Name: 종양 면역 프로 파일링에 대 한 쥐 및 치료 반응 평가에 편평 세포 암 종 세포의 intramucosal 접종 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: 학습하세요 두경부 편평세포암의 정위적 쥐 모델 구축 방법을 통해 종양 미세환경과 치료 내성 기전을 연구하는 기법입니다. 이 모델은 인간 질환의 임상적 특성을 효과적으로 재현합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

모든 동물 절차는 승인된 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 프로토콜 대학의 콜로라도 덴버 (프로토콜 # 00250)에 따라 수행 했다.
1. 종양 세포 배양
참고: B4B8 및 LY2 셀 라인 orthotopic HNSCC 종양을 생성 하는 데 사용 했다: B4B8 종양 세포 (BALB/C 마우스)에서 발암 물질 변형 막 keratinocytes11에서 파생 되었다. LY2 종양 세포는 저절로 변형된 BALB/C keratinocyte 선 (Pam 212)12,13의 림프절 전이에서 파생 되었다. 두 셀 라인 친절 하 게 박사 Nadarajah Vigneswaran (UTHealth, 휴스턴, 텍사스, 미국)에 의해 제공 되었다.
<ol><li>Dulbecco의 수정된이 글의 중간 (DMEM) F/12 10% 태아 둔감 한 혈 청 (FBS)와 1% 항균 시 셀 라인 유지 보수에 대 한 보완을 사용 합니다. 37 ° C, 5% CO2무 균 인큐베이터에서 이러한 셀 라인을 유지 합니다. 셀 15 구절을 초과 하기 전에 접종을 위해 사용 되어야 한다.</li>
	<li>플레이트 4 x 106 셀 175 cm2 셀 문화 플라스 크에 2 x 106 . 참고: 확인 셀 90% 미만 스트레스 응답을 유도 하지 않으려면 합칠.</li>
	<li>셀 (~ 48 h) 70% 합칠 때, 인큐베이터에서 플라스 크를 제거 하 고 세척 셀 3 찬 인산 염 버퍼 식 염 수 (PBS)와 x.</li>
	<li>0.25 %trypsin, 충분히 사용 하 여 판의 표면을 커버 플라스 크에서 세포를 분리 합니다.<ol>
<li>이렇게 하려면 70 %confluent 셀을 포함 하는 175 cm2 플라스 크에서 trypsin의 4 mL를 분배 합니다. 37 ° C, 5% CO2셀 문화 인큐베이터에서 3-4 분 trypsin 셀을 품 어.</li>
		<li>세포 분리를 보장 하기 위해 현미경으로 세포를 시각화 합니다.</li>
		<li>트립 신 활동을 무력화 하는 FBS를 포함 된 DMEM F/12 미디어 12 mL를 추가 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>세포 현 탁 액을 발음 하 고 50 mL 원뿔 튜브에 배치.</li>
	<li>3 x-4 그것을 반전 하 여 셀을 포함 하는 튜브를 흔들어 x.</li>
	<li>필요한 경우, microcentrifuge 튜브에서 Trypan 파랑의 10 µ L로 세포 현 탁 액의 약 10 µ L 수를 혼합 하 고는 hemocytometer를 사용 하 여 셀. 셀의 총 수에서 Trypan 파랑 양성 세포의 수를 빼서 세포 생존 능력을 결정 하 고 셀의 총 수로 나누면.</li>
	<li>300 x g 4 ° c.에서 5 분 동안에 세포 현 탁 액을 원심</li>
	<li>1 x 106 세포는 미디어의 50 µ L에 적절 한 볼륨에서 혈 청-와 항생제 DMEM 셀을 resuspend. 참고: (경험적으로 결정) vivo에서 세포 선 공격에 따라, 사출 사이트 마우스 당 당 1 x 106 셀 B4B8 및 LY2 셀에 대 한 적절 한 간주 되었다.</li>
	<li>얼음에 세포 현 탁 액을 포함 하는 유리병을 놓습니다.</li>
	<li>얼음에 미리 해 동된 지하실 멤브레인 매트릭스를 놓습니다. 참고: 지하실 막 매트릭스는 4 ° c.에 하룻밤 해 동</li>
</ol>2. 셀 쥐로 주입
<ol><li>셀: 지하실 막 매트릭스 (50 µ L 각)의 1:1 혼합물을 준비 합니다.</li>
	<li>추가 셀. 그런 다음, 점차적으로 지하실 멤브레인 매트릭스 플라스틱. 기포를 소개 하지 마십시오. 혼합 동물 주입 직전 이루어집니다 있는지 확인 합니다. 지하실 막을 시간의 연장된 기간에 대 한 셀을 추가 하는 것은 셀 혼합물을 엄격 하 게 동요 하기 어려운 시키는 매트릭스 혼합물에 정착 귀 착될 수 있다. 이 쥐의 종양 크기에 상당한 가변성을 발생 합니다.</li>
	<li>부드럽게 혼합. 매트릭스를 포함 하는 모든 단계는 얼음에 수행 됩니다 확인 합니다. 지하실 막 매트릭스는 실내 온도에 유해 합니다.</li>
	<li>접종에 대 한 주사기를 준비 합니다.</li>
	<li>셀/지하실 막 매트릭스 솔루션의 100 µ L를 0.5 mL 인슐린 주사기 (23 G)를 넣습니다.</li>
	<li>얼음 지하실 멤브레인 매트릭스 합을 피하기 위해 주사기를 유지.</li>
	<li>산소 (2.5%)와 isoflurane 챔버에 배치 하 여 마우스를 anesthetize.</li>
	<li>생쥐는 (발가락 핀치에 응답의 부족 함으로써) 주사를 수행 하기 전에 마 취 깊이 확인 합니다.</li>
	<li>오른쪽 또는 왼쪽 뺨 지역에 바늘을 삽입 합니다. 이것은 입의 양쪽에 사용할 수 있는 열린 공간을 통해 수행 됩니다.</li>
	<li>마우스의 혀는 방식에서 아닙니다 인지 확인 합니다. 참고: 혀, 혀 종양 귀 착될 것 이다 찌 르 기 쉽습니다. 필요한 경우에 반대 측에 혀를 이동 합니다.</li>
	<li>주사기 구강 내 뺨 지역에 평행 하 게 유지.</li>
	<li>때 주사, 주사기를 뒤로 당겨 10 ° 각도로 주사기를 천천히 삽입을 준비.</li>
	<li>5 기간 동안 셀/지하실 막 매트릭스 정지 100 µ L를 주사 s.</li>
	<li>추가 5 장소에 주사기를 잡고 모든 자료를 되도록 s 주입. 참고: 제어 nontumor 베어링 마우스 주사 혈 청 자유로운 미디어와 매트릭스의 혼합물 (위에서 설명한)으로 종양 세포 없이.</li>
	<li>부드럽게 주사기를 철회 한다.</li>
	<li>나머지 마우스 위의 절차를 계속 합니다.</li>
	<li>종양 심하게 나타나는 것을 시작 될 때까지 1 주에 대 한 허용 (50-200 밀리미터3 B4B8 및 LY2 셀).</li>
</ol>3입니다. 마우스 모니터링
<ol><li>종양 세포 주입 후 1 주에 캘리퍼스를 사용 하 여 첫 번째 측정을 수행 합니다. 외부 캘리퍼스를 사용 하 여 종양 볼륨을 계산 하기 위해 최고의 경도 직경 (길이) 및 가장 큰 가로 지름 (폭)를 결정 하 고 수정된 타원 수식14,15를 사용 합니다. <img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/59195/59195eq1.jpg">
</li>
	<li>계속 종양 볼륨 (x-2 1x 주당 정기적으로) 정기적인 캘리퍼스 측정을 수행 합니다.</li>
	<li>종양의 성장에 먹이의 효과 평가 하기 위해 동물 무게를 측정 합니다.</li>
</ol>4. 수확 종양
<ol><li>실험적인 끝점에 도달 하면 적절 한 조치 (예: CO2 질, 잘린, 또는 자 궁 경부 전위)를 사용 하 여 동물을 안락사. 참고: 이 연구에서는 끝점에 도달 했다 쥐 죽어가는 경우 (체중의 감소와 함께 &gt; 악 손질의 부족, 그들의 초기 무게의 15%) 및 종양 크기에 도달 하면 1, 000 m m3.</li>
	<li>
목 지역에는 중간을 통해 긴 절 개를 만들어 동물을 해 부를 시작 합니다.
	<ol>
<li>무딘 집게를 사용 하 여 피부를 피부를 잘라가 위를 날카로운.</li>
	</ol>
</li>
	<li>부드럽게 피부 종양을 덮고 아래가 위를 삽입 하 고와 피부에가 위를 추진 하 여 공기 주머니를 만듭니다.</li>
	<li>피부 종양에서 충분히 분리 되 면 배출 림프 노드 (DLNs)를 식별 하 고 종양 조직 림프절의 존재에 의해 혼동된 하지 않도록 그들을 삭제할. 참고: 큰 종양에 도달 및는 DLN 커버 수 있습니다. 수행 되는 분석 결과의 종류에 따라 그대로 림프절의 시험 결과 skewing 귀 착될 것 이다 종양에 면역 세포의 흘림 방지 필수적 이다.</li>
	<li>전체 볼륨이 분리 될 때까지 종양의 국경을 통해 잘라.</li>
</ol>5입니다. 종양 다운스트림 응용 프로그램에 대 한 처리
<ol><li>다운스트림 조직학 검사에 대 한 실 온에서 10% 포 르 말린에 종양을 배치 합니다. Overfixation을 피하기 위해, 70% 에탄올으로는 포 르 말린을 바꿉니다. 아래 설명 된 대로 흐름 cytometry 분석, 대 한 종양을 처리 합니다. 참고: Overfixation 얼룩의 특정 종류에 대 한 문제가 될 수 있는 전에 조직 72 h에 대 한 포 르 말린에 보관할 수 있습니다.</li>
	<li>1-2 m m로 종양을 잘라-크기의 조각 살 균 면도날 또는 날카로운가 위를 사용 하 여.</li>
	<li>콜라 3 세와 50 mL 원뿔 튜브에서 컷된 종양 조각을 놓으십시오 (샘플 당 4250 단위), DNase I (샘플 당 0.1 밀리 그램), 및 트립 신 억제제 (샘플 당 1 밀리 그램).</li>
	<li>매 10 분을 떨고와 30 분 동안 37 ° C에서 품 어. 참고: 샘플 resealable 봉투, 90% 에탄올으로 소독 하 고 셀 문화 인큐베이터에 배치에 배치할 수 있습니다.</li>
	<li>30 분 후 20 mL의 행 크의 균형 소금물 (HBSS) 및 5 분에 대 한 300 x g 에서 스핀을 추가 합니다. 참고: HBSS는 염화 칼륨, 염화 나트륨, 나트륨 중 탄산염, 염기 나트륨 인산 염, 인산 이수소 나트륨과 포도 당으로 이루어져 있습니다.</li>
	<li>삭제는 상쾌한 고 적혈구 (RBC) 세포의 용 해 버퍼의 2-3 mL에 펠 릿을 resuspend. 엄격 하 게 플라스틱. 참고: RBC 세포의 용 해 버퍼는 염화 암모늄, 중 탄산 나트륨, 및 disodium 구성 됩니다.</li>
	<li>실 온에서 2 분 동안 품 어. 참고: 더 이상 외피 다른 세포 인구에 게 독성이 될 수 있습니다.</li>
	<li>세포의 용 해 버퍼의 효과 중화 하는 HBSS의 20 mL를 추가 합니다.</li>
	<li>5 분에 대 한 300 x g 에서 centrifuge 고는 상쾌한 삭제.</li>
	<li>HBSS 10 mL에 펠 릿을 resuspend.</li>
	<li>70 µ m 나일론 restrainer 통해 해결책을 통과 하 고 5 분에 대 한 300 x g 에서 원심 분리기는 상쾌한 삭제.</li>
	<li>5.8-5.10 단계를 반복 하 고 정지에서 어떤 추가적인 파편 든 지 제거 되도록 하기 위해 40 µ m 나일론 restrainer 통해 세포 현 탁 액을 통과.</li>
</ol>6. 세포 얼룩 및 데이터 수집
<ol><li>HBSS의 1 mL에 셀 펠 릿을 resuspend.</li>
	<li>1.7 단계에 설명 된 대로 hemocytometer 또는 자동화 된 셀 카운터를 사용 하 여 셀의 개수</li>
	<li>
총 셀 수와 얼룩에 대 한 적절 한 농도 결정 합니다. 참고: 흐름 cytometry 얼룩에 대 한 이상적인 셀 농도 1-2 백만 셀. 예를 들어 96 잘 접시에서 수행 하는 얼룩을 10 백만 셀이 1 mL 및 플레이트 100 µ L을 잘 당 1 백만 셀에 샘플을 resuspend.</li>
	<li>
FcγIII 및 FcγII 수용 체 면역 글로불린의 nonantigen 특정 바인딩 방지 하기 위하여 1: 100의 농도에서 Fc 블록 (CD16/CD32)를 추가 합니다. 실 온에서 5 분 동안 품 어.
	<ol>
<li></ol></li><li><ol><li></ol></li><li><ol><li></ol></li></ol>

<ol><li>Chaturvedi, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Worldwide+trends+in+incidence+rates+for+oral+cavity+and+oropharyngeal+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Worldwide trends in incidence rates for oral cavity and oropharyngeal cancers.</a> Journal of Clinical Oncology. 31 (36), 4550-4559 (2013).</li>
<li>Ang, K. K., Sturgis, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+papillomavirus+as+a+marker+of+the+natural+history+and+response+to+therapy+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Radiation+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human papillomavirus as a marker of the natural history and response to therapy of head and neck squamous cell carcinoma.</a> Seminars in Radiation Oncology. 22 (2), 128-142 (2012).</li>
<li>Amin, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Eighth+Edition+AJCC+Cancer+Staging+Manual%3A+Continuing+to+build+a+bridge+from+a+population-based+to+a+more+%26%2334%3Bpersonalized%26%2334%3B+approach+to+cancer+staging%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">The Eighth Edition AJCC Cancer Staging Manual: Continuing to build a bridge from a population-based to a more &#34;personalized&#34; approach to cancer staging.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (2), 93-99 (2017).</li>
<li>Salley, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+carcinogenesis+in+the+cheek+pouch+of+the+Syrian+hamster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Experimental carcinogenesis in the cheek pouch of the Syrian hamster.</a> Journal of Dental Research. 33 (2), 253-262 (1954).</li>
<li>Morris, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+influencing+experimental+carcinogensis+in+the+hamster+cheek+pouch%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Factors influencing experimental carcinogensis in the hamster cheek pouch.</a> Journal of Dental Research. 40, 3-15 (1961).</li>
<li>MacDonald, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+epithelial+dysplasia+in+hamster+cheek+pouch+carcinogenesis+and+human+oral+mucosa%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+Pathology+%26+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of epithelial dysplasia in hamster cheek pouch carcinogenesis and human oral mucosa.</a> Journal of Oral Pathology & Medicine. 10 (3), 186-191 (1981).</li>
<li>Hawkins, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4NQO+carcinogenesis%3A+a+mouse+model+of+oral+cavity+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Head+%26+Neck%22%5BJournal%5D)">4NQO carcinogenesis: a mouse model of oral cavity squamous cell carcinoma.</a> Head & Neck. 16 (5), 424-432 (1994).</li>
<li>Tang, X. H., Knudsen, B., Bemis, D., Tickoo, S., Gudas, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+cavity+and+esophageal+carcinogenesis+modeled+in+carcinogen-treated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Oral cavity and esophageal carcinogenesis modeled in carcinogen-treated mice.</a> Clinical Cancer Research. 10 (1 Pt 1), 301-313 (2004).</li>
<li>Vered, M., Yarom, N., Dayan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4NQO+oral+carcinogenesis%3A+animal+models%2C+molecular+markers+and+future+expectations%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">4NQO oral carcinogenesis: animal models, molecular markers and future expectations.</a> Oral Oncology. 41 (4), 337-339 (2005).</li>
<li>Bornstein, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smad4+loss+in+mice+causes+spontaneous+head+and+neck+cancer+with+increased+genomic+instability+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Smad4 loss in mice causes spontaneous head and neck cancer with increased genomic instability and inflammation.</a> Journal of Clinical Investigation. 119 (11), 3408-3419 (2009).</li>
<li>Thomas, G. R., Chen, Z., Oechsli, M. N., Hendler, F. J., Van Waes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+expression+of+CD80+is+a+marker+for+increased+tumorigenicity+in+a+new+murine+model+of+oral+squamous-cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decreased expression of CD80 is a marker for increased tumorigenicity in a new murine model of oral squamous-cell carcinoma.</a> International Journal of Cancer. 82 (3), 377-384 (1999).</li>
<li>Yuspa, S. H., Hawley-Nelson, P., Koehler, B., Stanley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+transformation+markers+in+differentiating+epidermal+cell+lines+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A survey of transformation markers in differentiating epidermal cell lines in culture.</a> Cancer Research. 40 (12), 4694-4703 (1980).</li>
<li>Chen, Z., Smith, C. W., Kiel, D., Van Waes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+variants+derived+following+in+vivo+tumor+progression+of+an+in+vitro+transformed+squamous+cell+carcinoma+line+acquire+a+differential+growth+advantage+requiring+tumor-host+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Metastatic variants derived following in vivo tumor progression of an in vitro transformed squamous cell carcinoma line acquire a differential growth advantage requiring tumor-host interaction.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 15 (5), 527-537 (1997).</li>
<li>Euhus, D. M., Hudd, C., LaRegina, M. C., Johnson, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+measurement+in+the+nude+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Tumor measurement in the nude mouse.</a> Journal of Surgical Oncology. 31 (4), 229-234 (1986).</li>
<li>Tomayko, M. M., Reynolds, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+subcutaneous+tumor+size+in+athymic+%28nude%29+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Chemotherapy+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Determination of subcutaneous tumor size in athymic (nude) mice.</a> Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 24 (3), 148-154 (1989).</li>
<li>Yushkevich, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((User-guided+3D+active+contour+segmentation+of+anatomical+structures%3A+significantly+improved+efficiency+and+reliability%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">User-guided 3D active contour segmentation of anatomical structures: significantly improved efficiency and reliability.</a> NeuroImage. 31 (3), 1116-1128 (2006).</li>
<li>Dutta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+tumour+necrosis%2C+tumour+proliferation%2C+local+and+systemic+inflammation%2C+microvessel+density+and+survival+in+patients+undergoing+potentially+curative+resection+of+oesophageal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Britisch+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">The relationship between tumour necrosis, tumour proliferation, local and systemic inflammation, microvessel density and survival in patients undergoing potentially curative resection of oesophageal adenocarcinoma.</a> Britisch Journal of Cancer. 106 (4), 702-710 (2012).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+analysis+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma+cell+lines+and+human+tumors%3A+a+rational+approach+to+preclinical+model+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Genomic analysis of head and neck squamous cell carcinoma cell lines and human tumors: a rational approach to preclinical model selection.</a> Molecular Cancer Research. 12 (4), 571-582 (2014).</li>
<li>Walsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humanized+Mouse+Models+of+Clinical+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Humanized Mouse Models of Clinical Disease.</a> Annual Review of Pathology. 12, 187-215 (2017).</li>
<li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionizing+radiation+sensitizes+tumors+to+PD-L1+immune+checkpoint+blockade+in+orthotopic+murine+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22OncoImmunology%22%5BJournal%5D)">Ionizing radiation sensitizes tumors to PD-L1 immune checkpoint blockade in orthotopic murine head and neck squamous cell carcinoma.</a> OncoImmunology. 6 (10), e1356153(2017).</li>
<li>Ferris, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evaluations+of+nivolumab+%28nivo%29+versus+investigator%E2%80%99s+choice+%28IC%29+chemotherapy+for+recurrent+or+metastatic+%28R%2FM%29+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+%28SCCHN%29%3A+CheckMate+141%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Further evaluations of nivolumab (nivo) versus investigator’s choice (IC) chemotherapy for recurrent or metastatic (R/M) squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN): CheckMate 141.</a> Journal of Clinical Oncology. 34, (2016).</li>
<li>Ferris, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nivolumab+for+Recurrent+Squamous-Cell+Carcinoma+of+the+Head+and+Neck%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Nivolumab for Recurrent Squamous-Cell Carcinoma of the Head and Neck.</a> The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1856-1867 (2016).</li>
<li>Harrington, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nivolumab+versus+standard%2C+single-agent+therapy+of+investigator%27s+choice+in+recurrent+or+metastatic+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+%28CheckMate+141%29%3A+health-related+quality-of-life+results+from+a+randomised%2C+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Nivolumab versus standard, single-agent therapy of investigator's choice in recurrent or metastatic squamous cell carcinoma of the head and neck (CheckMate 141): health-related quality-of-life results from a randomised, phase 3 trial.</a> The Lancet Oncology. 18 (8), 1104-1115 (2017).</li>
<li>Kiyota, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized%2C+open-label%2C+Phase+III+clinical+trial+of+nivolumab+vs.+therapy+of+investigator%27s+choice+in+recurrent+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck%3A+A+subanalysis+of+Asian+patients+versus+the+global+population+in+checkmate+141%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">A randomized, open-label, Phase III clinical trial of nivolumab vs. therapy of investigator's choice in recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck: A subanalysis of Asian patients versus the global population in checkmate 141.</a> Oral Oncology. 73, 138-146 (2017).</li>
<li>Ling, D. C., Bakkenist, C. J., Ferris, R. L., Clump, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Immunotherapy+in+Head+and+Neck+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Radiation+Oncology%22%5BJournal%5D)">Role of Immunotherapy in Head and Neck Cancer.</a> Seminars in Radiation Oncology. 28 (1), 12-16 (2018).</li>
<li>Perri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioresistance+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%3A+Biological+bases+and+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Head+%26+Neck%22%5BJournal%5D)">Radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma: Biological bases and therapeutic implications.</a> Head & Neck. 37 (5), 763-770 (2015).</li>
<li>Yamamoto, V. N., Thylur, D. S., Bauschard, M., Schmale, I., Sinha, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+radioresistance+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">Overcoming radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma.</a> Oral Oncology. 63, 44-51 (2016).</li>
<li>Bonner, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy+plus+cetuximab+for+locoregionally+advanced+head+and+neck+cancer%3A+5-year+survival+data+from+a+phase+3+randomised+trial%2C+and+relation+between+cetuximab-induced+rash+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy plus cetuximab for locoregionally advanced head and neck cancer: 5-year survival data from a phase 3 randomised trial, and relation between cetuximab-induced rash and survival.</a> The Lancet Oncology. 11 (1), 21-28 (2010).</li>
<li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+EphB4-Ephrin-B2+Signaling+Enhances+Response+to+Cetuximab-Radiation+Therapy+in+Head+and+Neck+Cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Inhibition of EphB4-Ephrin-B2 Signaling Enhances Response to Cetuximab-Radiation Therapy in Head and Neck Cancers.</a> Clinical Cancer Research. 24 (18), 4539-4550 (2018).</li>
<li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+radiosensitization+in+EphB4+receptor-expressing+Head+and+Neck+Squamous+Cell+Carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Enhancing radiosensitization in EphB4 receptor-expressing Head and Neck Squamous Cell Carcinomas.</a> Scientific Reports. 6, 38792(2016).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+radiation+and+immunotherapy%3A+a+new+systemic+therapy+for+solid+tumors%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Combining radiation and immunotherapy: a new systemic therapy for solid tumors?</a> Cancer Immunology Research. 2 (9), 831-838 (2014).</li>
<li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+radiotherapy+and+PD-L1+blockade+is+mediated+by+TIM-3+upregulation+and+regulatory+T-cell+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Resistance to radiotherapy and PD-L1 blockade is mediated by TIM-3 upregulation and regulatory T-cell infiltration.</a> Clinical Cancer Research. , (2018).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

엄격한 분석 및 종양 microenvironment의 종양 개발, 진행, 전이의 메커니즘을 이해 하 고 효과적인 치료의 개발에 대 한 중요 한 전략을 나타냅니다. 머리와 목 암은 머리와 목 지역 내의 여러 해 부 사이트에서 발생 한 수 있습니다 복잡 한 질병 이다. 질병 메커니즘을 이해 하 고 치료를 개선 하는 주요 장애물이 인간 HNSCCs의 공격적이 고 전이성 자연 닮은 murine 마우스 셀 라인의 부족 했습니다. 또한, 수많은 murine 모델 종양 머리와 목 지역, 높은 혈관 밀도, 광범위 한 림프 맥 관 구조, 및 상주 점 막 식물의 중요 한 생리 기능을 부족의 피하 주입을 사용 합니다.
이 연구에서 우리는 murine HNSCC의 orthotopic 모델 특징. 우리는 여러 가지 이유가, 이미지 지도, 캘리퍼스, 점 막 식물 내에서 종양의 존재를 사용 하 여 종양의 성장을 평가 하는 능력에 대 한 필요 없이 지역에 쉬운 접근을 포함 하 여 종양 접종의 사이트 볼 점 ...

HNSCC 다섯 번째 가장 일반적인 종은 세계적으로, 매년 진단 이상 600000 환자와1. 적극적인 화학 요법과 방사선 (RT) 치료, 치료에도 불구 하 고 인간 유 두 종 바이러스 (HPV) 감염 없이 HNSCC 환자에 대 한 전반적인 생존 (OS) 율25 년 후 50% 미만 남아 있다. 이것은 크게에 기인 매우 복잡 한 종양 microenvironment 종양 볼 점 막, 혀, 구강, 비 강, 구강, 인 두의 바닥을 포함 한 머리와 목 지역 내의 여러 가지 해 부 사이트에서 발생 한 수로 oropharynx, 그리고 hypopharynx입니다. 또한, 머리와 목 지역 높은 나가도록 하 고 몸3에 모든 림프절의 거의 절반을 포함. 머리와 목 종양 생물학 조사 연구의 대다수는 측면 지역에서 종양 모델에 의존 합니다. 이러한 모델 종양 내장 메커니즘에 대 한 통찰력을 제공할 수 있습니다 하지만 기본 머리와 목 microenvironment의 부족 같은 결과의 변환 가능성 영향 크게 수 있습니다. 구강 종양을 유발 하는 데 사용 되었습니다 하나의 방법은 발암 물질 9, 10-디 메 틸-1, 2-benzanthracene (DMBA)4에 노출을 통해 이다. 그러나,이 메서드는 연결 된 마우스에만 쥐 및 햄스터 종양을 유도 하는 과정, 그리고 결과 종양의 차별화 된 Scc5,6조직학 특징의 많은가지고 있지 않습니다. Carcinogen4-nitroquinoline 1-산화물 (4-NQO), 수용 성 quinolone 파생, 마우스 구강 종양 구두로 적용 하는 경우에 발생 하지만 또한 긴 노출 시간 (16 주)와 제한 된에서 고통 소개 걸릴 시간과 일괄 처리 사이 속도 쥐7,,89. 임상 관련 모델을 개발 하기 위해서는 여러 그룹 드라이버 oncogenes 또는 종양 억제기 유전자, TP53, TGFB, KRA, HRA, 및 SMAD410등의 조작에 관련 된 유전자 조작된 모델을 활용 합니다. 이러한 모델 알려진된 드라이버 유전자와 종양에 대 한 통찰력을 제공할 수 있지만 인간 HNSCCs의 복잡 한이 정리 하지 않습니다.
이 작품에서 편평 세포 암 종 세포의 intramucosal 접종 생쥐에서 수행의 타당성을 설명 합니다. 접종된 세포 주입의 1 주 안에 공격적인 종양으로 발전. 인간의 HNSCCs와 마찬가지로 종양 지역 림프절에 전이. 우리는 질병의 조직학 및 임상 기능을 특성화 하 고 종양 면역 microenvironment에 대 한 통찰력을 제공. 우리는 HNSCC의이 orthotopic 모델 암 생물학, 종양 면역학, 및 전 임상 연구에 응용 프로그램을 제안 합니다. 면역 회피, 종양 진행, 치료 저항, 및 전이 메커니즘 제안 된 모델을 사용 하 여 해결 될 수 있는 임상 의미의 영역을 나타냅니다.

<table><tbody><tr><td>콜라겐 분해 효소 III</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td></td><td></td>LS004183</tr><tr><td>DNase I</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td></td><td></td>LS006328</tr><tr><td>Fc 블록 (CD16/32)</td><td>BD 생명과학</td><td>553141</td><td>&nbsp; 클론 2.4G2&nbsp;</td></tr><tr><td>플로우 사이토메트리 염색 버퍼</td><td>eBioscience</td><td>00-4222-26</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td></td><td>14175079 칼슘, 마그네슘, 페노 레드</td></tr><tr><td>없음 Helois 질량 사이토미터</td><td>Fluidigm</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel 막 매트릭스</td><td>Corning&nbsp;</td><td>CB-40234B</td><td></td></tr><tr><td>MRI 스캐너</td><td>Bruker</td><td>NA</td><td>7.4 Tesla</td></tr><tr><td>RBC 용해 완충액</td><td>BioLegend</td><td>420301</td><td></td></tr><tr><td>트립신 억제제</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td></td><td></td>LS002830</tr></tbody></table>

종양 면역 프로 파일링에 대 한 쥐 및 치료 반응 평가에 편평 세포 암 종 세포의 intramucosal 접종

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

머리와 목 편평 상피 세포 암 (HNSCC)은 치료 실패와 재발의 높은 보급으로 쇠 약하게 하 고 치명적인 질병 이다. 더 나은 치료 전략을 개발 하기 위하여 종양 microenvironmental 요소 이해 치료 저항에 기여 하는 중요 하다. 질병 메커니즘을 이해 하 고 치료를 개선 하는 주요 장애물이 인간 HNSCCs의 공격적이 고 전이성 자연 닮은 murine 셀 라인의 부족 했습니다. 또한, murine 모델의 대다수 종양 머리와 목 지역, 높은 혈관 밀도, 광범위 한 림프 맥 관 구조, 상주 점 막 식물 등의 중요 한 생리 기능을 부족의 피하 implantations를 사용 합니다. 이 연구의 목적은 개발 하 고 HNSCC의 orthotopic 모델의 특성입니다. 우리는 두 유전자 별개 murine 셀 라인 및 설립된 종양 생쥐의 뺨 점 막에 사용합니다. 우리는 콜라 기반 종양 소화 방법이 설립된 종양에서 단일 세포의 최적의 복구를 최적화합니다. 여기에 제시 된 데이터 표시 마우스 지역 림프절에 전이 매우 vascularized 종양 개발. 단일 셀 multiparametric 대량 cytometry 분석 모든 면역 세포의 대다수를 대표 하는 골수성 세포와 다양 한 면역 인구의 존재를 보여줍니다. 이 연구에서 제안 된 모델이 있다 암 생물학, 종양 면역학, 및 새로운 치료제의 전 임상 개발에 응용 프로그램. 인간 질병의 임상 특징 orthotopic 모델의 닮은 향상 된 번역 및 향상 된 환자 결과 대 한 도구를 제공 합니다.

LY2 및 B4B8 세포 증식의 생체 외에서 평가 했다 두 셀 라인 비슷한 두 배로 시간을가지고 (21h와 23 h, 각각). Vivo에서 두 셀 라인 접종 (그림 1A)의 1 주 안에 단일, 표시, 및 만져 서 질량을 형성. LY2 종양 방위 쥐, 턱 종양 부담 (그림 1A) 때문에 3 주에 의해 전치 되었다. 종양 세포에는 영향을 받지 않은 통제 쥐 팬 들은 예상 대로 종양의 정보를 개발 하지 않았다. LY2 종양 B4B8 종양에 비해 더 높은 속도로 성장 했다. LY2 종양 방위 쥐 이었다 B4B8 종양 (그림 1B)에 162 ± 4 m m3 에 비해 632 ± 10 m m3 에서 21 일에 평균 종양 볼륨. 빠르게 턱 변위를 전시 하는 마우스 개발 dysphagia ...

여기 우리는 머리와 목 편평 상피 세포 암의 orthotopic murine 모델 개발에 대 한 재현 방법 제시. 종양 괴 사, 불 쌍 한 차별화, 꾸벅꾸벅 졸 기 전이 및 면역 침투를 포함 하 여 질병의 임상 관련 histopathological 기능을 보여 줍니다. 부전 실어증, 턱 변위, 및 체중 감소를 포함 한 임상 관련 증상을 개발 하는 종양 방위 쥐.

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

머리와 목 부위의 암이 점점 더 널리 퍼지고 있습니다. 그러나 종양 미세 환경과 이 지역에서 치료 저항 메커니즘에 대한 제한된 이해가 있습니다. 이 기술은 접근 가능한 방식으로 머리/목 종양의 토착 미세 환경을 재구성하는 데 사용할 수 있으며 인간에서 볼 수 있는 것과 유사한 임상 증상을 생성합니다.종양 세포 배양은 70%에 도달하면 세척당 감기 PBS로 세포를 세 번 세척하고 배양 플라스크의 바닥 표면을 덮기 위해 충분한 0.25%의 트립신으로 세포를 부착한다. 세포 배양 인큐베이터에서 3~4분 후, 광 현미경으로 분리를 확인하고 태아 소 혈청으로 보충된 DMEM F12 배지의 12밀리리터로 트립신을 중화시한다. 세포 현탁액을 50 밀리리터 원판 튜브로 옮기고 반전으로 세포를 3~4회 혼합합니다.그런 다음 원심분리에 의해 세포를 수집하고 얼음에 대한 중간 농도의 50 마이크로리터 당 6 번째 종양 세포에 10 번 10에 혈청 및 항생제없는 DMEM에서 펠릿을 다시 중단합니다. 주입 직전에, 얼음에 지하 막 매트릭스 비율에 1 - 1 종양 세포 현탁액에 세포를 혼합. 수령동물 당 100마이크로리터의 23게이지 바늘을 장착한 0.5 밀리리터 주사기 1개를 적재한다.주사기를 얼음 위에 놓고 마취 된 마우스에 발가락 핀치에 대한 반응이 부족한지 확인합니다. 다음으로, 5초 동안 전지 지하 막 매트릭스 현탁액의 전체 100 마이크로리터 부피의 주입을 용이하게 하기 위해 구강 내부에 있는 동안 구강 부위와 평행하게 주사기를 유지하는 입의 양쪽에 있는 사용 가능한 열린 공간을 통해 오른쪽 또는 왼쪽 buccal 영역에 바늘을 삽입한다. 주사기를 5초 동안 제자리에 두어 주사기를 부드럽게 인출하기 전에 모든 재료가 주입되었는지 확인합니다.종양은 약 1 주일 에서 심하게 볼 수 있게 될 것입니다. 주사 후 1 주일, 캘리퍼를 사용하여 각 종양의 길이와 폭을 측정하여 일주일에 1 ~ 2 번 종양 부피를 결정합니다. 및 각 동물의 무게를 측정하여 종양 성장이 먹이에 미치는 영향을 평가합니다.적절한 실험적 엔드포인트에서 날카로운 가위와 무딘 집게를 사용하여 목의 중간선을 통해 피부 절개를 합니다. 그리고 가위를 종양을 덮고 있는 피부 아래에 부드럽게 삽입하여 가위를 피부로 밀어 공기 주머니를 만듭니다. 일단 피부가 종양에서 충분히 분리되면, 종양 조직이 림프 조직의 존재에 의해 혼동되는 것을 피하기 위해 배수 림프절을 소비하고 전체 부피가 분리 될 때까지 종양의 경계를 통해 절단.다운스트림 분석을 위해 종양을 처리하려면 종양을 1~2mm 크기의 조각으로 자르고 콜라게나아제 3개, DNA 1 및 트립신 억제제가 들어 있는 50밀리리터 원뿔튜브에 조각을 배치합니다. 종양 조각을 섭씨 30도에서 30분 동안 배양한 후, 10분마다 흔들리는 후, 20밀리리터의 HBSS를 튜브에 추가하고 70 마이크로미터를 통해 종양 조각을 함유한 현탁액을 70 마이크로미터 부어 나일론 스트레이너를 통과한다. 5 밀리리터 주사기 플런저를 사용하여 스트레이너의 종양 조각을 분쇄하고 여과기를 통해 HBSS의 10 밀리리터를 추가합니다.원심분리로 세포를 회전시합니다. 엄격한 파이펫팅으로 적혈구 용해 버퍼의 2~3밀리리터에서 펠릿을 다시 일시 중단하여 실온에서 2분 후 신선한 HBSS 20 밀리리터로 용액을 중화시합니다. 그런 다음 다른 원심분리를 위해 HBSS의 추가 20 밀리리터에서 세포를 다시 중단하고 종양 세포 현탁액에서 최종 이물질을 제거하기 위해 40 마이크로미터 부어 필터를 통해 세포를 변형시한다.LY2 종양은 B4B8 종양에 비해 더 높은 비율로 증가합니다. 그리고 턱 변위를 나타내는 마우스는 난이증으로 인해 체중 감소를 급속히 개발합니다. LY2 마우스의 중간 생존은 또한 B4B8 종양 베어링 마우스를 위해 관찰된 반 이하입니다.종양 을 낳는 마우스의 자기 공명 화상 진찰은 buccal 점막의 내층으로 확장하는 잘 경계한 종양을 보여줍니다, 그러나 혀 또는 그밖 가까운 기관으로. 히스토럴 검사에 따르면 모든 LY2 종양 베어링 마우스는 제대로 분화된 편평상피 세포 암이 발생하며 B4B8 종양을 가진 마우스는 적당히 분화된 편평상피 세포 암이 발생합니다. 모든 LY2 종양 베어링 마우스는 또한 조직학적으로 확인된 괴사를 가지고 있으며, 대다수는 중등도에서 중증 괴사를 입증합니다.본 대표적인 실험에서, LY2 종양은 부칼 영역 종양 세포 주입 후 3주 후에 수확및 처리되었다. CD45 양성 면역 세포는 전체 종양 세포 집단의 7.3%를 나타냈다. CD11b 양성 골수성 세포는 모든 CD45 양성 세포의 37.8%를 나타내며, 그 중 대부분은 호중구및 골수성 유래 억제제 세포의 작은 집단과 함께 F480 양성 대식세포로 결정되었다.T 세포는 CD45 양성 면역 세포 집단의 15.9%를 구성했으며, 그 중 53.4%는 CD4 양성 FoxP3 양성 조절 T 세포였다. 자연 킬러 세포는 모든 CD45 양성 세포의 2% 미만으로 구성되었습니다. 바늘과 받는 사람 마우스를 잡고 동물의 입을 노출에 자신감과 편안함을 개발하기 위해 주사를 연습하는 것이 중요하다.일단 절차가 성공적으로 수행되면 종양 내성 및 미세 환경 적 요인의 치료 또는 평가에 대한 종양 반응의 평가를 포함하는 실험을 수행 할 수 있습니다. 이 기술은 조사자가 시작한 임상 시험을 설계하는 길을 열어 주부 암 환자에서 방사선 요법과 항 PL1 요법을 결합하는 효과를 평가했습니다.

intramucosal-inoculation-squamous-cell-carcinoma-cells-mice-for-tumor

Research

연구

JoVE Journal

Cancer Research

암 연구

에 대한 면역 적격 마우스에 묽은 난소암의 Orthotopic 모델 생체내에</em종양 면역 응답> 종양 이미징 및 모니터링

표시 셀 다중 광자 현미경을 통해 혀를 이내 구강 암 종양 침략의 양적 모니터링 마우스 모델을 생성에 관련된 기술의 포괄적인 개요는 제공됩니다. 이 시스템은 침입 방지 화합물의 분자 평가 및 약물 효능을위한 유용한 플랫폼이 될 수 있습니다.

구강 편평 세포 암종의 Orthotopic 마우스 모델에서 종양 세포 침략의 다중 광자 이미징

이 비디오에서는 편평 세포 암종 세포주를 점막내 접종하여 정소성 두경부암 쥐 모델을 개발합니다. 종양을 가진 마우스는 인간 질병의 임상적으로 관련된 증상과 유사성을 보이므로 암 진행을 연구하고 새로운 치료 전략을 발견하는 데 사용할 수 있습니다.

쥐 모델에서 암세포의 점막내 접종: 정소성 두경부 암 마우스 모델을 확립하는 절차

이 비디오는 세포 기반 종양 백신 접종 분석을 보여줍니다. 종양 형성을 위해 B16-F10 흑색종 세포를 피내 주입한 마우스는 발병한 종양 근처에서 Flt3L 사이토카인을 분비하는 B16-F10 세포를 접종합니다. 백신에서 분비된 Flt3L은 수지상 세포의 성숙 및 증식을 촉진한 후 림프절의 T 세포에 종양 항원을 제시하여 표적 항종양 면역 반응을 유발합니다.

Tumor Implantation and Injection of a Tumor Vaccine in a Mouse 모델에서의 종양 백신

N-부틸-N-(4 - 히드 록시 부틸) 니트로사민 유도 방광암 모델은 인간의 점액 1 (MUC1) 테스트의 목적 MUC1-감독 면역 형질 전환 생쥐에서 개발되었다. MUC1 표적 펩타이드 백신을 투여 한 후, MUC1에 대한 세포 독성 T 림프구 반응은 혈청 사이토 카인 수준과 T 세포의 특정 활동을 측정하여 확인 하였다.

면역 본래대로 사람 MUC1 유전자 변형 마우스의 침략 과도 셀 방광 암의 유도 : 면역 요법 개발을위한 모델

이 프로토콜은 암컷 C57BL / 6J 마우스의 종양 성장을 모니터링 뮤린 동소 방광 종양의 발생을 설명한다.

쥐 동소 이식 방광 종양 모델 및 종양 탐지 시스템

여기에서, 마우스 종양 모델에서 종양 내재 및 주변부 유래 종양 침윤된 림프구의 특성화를 위한 종양 이식 프로토콜을 제시한다. 유세포 분석기를 사용한 수용자 유래 면역 세포의 유입에 대한 특이적 추적은 항종양 면역 반응 동안 이들 세포의 표현형 및 기능적 변화의 역학을 드러낸다.

마우스에서 종양 침윤성 CD8+ T 세포의 역학을 평가하기 위한 종양 이식

Intravital microscopy 결과의 번역은 조직에 대한 얕은 깊이 침투로 인해 어려움을 겪고 있습니다. 여기에서는 직접적인 공간 상관 관계를 위해 생체 내 현미경 검사와 임상적으로 적용 가능한 이미징 양식(예: CT, MRI)을 함께 정합할 수 있는 등쪽 창 챔버 마우스 모델에 대해 설명하며, 이를 통해 생체 내 현미경 검사 결과의 임상 번역을 간소화할 수 있습니다.

중개 암 연구에서 생체 내 현미경 및 자기 공명 영상의 결합을 위한 Dorsal Skinfold Window Chamber 종양 마우스 모델

이 연구는 쥐 모델에서 발광 결장직장암 세포의 생체 내 피하 유도와 이미징 시스템을 사용한 후속 발광 측정에 중점을 둡니다. 이 절차는 실시간 모니터링 및 치료 평가를 위한 재현 가능한 종양 성장 모델을 확립하는 것을 목표로 합니다.

항종양 효능을 평가하기 위해 Athymic Nude 마우스에 인간 결장직장암 세포의 피하 주입

구강 내에 형성된 구강 편평세포암 종양을 외과적으로 절제하는 독특한 방법을 여기에서 소개합니다.

구강 편평세포암의 마우스 전임상 모델을 위한 번역 관련 종양 절제 모델

종양 내 면역치료에 대한 관심이 높아짐에 따라, 접근 가능하고 실용적인 종양 모델을 선택하는 것이 필수적입니다. 피하 종양은 쉽게 진단할 수 있지만, 시각화하고 조작하는 것은 어렵습니다. 이 프로토콜에서는 가시성과 접근성을 높이는 피내종양을 생성하는 방법을 설명합니다.

생쥐암 종양 내 면역치료 연구의 강력한 모델로서의 피내종양 이식

학습하세요 두경부 편평세포암의 정위적 쥐 모델 구축 방법을 통해 종양 미세환경과 치료 내성 기전을 연구하는 기법입니다. 이 모델은 인간 질환의 임상적 특성을 효과적으로 재현합니다.

종양 면역 프로 파일링에 대 한 쥐 및 치료 반응 평가에 편평 세포 암 종 세포의 intramucosal 접종

더 많은 동영상 탐색