Name: 직교 쥐 신장 이식: 새롭고 단순화 된 외과 접근 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: 배우세요 쥐 직교 신장 이식 수술법으로, 문맥 정맥을 통한 관류와 커프 시스템을 활용해 재관류 시간을 단축하고 이식 성공률을 높이는 방법을 확인하세요.

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이 작품은 보 포 크 가족의 재산에서 관대 한 선물에 의해 후원 되었다.

루이스 (RT11)와 검은 쥐 티 (RT1A) 랫 트는 상업 상인 들에게서 구입 하였다 ( 재료 표참조). 이러한 완전 한 MHC 불일치 균 주는 종종 급성 신장 동종 거부를 연구 하는 데 사용 됩니다. 모든 동물은 존스 홉킨스 대학의 특정 병원 체 무료 시설에서 건강 (NIH) 지침의 국립 연구소에 따라 보관 및 유지 되었다. 모든 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았다.
1. 기부자 절차
<ol><li>소독의 수단으로이 절차에 사용 되는 모든 수술 도구를 준비 하 고 오토 클레이 브 및 감염 합병증을 방지 하기 위해 일회용 멸 균 장갑을 사용 합니다.</li>
	<li>이 소에이 소를 흡입 하 여 기증자 쥐를 마 취 (3%에서 유도-4% 및 유지 보수 1%-2%) 절차의 나머지 부분에 대 한. 모든 기증자 및 수령인에 게 동물을 제공 하십시오. 진통에 대 한 몸 무게 0.1 밀리 그램/kg에서 선취 권 부 프레 노르 핀 피하.</li>
	<li>이제 쥐를 부정사 위치에 놓고 멸 균 마스킹 테이프로 팔 다리를 움직이지 않습니다.</li>
	<li>복 부 영역에서 머리를 제거 하는 기계식 클리퍼를 사용 합니다.<ol>
<li>눈 윤활제를 바르고 포 비 돈 요오드에 적신 멸 균 거 즈를 사용 하 고, 이소프로필 알콜에 적신 거 즈로 수술 장을 소독 합니다.</li>
		<li>첫 번째 절 개 전에, 쥐는 적절 하 게 발가락 핀치 철수 반사의 부재를 확인 하 여 마 취 있는지 확인.</li>
	</ol>
</li>
	<li>가 위를 사용 하 여 시작 하 여 큰 종 중간 선 피부와 근육 절 개에서 심 피 증에 대 한 절단은 xiphoid, 복 강에 들어갑니다.</li>
	<li>복 부 벽의 양쪽에 두 개의 견인 기를 삽입 하 여 개복 내 강을 노출 시킵니다.</li>
	<li>촉촉한 살 균 거 즈로 장을 덮고 복 부의 오른쪽 측면으로 옮겨 대동맥, 대 정 맥, 왼쪽 신장을 노출 시킵니다. 내장과 복 부 장기를 상 온으로 유지 하기 위해 1 cc 주사기로 예 열 식 염 수 1 mL를 바르 십시오.<ol>
<li>두 번째 촉촉한 거 즈를 덮고 신장에 위 및 비장 두개골을 동원 하 여 노출 된 신장을 덮는 작은 촉촉한 거 즈를 적용 하십시오 (그림 1a).</li>
	</ol>
</li>
	<li>분리 하 고 결합 조직과 서로 왼쪽 신장 동맥 및 정 맥을 동원 하기 위해 미세 수술 해 부 집게를 사용 합니다. 왼쪽 고 달 정 맥을 cauterizing 하 여 왼쪽 신장 정 맥을 분리 하 고 부 신 동맥을 cauterizing 하 여 왼쪽 신장 동맥을 분리 합니다. 그 후, 하 부 포 셉 (그림 1B)와 결합 조직을 하 수 하 여 왼쪽 신장 척추의 우수 하 고 열 등 한 대동맥과 대 정을 동원.</li>
	<li>하 부 팅 핀셋을 사용 하 여 결합 조직에서 요 관을 나누고 동원 하 고, 마이크로가 위를 사용 하 여 신장 골반에서 측정 된 2cm의 길이로 대각선 절 개를 만듭니다. 폴 리아 미드 커 프 ( 재료 표참조)를 요 관 중간에 삽입 하 고 8-0와 매듭을 두어 커 프를 고정 시킵니다. 실크 봉합 (그림 1C). 참고: 유착으로 인 한 장애물에 대 한 보호 기능을 제공 하므로 ureter에서 모든 지방과 결합 조직을 제거 하지 않는 것이 중요 하며, 제거 하면 요 관 괴 사가 발생할 수 있습니다. Ureter에 산소를 공급 하는 용기를 보존 하기 위해 여분의 주의를 기울이십시오.</li>
	<li>해 부 집게 또는 마이크로가 위를 사용 하 여 perinephric 지방과 분리 하 여 왼쪽 신장을 동원 합니다. 신장의 지방 캡슐을 두고 연결 하 고 신장을 처리 하기 위한 그 사이트를 사용 합니다.<ol>
<li>열 등 한 대 정 맥을 노출.</li>
	</ol>
</li>
	<li>페니 스 정 맥을 통해 27G의 바늘로 주사기를 사용 하 여 200의 헤 파 린 단위를 관리 합니다. 출혈을 방지 하기 위해 면봉으로 1 분 이상 주사 부 위에 압력을가 합니다.</li>
	<li>차원문 정 맥 (pv)과 열 등 한 대명 (그림 1d)을 확인 합니다. 16 G 바늘을 사용 하 여 포털 정 맥에 헤 파 린의 500 단위와 혼합 된 차가운 생리 식 염 50 mL를 주입 하 여 신장을 씻어 냅니다 (그림 1e). 플러싱 하기 전에, 인프라 수준에서 열 등 한 대 정 맥을 자르고 바늘 삽입 부 위에 문맥이 혈액 순환을 종료 할 수 있도록 합니다. 서서히 식 염 액을 주입 하 여 신장을 내뿜는 것을 시작 하십시오. 진한 빨간색에서 균일 한 회색과 옅은 색으로 신장의 색의 변화를 관찰 하십시오 (그림 1F).</li>
	<li>플러싱 후, 대동맥과 정 맥에 신장 동맥과 혈관 근 위부를 리 게이트 하 고 얼음에 차가운 염 수에 있는 페 트리 접시에 플러시 신장을 배치 합니다. 그림 2 A는 기증자 절차의 개략적인 개요를 나타냅니다.</li>
	<li>일단 신장이 찬 염 분에, 수정 하 고 정 맥 팔목의 손잡이를 움직이지 않게 하 고 ( 물자의 테이블을 참조 하십시오) 팔목을 통해 서 신장 정 맥을 부드럽게 당깁니다. 그런 다음, 8 제로 실크 봉합 사를 사용 하 여 3 개의 매듭을 배치 하 여 커 프에 신장 정 맥을 고정 시킵니다 (그림 2b). 주의: 정 맥의 방향에 특별 한 주의를 기울여 제자리에 고정 시킵니다. 회전 된 정 맥은 혈액 흐름의 방해를 일으키고 혈전 증으로 이어집니다.</li>
</ol>2. 수령인 절차
<ol><li>기증자 절차에서 1.1-1.11 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>두 개의 atraumatido 미세 혈관 클램프를 대동맥과 대 정 맥 근에 왼쪽 신장 동맥에 위치 시킵니다 (그림 3a).</li>
	<li>신장의 입구에 수용자 신장 정 맥 근 위부를 ligate. 혈관에서 남아 있는 모든 혈액을 제거 하기 위해 혈장 생리 식 염 수로 신장 정 맥을 씻어 냅니다.</li>
	<li>이전에 기증자 신장에 위치 하 고 8-0를 가진 수 갑의 신장 정 맥 위에 결 찰 된 신장 정 맥을 밀어 넣습니다 실크 봉합 (그림 3b). 팔목에 신장 정 맥을 고정 할 때 동일한 위치 방향을 유지.</li>
	<li>왼쪽 신장의 하 부 극의 수준에서 요 관를 ligate. Perinephric 지방에서 신장을 동원 합니다.</li>
	<li>수용자 신장의 입구에 신장 동맥 근 위부를 ligate. 혈관의 과잉 혈액을 제거 하려면 혈장 염 수로 씻어 내십시오. 10-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 8 ~ 10 개의 봉합이 중단 된 신장 동맥의 종단 간 문 합을 수행 합니다 (그림 3c). 모험 층을 사용 하 여 동맥을 기동.</li>
	<li>혈관 클램프를 제거 하 여 신장의 재 관류를 다시 시작 하십시오. 먼저 정 맥에 클램프를 제거한 다음 동맥에 클램프를 제거 합니다 (그림 3d). 무 균 면봉을 사용 하 여 문 합 부위 주위의 모든 부 위에 가볍게 압력을가 합니다. 몇 분은 특허 문 합을 달성 하기에 충분 해야한다.</li>
	<li>적절 한 관류를 평가 하기 위해 신장을 잠시 관찰 하십시오. 재 관류 직후, 신장은 색상을 변경 하 고 몇 분 후 점차 자연 스러운 짙은 붉은 색을 회복 해야 합니다 (그림 3E). 요 관 및 현장 소변 생산의 가시적 연동 운동 때때로 관찰 된다.</li>
	<li>Ureteral 커 프의 노출 된 팁을 받는 요 관에 삽입 하 고 수령인에 게 8-0을 확보 하 여 마무리 합니다. 실크 봉합 (도 2c 및 도 3F).</li>
	<li>기증자와 수령인의 요 관을 위치에 유지 하기 위해, 각 요 관 측의 끝을 서로 묶어.</li>
	<li>선택적으로, 오른쪽 신장은 4-0 실크 봉합 사와 신장을 제거 하 여 오른쪽 신장 동맥과 정 맥을 묶는 하 여 조카를 절제 할 수 있습니다.</li>
	<li>복 강에서 모든 고 지를 제거 하 고 모든 장기를 자연 스러운 위치에 반환 하 고 내장에 생리 식 염 수 1 mL을 넣어 습기를 유지 하 고 4-0 흡수 성 봉합 사를 사용 하 여 복 부를 닫고 피부를 닫기 위해 4-0 실크 봉합을 합니다. 중단 된 방식으로.</li>
</ol>3. 수술 후 관리
<ol><li>광고 libitum 물과 음식에 대 한 액세스와 깨끗 한 케이지에 동물을 배치 하 고 37 ° c가 열 패드에 복구 할 수 있습니다.</li>
	<li>진통에 대 한 피하에 0.1 mg/kg 부 프레 노르 핀을 주입 하 고 회복을 위해 동물을 모니터링 하십시오. 추가 진통제 투여는 다음 며칠에 필요할 수 있습니다, 불편 함이나 통증의 징후에 따라. 항생제는 전염 하는 합병증이 희소 하기 때문에, 일상적으로 관리 되지 않습니다.</li>
	<li>동물 시설에 다시 동물을 반환 하기 전에 1 ~ 2 시간에 대 한 복구를 관찰 합니다. 처음 24 시간 동안 동물의 2 배 – 하루 3 배를 검사 하 고, 매일 검사를 수행 합니다. 통증과 고통, 경구 섭취, 비뇨 기 출력의 징후에 주의 하십시오.</li>
	<li>수술 후 7 ~ 10 일 후에 바늘을 제거 하십시오.</li>
</ol>

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<li>Cameron, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell+Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression%3A+II%2C+Study+in+Miniature+Swine%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: II, Study in Miniature Swine.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2066-2076 (2016).</li>
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이 원고에서, 우리는이 절차를 수행 하는 데 필요한 모든 장비를 포함 하 여 구체적으로 래 트의 직교 KT에 대 한 외과 수술 방법을 설명 합니다 (그림 5). 1965에서 피셔와 리는 쥐의 KT에 대 한 첫 번째 보고서를 출판 하였으며,이는 흥미로운 조사 분야18의 시작이 되었다. 이후,이 모델의 재현성을 향상 시키기 위해 많은 변형이 도입 되었습니다. 그것은 허 혈 재 관류 손상 및 신장 이식 거부 및 관용을 연구 하기 위한 효과적인 동물 모델로 서, 부분적이 고 완전 한 MHC 불일치 조합으로 여러 근 친 및 교배 균 주의 가용성 덕분에19. Rat KT 모델은 돼지에 대 한 조사를 연장 하기 전에, 그리고 KT의 비 인간 영장류 모델에 대 한 가설을 시험 하기 위한 도구로 서의 역할을 할 수 있습니다. 신장 이식 거부 또는 설치류 내성 연구에 대 한 옵션은 제한적입니다. 마우스에서 신...

역사적으로, 첫번째 이식 거절 연구 결과는 설치류1에 있는 피부이 식을 사용 하 여 브렌 트와 Medawar에 의해 수행 되었다. 피부가 뚜렷한 면 역학적 특징을가지고 있다는 것이 분명 하 게 되었고,이는 다른 혈관 화 된 고체 기관에서 거부 되는 것과다른 높은 면역 원 성 기관을 만들기 때문입니다. 고체 장기 이식 거부의 쥐 연구는 심장에 제한, 간, 그리고 신장 이식. 이러한 각 기관은 거부를 연구 하는 데 적합 하지만, 각각의 장점과 단점이 있습니다. 심장 이식 종종 복 부에 이식 하 고 대동맥과 대 정 맥에 문 지, 자리에 받는 사람의 기본 마음으로3. 이것은 인간의 임상, 해부학 적, 생리 적 상태를 재현 하지 않습니다. 또한, 마음은 차가운 허 혈에 매우 민감 하 고 그들의 기능을 복구 할 수 있도록 하기 위해 1 시간 내에 우선적으로 사용 되는 재 관류 해야4. 간이 식은 일반적으로 외과로 더 도전적이 고 시간에 민감한 수행 하기 위하여 여겨집니다. 네이티브 간을 제거한 후, 기증자 간 이식 하 고 30 분 이내에 사용 되는 받는 사람으로 작동 하지 않고 더 이상 지속 될 수 없습니다5. 간 동맥, 문맥 정 맥, 특히 담 관 재건은 정제 된 외과 기술이 필요 합니다. 외과 적 문제 외에도, 간은 토로 제 성 성질 및 설치류와 인간을 소유 하는 것으로 알려져 있습니다.6,7,8. 상기 신장은 전술한 기관과 달리, 직교 방식으로 이식 될 수 있으며, 일관 되 고, 재현성 있는 거부 에피소드 (면역 억제 되지 않은 경우)를 갖는 면역 원 성 기관으로 알려져 있으며, 여러 가지 중의 장기간의 차가운 허 혈 시간을 허용 시간. 이것은 쥐 신장 이식이 동종 거부 및 관용을 연구 하기 위한 이상적인 모델을 만든다.
신장 이식 (KT)은 말기 신장 질환을 가진 환자에 대 한 치료의 바람직한 선택 이다. 지난 몇 십년 동안, KT 후 단기 생존 결과는 극적으로 개선, 하지만 장기 생존 결과 정체는9. 종래의 면역 억제제 요법은 표준 항 거부 요법으로 남아 있다. 그러나, 면역 억제 요법의만 성적 사용은 신 독성, 당뇨병 및 이차 악성 종양과 같은 현저한 사망률 및 사망률을 야기 한다 (10,12). 장기적으로 만성 항 체 및 세포 매개 거부는 이식 편 생존을 위협 하며, 제한 된 치료 옵션을 사용할 수 있습니다.
이식의 주요 목표는 만성 면역 억제에 대 한 필요성을 장애와 하기 위해 이식 관용의 유도 이다. Rat KT 모델은 면역 억제 과정을 조사 하 고 새로운 접근법을 면역학 변조 및 이식 관용으로 평가할 수 있는 강력한 도구입니다. 쥐는 또한 급성 및 만성 세포 및 항 체 중재 거부13,14,15,17을 연구 하기에 적합 한 모델로 서의 역할을 한다. 이 수술 모델은 동종 거부 및 관용의 다양 한 측면을 연구 하는 신뢰할 수 있고, 재현 가능 하며, 비용 효율적인 도구 임을 입증 했습니다. 그것은 종종 고가의 성가신 대형 동물 연구를 착수 하기 전에 새로운 관용 유도 프로토콜을 테스트 하는 데 사용 됩니다. 쥐에서 KT를 수행 하는 것은 > 90%의 생존 율에 도달 하기 위해 광범위 한 외과 훈련과 전문성을 필요로 합니다. 이 원고와 함께 제공 되는 교육용 비디오를 통해 우리 기관에서 수년간 성공적으로 수행 된 쥐에 대 한 직교 KT에 대 한 단계별 개요를 제공할 수 있습니다.
어떤 절차를 시작 하기 전에, 기증자 및 수령인 선택은 중요 하 고 실험의 성격에 달려 있습니다. 이상적으로, 기부자와 수령인은 220-260g 사이의 무게와 나이의 8 ~ 12 주 사이 이어야 합니다. 220 g 미만의 동물은 작은 직경의 동맥, 정 맥 및 요 관을가지고 있어 받는 사람의 문 합을 특히 어렵게 합니다. 경미한 출혈은 저 혈당 증를 유발 하 고 작은 동물에서 죽음으로 이어질 수 있습니다. 260 g 보다 무거운 동물은 혈관 주위에 더 많은 지방을 표시 하 고 혈관 분리는 더 많은 수술 시간을 필요로 하 고 차가운 허 혈 시간을 증가 시킵니다.

<table><tbody><tr><td>Buprenorphine HCL</td><td>Reckitt Benckiser Healthcare UK</td><td>NDC12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>절개 펜치, 곡선</td>형 <td>젠방, 중국</td><td></td><td>11cm 플랫 핸들&nbsp;</td></tr><tr><td>헤파린 나트륨 주입 USP</td><td>Sagent 제약&nbsp;</td><td>NDC25021-400-10</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 집게, 직선, 부드러운</td><td>Jingzhong, 중국</td><td>WA3010</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 바늘 홀더</td><td>Jingzhong, 중국</td><td>WA2010</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 용기 클램프</td><td>Jingzhong, 중국</td><td>WA40120</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 스프링 가위 1</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5620</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 스프링 가위 2</td><td>FST</td><td>91501-09</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 스프링 가위 3</td><td>Zhenbang, 중국</td><td></td><td>8.5cm Vannas, 곡선</td></tr><tr><td>Prograf (Tacrolimus / FK506)</td> <td>Astellas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rats</td><td>Charles River & 타코닉 바이오사이언스&nbsp;</td><td>LEW/CRL 및 다-엠&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>면도기</td><td>Wahl</td><td>79600-2101</td><td></td></tr><tr><td>봉합사 4-0</td><td>Ethicon</td><td>J304H</td><td></td></tr><tr><td>봉합사, 4-0&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>683G</td><td></td></tr><tr><td>봉합사, 10-0&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>2820G</td><td></td></tr><tr><td>주사기 및 바늘</td><td>BD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>스레드, 8-0</td><td>Ashaway</td><td>75290</td><td></td></tr><tr><td>요관 커프</td><td>Microlumen</td><td>160-1</td><td>폴리이미드 튜빙, 지름 0.41 mm&nbsp;</td></tr><tr><td>정맥 커프</td><td>Intramedic BD</td><td>7441</td><td>PE-200 비방사선 불투과성 폴리에틸렌 튜브 ID: 1.4mm, OD: 1.9mm</td></tr></tbody></table>

직교 쥐 신장 이식: 새롭고 단순화 된 외과 접근

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

신장 이식 향상 된 생존 율을 제공 하 고 최종 단계 신장 질환 환자에 대 한 삶의 질 향상, 모든 종류의 신장 대체 요법에 비해. 지난 몇 십년 동안, 쥐 신장 이식 모델은 거부와 관용의 면 역학적 현상을 연구 하는 데 사용 되었습니다. 이 모델은 고가의 전 임상 큰 동물 연구를 진행 하기 전에 새로운 면역 조절 제약 및 식이요법을 테스트 하는 필수 불가결 한 도구가 되고있다.
이 프로토콜은 쥐에서 직교 신장이 식을 안정적으로 수행 하는 방법에 대 한 자세한 개요를 제공 합니다. 이 프로토콜은 성공 확률을 증가 시키는 세 가지 독특한 단계를 포함 합니다: 포털 정 맥을 통해 홍 조에 의해 기증자 신장의 관류와 신장 정 맥과 요 관을 낙 소 하는 커 프 시스템의 사용, 추위와 따뜻한 감소 허 혈 시간. 이 기술을 사용 하 여, 우리는 syn유전학 또는 관대 한 신장이 식을 가진 동물에 있는 일반적인 혈 청 크 레 아 티 닌을 가진 6 달 저쪽에 생존 율을 달성 했습니다. 연구의 목적에 따라,이 모델은 급성, 만성, 세포 또는 항 체 중재 거부를 연구 하기 위해 이식 전 또는 후 처리에 의해 변형 될 수 있다. 이는 신장 이식의 다양 한 측면을 연구 하기 위해 재현 가능 하 고 신뢰할 수 있으며 비용 효율적인 동물 모델입니다.

신 유전학 (n=5) 과 동종 신장 이식 (n=5)을 수행 하였다 . 신 유전학 이식이 있는 동물은 면역 억제제 치료 없이 장기간 생존을 달성 하였다. 면역 억제 없이 동종이 식을 받은 동물은 이식 편을 거절 하 고 8 일의 중앙값 생존을 통해 신부전에 굴복 하였다 (도 4a). 합성 군에서 정숙 하 게 증가 된 혈 청 크 레 아 티 닌은 동종 군에서 14 배로 증가 시키면서 0.5 mg/dl 대 7.0 mg/dl, 피 &lt; 0.01) 이다. Explantation 시, 신 유전학 신장 이식의 거시적 관점은 어떤 이상을 보여주지 않았다. 신장 색상과 내부 구조는 그대로 유지. 반대로, 거부 된 동물의 신장 알로이 저는 내부 구조의 파괴와 함께 적색 출혈 패치를 제시 했습니다 (<strong class="xfig...

이 원고와 프로토콜의 목적은 쥐에서 직교 신장 이식의 외과 수술을 상세히 설명 하 고 입증 하는 것입니다. 이 방법은 기증자 신장의 정확한 관류를 달성 하 고 정 맥 및 요 추 팔목 문 합 기술을 사용 하 여 재 관류 시간을 단축 하기 위해 단순화 된다.

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

존스 홉킨스에 있는 우리의 실험실은 경험의 2 년 이상으로 작은 동물 신장 및 간 이식을 능력을 발휘하고 있습니다. 이 특정 프로토콜은 쥐에서 치열 교정 신장 이식을 성공적으로 수행하는 데 필요한 중요한 단계를 간략하게 설명합니다. 성공확률과 재현성을 높이기 위해, 우리의 프로토콜에는 포탈 정맥을 통한 기증자 신장의 관류, 신장 정맥과 요관을 마취하기 위한 커프 시스템의 사용 등 세 가지 독특한 단계가 포함되어 있습니다.이 절차를 시연하는 것은 우리 실험실대학원생인 Le Qi 박사가 될 것입니다. 이 절차를 시작하려면 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 기증자 쥐를 마취합니다. 쥐를 척추 위치에 놓고 멸균 마스킹 테이프로 팔다리를 고정시하십시오.텍스트 프로토콜에 설명된 바와 같이 안구 윤활유를 바르고 수술 부위를 살균합니다. 첫 번째 절개 전에, 쥐가 발가락 핀치 철수 반사의 부재를 확인하여 적절하게 마취되었는지 확인하십시오. 가위를 사용하여, 심포이드에 대칭 음모에서 큰 세로 중간 피부와 근육 절개를 만들어 시작하고 복막 구멍을 입력합니다.촉촉한 멸균 거즈로 내장을 덮고 대마, 베나 카바 및 왼쪽 신장을 노출하는 복부의 오른쪽 측면으로 이동합니다. 내장과 복부 장기를 촉촉하고 정상 온도에서 유지하기 위해 1 cc 주사기로 예열 된 식염수 1 밀리리터를 적용하십시오. 두 번째 촉촉한 거즈를 바르고 위장과 비장을 신장에 가릴 수 있습니다.그런 다음 노출된 신장을 덮기 위해 작은 촉촉한 거즈를 추가합니다. 미세 수술 해부 집게를 사용하여 결합 조직과 서로 왼쪽 신장 동맥과 정맥을 분리하고 동원하십시오. 이제 왼쪽 고나달 정맥을 소작하여 왼쪽 신장 정맥을 분리하고 부신 동맥을 소작하여 왼쪽 신장 동맥을 분리합니다.그 후, 대동맥과 베나 카바를 해부포로 결합 조직을 해부하여 왼쪽 신장 혈통에 우수하고 열등한 을 동원한다. 해부 포셉을 사용하여 결합 조직으로부터 요관을 나누고 동원한 다음 마이크로 가위를 사용하여 신장 골반에서 측정된 약 2센티미터의 길이로 대각선 절개를 합니다. 폴리아미드 커프스를 요관에 중간으로 삽입하고 8-0으로 매듭을 배치하여 커프를 고정합니다. 실크 봉합사.해부 포셉 또는 마이크로 가위를 사용하여 회인성 지방에서 분리하여 왼쪽 신장을 동원합니다. 신장의 지방 캡슐을 부착 하고 신장 을 취급 하기 위해 그 사이트를 사용 하 여 둡니다. 이제 음경 정맥을 통해 27 게이지 바늘을 가진 주사기를 사용하여

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

우리는 시궁창에서 orthotopic 간 이식을위한 클래식 두 커프스 기술의 쉬운 설정 개정을 제시.

쥐에게 Orthotopic 간 이식

쥐의 Orthotopic 간 이식은 생명 의학 연구에 필수적인 실험 모델입니다. 여기 50 % 부분 이식을 사용하여 간장 동맥 재건과 orthotopic 쥐의 간 이식에 대한 수술 절차를 제시한다.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

여기에서는 거부 반응의 면역학을 연구하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 제시된 수술 모델은 짧은 수술 시간과 간결한 기술을 보여주었습니다. 기증자-수용자 균주 조합에 따라 이식된 신장은 간질성 섬유증 및 세뇨관 위축으로 정의되는 급성 세포 거부 반응 또는 만성 동종이식 손상이 발생할 수 있습니다.

마우스 신장 이식 : 동종 이식 거부의 모델

이 원고의 목표는 동맥 문합에 대한 세부 사항에 특히 주의를 기울여 마우스에서 신장 이식을 수행하는 데 필요한 단계를 설명하는 것입니다.

쥐 신장 이식 기술

돼지 장기 이식 모델은 장기 보존 메커니즘을 연구하는 데 중요한 플랫폼을 제공합니다. 이 논문은 변연 신장 이식편을 사용하여 이식 결과를 개선하기 위한 새로운 접근 방식을 조사할 수 있는 이종성 돼지 신장 자가이식 모델에 대해 설명합니다.

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

이 논문은 살아있는 기증자의 로봇 보조 신장 이식에 대한 기술적 세부 사항을 제공합니다.

로봇 보조 신장 이식

이 프로토콜은 심장 판막의 동종 활성에 대한 연구를 허용하기 위해 신장 캡슐 아래에 대동맥 판막 전단지를 이식하는 간단하고 효율적인 방법을 설명합니다.

설치류의 이종 주제 심장 판막 이식을위한 단순화 된 모델

이 프로토콜은 변형 된 동맥 해부학 전략에 초점을 맞춘 마우스 신장 이식의 새로운 수술 기술을 제시합니다. 간단하고 안전한 요관-방광 해부학 방법을 포함하는 혈관 봉합 기술도 제시된다. 이러한 변형은 수술 시간을 단축시키고 마우스 신장 이식 절차의 성공률을 향상시킵니다.

마우스의 신장 이식을위한 수정 된 수술 기술

쥐 동위원소 신장 이식 모델은 신장 동종이식편 거부의 메카니즘을 조사하는 데 기여한다. 현재의 모델은 신장 이식의 종단 간 해부학과 요관 방광 문합술의 종단 간 "터널"방법을 사용하여 혈액 공급 및 정맥 역류에 간섭하지 않고 수혜자의 생존을 증가시킵니다.

신장 동종이식편 거부반응을 위한 쥐 동위원소 신장 이식 모델

이 프로토콜은 쥐 신장을 체 외 에서 정상모세포 기계로 관류하여 수혜자 쥐로 이식하는 과정을 설명합니다.

이식을 위한 쥐 신장의 정상 기계 관류

배우세요 쥐 직교 신장 이식 수술법으로, 문맥 정맥을 통한 관류와 커프 시스템을 활용해 재관류 시간을 단축하고 이식 성공률을 높이는 방법을 확인하세요.

직교 쥐 신장 이식: 새롭고 단순화 된 외과 접근

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