무알코올 Steatohepatitis (NASH) 해상도 평가 하기 위해 쥐에 지속 가능 간 생 검 절차의

비알코올성 염간염 또는 NASH를 가진 마우스에 있는 이 생존가능한 간 생검 절차는 NASH가 없는 동물의 배제 및 내정간섭에 대한 반응의 정확한 측정을 둘 다 허용합니다. 이 절차는 간과의 사후 치료 병리학을 비교하고 약물 효능의 보다 정확한 평가를 허용하는 NASH 연구를 위한 임상 시험 설계를 밀접하게 모방합니다. 간 엽을 노출하는 것은 처음에 도전이 될 수 있습니다.

손가락이나 면에 기울어진 어플리케이터로 조직을 먼저 노출하여 가장 적합한 것을 찾아보십시오. 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 1 - 2 센티미터, 세로 복부 피부 절개는 즉시 심경화 과정과 마취 마우스의 왼쪽에 약간 caudal합니다. 집게와 가위를 사용하여 복벽이 노출되고 간이 근육 조직 아래에 시각화 될 때까지 피부를 해부하십시오.

멸균 메스 블레이드를 사용하여, 복부 벽에 1-2센티미터 절개를 하여 간 좌측 측삭 엽을 노출시키고, 왼쪽 측면 엽 아래에 멸균 면봉을 놓아 절개를 통해 노출되는 부분을 부드럽게 추출한다. 멸균식 식염수에 흠뻑 젖은 거즈 조각을 노출된 엽 아래에 놓고 멸균 가위를 사용하여 추출된 간에서 30-50밀리그램의 쐐기 모양의 조직을 소비합니다. 간 웨지 조각과 비슷한 크기의 흡수성 젤라틴 압축 스폰지 조각을 자르고 멸균 집게를 사용하여 스폰지를 간 절단 부위에 삽입합니다.

젤라틴이 간 표면에 부착될 때까지 집게와 함께 스폰지를 제자리에 고정하고 혈청은 간 생검을 다운스트림 분석을 위한 적절한 용기에 넣기 전에 달성됩니다. 간을 복부로 부드럽게 돌려보내 스폰지를 방해하지 않도록 주의하고, 전체 정사각형 매듭으로 시작하고 끝나는 것은 5-0 코팅 된 흡수성 봉합사로 복부 벽을 봉합합니다. 그런 다음 7mm 상처 클립으로 피부를 닫고 배치 후 완전한 폐쇄를 확인하고 마우스를 완전한 회복이 될 때까지 모니터링하여 가열 된 표면의 깨끗한 케이지로 되돌릴 수 있습니다.

이 대표적인 실험에서, 118 마우스는 NASH를 유도하기 위하여 지방, 과당 및 콜레스테롤에서 높은 관습 규정식에 29 주 후에 생검되었습니다. 섬유증과 스테토시스의 수준은 각 생검에 대해 다음 득점했다. 마우스는 저또는 높은 섬유증과 비정상적인 체중 감소 또는 상처 치유에 기초하여 연구에서 제외되었고, 나머지 마우스는 6주 동안 차량 또는 글루카곤 과 같은 펩티드-1 수용체 작용제 리라글루티드로 치료되었다.

차량 처리 군에서, 1개의 마우스는 섬유증에 있는 증가를 보여주었고 4개의 마우스는 NASH 활동 점수에 있는 증가를 보여주었습니다. Liraglutide 처리는 섬유증의 전반적인 개선과 연관되었습니다, 와 17% 치료 단 개선 및 83% 변경되지 않은 남아. 마찬가지로, 리라글루티드 치료는 전체 NASH 점수를 향상, 와 함께 66% 향상 된 NASH 활동 점수를 나타내는, 33%는 변경되지 않은 남아.

또한, liraglutide 치료는 염증을 개선, 와 함께 75% 치료 후 낮은 염증 점수를 가진 그룹의, 차량 치료 동물 염증의 증가 경험 하는 동안. Steatosis는 고뇌증 처리에 의해 영향을 받지 않았고, 개입 전후에 두 그룹에서 변경되지 않았습니다. 간을 과도하게 손상시키지 않도록 주의하여 필요에 맞게 적절하게 분석할 수 있도록 하십시오.

이 절차는 NASH 간에서 새로운 치료법의 전 및 후 치료 효과를 비교하여 임상 시험 설계를 모방하는 데 사용할 수 있습니다.