이중 가닥 RNA와 패턴 인식 수용 체 부정적인 감 RNA 바이러스 감염에의 confocal 영상

RNA 바이러스 복제 생산 하는 이중 가닥 RNA는 타고 난 면역 반응 유도 하 패턴 인식 수용 체에 의해 인식할 수 있습니다. 부정적인 감 RNA 바이러스에 대 한 낮은 수준의 dsRNA와 호흡기 간의 상호 작용 불분명 남아 있습니다. Arenavirus dsRNA와 개별 셀에서 PRR를 시각화 하는 confocal 현미경 검사 법 방법을 개발 했습니다.

전통적인 이중 가닥 RNA 검출 분석은 일반적으로 음성 감각 RNA 바이러스 감염에서 형성된 이중 가닥 RNA를 검출하기에 충분히 민감하지 않습니다. 따라서 이중 좌초 된 RNA와 호스트 패턴 인식 수용체 사이의 상호 작용은 이러한 바이러스에 대해 크게 애매하게 남아 있다. 이 프로토콜을 활용하여 우리는 바이러스 성 핵 단백질, 이중 가닥 RNA 사이의 상호 작용을 시각화하고 특성화 할 수 있으며 음성 감각 RNA 바이러스에 대한 단일 세포 수준에서 PRR을 숙주 할 수 있습니다. 이것은 개별 적인 세포에 있는 이중 좌초 RNA 및 2개의 바이러스성 또는 호스트 단백질 표적의 동시 염색을 허용하는 멀티플렉스 분석입니다. RNA-FISH 분석과는 달리 이 기술은 RNA 서열이 독립적이며 일반적으로 단백질 표적의 항체 검출과 호환된다. 감염 24시간 전에 200, 000개의 인간 폐 상피 A549 세포를 폴리-D-Lysine 코팅 유리 커버 에 12웰 플레이트로 파종하고 37세에 성장하여 시작합니다.