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DOI: 10.3791/59143-v
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여기, 우리는 작은 세포 외 소포 (EVs) 뇌와 종양 견본을 포함 하 여 전체 조직에서 분리 하는 상세한 프로토콜을 제공 합니다. 이 방법은 추가 다운스트림 분석에 대 한 단단한 조직에서 EVs를 추출 하는 재현 기법을 제공 합니다.
이 프로토콜은 다운스트림 전 생체 분석용 전체 조직 표본에서 작은 세포 외 소포를 추출하고 격리하기 위한 엄격하고 재현 가능한 기술을 제공합니다. 현재 달성 가능한 가장 높은 수준의 순도 를 통해,이 방법은 종양을 포함한 다양한 조직 표본으로 분비된 간질 소포의 직접적인 형태, 면역 페노티픽 및 깊은 특성화를 용이하게합니다. 여기에서, 우리는 두뇌와 폐 종양 견본에서 조직 전기의 격리를 보여줍니다.
그러나, 이 기술은 다양한, 양성, 또는 그밖 종양 견본을 이용한 연구 결과에또한 적용될 수 있습니다. 시작하려면, 조직의 모든 0.4 ~ 1.0 그램에 대한 최대 절전 모드 -E 배지에서 해리 버퍼의 10 밀리리터를 준비합니다. 50 밀리리터 튜브의 완충제에 전체 신선하거나 냉동 된 조직을 추가하고 20 분 동안 섭씨 37도에서 따뜻한 수조에 배양하십시오.
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