Name: 마우스 종아리에 일관된 마사지와 같은 섭동을 적용하고 근육 내 압력 변화를 모니터링 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-09-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 49 s
Description: 학습하세요 마우스 종아리에 기계적 하중을 적용하고 근육 내 압력 변화를 모니터링하는 방법을. 이 프로토콜은 운동과 마사지의 유익한 효과 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

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나카니시 K. 하마모토, 구메, K. 츠루미 가 프로젝트 전반에 걸쳐 꾸준히 지원해 주신 것에 감사드립니다. 이 작품은 일본 후생노동성의 교내 연구 기금에 의해 부분적으로 지원되었습니다. 일본과학진흥학회과학연구지원부 2015-2019년도 일본 문부과학성(S1511017)의 사립대학 전략연구재단 MEXT 지원 프로그램.

모든 동물 실험은 국가 장애인 재활 센터의 기관 동물 관리 및 사용위원회의 승인하에 수행되었습니다.
1. 마우스 양측 뒷다리의 고정
참고: 남성 C57BL/6 마우스는 적어도 7일 동안 적응 후 11-12주 후에 실험에 사용하였다.
<ol><li>나트륨 펜토바르비탈 (50 mg /kg i.p.)을 사용하여 마우스를 적절하게 마취하십시오. 쥐가 뒷다리 발가락 핀치에 반응하지 않도록 하십시오. 참고: 오전 10시부터 오후 7시 사이에 고정 절차를 수행하여 마우스의 먹이 활동에 미치는 영향을 최소화하십시오.</li>
	<li>무릎 관절이 연장되고 발목 관절이 발바닥이 구부러진 척추 위치에 놓인 마우스의 양측 뒷다리에 수술 테이프를 적용하십시오.</li>
	<li>L4-5 척추 레벨의 트렁크에 알루미늄 와이어(재료 표 참조)를 놓고 나선형 층의각 회전 사이에 5mm 간격으로 뒷다리 주위의 나선형 구성으로 와이어를 코일합니다(그림1A). 와이어를 너무 단단히 코일하지 말고 국부적인 혈류를 방해하지 않도록하십시오.</li>
	<li>배선에서 탈출할 가능성을 최소화하기 위해 알루미늄 와이어의 구성을 수동으로 조정하여 90° 납치 위치에서 고관절을 고정시됩니다.</li>
	<li>마우스를 원래 케이지로 되돌아갑니다. 3 시간 후, 그들은 마취에서 회복하고 평소와 같이 음식과 물에 액세스 할 수 있는지 확인하십시오.</li>
	<li>집 3 - 6 고정하기 전에 케이지 당 고정 마우스.</li>
</ol>2. 마우스 위장관 근육의 근육 내 압력 측정
참고: LCC와 결합된 압력 모니터링 실험에서 원통형 단위(36 g, 66 g 및 200g)의 여러 다른 분동을 테스트했습니다. 이러한 측정은 근육 염증 및 위축을 분석하기 위한 실험과 는 별도로 수행되었다(자세한 내용은 3-5단계 참조) 즉, 압력 측정을 받은 마우스는 조직학적 분석에 사용되지 않았다.
<ol><li>압력 측정은 뒷다리 배선 및 LCC에 비해 더 침습적 인 절차 (예 : 피부 절개 및 바늘 삽입)를 포함하기 때문에 세 가지 마취제 (메데토미딘 0.75 mg / kg, midazolam 4.0 mg / kg 및 butorphanol 5.0 mg / kg, butorphanol) 혼합물을 사용합니다. i.p.)를 참조하십시오. 쥐가 뒷다리 발가락 핀치에 반응하지 않도록 하십시오.</li>
	<li>마우스를 쉬운 위치에 놓고 전기 면도기로 탈모한 후 후 종아리에 메스로 2mm 절개를 하고 70 % 에탄올 및 클로르헨시딘 흡수 면으로 피부 표면을 반 살균하십시오.</li>
	<li>피부 표면에 둔각 (150 ° - 170 °)에서 위장혈증 근육에 20G 주유징 바늘을 삽입하십시오.</li>
	<li>바늘의 플라스틱 칼집을 가이드로 사용하여 위천혈의 중간 배에 혈압 텔레미터 (재료 표참조)의 센서를 배치한 다음 근육에서 칼집을 제거합니다.</li>
	<li>4-0 나일론 봉합사로 피부를 봉합한 후, 마우스의 종아리에 원통형 단위의 여러 가지 가중치로 LCC를 적용하고(자세한 내용은 3단계 참조), 생물학적 신호 분석을 위한 소프트웨어를 사용하여 근육 내 압력을 모니터링합니다(표 표 참조 재료)를참조하십시오.</li>
	<li>마우스를 원래 케이지로 되돌아갑니다. 3 시간 후, 그들은 마취 / 진통에서 회복하고 평소와 같이 음식과 물에 액세스 할 수 있는지 확인하십시오.</li>
</ol>3. 마우스 종아리의 국소 주기적 압축(LCC)
<ol><li>근육 내 압력 측정 및 안락사 (즉, 자궁 경부 탈구)를 제외하고 마취를 위해 펜토 바르 비탈 나트륨 (50 mg / kg i.p.)을 사용하십시오.</li>
	<li>뒷다리 배선에서 마우스를 분리하고 무릎 관절이 확장되고 발목 관절이 발목 관절이 구부러져 종아리가 위쪽으로 향할 수 있도록 경향이있는 위치에 놓습니다. 무대에서 마우스 뒷다리를 고정하지 마십시오.</li>
	<li>LCC를 10분 동안 1Hz에서 쿠션패드(그림 1C)로덮인 원통형 중량 단위(그림1B)를수직으로 이동하여 종아리에 7일 동안 적용한다.</li>
	<li>매일 LCC의 각 시합 후, 마우스 뒷다리를 다시 와이어.</li>
</ol>4. 위장관의 면역성 화학적 분석
<ol><li>세 가지 마취제 (메데토미딘 0.75 mg /kg, 미다졸람 4.0 mg / kg, 및 butorphanol 5.0 mg / kg)의 혼합물의 복강 내 주입에 의해 적절한 마취 / 진통하에 자궁 경부 탈구에 의해 마우스를 안락사.</li>
	<li>후방 종아리 표면을 제모 한 후, 피부 절개를하고, 수술 가위를 사용하여 티바이오 섬유 뼈에서 분리하여 위장 근육을 해부하고 신속하게 최적의 절삭 온도 화합물 용액에 동결.</li>
	<li>저온 극저온을 사용하여 유리 슬라이드에 위장내 근육의 저온 섹션 샘플을 준비하십시오. 시료를 분석할 때까지 -80°C 냉동고에 보관합니다.</li>
	<li>냉동실에서 분석할 위장혈성 저온절 샘플을 꺼내 실온에서 공기 건조시켜 탈수한다.</li>
	<li>액체 차단펜을 사용하여 슬라이드의 모든 저온 단면이 포함된 영역을 그립니다. 원은 솔루션이 슬라이드에서 흐르는 것을 방지합니다.</li>
	<li>물에 젖은 종이 천으로 촉촉한 환경을 조성하는 트레이에 슬라이드를 놓아 시료의 건조를 피하십시오.</li>
	<li>실온에서 30분 동안 차단 완충액(0.25% 카제인, 담체 단백질 및 0.015 M 나트륨 아지드을 함유하는 인산완충식염수)의 100 μL을 적용합니다.</li>
	<li>PBS-T (0.1 % 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 모노 라우 레이트 (재료 표참조)를 함유 한 PBS로 배양하여 슬라이드를 두 번 헹구십시오.</li>
	<li>각 샘플에 PBS로 희석된 1차 항체 100 μL을 적용하고, 트레이를 뚜껑으로 덮고, 실온에서 밤새 배양합니다.</li>
	<li>PBS-T로 3회 세척하십시오(세척시 5분).</li>
	<li>각 샘플에 PBS로 희석된 이차 항체 100 μL을 적용하고 실온에서 1시간 동안 배양합니다. 참고: 항 라미닌 염색의 경우 Alexa Fluor 568-컨쥬게이팅 이차 항체를 사용하십시오. 안티 F4/80, 안티 MCP-1 및 안티 TNF-α의 경우, 알렉사 플루어 568- 또는 488-컨쥬게이트 이차 항체를 사용한다.</li>
	<li>PBS-T로 3회 세척하십시오(세척시 5분).</li>
	<li>각 시료에 PBS-T로 희석한 DAPI 용액 100 μL을 적용하고 실온에서 3분 동안 배양합니다.</li>
	<li>PBS-T로 3회 세척하십시오(각 5분).</li>
	<li>시료를 마운팅 매체로 장착하고 커버립으로 덮습니다.</li>
</ol>5. 위장관의 히스토 형태 분석
<ol><li>형광 현미경에 샘플 슬라이드를 배치 (재료의 표참조) 적절한 필터와 20 × 목표를 사용하여 샘플을 볼 (DAPI-B, 여기 360/ 40 nm 및 방출460/50 nm; GFP-B, 470/40 여기및 방출을 위한 535/50 nm를 위한 nm; FRITC, 540/25 nm 여기 및 방출을 위한 605/55 nm.</li>
	<li>이미지 분석을 위한 소프트웨어를 사용하여(재료 표참조), 각 근화섬유의 단면적(CSA)을 측정하고, F4/80-, MCP-1-및 TNF-α 양성 세포의 수를 계산한다. 참고 : 항 라미닌-2 면역 염색으로 시각화 된 지하 막의 내부 마진을 추적하여 각 myofiber의 CSA를 결정합니다.</li>
</ol>

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<li>Onda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+mouse+model+of+skeletal+muscle+atrophy+using+spiral+wire+immobilization%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">A New mouse model of skeletal muscle atrophy using spiral wire immobilization.</a> Muscle Nerve. 54 (4), 788-791 (2016).</li>
<li>Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines--chemotactic+cytokines+that+mediate+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Chemokines--chemotactic cytokines that mediate inflammation.</a> The New England Journal of Medicine. 338, 436-445 (1998).</li>
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<li>Baumann, J. U., Sutherland, M. D., Hangg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+pressure+during+walking%3A+An+experimental+study+using+the+wick+catheter+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+Related+Research%22%5BJournal%5D)">Intramuscular pressure during walking: An experimental study using the wick catheter technique.</a> Clinical Orthopaedics Related Research. 145, 292-299 (1979).</li>
<li>Lee, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+physical+inactivity+on+major+non-communicable+diseases+worldwide%3A+an+analysis+of+burden+of+disease+and+life+expectancy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Effect of physical inactivity on major non-communicable diseases worldwide: an analysis of burden of disease and life expectancy.</a> Lancet. 380, 219-229 (2012).</li>
</ol>

저자는 원고와 관련된 경쟁적인 이해관계가 없다고 선언합니다.

우리는 항 염증 효과가있는 마사지와 같은 기계적 자극을 적용하는 방법을 설명했습니다. 우리의 시스템은 이전에보고 된 것과 비교할 때에도 다음과 같은 장점이 있습니다. 먼저, 이전 연구는 적용된 기계적 힘을 정량적으로 정의하지 않았거나2를 적용하거나 체표면에서의 측정에 기초하여 그들의 크기를 정의하되, 조직내부(10)는정의하지 않았다. 대조적으로, 우리는 혈압 텔레미터를 사용하여 근육 내 압력을 측정했습니다. 둘째, 우리 장치의 간단한 구조(그림 1B)는우리가 상대적으로 저렴한 비용으로 높은 일관성과 재현성(그림 3A)으로시스템을 구성 할 수있었습니다. 셋째, 우리의 개입 (LCC)은 근육 내 압력 변화와 관련하여 신체 활동 (가벼운 근육 수축)에 관한 것입니다 (50 mmHg15). 우리의 접근은...

마사지는 일반적으로 통증 완화와 경쟁 선수와 비 운동 선수 모두 모두 신체 성능의 개선에 도움이 될 것으로 인식1,2. 사실, 이전 연구는 마사지가 국소 염증을 억제하는 것으로 나타났습니다3 운동 후 근육 손상에서 회복을 자극4,5. 마사지의 유익한 효과의 근간이 되는 분자 메커니즘은 크게 알려지지 않았습니다.
마사지에 대한 기계적 조사의 어려움 중 하나는 마사지와 같은 중재를 테스트하는 실험 기술의 재현성과 관련이 있습니다. 이전 연구에서는, 마사지를 모방하는 실험 절차는 주로 손바닥과 손가락과 같은 실무자의 신체 부위를 사용하여 물리적 인 개입의 적용을 포함6,7,8. 따라서 크기, 빈도, 지속 시간 및 모드를 정확하게 재현하기가 어렵습니다.
많은 장치가 대상 조직에 정의된 기계적 하중을 적용하도록 개발되었습니다. 예를 들어, Zeng 등은 쥐의 뒷다리에 길이 가변 적재를 위한 공압 시스템을 개발하였고, 왕 등은 쥐와 토끼의 뒷다리에 마사지와 같은 기계적 하중을 적용할 수 있는 메카트로닉 장치를 개발했습니다. 실시간 피드백 제어10. 이에 비해, 우리의 로컬 주기적 압축 (LCC) 시스템은 훨씬 간단, 건설에 대한 훨씬 적은 비용을 요구. 그럼에도 불구 하 고, 우리는 가벼운 근육 수축 하는 동안 생성 되는 근육 압력 변화를 재현할 수 있습니다. 이 장치를 사용하여, 우리는 성공적으로 마사지와 같은 기계적 개입이 국소 간질 유체 역학을 조절하고 고정 유도 근육 위축을 완화한다는 것을입증했다 11.
여기에서는 운동과 마사지의 긍정적 인 효과 뒤에 분자 메커니즘을 탐구하는 데 도움이 될 수있는 장치 및 프로토콜의 세부 사항을 설명합니다. 프로토콜의 회로도는 보충 그림 1로표시됩니다.

<table><tbody><tr><td>알루미늄 와이어</td><td>DAISO JAPAN</td><td>B028</td><td>알루미늄 와이어는 와이어에 의한 제한을 피하기 위해 사용됩니다</td></tr><tr><td>혈압 원격 측정기</td><td>Millar</td><td>SPR-671</td><td>혈압 측정기는 근육 내압을 측정하는 데 사용됩니다.</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D1306</td><td>DAPI는 형광 현미경 검사용 DNA를 염색하는 데 일반적으로 사용되는 형광 프로브입니다.</td></tr><tr><td>Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 (Dilution ratio, 1:500)</td><td>Invitrogen </td><td>A11034</td><td>면역조직화학 염색을 위한 항체.</td></tr><tr><td>Goat anti-rat Alexa Fluor 568 (Dilution ratio, 1:500))면역</td><td>조직화학 염색을 위한</td> <td>Invitrogen </td><td>A11077</td> 항체.</tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>N/A</td> 이미지 <td></td></tr><tr><td>LabChart8</td><td>AD용</td> 분석 소프트웨어<td>&nbsp;</td><td>생체 신호 획득을 위한 분석 소프트웨어.</td></tr><tr><td>Prolong gold</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>P36930</td><td>Prolong gold는 염색된 시료를 장착하기 위한 것입니다.</td></tr><tr><td>단백질 블록 무혈청</td><td>Dako</td><td>X090930-2</td><td>면역조직화학 절차에서 비특이적 배경 염색을 차단합니다.</td></tr><tr><td>Rat monoclonal anti-laminin-2 항체 (희석 비율, 1:1000)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>L0663</td><td>면역조직화학 염색을 위한 항체.</td></tr><tr><td>Rat monoclonal anti-F4/80 항체 (Dilution ratio, 1:500)</td><td>Abcam</td><td>ab6640</td><td>면역조직화학 염색용 항체.</td></tr><tr><td>Rabbit polyclonal anti-MCP-1 항체 (Dilution ratio, 1:1000)</td><td>Abcam</td><td>ab25124</td><td>면역조직화학 염색용 항체.</td></tr><tr><td>토끼 다클론 항-TNF-&알파; 항체 (Dilution ratio, 1:1000)</td><td>Abcam</td><td>ab66579</td><td>면역조직화학 염색을 위한 항체.</td></tr><tr><td>수술용 테이프</td><td>3M Japan</td><td>1530EP-0</td><td>수술용 테이프는 관절의 움직임을 제한하는 데 사용됩니다.</td></tr></tbody></table>

마우스 종아리에 일관된 마사지와 같은 섭동을 적용하고 근육 내 압력 변화를 모니터링

Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes

마사지는 일반적으로 통증과 염증을 완화하는 데 도움이 되는 것으로 인식됩니다. 이전 연구는 골격 근육에 마사지의 항 염증 효과 보고 하지만, 뒤에 분자 메커니즘은 제대로 이해. 우리는 최근에 다양한 진폭을 가진 근위내 압력파를 생성할 수 있는 국부적인 주기적 압축 (LCC)를 적용하는 간단한 장치를 개발했습니다. 이 장치를 사용하여, 우리는 LCC가 대식세포의 염증 반응을 계조시키고 고정으로 인한 근육 위축을 완화한다는 것을 입증했습니다. 여기에서는, 우리는 마우스 뒷다리의 골격 근육의 고정화 유도한 염증 그리고 위축에 대하여 마사지 같이 내정간섭으로 LCC의 최적화 그리고 적용을 위한 프로토콜을 기술합니다. 우리가 개발 한 프로토콜은 운동과 마사지의 근본적인 유익한 효과를 조사하는 데 유용 할 수 있습니다. 우리의 실험 시스템은 근육 항상성의 기계적 조절을 해명하기 위한 분석 접근법의 프로토타입을 제공하지만, 더 포괄적인 연구를 위해 추가 개발이 이루어져야 합니다.

우리의 이전 관찰과 일치12,위장혈성 myofibers의 CSA는 뒷다리 고정에 의해 현저하게 감소되었다(그림 2A, B). 또한, 우리의 면역 형광 염색 분석은 MCP-1과 TNF-α를 발현하는 세포가 염증 과정 조절에 중요한 역할을한다는 것을 밝혀13,14,위암혈성 근육에서 크게 증가 고정 된 뒷다리의 조직 (MCP-1 : 그림 2C, F, H; TNF-α: 그림 2D, G,I). F4/80으로 긍정적으로 염색된 세포의 증가와 함께, 대식세포에 대한마커(그림 2C-...

여기에서는 마우스 종아리에 정의된 기계적 하중을 적용하고 수반되는 근육 내 압력 변화를 모니터링하기 위한 프로토콜을 설명합니다. 우리가 개발 한 실험 시스템은 운동과 마사지의 유익한 효과 뒤에 메커니즘을 조사하는 데 유용 할 수 있습니다.

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of ...

당사의 프로토콜은 시스템과 메커니즘에서 유용할 수 있습니다. 그리고 올바른 정보는 육체적 스트레스와 마사지의 효과를 보여줍니다. 우리의 지역 순환 완성 시스템은 훨씬 더 간단합니다.로컬 삽입에는 기존 메서드가 필요하지 않습니다. 무릎 관절이 연장되고 발목 관절 발바닥이 구부러진 수핀 위치에 있는 양측 뒷다리에 수술 용 테이프를 적용하십시오. L4-5 척추 레벨의 트렁크에 알루미늄 와이어를 놓고 나선형의 각 회전 사이에 5밀리미터 간격이 있는 뒷다리 주위에 나선형 구성으로 와이어를 코일링합니다.배선에서 탈출할 가능성을 최소화하기 위해 와이어 구성을 수동으로 조정하여 90도 의 고관절을 납치하는 위치에서 고관절을 고정시하십시오. 그런 다음 마우스를 전체 복구 할 때까지 모니터링하여 홈 케이지로 돌아갑니다. 근육 내 위트로네미온 근육 압력을 측정하기 위해 마취 된 마우스를 경향이있는 위치에 배치하고 면도, 다피, 및 후방 종아리의 피부를 반 살균.메스를 사용하여 소독된 피부에 2밀리미터 절개를 합니다. 그리고 피부 표면에 150 ~ 170도 각도로 위트로테니미즘 근육에 20 게이지 인주거 바늘을 삽입합니다. 다음으로, 바늘의 플라스틱 칼집을 가이드로 사용하여 위트롬혈 근육의 중간 배에 혈압 텔레미터 센서를 배치합니다.4-O 나일론 봉합사로 피부를 둘러싸습니다. 그런 다음 여러 가지 원통형 장치 가중치를 사용하여 1 분 동안 종아리 근육에 국부 원통형 압축을 적용하십시오. 및 생물학적 신호 분석을 위한 적절한 소프트웨어를 사용하여 근육 내 압력을 모니터링한다.국부주 주기적 압축 처리를 위해 뒷다리 배선으로부터 마취 마우스를 분리한다. 그리고 동물을 경향이있는 위치에 놓습니다. 무릎 관절이 연장되고 발목 관절이 위쪽으로 향하는 송아지와 함께 발바닥구이 되도록 뒷다리를 조정합니다.그리고 수직으로 7 일 동안 하루에 30 분 동안 한 hertz에서 종아리 근육 위에 쿠션 패드로 덮여 원통형 무게 단위를 이동합니다. 압축의 각 매일 시합 후 홈 케이지에 동물을 반환하기 전에 마우스 뒷다리를 다시 연결합니다. 실험의 끝에서 후방 종아리 표면을 과소 하 게 하 고 경정 골에서 위 트 륨 근육의 분리를 허용 하는 피부 절개를.수확된 근육 조직을 최적의 절삭 온도 화합물 용액으로 신속하게 동결합니다. 그리고 유리 슬라이드에 위트로테미즘 근육의 섹션을 얻기 위해 극저온을 사용합니다. 면역조직화학 라벨링의 경우 각 슬라이드의 조직 섹션 주위에 링을 그리기 위해 소수성 펜을 사용하기 전에 실온에서 공기 건조로 섹션을 해동하고 탈수한다.다음으로 슬라이드를 습도 챔버에 놓습니다. 그리고 각 측면에 100 마이크로리터의 블로킹 버퍼를 추가합니다. 실온에서 30분 후 PBS-T에서 25분간 세척한 슬라이드를 헹구고, 실온에서 하룻밤 동안 관심 있는 1차 항체의 100마이크로리터로 섹션을 표시합니다.다음날 아침 PBS-T에서 슬라이드를 3회 세척하여 세척당 5분간 세척합니다. 그리고 빛으로부터 보호되는 실온에서 1 시간 동안 적절한 이차 항체로 샘플을 라벨. 인큐베이션이 끝나면, 시연된 대로 신선한 PBS-T로 슬라이드를 3번 씻으십시오.그리고 어둠 속에서 실온에서 3 분 동안 DAPI의 100 마이크로 리터로 핵을 얼룩지게합니다. 그런 다음 슬라이드를 세 번 더 씻으십시오. 그리고 호환 장착 매체와 커버 슬립샘플을 장착.조직형 분석의 경우, 형광 현미경의 단계에 슬라이드를 배치하고 적절한 필터에서 20-X 주관적인 아래 샘플을 볼 수 있습니다. 그런 다음, 영상 분석 소프트웨어에서 각 근섬유의 단면 영역을 측정하고 관심있는 실험 마커를 표현하는 세포의 수를 계산합니다. 위장혈증 근섬유의 단면 영역은 뒷다리 고정에 의해 현저히 감소된다.또한, 면역형 염색 분석은 MCP-1 및 TNF-알파를 발현하는 세포가 고정된 뒷다리의 위장혈증 근육 조직에서 현저히 증가한다는 것을 보여준다. 함께, F4/80으로 긍정적으로 염색된 세포의 증가와 더불어, 뒷다리 고정은 대식세포 축적을 포함하여 국소 선동적인 반응을 관련시키는 송아지 근육 위축을 선동하는 것처럼 보입니다. 원통형 장치의 중량을 변경하여 테스트된 여러 가지 다른 국소 주기적 압축 크기 중, 수은 간 압력파의 50 밀리리터에 대응하는 압축은 근섬유 단면 면적의 고정유도 감소를 가장 효율적으로 완화시키고 위트로크리미즘 근육의 대식파지 축적을 증가시키는 것으로 보인다.66그램국소 주기적 압축은 7일 동안 하루 30분 동안 1 헤르츠에 적용되어, 위트롬혈근육의 근섬유 단면 영역에서 관찰된 고정화가 유도된 감소를 현저히 완화시킨다. 더, 국소 주기적 압축은 부분적으로 고정을 부드럽게 삼두근 수라 근육의 수축 력의 감소를 유도한다. 또한, 국시주 압축은 F4/80 양성, TNF-알파 양성 및 MCP-1의 증가가 고정된 뒷다리의 위트로크리혈 근육 조직에서 증가한다.우리의 접근은 환자에 있는 근육 상승을 위한 과학적 기초를 제공하고 예방 절차를 위한 우리의 잠재적인 전략을 제공할 것입니다. 쥐는 물리적 비활동의 제한을 발견했다. 우리의 시스템을 사용하여, 우리는 근육이 환자에 있는 정비사가 결여된 대부분의 환자를 평가하기 시작했습니다.적당한 지역 산업 방법은 완벽한 고정 유도 근육 위축을 만든다.

application-consistent-massage-like-perturbations-on-mouse-calves

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오는 마우스의 CMAP(Compound Muscle Action Potential)를 측정하기 위한 생체 내 기술을 보여줍니다. 전극을 설정하고, 근육 섬유에 신경을 공급하는 앞다리 뉴런을 자극하고, 근육 반응을 기록하는 단계를 간략하게 설명합니다. 이 기술은 신경 세포 탈수초화 및 기능적 뉴런 손실을 평가합니다.

Measuring Compound Muscle Action Potentials in Mouse Forelimb Muscles In Vivo(생체 내 마우스 앞근육의 복합 근육 활동 전위 측정)

이 원고는 임신 중 자궁 내 압력을 측정하기 위해 마우스에 텔레미터를 이식하는 프로토콜을 제공합니다.

자궁 원격 측정은 마우스 수축 압력을 측정하는<em&gt; 생체</em

우리는 마우스의 모터 유닛의 기능의 생체 모니터링 허용 정제 프로토콜을 제시한다. 기술 좌골 신경에서 신경 지배 마우스 뒷다리 근육의 복합 근 활동 전위 (CMAP)와 모터 유닛 번호 추정 (무네)을 측정하는 것이 설명된다.

전기 생리 모터 단위 수 추정 (무네) 마우스 뒷다리 근육의 복합 근육 활동 전위 (CMAP)를 측정

신경 유도의 측정 neurodegeneration의 마우스 모델을 평가 하는 유용한 도구 이지만 그것은 자주 hindlimbs에 좌 골 신경을 자극에 적용 됩니다. 여기, 복합 근육 활동 전위 (CMAP) vivo에서 상 완 신경 총에 의해 innervated 마우스 forelimb 근육에서 측정 하는 기술을 설명 합니다.

Vivo에서 모터 신경 퇴보의 마우스 모델에서 앞 발에서 복합 근육 활동 전위의 electrophysiological 측정

쥐 골격 근육 수축 기능의 측정 치료 개입의 효능 뿐만 아니라 질병의 진행을 추적 하는 데 사용할 수 있는 유용한 도구입니다. 여기 같은 마우스에서 시간이 지남에 따라 반복 될 수 dorsiflexor 근육의 비-침략 적, vivo에서 평가 설명 합니다.

비-침략 적 쥐에서 Dorsiflexor 근육 기능 평가

우리 관절염 통증의 갖는 측정을 개발 하 고 화학적으로 유발 된 관절염의 다른 murine 모델에 자발적인 통증을 측정 하기 위한 표준화 된 방법으로 그것을 결합. 이러한 측정값은 민감하고 관절 통증의 종류에 대 한 재현입니다.

Murine 모델 Monoarticular 무릎 통증의 통증의 자연과 갖는 측정

무릎 근간근의 정량화는 노화, 질병, 부상 및 재활에 대한 기능적 적응을 이해하는 것이 필수적입니다. 생체 무릎 확장 이소메트릭 피크 파타닉 토크에서 반복적으로 측정하는 새로운 방법을 제시합니다.

마우스에서 무릎 엑스텐서 근육 기능의 생체 측정

마우스에서 요통 모델의 간단하고 신속한 유도를 위한 방법은 요로 플라스미노겐 활성제의 인대 내 주입을 사용하여 여기에서 제공됩니다.

우로키나아제(Urokinase)형 플라스미노겐 활성제(Plasminogen Activator)에 의한 생쥐 요통 모델

본 프로토콜은 마우스와 같은 작은 동물에서 수행되는 정밀 재활 연구에 통합될 수 있는 투여량 조정 저항 훈련(DART)이라는 독특한 기술을 설명합니다.

근육 손상 위험이 감소한 마우스에서 복용량 조정 저항 훈련

본 연구에서는 스트레스와 조직 손상을 최소화하면서 수동 마사지를 복제하는 생쥐용 복부 마사지 장치를 소개한다. 이 장치는 제2형 당뇨병 마우스의 혈당 수치를 현저히 낮추고, 지질 대사를 개선하며, 인슐린 감수성을 향상시켜 임상적 잠재력을 지닌 유망한 비침습적 치료 접근법을 제공합니다.

T2DM 마우스의 복부 마사지를 위한 고정 및 작동 방법

이 프로토콜은 마우스에서 무릎 통각 과민을 측정하는 방법을 설명합니다. 우리는 급성 무릎 통증의 마우스 모델과 골관절염(OA) 모델의 예를 보여줍니다.

Pressure Application Measurement를 사용한 마우스의 무릎 통각 과민 평가

학습하세요 마우스 종아리에 기계적 하중을 적용하고 근육 내 압력 변화를 모니터링하는 방법을. 이 프로토콜은 운동과 마사지의 유익한 효과 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

마우스 종아리에 일관된 마사지와 같은 섭동을 적용하고 근육 내 압력 변화를 모니터링

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