코카나발린A에 의해 유도된 수성 결핍 안구 건조증의 토끼 모델: 약물 효능 연구에 적용

우리의 방법은 모든 홍엽 땀샘을 주입하고 주사를 반복하는 우리의 방법에 급성 또는 만성 수 있는 안구 건조 증의 누락된 신뢰할 수 있는 동물 모델을 제공합니다. 이 기술은 널리 변하는 크기의 땀샘과 우수한 홍추선까지 초음파 지침을 사용하여 열등한 lacrimal 선에 Concanavalin A를 안정적으로 전달하여이 방법을 완전한 접근법으로 만듭니다. 이 모델은 수성 결핍 안구건조증을 유발하는 간단하고 최적화된 비수술적 수단을 제공합니다.

그것은 약물 효능 및 질병 병리생리학을 연구하는 데 적합합니다. 후방 부신을 식별하고 초음파 국소화를 활용하는 것은 처음에는 어려울 수 있습니다. 모든 모피를 제거하는 것은 이 두 단계에 대한 초음파 현지화를 돕는 데 중요합니다.

절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원생 인 웨이 황 (Wei Huang)이 될 것입니다. 이어 로브가 더 이상 완전히 똑바로 똑바로 있지 않은 편안한 헤드 위치를 관찰하여 가벼운 진정효과를 확인한 후 마이크로파이프를 사용하여 방부제 프리 리도카인 25마이크로리터를 첫 눈에 바르고 눈꺼풀 사이에 유연한 와이어 뚜껑 스펙큘럼을 배치합니다. 0.3 개의 집게를 사용하여 정점에 틈새 멤브레인을 잡고 각막 위로 확장하십시오.

26 게이지 날카로운 바늘을 사용하여, 1:100, 000번째 피네프린으로 리도카인을 1%를 틈새 막의 기지에 미묘하게 주입한다. 적당한 흠은 멤브레인 위에 형성되어야 합니다. 그런 다음 스펙큘럼을 제거하고 왼쪽 틈새 막에 동일한 주사를 내십시오.

약 5분 후 뚜껑 을 다시 동료 눈에 넣고 0.3 개의 집게를 사용하여 정점에 있는 틈새 막을 철회하십시오. Westcott 가위를 사용하여 틈새 멤브레인을 기지에서 자르고 스펙큘럼을 제거합니다. 그런 다음 국소 항생제 연고를 눈에 놓습니다.

우수한 홍엽 동맥 주입의 palpebral 분배의 경우, 퇴적을 확인한 후, 전 궤도 및 두피 영역에서 모피를 전단하고 탈필 크림을 사용하여 잔류 털을 완전히 제거합니다. 2 분 후 크림을 제거하고 적절한 눈에 1 % 방부제무료 리도카인의 25 마이크로 리터를 적용합니다. 상부 눈꺼풀에 에버트하고 선의 팔페브랄 부분을 표시하는 프로튜브랜스가 보일 때까지 후방 궤도 림에 부드러운 내측 압력을 가한다.

27 게이지 바늘이 장착된 미세톱 집게와 결핵 주사기를 사용하여, 직접 조직에 바늘 2 밀리미터를 진행 하는 변전 하는 방법을 통해 동맥을 관통 하 고 주입 후 Concanavalin A 또는 Con A.의 500 마이크로 그램 솔루션의 100 마이크로 리터를 주입, 궤도 우수한 lacrimal 동맥 후부에서 돌출 하는 궤도 우수한 lacrimal 동맥을 일으킬 세계에 내측 압력을 적용. 닫힌 곡선 포셉을 사용하여 두개골의 뼈 개구부가 느껴질 때까지 부위를 들여쓰기하고 바늘 배치의 랜드마크역할을 하기 위해 피부에 들여쓰기를 남기기 위해 집게로 더 겸손한 압력을 가합니다. 27 게이지 바늘을 장착한 결핵 주사기를 삽입하여 27게이지 바늘을 피부에 수직으로 삽입하여 절개 부위에 약 1분기 인치 를 삽입하고 주사 부위와 뼈 궤도 림 사이의 중간점을 목표로 하는 측면 캔투스쪽으로 바늘을 후방 및 외부로 리디렉션합니다.

바늘의 허브에 도달하면, 천천히 0.2 밀리리터의 1, 000 마이크로그램 용액을 Con A.For ILG 주사에 대고, 궤도의 하부 전방 부분을 따라 ILG의 우위를 찾기 위해 옆에서 동물을 본다. 외과 마킹 펜을 사용하여 ILG 선의 피상적 인 부분이 zygomatic 뼈의 피상적 인 휴식 장소에서 궤도의 더 많은 내측 위치로 이동하는 피부에 수직 선을 그립니다. 지고성 뼈의 끝을 확인하기 위해 피부의 라인을 가로 질러 수직으로 개최 된 초음파 프로브를 쓸어.

ILG 전환은 선의 이미지가 인식 가능한 내측 테두리없이 둘레의 고초 선에서 하나로 변경되는 곳에서 발생합니다. 이러한 변화가 관찰될 때 피부에 그려진 선에 핸드피스의 상대적 위치는 사출 부위가 될 것이다. 콘 A를 zygomatic 아치 뼈에 내다식하는 지점에서 선에 배치하려면, zygomatic 뼈 초반향 신호의 깊이와 바늘의 알려진 길이를 뺀 1 밀리미터로 원하는 주입 깊이를 설정합니다.

체내에 약 12밀리미터의 바늘을 삽입한 후 체내의 노출바늘길이가 계산된 차이와 같을 때까지 천천히 철수한다. 그런 다음 Con A 용액의 1, 000 마이크로그램의 0.2 밀리리터를 주입하고 초음파에 의한 주사의 성공을 확인합니다. ILG는 특징적인 초반향 공간을 전시해야 합니다.

Con A 주사는 눈물 생성감소를 동반하는 조밀한 림프구성 침투를 특징으로 하는 눈물 선상에서 강한 염증 반응을 유도한다. 눈물 유산부페린 수준은 절각과 결막 상피및 증가된 장미 벵골 염색의 결과로 억압됩니다. 3개의 궤도 LG 조직의 주사는 일관되고 균일한 안구건조증 상태를 생성합니다.

Con A 주사의 한 세트는 10일까지 정상화되는 모든 임상 파라미터와 함께 약 1주일 동안 지속되는 안구건조증 질환을 일으킵니다. 순차콘 A 주사는 약 1주일 간격으로 안구건조증질환의 지속시간을 이에 따라 연장한다. 주사의 대략 5 세트 후에, 안구 건조 병 상태는 수시로 추가 주사를 위한 필요 없이 영구하게 됩니다.

절기 동맥 구조를 최적으로 지역화하는 것이 가장 중요합니다. 두개골 해부학에 친숙하고 초음파를 이용한 기술과 함께 모피제거를 포함한 미세한 디테일에 대한 주의가 모두 결과를 향상시킨다. 이 간단한 기술은 날카로운 사용을 필요로하기 때문에, 조사는 바늘 스틱 부상을 방지하기 위해 적절한 예방 조치를 취해야한다.