Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

Patrick Moran; Yichen Guo; Rong Yuan; Nicholas Barnekow; Jordan Palmer; Adam Beck; Bin Ren

doi:10.3791/59624

생체 내피 세포에서 RNA 격리를 위한 리보솜 친화성 정제(TRAP) 번역

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Biochemistry
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Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

생체 내피 세포에서 RNA 격리를 위한 리보솜 친화성 정제(TRAP) 번역

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08:53 min

May 25, 2019

DOI: 10.3791/59624-v

Patrick Moran^1,2, Yichen Guo^3,4, Rong Yuan^1,3, Nicholas Barnekow¹, Jordan Palmer², Adam Beck³, Bin Ren^3,4,5

¹Blood Research Institute,Blood Center of Wisconsin, ²Department of Medicine,Medical College of Wisconsin, ³Department of Surgery,The University of Alabama at Birmingham, ⁴Department of Biomedical Engineering,The University of Alabama at Birmingham, ⁵GBS Program, Graduate School,The University of Alabama at Birmingham

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 RNA 정화와 결합된 리보솜에 있는 향상된 녹색 형광 단백질 (EGFP)의 EC 특정 유전 꼬리표를 통해 마우스 두뇌, 폐 및 심혼 조직에서 직접 혈관 내피 세포 (Ec)에서 리보솜 결합mRNA를 정화하는 접근을 제시합니다 .

안녕하세요, 저는 빈 렌입니다, 나는 알라바마 대학 버밍엄 의과 대학에서 수술 및 생물 의학 공학의 부교수입니다. 우리의 실험실은 이러한 일반적인 심장 혈관 질환과 암의 맥락에서 내피 세포 생물학 기능 혈관 신생 아큐오발생에 관심이 있습니다. 우리의 연구 중 하나는 내피 세포 전분 및 혈관 신생의 후성 유전학 및 전사 조절에 있습니다.

혈관 신생의 전사 메커니즘을 이해하기 위해, 우리는 자궁 내피 세포에서 혈관 신생과 관련된 특정 유전자를 삭제했을뿐만 아니라 향상된 GFP 프로브가 토착 내피 세포의 리보솜에 유전적으로 태그될 트랜스젠트 엔지니어링 마우스 라인을 확립했습니다. 이러한 방식으로, 우리는 형질전환 동물에서 직접 다른 조직 기관에서 내피 세포에서 관련 메신저 RNA의 루프를 분리하고 정화 할 수 있습니다. 그런 다음 정제 된 메신저 RNA를 사용하여 성적 증명서 및 전사의 다운스트림 분석을 사용할 수 있습니다.

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