌 부상1이상 조사를 위한 가장 널리 사용 되 실험 방법 중 하나입니다. 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 주변 면역 체계를 활성화 하기 때문에 주변 면역 세포가 허 혈 성 뇌에 침투 하 고 원인 신경 손상2. 따라서, 안정적이 고 재현 가능한 마우스 모델을 모방한 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 이해 선의 이상 필요 합니다.
C57BL/6J (B6) 마우스는 선 실험에서 가장 일반적으로 사용 되 긴장 때문에 그들은 쉽게 유전자 조작 될 수 있습니다. 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 상태를 모방 MCAO/reperfusion의 두 가지 일반적인 모델 사용할 수 있습니다. 첫 번째는 실리콘 코팅 필 라 멘 트 intravascularly MCA;에 혈액 흐름을 막다 하 고용은 인접 MCAO의 intraluminal 필 라 멘 트 모델 occluding 필 라 멘 트를 복원 혈액 흐름3이후에 제거 됩니다. 더 이상 폐색 기간 외피와 subcortical 지역에서 경색 원인 반면 짧은 폐색 기간 바꾸어 지역의 병 변에서 발생 합니다. 두 번째 모델은 extravascular 결 찰 후 혈액 흐름 봉합 및 동맥 류 클립4의 제거를 통해 복원 MCA 통해 혈액의 흐름을 줄이기 위해 MCA CCA의 포함 한다 원심 MCAO의 결 찰 모델. 이 모델에는 경색은 대뇌 피 질의 영역에서 발생 하 고 사망률은 낮다. MCAO/reperfusion 모델의 결 찰 원심 MCA의 사이트를 노출 하는 craniectomy를 해야 하므로 사이트를 쉽게 확인 될 수 있다, 그리고 원심 MCA에 혈액의 흐름 절차 동안 중단 여부를 검토 하는 것은 간단 합니다.
B6 쥐 윌리스;의 원형의 해부학에 있는 상당한 변이 전시 이 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion5,,67다음 경색 볼륨에 영향을 수 있습니다. 현재,이 문제는 원심 MCA8의 결 찰을 통해 극복할 수 있습니다. 이 연구에서 우리는 MCA 혈액 흐름을 경색 및 허 혈의 미리 결정된 한 기간 후 reperfusion를 활성화 하는 방법을 설정 합니다. 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 모델의 2 배 폐색 혈액의 흐름 허 혈의 일정 기간 후 복원으로 바로 원심 MCA와 오른쪽 CCA의 결 찰을 통해 MCA 영토의 일시적인 허 혈을 유도 합니다. 이 MCAO/reperfusion 모델 대뇌 허 혈-reperfusion4후 안정적인 크기, 허 혈 성 두뇌와 행동 적자에 뇌에 침투 하는 면역 세포의 대부분의 경색을 유도합니다.

<table><tbody><tr><td>뼈 rongeur</td><td>Diener</td><td></td><td>Friedman</td></tr><tr><td>부 프레 노르 핀</td><td>시그마</td><td>B-044</td><td></td></tr><tr><td>세파 졸린</td><td>시그마</td><td>1097603</td><td></td></tr><tr><td>클로랄 수화물</td><td>시그마</td><td>C8383</td><td></td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>니콘</td><td>SMZ-745</td><td></td></tr><tr><td>전기 가위</td><td>Petpro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 % 포르말린</td><td>Sigma</td><td>F5304</td><td></td></tr><tr><td>저미네이터 드라이 비드 살균기</td><td>Braintree Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>홍채 집게</td><td>칼 Klappenecker</td><td></td><td>10cm</td></tr><tr><td>홍채 가위</td><td>다이너</td><td></td><td>9cm</td></tr><tr><td>홍채 가위 STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>11cm</td></tr><tr><td>마이크로드릴</td><td>스톨팅</td><td>FOREEDOM K.1070</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위 - Vannas</td><td>HEISS</td><td>H-4240</td><td>블레이드 7mm, 8cm</td></tr><tr><td>마우스 뇌 매트릭스</td><td>세계 정밀 기기</td><td></td><td></td></tr><tr><td>비 침습적 혈압 시스템</td><td>무로마치</td><td>MK-2000ST</td><td></td></tr><tr><td>작동 가위 STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>14cm</td></tr><tr><td>생리 모니터링 시스템</td><td>하버드 장치</td><td></td><td></td></tr><tr><td>면도기 블레이드</td><td>Ever-Ready</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stoelting 설치류 워머</td><td>Stoelting</td><td>53810</td><td>가열 패드</td></tr><tr><td>봉합 클립</td><td>Stoelting</td><td></td><td></td></tr><tr><td>핀셋</td><td>IDEALTEK</td><td></td><td>No.3</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>15672</td><td>외과용 접착제</td></tr><tr><td>10-0 봉합사</td><td>UNIK</td><td>NT0410</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazolium 염화물</td><td>시그마</td><td>T8877</td><td></td></tr></tbody></table>

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

이 연구에서 중간 대뇌 동맥 (MCA) 폐색 마우스 모델 연구 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 채택 된다. 재현 가능 하 고 안정적인 마우스 모델은 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 이상 조사 하 고 뇌졸중 환자에 대 한 잠재적인 치료 전략을 결정 하는 데 유용 합니다. 윌리스의 C57BL/6 마우스의 해부학에 있는 변이 대뇌 허 혈 유발 부상 후 그들의 경색 볼륨을 영향을 줍니다. 연구 그 원심 MCA 폐색 (MCAO) 수 있습니다이 문제를 극복 하 고 안정적인 경색 크기에 결과 표시 했습니다. 이 연구에서 우리는 오른쪽 MCA에 혈액 흐름의 중단을 통해 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델을 설정합니다. 우리는 distally 오른쪽 MCA와 바로 일반적인 경 동맥 (CCA) 선 하 고 국 소 빈 혈의 일정 기간 후 혈액 흐름을 복원. 이 국 소 빈 혈 reperfusion 상해 안정적인 크기와 행동 적자의 경색을 유도합니다. 주변 면역 세포는 24 h 침투 기간 내 허 혈 성 뇌를 침투. 또한, 대뇌 피 질의 영역에서 신경 손실 더 reperfusion 동안 작습니다. 따라서,이 두 혈관 폐색 모델은 면역 반응 및 신경 복구 후 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion 기간 동안 조사 적합 합니다.

MCAO/reperfusion 이렇게 오른쪽 MCA 주변 피 질 경색 생산과 행동 적자 발생. 허 혈 유발 경색 볼륨 (그림 1AB) 및 (그림 1 cD) 신경 손실의 다른도 결 찰 기간 증가 통해 오른쪽 MCA 영역의 대뇌 피 질에서 창조 되었다. 이 MCAO/reperfusion 상해 MCAO/reperfusion (그림 2) 후 48 h에 동물의 운동 활동을 감소. 주변 면역 세포 (CD45높은 세포)의 대량은 또한 대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion (그림 3) 후 허 혈 성 뇌 (동측 반구)를 침투. 또한, 우리 MCAO 모델이 2 배 폐색 모델을 비교 하 고이 두 ...

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 마우스 모델 선의 이상 조사를 설립 하다. 우리는 distally 오른쪽 중간 대뇌 동맥과 바로 일반적인 경 동맥 선 하 고 국 소 빈 혈의 10 또는 40 분 후 혈액 흐름을 복원.

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

대뇌 허혈 재관류의 이 2용기 폐색 마우스 모형은 치기의 병생리학을 조사할 수 있습니다. 이 모델은 허혈성 뇌의 면역 세포와 대뇌 허혈 -재퍼주입 후 행동 적자에 침투하는 뇌의 대량의 안정적인 경부 볼륨을 유도할 것입니다. 이 모델에서는, 피질 영역에서 경색이 발생하고 사망률이 낮습니다.결찰 MCAO 재퍼퓨전 모델은 황실 MCA의 크기를 노출하기 위해 두개골 절제술이 필요하기 때문에 크기를 쉽게 확인할 수 있으며, 시술 중에 단위 MCAO의 혈류가 중단되는지 여부를 검사하는 것은 간단하다. 수술 전까지 생쥐에게 물과 음식에 무료로 접근할 수 있도록 하십시오. 수술 도구를 자동 클렌브하고 70 %의 에탄올을 사용하여 수술 테이블과 장비를 소독하십시오.8-12주 된 마우스를 마취한 후, 단단한 발가락 핀치를 사용하여 테스트할 때 페달 반사가 없는지 확인하십시오. 마우스가 마취 하에 있는 동안 눈 건조를 방지하기 위하여 수의사 연고를 사용하십시오. 혈압을 모니터링하려면 먼저 모발을 제거한 다음 비침습적 혈압 시스템과 생리적 모니터링 시스템을 사용하여 직장 온도와 동맥 혈액 가스를 모니터링합니다.예방 항생제로 마우스를 피하로 주입하십시오. 다음으로, 가열 패드에 마우스를 supine 위치에 놓습니다. 피부를 노출하려면 전기 클리퍼를 사용하여 복부 목 부위와 오른쪽 눈과 오른쪽 귀 사이의 부위의 털을 면도합니다.에필라팅 크림으로 동물의 몸에서 털을 제거하고 수술 부위를 70%에탄올로 소독합니다. 그런 다음 홍채 가위를 사용하여 목에 1 센티미터 길이의 중간 선 절개를 자른다. 홍채 집게로, 조심스럽게 물리적 인 부상을 일으키지 않고 미주 신경에서 무료로 일반적인 경동맥을 해부하고, 동맥을 분리하는 5-0 실크 봉합사를 사용합니다.다음으로, 홍채 가위를 사용하여 오른쪽 눈과 오른쪽 귀 사이의 중간점에서 두피에 0.3 센티미터 절개를 합니다. 마이크로 가위를 사용하여, zygomatic과 squamosal 뼈를 노출하는 측두근 근육을 잘라. 마우스를 스테레오 해부 현미경 아래에 놓고 마이크로 드릴을 사용하여 오른쪽 해반 중간 뇌 동맥 바로 위에 2 밀리리터 구멍을 만듭니다.10-0 봉합사를 사용하여 오른쪽 단위 MCA의 트렁크를 리게이트하고 비외상성 동맥류 클립을 사용하여 오른쪽 CCA를 가리키게 합니다. 허혈의 원하는 기간 후, MCA와 CCA에 혈액 흐름을 복원하는 봉합및 동맥류 클립을 제거합니다. 봉합사 클립을 사용하

two-vessel-occlusion-mouse-model-of-cerebral-ischemia-reperfusion

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

쥐에서 허혈성 뇌 손상 외과 유도는 뇌졸중 연구 널리 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 중간 대뇌 동맥의 폐색에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈의 유도를 보여줍니다. histological 얼룩 및 자기 공명 영상에 의해 발생하는 경색의 시각화도 표시됩니다.

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

중간 대뇌 동맥의 폐색 Filamentous은 생쥐에서 허혈성 뇌졸중 공부를위한 일반적인 모델입니다.

마우스의 모델링 스트로크 - 필라멘트 모델 중간 대뇌 동맥 폐색

뇌졸중의 병태 생리를 이해하기 위해, 신뢰할 수있는 모델을 사용하는 것이 중요하다. 마우스에서 가장 자주 사용되는 뇌졸중 모델 중 하나를 설명한다 본 논문의 중간대 뇌동맥 폐색 (MCAO) 모델이라 재관류 (또한 관내 또는 필라멘트 봉합사 모델 지칭).

마우스의 중간 대뇌 동맥 폐색 및 재관류 유도 스트로크에 대한 수술 적 접근

우리는 실리콘으로 코팅된 봉합사를 사용하여 중대뇌동맥의 폐색에 의해 유도된 뇌졸중의 마우스 모델을 설명합니다. 이 프로토콜은 영구적인 폐색 또는 일시적인 허혈을 유도한 후 재관류를 유도하는 데 적용할 수 있습니다.

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

중간 대뇌 동맥의 Intraluminal 필 라 멘 트 폐색 설치류 실험 뇌졸중의 가장 자주 사용 된 vivo에서 모델입니다. 일반적인 경 동맥 복구를 허용 하는 다른 수술 접근 여기, 일반적인 경 동맥의 reperfusion 및 중간 대뇌 동맥 영역 전체 reperfusion 수 있습니다 수행 됩니다.

쥐에 있는 일반적인 경 동맥 수리 통해 Reperfusion를 허용 하는 중간 대뇌 동맥 폐색

이 프로토콜은 중간 크기의 경색과 우수한 생존율을 가진 독특한 마우스 스트로크 모델을 보여줍니다. 이 모델을 통해 전임상 뇌졸중 연구자는 허혈 기간을 연장하고, 노령 마우스를 사용하고, 장기적인 기능적 결과를 평가할 수 있습니다.

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

이 프로토콜은 중뇌동맥의 내강 내 폐색을 통한 마우스의 일시적인 국소 대뇌 허혈 모델을 설명합니다. 또한 자기 공명 영상 및 행동 테스트를 사용하여 결과 평가의 예를 보여줍니다.

뇌졸중의 일시적인 중뇌동맥 폐색 모델

여기에서는 C57BL/6J 마우스에서 경두개 전기응고를 통해 원위 중뇌동맥 폐색(dMCAO) 모델을 확립하고 후속 신경학적 행동 및 조직병리학적 특징을 평가하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

원위 중동맥 폐색 기법을 사용한 마우스의 급성 허혈성 뇌졸중 유도

현재 프로토콜은 손상을 입히지 않고 뇌 혈관의 해부학적 구조를 보존하는 중대뇌 동맥 폐색/재관류의 쥐 모델을 설명합니다.

대뇌 혈관의 해부학적 구조를 손상시키지 않고 중간 대뇌 동맥 폐색/재관류의 쥐 모델

이 프로토콜은 연구자가 수정된 Longa 외부 경동맥 방법을 사용하여 마우스에서 중뇌동맥 폐색 절차를 수행할 수 있는 단계별 가이드를 제공합니다. 이 기사에 제시된 수정 사항은 중뇌동맥 폐색의 정확도를 높이고 완전한 재관류를 보장하는 것을 목표로 합니다.

완전한 재관류를 위한 Longa Middle Cerebral Artery Occlusion 방법의 최적화

이 프로토콜은 총경동맥을 통한 중뇌동맥 폐색 재관류를 준비하는 과정을 설명합니다.

중뇌동맥 폐색 재관류를 위한 수정된 모델 준비

배우세요 대뇌 국소 빈혈 재관류의 2혈관 폐색 마우스 모델을 이용한 뇌졸중 병태생리학 연구 방법을. 이 기법은 쥐의 피질 영역에서 안정적인 경색 부피를 유도하고 면역세포 침윤 및 행동 결손을 평가하여 치료 전략 개발에 활용됩니다.

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

더 많은 동영상 탐색