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Immunology and Infection
절연 및 높은 소금의 입양 전송 처리 수지상 세포를 항 원 제시
절연 및 높은 소금의 입양 전송 처리 수지상 세포를 항 원 제시
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JoVE Journal Immunology and Infection
Isolation and Adoptive Transfer of High Salt Treated Antigen-presenting Dendritic Cells

절연 및 높은 소금의 입양 전송 처리 수지상 세포를 항 원 제시

Full Text
6,087 Views
09:29 min
March 5, 2019

DOI: 10.3791/59124-v

Justin P. Van Beusecum1, Liang Xiao1, Natalia R. Barbaro1, David M. Patrick1, Annet Kirabo1

1Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine,Vanderbilt University Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for isolating dendritic cells from murine spleens using magnetic cell sorting, followed by adoptive transfer into na茂ve mice. The focus is on high-salt activated dendritic cells and the detailed procedures for adoptive transfer and flow cytometry.

Key Study Components

Area of Science

  • Immunology
  • Cell Biology
  • Cardiovascular Research

Background

  • Dendritic cells play a crucial role in the immune response.
  • CD11c positive dendritic cells are significant in studying hypertensive injury.
  • Isolation techniques are essential for understanding immune cell functions.
  • This method can be adapted for various immune cell types.

Purpose of Study

  • To isolate CD11c positive dendritic cells from murine spleens.
  • To facilitate the study of their physiological roles in disease states.
  • To demonstrate the adoptive transfer process into recipient mice.

Methods Used

  • Magnetic cell sorting for dendritic cell isolation.
  • Adoptive transfer of isolated cells into na茂ve mice.
  • Flow cytometry for analyzing cell populations.
  • Visualization techniques to enhance understanding of the process.

Main Results

  • Successful isolation of dendritic cells from murine spleens.
  • Demonstrated the adoptive transfer process effectively.
  • Highlighted the role of CD11c positive dendritic cells in hypertension.
  • Provided a reproducible method applicable to other immune cells.

Conclusions

  • The protocol is effective for isolating and studying dendritic cells.
  • Insights gained can advance research in hypertension and immune responses.
  • This method can be adapted for various immune cell types.

Frequently Asked Questions

What are dendritic cells?
Dendritic cells are immune cells that process and present antigens to T cells, playing a crucial role in initiating immune responses.
How does magnetic cell sorting work?
Magnetic cell sorting uses magnetic beads coated with antibodies to isolate specific cell types from a mixture based on surface markers.
What is adoptive transfer?
Adoptive transfer is a technique where immune cells are transferred from one individual to another to study their effects on the recipient's immune system.
Why is flow cytometry important?
Flow cytometry allows for the analysis of physical and chemical characteristics of cells, enabling detailed study of cell populations.
Can this method be used for other immune cells?
Yes, the protocol can be adapted for isolating other immune cell types such as B lymphocytes, T lymphocytes, monocytes, and macrophages.

여기, 선물이 자기 세포 분류와 순진한 쥐로 후속 입양 전송 murine spleens에서 수지상 세포를 분리 하는 프로토콜. 높은 소금 활성화 수지상 세포의 모델 입양 전송 및 cytometry의 단계별 절차를 설명 하기 위해 선택 되었다.

이 방법은 CD11c 양성 수지상 세포의 연구 결과 및 고혈압 상해의 역할을 어떻게 강화하는지를 포함하여 고혈압 및 심혈관 질환 분야의 주요 질문에 대답할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 고체 기관에서 CD11c 양성 수지상 세포의 격리와 다양한 질병 상태에서의 생리적 역할의 연구입니다. 따라서 이 과정은 B 림프구, T 림프구, 단세포 및 대식세포를 포함한 다중 면역 세포 유형에 적용 될 수 있습니다.

이 기술의 시각화는 수지상 세포 격리, 특히 수용자 마우스로의 입양 전달 과정을 이해하는 데 매우 중요합니다. 시작하려면 안락사 마우스의 가슴과 측면을 70 %에탄올로 스프레이하십시오. 왼쪽에, 조심스럽게 비장을 노출피부와 복막 구멍을 엽니 다.

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