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Developmental Biology
전체 산 Epifluorescence를 사용 하 여 마우스 Embryogenesis 동안 심장 챔버의 분석
전체 산 Epifluorescence를 사용 하 여 마우스 Embryogenesis 동안 심장 챔버의 분석
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

전체 산 Epifluorescence를 사용 하 여 마우스 Embryogenesis 동안 심장 챔버의 분석

Full Text
8,203 Views
06:27 min
April 17, 2019

DOI: 10.3791/59413-v

Zhentao Zhang1,2,3, Young-Jae Nam1,2,3

1Department of Medicine, Division of Cardiovascular Medicine,Vanderbilt University Medical Center, 2Department of Cell and Developmental Biology,Vanderbilt University, 3Vanderbilt Center for Stem Cell Biology,Vanderbilt University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents protocols for examining mouse heart development using whole mount epifluorescent microscopy on MLC-2v-tdTomato reporter knock-in mice. The method enables direct visualization of ventricular formation stages without complex histochemical techniques.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Cardiovascular Research

Background

  • Heart development is a critical area of study in developmental biology.
  • Traditional methods for studying heart morphology can be labor-intensive.
  • Fluorescent reporter mice provide a novel approach to visualize heart structures.
  • MLC-2v-tdTomato mice serve as a useful model for these studies.

Purpose of Study

  • To provide a simple method for visualizing heart development stages.
  • To demonstrate the utility of fluorescent reporter mice in developmental studies.
  • To facilitate research without the need for complex techniques.

Methods Used

  • Whole mount epifluorescent microscopy.
  • Use of MLC-2v-tdTomato reporter knock-in mice.
  • Dissection of embryos at various stages of development.
  • Simple experimental setup suitable for regular lab environments.

Main Results

  • Successful visualization of heart tube formation and looping.
  • Clear observation of full chamber formation.
  • Method applicable to other fluorescent reporter mouse lines.
  • Protocol demonstrated ease of use in a standard laboratory setting.

Conclusions

  • The presented method simplifies the study of heart development.
  • It allows researchers to visualize critical stages without complex procedures.
  • This approach can enhance understanding of cardiac morphogenesis.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this method?
The main advantage is its simplicity, requiring no complex techniques or equipment.
Can this method be used with other mouse lines?
Yes, it can be widely used with other fluorescent reporter mouse lines.
What stages of heart development can be visualized?
The method allows visualization of heart tube formation, looping, and full chamber formation.
What is the age of the mice used in the study?
MLC-2v-tdTomato mice aged 8 to 10 weeks were used.
Is any special equipment required?
No, the method can be performed in a regular lab setting without special equipment.
How are the embryos prepared for examination?
Embryos are dissected from pregnant dams and prepared for microscopy.

우리는 프로토콜 검사 실의 특정 MLC-2v-tdTomato 기자 노크에 쥐에서 해 부 마우스 배아에 전체 마운트 epifluorescent 현미경 검사 법을 사용 하 여 마우스 심장 개발을 제시. 이 방법을 직접 노동 집약적인 조직화 학적인 방법 없이 마우스 심장 개발 하는 동안 심 실 형성의 각 단계를 시각화 수 있습니다.

이 방법을 사용하여 마우스 배아의 추가 실험 조작 없이 심장 관 형성, 루핑 및 전체 챔버 형성을 직접 검사할 수 있습니다. 비록, 우리는 예를 들어 MLC-2v-tdTomato 마우스를 사용하지만, 이 간단한 방법은 널리 다른 형광 기자 마우스 라인과 함께 사용될 수있다. 이 프로토콜의 주요 장점은 매우 간단하며 복잡한 기술이나 장비가 필요하지 않다는 것입니다.

일반 랩 설정에서 수행할 수 있습니다. 남성 마우스와 여성을 짝짓기 후, MLC-2v-tdTomato 8 받는 사람 10 주, 매일 아침 질 플러그댐을 확인. 임신 한 댐을 누워, 다른 일에 안락사 후 coitum, supine 위치에 70 %에탄올로 복부를 스프레이.

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