Name: 진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-02T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 학습하세요 진공 혈액 수집 시스템과 안경 돋보기를 이용한 생쥐 꼬리 정맥 채혈법을. 이 방법은 반복 채혈이 가능하며 초보자도 높은 성공률을 보이고 생쥐에게 최소한의 손상만을 줍니다.

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이 작품은 지원 [보조금 번호 2018CFB761] 후베이 성, 중국의 자연 과학 재단 부여에 의해.

1입니다. 축산
<ol><li>12 주 오래 된 쿤밍 마우스를 사용 합니다. 참고: 우리가 사용 하는 마우스 (n = 40, 20 남성, 37-46 g 의미 42.38 ± 2.39 g) 실험 동물 센터 Tongji 의학 대학에서.</li>
	<li>식품 및 식 수와 표준 조건 하에서 쥐를 집. 계속 나무 면도을 530 cm2 장에 두 마우스 침구.</li>
	<li>21-23 °C 사이 실내 온도 유지</li>
	<li>일반 소금 다이어트로 쥐를 피드 (0.3 %NaCl) 연구를 통해.</li>
</ol>2. 혈액 샘플 컬렉션
<ol><li>다음 장비 준비: 진공 튜브 (1 mL), 나비 바늘, 돋보기 안경, 그리고 플라스틱 금지 홀더. 멸 균 표면 (그림 1)에 넣어.</li>
	<li>플라스틱 금지 홀더에 마우스를 놓고 따뜻한 물 (20-30 °C)로 꼬리를 세척 합니다. 70% 에탄올 포화 면봉 정 맥을 확장 하는 꼬리를 닦아냅니다. 오른쪽 또는 왼쪽 꼬리 정 맥 혈액 샘플링을 선택 합니다. 부드럽게 꼬리의 아래 부분을 파악 하 고 혈액 샘플 컬렉션 중에 바로 꼬리를 계속.</li>
	<li>혈액을 수집 합니다. 두 그룹에서 혈액을 수집 하는 방법, 비교 하는 경우: "실험적인" 그룹 개발 했습니다, 아래 절차를 사용 하 여 및 "전통적인" 그룹 아래 제시 또한 전통적인 방법을 사용 하 여.<ol>
<li>실험적 컬렉션:<ol>
<li>꼬리 정 맥의 펑크에 대 한 보기를 개선 하기 위해 안경 돋보기를 착용. 22 G 나비 바늘 팁 하나는 천사 약 10°, 꼬리의 기지에 쪽으로 이동 하는 여러 개의 샘플에 대 한 꼬리의 위치 distally 끝에서에서 약 절반 거리에 측면 꼬리 정 맥에 삽입 합니다.</li>
			<li>진공 혈액 컬렉션 튜브를 수집 혈액 (그림 2)에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입 합니다. 참고: 경우에 혈액 혈액 수집 하는 동안 밖으로 흐르는 중지, 바늘 각도 수 신속 하 게 조정 한다. 바늘에 혈액 응고를 방지 하려면 다른 빵 꾸 위치를 선택 해야 합니다 15 후 밖으로 흐르는 혈액 중지 하는 경우 s.</li>
		</ol>
</li>
		<li>전통적인 방법:<ol>
<li>연결 된 주사기에는 거리의 측면 혈관 약 1 / 3의 하나로 distally 꼬리의 끝에서 바늘을 삽입 합니다.</li>
			<li>피는 허브에 표시 하는 때, 혈액 (그림 3)7수집을 천천히 플런저를 후퇴. 참고: 추가 혈액 컬렉션으로 다양 한 경험의 효과 명료 하 게, 하는 초보자와 전문가 선정 됐다 실험 및 전통적인 방법을 사용 하 여 동시에 혈액 샘플을 수집 하.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>혈액 수집 후 바늘을 제거 하 고 출혈을 막으려고 펑크 포인트를 누릅니다. 다음, 플라스틱 금지 홀더에서 마우스를 해제 하 고 그것의 감 금 소를 마우스를 반환 합니다. 참고: 그것은 알려졌다는 최대 총 혈액의 10% 볼륨 수 안전 하 게 2 주 간격으로8에서 건강 한 동물에서 제거, 그래서 약 175 µ L 혈액의 윤리적 원칙에 따라 각 시간 수집 된.</li>
	<li>EDTA와 튜브를 사용 하 여 플라즈마를 수집 하 여 응고 하지 않고 튜브를 사용 하 여 혈 청을 수집. 부드럽게 여러 번 튜브를 반전 하 고 수직으로 얼음에 넣어.</li>
	<li>혈액 샘플 컬렉션 튜브 플라스마와 혈 청을 10 분 1000 x g에서 냉장된 원심 분리기에 원심 참고: 성공적인 혈액 컬렉션 얻기 175 µ L의 각 시간으로 정의 됩니다. 3 개 이상 구멍을 시도해 야 하 고 실패 한 혈 세 번째 찔린 후 총 혈액 양의 미만 175 µ L로 정의 됩니다. 샘플링 기간 후 혈액 컬렉션 바늘의 제거를 꼬리 정 맥 빵 꾸에서 시간으로 정의 됩니다.</li>
	<li>두 번 간격 2 주8의 혈액을 수집 합니다.</li>
</ol>3. 통계 분석
<ol><li>상업적으로 이용 가능한 통계 소프트웨어를 사용 하 여 분석을 위해. 사용 하 여 p < 0.05 컷오프 통계적 의미에 대 한 평균값이 ± 표준 편차로 데이터를 제시.</li>
</ol>

<ol><li>Grouzmann, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+methodology+is+crucial+for+precise+measurement+of+plasma+catecholamines+concentrations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Blood sampling methodology is crucial for precise measurement of plasma catecholamines concentrations in mice.</a> European Journal of Physiology. 447 (2), 254-258 (2003).</li>
<li>Heimann, M., Roth, D. R., Ledieu, D., Pfister, R., Classen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublingual+and+submandibular+blood+collection+in+mice%3A+a+comparison+of+effects+on+body+weight%2C+food+consumption+and+tissue+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Sublingual and submandibular blood collection in mice: a comparison of effects on body weight, food consumption and tissue damage.</a> Lab Animal. 44 (4), 352-358 (2010).</li>
<li>Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+sublingual+vein+in+mice+and+hamsters%3A+a+suitable+alternative+to+retrobulbar+technique+that+provides+large+volumes+and+minimizes+tissue+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage.</a> Lab Animal. 43 (3), 255-260 (2009).</li>
<li>Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+blood+collection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Methods of blood collection in the mouse.</a> Lab Animal. 29 (10), 47-53 (2000).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Pharmacotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Academic+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Academic Emergency Medicine. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstetrics and Gynecology. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

현재 연구는 배우기 쉬운 혈액 수집 방법을 마우스에서 기존의 기술에 우수 하는 설명 합니다. 첫째, 메서드 높은 성공율 쉽게 장악 될 수 있습니다. 둘째, 그것 진공 부정 압력 원리에 기반 하 고 또한 오염 및 용 혈9의 기회를 감소 시키는 직접 혈액 노출의 위험을 감소와 혈액의 연속 그림에 대 한 있습니다. 셋째,이 메서드는 다양 한 연구 목적을 위해 짧은 기간 동안 쥐에서 적절 한 볼륨으로 혈액의 자주 샘플링 가능. 또한, 절차 inflicts 마우스에만 최소한의 부상 그리고 혈액 컬렉션; 마 취약의 사용 없이 실행 될 수 있습니다. 따라서, 혈액 샘플에는 스트레스 반응 및 마 취약의 영향을 피할 수 있습니다.
꼬리 정 맥에 따라 승인 된 프로토콜7혈액 샘플링에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 그것은 항상 쉽지 않다를 낮은 혈액 흐름으로 얇은 꼬리 정 맥에서 충분 한 혈액 볼륨. 이 경우에, 피부는 일반적으로 자르면 정 맥, 랜 싯에 의해 침투 또는 꼬리의 끝에 면도칼으로 신속 하 게 제거 됩니다.
이 프로토콜 진공 혈액 샘플 컬렉션 튜브, 나비 바늘, 그리고 안경 돋보기를 필요로 하는 진공 혈액 수집 시스템을 사용 하 여 쥐에서 혈액 컬렉션의 방법론을 개선 하는 것을 목표로. 이 진공 혈액 샘플링 시스템으로 매일 임상 연습10환자에서 혈액 샘플을 수집 하기 위해 사용 됩니다. 안경 돋보기의 도움으로 꼬리 정 맥의 완벽 한 펑크 포인트 찾을 수 쉽습니다. 바늘의 팁을 꼬리 정 맥에 삽입 하는 경우 혈액 부정적인 압력 진공 튜브로 자동으로 흐르게 됩니다. 바늘을 꼬리 정 맥에서 철수, 후 카 테 터에서 차단 된 혈액 수집 진공 튜브 진공 때문에 흐름 것입니다.
다음 팁은 방법의 성공적인 응용 프로그램에 대 한 중요 합니다. 첫째, 각 마우스의 몸 무게 40 g 해야 이상 감소 puncturing에 충분 한 혈액을 얻기 어려움. 둘째, 실패 한 혈의 경험 혈액을 밖으로 계속 될 때까지 천천히 바늘을 철회 하려고 한다. 셋째, 혈액 샘플링 하는 동안 어떤 움직임을 피하기 위해 꼬리를 확장 하는 생명 이다. 바늘을 부드럽게 잡고 마우스 꼬리 움직임으로 정 맥에 바늘 팁을 유지 시킬 수 있습니다. 넷째, 혈액 혈액 수집 하는 동안 밖으로 흐르는 중지, 바늘 각도 적시에 조정 되어야 한다. 바늘에 혈액 응고를 방지 하기 위해 다른 빵 꾸 위치를 선택 해야 합니다 15 후 밖으로 흐르는 혈액 중지 하는 경우 s. 마지막으로,이 기법을 사용 하 여 쥐에서 혈액을 수집 하는 동안 두 사업자의 협력을 권장 합니다.
즉, 마우스에 사용 하기 위해 채택 된 진공 혈액 수집 방법, 가능 하 고, 안전 하 고 쉽게 연습입니다. 이 메서드는 적절 한 혈액 볼륨 비 취 쥐에서 혈액의 자주 샘플링을 수 있습니다.

동물 실험에 관련 된에서 혈액 샘플링 기초 연구 기술입니다. 사용할 수 있는 몇 가지 기술이 있다 쥐에서 혈, 꼬리 자르는 등 및 심장, 역 궤도 총, 경 정 맥, 꼬리 정 맥, 그리고 베 나 정 맥의 puncturing. 이상적으로, 혈액 동물의 건강에 미치는 영향을 최소화와 최소 침 습 방식으로 수집 한다. 그러나, 가장 일반적으로 사용 되는 기술을 종종 동물에 스트레스를가 하 고 연구 결과1에 영향을 줄 수 있습니다. 복고풍 궤도 총에서 혈 쥐2에서 충분 한 혈액 량을 얻기 위해 사용할 수 있습니다. 그러나, 그것은 심각한 조직 손상 될 수 있습니다 하 고 짧은 시간 간격3에서 반복 해 서 혈액을 얻기 위해 허용 하지 않습니다.
꼬리 정 맥 행 쥐 시 최소한의 부상 혈액 컬렉션에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 쥐의 꼬리 정 맥은 얇은, 그리고 그것이 때로는 기존의 펑크 기술을 통해 충분 한 혈액을 얻기 어렵다. 경우에 따라 반복된 자국 원하는 혈액 볼륨을 얻기 위해 필요 합니다. 마 취는 또한 일반적으로 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링을 촉진 하기 위하여 권장 됩니다.  또한, 메스, 똑 바른 가장자리 면도기, 또는 날카로운가 위 필요한 혈액 샘플4를 꼬리의 끝을 제거 하려면 필요할 수 있습니다. 우리 혈액 오염의 위험을 감소 하 고 반복된 구멍5에 대 한 필요성을 피할 수 있는 진공 혈액 샘플 수집 시스템에 의해 이전 비 anaesthetized 쥐의 꼬리 정 맥에서 성공적인 혈액 컬렉션을 보고 있다. 이 연구는 비 취 쥐에 있는 유사한 혈액 수집 방법을 보고합니다.

<table><tbody><tr><td>양심 바늘</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>20163151718</td><td>22G (0.7 mm x 25 mm)</td></tr><tr><td>안경 돋보기</td><td>Vergroberung</td><td></td><td></td></tr><tr><td>생쥐</td><td></td><td></td>를 위한 1.5x 일반 소금 식단 <td>생쥐는 연구 기간 동안 일반 소금 식단(0.3% NaCl)을 받았습니다.</td></tr><tr><td>플라스틱 홀더</td><td>상하이 강 Nong 의료 기기 유한 공사, 중국</td><td></td> 통계 분석을위한 <td>35-45 g 쥐 hoder</td></tr><tr><td>SPSS 소프트웨어</td><td>SPSS Inc, 시카고; 미국</td><td>버전 17.0.</td><td></td></tr><tr><td>주사기</td><td>산동 wego 의료 고분자 제품 유한 회사, 중국</td><td>20160911A</td><td>1 mL (일치하는 바늘 크기 : 0.45 &times; 16RW LB)</td></tr> <tr><td>진공 혈액 수집 시스템</td><td>Wuhan Zhi Yuan, Medical Science and Technology co., LTD, China</td><td>20171222</td><td>1 mL (&Phi; 12.4&회; L75)</td></tr></tbody></table>

진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

혈액 샘플 컬렉션은 실험 동물 연구의 기초입니다. 그것은 다양 한 연구 목적에 대 한 적절 한 혈액 샘플을 얻기 위해 중요 합니다. 쥐의 꼬리 정 맥은 작은, 그리고 그것이 때로는 기존의 펑크 메서드에서 필요한 혈액 볼륨을 얻기 어렵다. 이 연구 조사는 진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기 (실험 그룹) 기존의 혈액 샘플링 방법 (기존의 그룹)에 비해의 사용을 통해 쥐의 꼬리 정 맥에서 반복 된 혈액 샘플 컬렉션의 우수성 각각 초보자와 전문가 의해 수행. 안경 돋보기의 도움으로, 나비 바늘 팁 실험적인 그룹에 있는 각 마우스의 꼬리 정 맥에 삽입 됩니다. 정 맥은 성공적으로 침투 하 고 때 혈액 샘플은 진공 혈액 컬렉션 튜브에 나비 바늘의 고무 끝의 삽입에 의해 진공 컬렉션 튜브에 수집 됩니다. 플런저 다음 기존의 그룹에 안경 돋보기의 도움 없이 혈액을 수집 하는 데 사용 됩니다. 초보자와 전문가 의해 혈액 샘플 컬렉션의 성공률 100% (p < 0.01) 대 70% 실험 그룹과 기존 그룹에서 85% (p < 0.01) 35%에서 보였다. 초보자와 전문가 모두에 대 한 펑크 시간 필요한 혈액 샘플을 얻기 위해 필요한 실험 그룹 (2.40 ± 0.75 2.90 ± 0.31 대, p < 0.05; 1.15 ± 0.37 1.55 ± 0.76, p < 0.05 대) 전통적인 그룹에 비해 훨씬 낮은 했다. 결론적으로, 제시 혈액 샘플링 기법 가능 하 고 연습을 쉽게 이며 비 취 쥐에서 적절 한 혈액 볼륨의 자주 샘플링을 가능 하 게.

신체 질량, 혈액 컬렉션 볼륨, 및 두 그룹의 샘플링 기간 혈액 샘플은 각 그룹에서 2 주 간격 두 번 20 쥐 (10 컷)에서 수집 했다. 쥐의 평균 몸 질량 각각 초보자를 위한 실험 및 기존 단체와 전문가 사이 유사 했다 (42.40 g ± 42.65 g ± 1.14 g 대 1.42 g, p &gt; 0.05; 42.55 g ± 2.91 g 대 43.20 g ± 2.69 g p &gt; 0.05). 수집 된 혈액 볼륨 및 샘플링 기간 전문가 (171.75 µ L ± 25.61 µ L, p &gt; 0.05 대 184.25 µ L 11.95 ± µ L, 1.85 분 ± 2.17 분 ± 0.80 분, p &gt; 0.05 대 0.68 분)에 두 그룹 사이 유사 했다. 그러나, 더 높은 수집된 혈액 볼륨 및 더 짧은 샘플링 기간 초보자 (148.50 µ L ± 30.22 µ L, p &lt; 0.01 대 172.00 µ L ± 15.17 µ L, 3.11 분 ± 4.08 분 ± 0.61 분, p &lt; 0.01 대 0.44 분)에서 전통적인 그룹에 비해 실험적인 그룹에서 보였다. 초보자에 비해, 전문가 들은 더 높은 혈액 볼륨 수집과 낮은 샘플링 (184.25 µ L 11.95 ± µ L 172.00 µ L ± 15.17 µ L, p &lt; 0.01 대 148.50 µ L ± 30.22 µ L, p &lt; 0.05 대 171.75 µ L ± 25.61 µ L, 1.85 분 ± 0.68 실험 하 고 기존의 방법을 사용 하 여 시간을 보여주었다 3.11 분 ± 0.44 분, p &lt; 0.01; 대 분 2.17 분 ± 4.08 분 ± 0.61 분, p &lt; 0.05 대 0.80 분) (표 1).
두 그룹의 펑크 시간과 성공률 초보자와 전문가 사이 성공률의 비교에서에서 100% (20/20) (p &lt; 0.01) 실험적인 그룹 및 35% 대 70% (14/20) 했다 (7/20) 85% (17/20) (p &lt; 0.01) 전통적인 그룹에 대. 높은 성공률 또한 초보자에서 전통적인 그룹에 비해 실험적인 그룹에서 보인 [35% 대 70% (14/20) (7/20), p &lt; 0.05]. 초보자와 전문가 모두에 구멍의 수 실험 그룹 (2.40 ± 0.75 2.90 ± 0.31 대, p &lt; 0.05; 1.15 ± 0.37 1.55 ± 0.76, p &lt; 0.05 대) 전통적인 그룹에 비해 훨씬 낮은 했다. 초보자에 비해, 전문가 대 한 낮은 펑크 시간 실험 하 고 기존의 방법을 사용 하 여 관찰 되었다. (1.15 ± 0.37 2.40 ± 0.75 대, p &lt; 0.01; 2.90 ± 0.31, p &lt; 0.01 대 1.55 ± 0.76) (표 1)입니다.
<img alt="버퍼 및 챔버를 사용한 전기영동 설정; DNA 분리 방법; 실험실 장치 배치." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig1.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> 그림 1: 장비. 1 mL 진공 혈액 컬렉션 튜브와 22 G 나비 바늘 (왼쪽), 안경 돋보기 (중간), 그리고 플라스틱 금지 홀더 (오른쪽)은입니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="수술 절차 설정, 동물 해부 실험, 메스 및 주사기를 사용하는 연구원." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> 그림 2: 실험 그룹에서 성공적인 혈. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="조직 샘플에 주사기 주입, 실험실 실험, 근접 촬영, 의학 연구 방법." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> 그림 3: 기존 그룹에 성공적인 혈. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2">실험 그룹</td>
			<td colspan="2">기존 그룹</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>초급</td>
			<td>전문가</td>
			<td>초급</td>
			<td>전문가</td>
		</tr>
<tr>
<td>신체 질량 (g)</td>
			<td>42.4±1.42</td>
			<td>42.55±2.91</td>
			<td>42.65±1.14</td>
			<td>43.20±2.69</td>
		</tr>
<tr>
<td>수집 된 혈액 볼륨 (µ L)</td>
			<td>172.00±15.17</td>
			<td>184.25±11.95#
</td>
			<td>148.50±30.22*
</td>
			<td>171.75±25.61#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>샘플링 기간 (분)</td>
			<td>3.11±0.44</td>
			<td>1.85±0.68#
</td>
			<td>4.08±0.61*
</td>
			<td>2.17±0.80#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>혈액 컬렉션 시간</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
		</tr>
<tr>
<td>구멍의 평균 수</td>
			<td>2.40±0.75</td>
			<td>1.15±0.37#
</td>
			<td>2.90±0.31*
</td>
			<td>1.55±0.76# # *
</td>
		</tr>
<tr>
<td>한 번 빵 꾸</td>
			<td>3</td>
			<td>17</td>
			<td>0</td>
			<td>12</td>
		</tr>
<tr>
<td>두 번 펑크</td>
			<td>6</td>
			<td>3</td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>세 번 펑크</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td>실패</td>
			<td>6</td>
			<td>0</td>
			<td>13</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>성공률</td>
			<td>70%</td>
			<td>100%#
</td>
			<td>35%*
</td>
			<td>85%#
</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: 실험과 기존 그룹 사이 결과의 비교. * p &lt; 0.05 * * p &lt; 0.01, 종래의 방법 대 실험 방법. #p &lt; 0.05, ##p &lt; 0.01, 초급 전문가 대.

이 연구 보고 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 쥐에서 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링 합니다. 우리의 방법은 연습을 쉽게 이며 쥐에 반복 혈액 샘플링에 사용 될 수 있었다.

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

이 연구는 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용하여 마우스에서 꼬리 정맥에서 혈액 샘플링을보고합니다. 우리의 방법은 연습하기 쉽고 마우스에서 반복 혈액 샘플링에 사용할 수 있습니다. 마우스는 처음에 플라스틱 제지 홀더에 배치됩니다.꼬리는 70%에탄올로 청소하고 닦아냅니다. 그런 다음 작업자는 마우스 꼬리의 시야를 개선하기 위해 안경 돋보기를 착용합니다. 나비 바늘 끝은 그 때 넓힌 측측 꼬리 정맥 의 하나에 삽입되고, 혈액은 나비 바늘의 고무 끝을 통해 진공 수집 관으로 수집됩니다.마지막으로 바늘이 제거되고 혈액 수집 과정이 완료됩니다. 꼬리 정맥은 혈액 샘플링을위한 바람직한 위치입니다. 이러한 혈액 샘플링 방법은 마우스에 대한 최소한의 상해와 관련이 있지만, 마우스의 꼬리 정맥은 매우 얇기 때문에 때로는 천명이 어렵고, 여기서 우리는 진공 추출 튜브 시스템을 사용하여 실험실 시험 마우스에서 간단한 꼬리 정맥 혈액 샘플링 방법을 설명한다.이 방법은 간단하고 효율적이며 마우스에서 반복적으로 필요한 혈액을 얻는 데 사용할 수 있습니다. 이 절차는 우리 실험실의 두 구성원에 의해 입증됩니다, 샤오얀 리우와 우송 주 시작, 우리는 플라스틱 억제 홀더, 고무 스토퍼진공 튜브, 이중 뾰족한 바늘, 멸균 표면에 안경 돋보기를 배치합니다. 다음으로, 플라스틱 제지 홀더에 마우스를 놓습니다.마우스의 앞발과 뒷발은 편안한 위치에 있어야 합니다. 혈액 샘플을 얻으려면 따뜻한 물로 꼬리를 20 ~ 30 섭씨로 씻고 70 %의 에탄올 포화 면 볼로 꼬리를 닦아 정맥을 확장하십시오. 혈액 샘플링을 위해 오른쪽 또는 왼쪽 꼬리 정맥을 선택합니다.꼬리의 아래부분을 부드럽게 잡고 혈액 샘플 수집 중에 꼬리를 똑바로 유지합니다. 테일 정맥의 구멍을 용이하게하기 위해 시야를 개선하기 위해 안경 돋보기를 착용하십시오. 22 게이지 나비 바늘 끝을 약 10도 각도로 꼬리 끝에서 반 말단 의 주위에 측면 꼬리 정맥 중 하나에 삽입하고 여러 샘플에 대한 꼬리의 베이스를 향해 이동합니다.진공 혈액 수집 튜브에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입하여 진공 수집 튜브에 혈액을 수집합니다. 쥐의 꼬리는 승인 된 프로토콜에 따라 필요에 따라 자주 여러 혈액 수집에 사용할 수 있습니다. 전통적인 방법으로 마우스의 얇고 낮은 혈류 꼬리 정맥으로부터 충분한 혈액 량을 얻는 것은 항상 쉬운 일이 아닙니다.우리의 방법은 간단하고 효율적이며 마우스에서 반복적으로 적절한 혈액 량을 얻는 데 사용할 수 있습니다. 총 혈액량의 최대 10%가 건강한 동물로부터 2주 간격으로 안전하게 제거될 수 있으므로, 약 175개의 마이크로리터 혈액 샘플을 윤리 교장에 따라 매번 수집하였다. 둘째, 혈액 샘플링 과정에서의 움직임을 피하기 위해 꼬리를 확장하는 것이 중요합니다.바늘의 혈액 응고를 피하기 위해 혈액이 15 초 이상 흐르는 것을 멈추면 또 다른 펑크 위치를 선택해야합니다. 성공적인 혈액 수집은 매번 175 마이크로리터 혈액을 얻는 것으로 정의되었습니다. 최대 천자 시간은 세 번의 시험으로 설정되었습니다.총 혈액 량이 제 3 천자 후 175 마이크로 리터가 낮아지면 실패한 혈액 수집으로 정의되었습니다. 적절한 샘플 부피가 수집되면 정맥에서 바늘을 철회하고 삽입 부위에 압력을 간략하게 적용하여 출혈을 막습니다. 플라즈마를 수집하려면 항응고제인 EDTA가 포함된 튜브를 사용하여 항응고제를 혈액과 혼합하고 샘플을 수직으로 얼음에 놓습니다.냉장 원심분리기에서 전혈 샘플 수집 튜브를 10분 간 회전시합니다. 혈장 추출, 적혈구 층과 백혈구 층을 방해하지 않도록주의 복용. 세린을 수집하려면 항응고제없이 튜브를 사용하십시오.두 유형의 샘플은 즉시 사용하거나 최대 1년 동안 섭씨 80도 미만으로 저장할 수 있습니다. 이 연구는 진공 혈액 수집 시스템과 안경 확대를 통해 마우스의 꼬리 정맥에서 반복 혈액 샘플 수집의 우수성을 조사하는 것을 목표로했다. 실험군은 종래의 혈액 샘플링 방법에 비하면.종래의 그룹은, 각각 초보자와 전문가에 의해, 수집된 혈액 량 및 샘플링 기간은 전문가를 위한 2단 사이에서 유사했습니다, 그러나, 증가한 혈액 부피 및 짧은 샘플링 기간은 초보자를 위한 기존 단에 비해 실험군에서 보였습니다. 더 높은 성공률은 또한 초보자를 위한 전통적인 단에 비해 실험 군에서 보였습니다. 이 혈액 샘플링 방법은 마스터하기 쉽고 성공률이 높습니다.실패한 천지의 수는 기존 방법을 사용하는 것과 비교하여 감소될 수 있습니다. 더욱이 이 절차는 마우스에 최소한의 상해를 야기하고, 마취가 필요 없이 마우스의 꼬리 테이프일 뿐이며, 혈액 샘플에 대한 마취제에서 스트레스 반응의 영향을 피할 수 있었다.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

이 비디오에서는 마우스 모델에서 말초 혈액을 수집하기 위해 꼬리를 자르는 절차를 보여줍니다. 수집된 혈액은 이후 추가 실험에 사용할 수 있는 별도의 혈장으로 원심분리됩니다.

말초 혈액 수집 및 혈장 분리를 위한 마우스 꼬리 싹둑 촬영 절차

혈액 샘플은 생체 내 생리학적 상태나 질병의 바이오마커를 평가하는 데 유용합니다. 여기에서는 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링하는 방법론을 설명합니다. 이 방법은 최소한의 통증과 침습성으로 빠른 샘플을 제공합니다.

쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링

여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

여기 억제 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링 프로토콜 자주 샘플 컬렉션에 대 한 선물이. 이 메서드는 타악기 황 호르몬 분 비의 사정 패턴에 대 한 유용 하 고 다른 순환 요인의 분석에 대 한 적응 될 수 있습니다.

타악기 황 호르몬 분 비의 평가 대 한 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링을 자주

여기서, 우리는 마우스의 쇄 골 정 맥 으로부터 혈액 샘플을 채취 하는 프로토콜을 제시 한다.

생쥐의 쇄 골 정 맥 천자를 통한 혈액 채취

여기에서 우리는 쥐 모델에 대해 빠르고 쉽고 신뢰할 수 있는 채혈 대안을 제공하는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 문맥에 따라 세 가지 다른 혈액 샘플링 방법을 설명합니다: 마취 또는 의식이 있는 동물에 대한 꼬리 정맥 천자, 마취 하에 등쪽 음경 정맥 천자.

쥐 모델에서 혈액 샘플링을 위한 수정된 꼬리 정맥 및 음경 정맥 천자

이 프로토콜은 지속적인 비디오 뇌전도(EEG) 모니터링과 병행하여 수행된 간질 쥐의 반복적인 뇌척수액 및 혈액 수집을 보여줍니다. 이는 다양한 체액 분자의 변화와 발작 활동 사이의 가능한 연관성을 탐구하는 데 도움이 됩니다.

EEG 기록 중 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 뇌척수액 및 혈액 샘플링

이 프로토콜은 장내 미생물 대사 산물의 생산 및 흡수를 평가하기 위해 마우스의 문맥 및 하대정맥에서 혈액을 순차적으로 수집하는 방법을 보여줍니다.

하대정맥(Inferior Vena Cava)에서 순차적 혈액 채취 후 문맥(portal vein)을 통해 생쥐의 장내 미생물 대사산물을 평가합니다.

여기에서는 란셋을 사용한 안면 정맥 천자를 통해 쥐 피험자의 최적화된 채혈 기술을 위한 프로토콜을 제시합니다. 우리는 유세포 분석 평가와 함께 이 기술을 사용하여 형질전환, 선천성 및 리포터 균주의 세포 표현형을 특성화합니다. 혈청 사이토카인 분석 및 당뇨병 연구에도 적합합니다.

쥐 채혈을 위한 안면 정맥 정맥 천자

EEG/fMRI 데이터의 동시 수집을 위한 프로토콜을 제시하고, MR 클럭 신호 기록을 동기화합니다. 우리는 피험자가 스캔 하는 동안 '콜드 글러브'지침을 수신 하는 독특한 패러다임을 사용 하 여이 방법을 설명 하 고 EEG/fMRI 데이터는 최면 유도 전후 모두 손 온도 측정과 함께 기록 됩니다.

차동열 감각에 대한 집중주의 제안 중 동시 fMRI/EEG 데이터 수집 방법

학습하세요 진공 혈액 수집 시스템과 안경 돋보기를 이용한 생쥐 꼬리 정맥 채혈법을. 이 방법은 반복 채혈이 가능하며 초보자도 높은 성공률을 보이고 생쥐에게 최소한의 손상만을 줍니다.

진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된

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