쥐에서 중간 신경 재생을 평가하는 기능적 및 생리적 방법

쥐의 중앙 신경을 사용 하 여, 그것은 적절 하 게 복제 할 수 있습니다., 인간에서 말초 신경 병 변. 임상적으로, 이 병변의 대부분은 이 실험 모형의 사용에 지원을 빌려주는 상부 사지에서 생깁니다. 이 논문에서 우리는 쥐에 있는 중앙신경 병변의 다른 모형을 생성하는 방법을 보여줍니다.

또한, 우리는 몇 가지 테스트를 사용하여이 신경의 기능적 회복을 평가하는 방법을 설명 합니다. 중앙값 신경은 척수 세그먼트 C6에서 T1로 시작됩니다. 중앙분리성 신경은 녹색으로 강조 표시됩니다. 이 비디오에서는 수술 용 커튼이 데모 목적으로 사용되지 않습니다.

수술을 수행하는 동안 커튼을 포함하십시오. 오른팔과 가슴 부위의 내측 측면의 피부는 깊은 근막 평면까지 절개됩니다. 출혈 혈관은 신중하게 결찰됩니다.

다음으로, 눈동막은 조심스럽게 절단되어 팔의 내측 측면에서 혈관 및 신경 구조를 손상시키지 않도록주의합니다. 한 쌍의 가위가 무딘 아래에 열리며, 가슴 의 말단 삽입은 이 근육을 애타게하기 위해, 근본적인 축실 동맥 및 정맥에서 벗어나 브라키아 신경질의 말단 가지에서 멀리 떨어져 있습니다. 가슴 주요 근육의 삽입, 다음 전기 소터로 분할.

가슴 경 경미한 근육 은 다음 노출 하 고 잘라. 내측 신경은 그 때 경쟁 혈관에서 그리고 팔꿈치 지역까지 울나르 신경에서 둔하게 해부됩니다. 이제 브라척 신경총의 다른 단부 가지, 즉 중앙값, 울나르, 방사형, 액실리 및 무분비 증 신경을 관찰할 수 있습니다.

중앙분리성 신경이 노출되고 격리된 다른 기계적 부상을 유도할 수 있다. 샴 그룹은 중앙신경만 해부하여 생성할 수 있습니다. 호감 군에서 중앙분리신경은 15초 동안 미세 수술 포셉을 사용하여 압축됩니다.

절제 그룹은 중앙신경의 10mm 길이 세그먼트를 제거하여 발생합니다. 중앙신경의 근위 그루터기는 8-0으로 합산됩니다. 축 축 성장을 방지 하기 위해 나일론 봉합사. 대안적으로, 절제된 세그먼트를 180도 회전시키고 자가 신경 이식으로 사용할 수 있다.

이 경우, 미디어 신경의 섹션의 근위 및 말단 그루터기는 10-0 나일론 바늘을 사용하여 신경 이식에 봉합된다. 물리 치료는 말초 신경 부상에서 회복 하는 환자의 치료의 표준의 일부입니다. 쥐에 수술 후 물리 치료를 제공 하는 여러 전략이 있다, 중앙 신경 부상에 제출 된.

젊은 쥐를 선택하고 수술 전에 물리 치료 기구와 접촉 할 수 있도록하는 것이 중요합니다. 이를 통해 운동 설정을 쉽고 빠르게 적응할 수 있습니다. 또한, 물리 치료 기구는 쥐가 어느 정도의 자유를 가질 수 있게 하고 이상적으로 앞발로 미세한 움직임을 수행 할 수 있게해야합니다.

물리 치료를 수행하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 예를 들어 개별 구를 사용할 수 있습니다. 쥐를 구 안에 넣은 다음 장애물이 거의 없는 방에 놓습니다.

반 시간 동안 방을 탐험하자. 하루에 한 번 이 작업을 수행합니다. 쥐는 개별 케이지에 보관할 수도 있습니다.

통합 된 러닝 휠. 이런 식으로, 쥐는 운동할 수 있습니다., 그들은 원하는 대로 그리고 그들은 그것을 원하는 때마다. 또 다른 가능성은 수용, 큰 케이지에 그룹으로 쥐.

가죽, 로프, 러닝 휠 및 기타 환경 농축 요소를 사용하여 케이지를 개인화하십시오. 이들은 그들의 자연적인 탐구 적인 행동에 동의하 고 쥐친숙 얻을 수 있도록 운동의 충분 한 자유를 허용, 기능 테스트에서 존재 하는 요소의 일부와 함께. 기능 성 테스트를 수행하기 전에, 당신이 긍정적 인 보강으로 사용하기로 선택한 음식 취급쥐를 숙지.

쥐가 자연적으로 더 활성화될 때 저녁에 시험을 실시하십시오. 파악 테스트로 시작합니다. 격자에 쥐를 놓고 꼬리로 들어 올려 그리드를 잡습니다.

쥐가 격자를 잡을 수있을 때, 두 앞포와 유사한 강도. 그것은 중앙 신경이 작동하고 파악 시험이 양성으로 여겨진다는 것을 의미합니다. 부상당한 발로 그리드를 잡을 수 없는 경우 파악 테스트는 부정적인 것으로 간주됩니다.

핀 찌르기 테스트를 위해, 플랫폼에 쥐를 배치하고 탐색 및 주요 그루밍 활동이 가라 앉을 때까지 몇 분 기다립니다. 쥐가 고정되어 있고 앞발에 서있을 때 시작합니다. 거울의 도움으로 폰 프레이 머리를 메쉬를 통해 삽입하여 앞포의 팔마 측면을 찌르세요.

각 포파에서 이 것을 다섯 번 반복하면 각 평가 후 몇 초 동안 기다리게 됩니다. 쥐가 필라멘트에서 발을 천천히 제거하고 쥐가 자극에 빠르게 반응하고 발을 제거하거나 발을 핥으면 다음과 같이 인출 응답을 점수, 0 철수 응답이 없습니다. 사다리 의 바닥에 쥐를 놓고 쥐의 꼬리를 부드럽게 만지지 않습니다.

쥐가 걷기 시작하면 타이머를 시작하고 주나가 상자 입구를 가로 질러 지나면 중지하십시오. 시간을 기록하고 테스트를 세 번 반복합니다. 밧줄 바닥에 쥐를 넣고 부드럽게 꼬리를 터치하여 그것을 등반하도록 설득.

동물이 하지 않는 경우 유효한 테스트를 고려, 작업 하는 동안 주저 또는 등반을 중지. 동물이 등반을 시작하고 쥐의 주나가 플랫폼입구를 가로지르는 순간을 멈추면 타이머를 시작합니다. 쥐에게 수행 한 후 간식을 주고, 작업을 올바르게 하고 그것을 허용, 그것을 반복하기 전에 휴식의 몇 분.

복도 바닥에 그래프 용지 를 놓습니다. 그런 다음 꼬리로 쥐를 잡고 메틸렌 블루에 함침 된 그림 브러시를 잡게하십시오. 복도 입구에 놓아 상자 안으로 걸어들어보세요.

복도 바닥에서 그래프 용지를 제거하고 두 앞포의 좋은 대표적인 인상을 얻을 때까지 테스트를 반복합니다. 획득한 인쇄물에서 연속 포파의 좋은 프린트가 있는 인쇄물을 선택하고 다음 매개 변수를 측정합니다. 인쇄 길이, 손가락 스프레드, 중간 손가락 확산 및 자세 계수.

마지막으로 두 개의 연속 인쇄의 두 번째 손가락 사이의 거리를 측정, 보폭 길이. 열화상 평가를 수행하려면 스폰지에 이중 면 접착제 조각을 놓습니다. 쥐를 위에 놓고 앞발을 그림대로 붙입니다.

쥐의 발을 처리에서 열 교환을 소멸하는 분 기다립니다. 쥐에서 90도, 약 30센티미터 떨어진 각도로 카메라를 잡아보세요. 두 번의 인수를 합니다.

첫째, 전신 써모그램은 카메라를 쥐의 상체에 근사화하여 두 번째 를 만듭니다. 획득 된 써모그램에서, 우리는 앞발의 팔마 영역에 해당하는 관심 영역을 찾을 수 있습니다. 두 발 모두에서 해당 영역의 평균, 최소 및 최대 온도 값을 측정하고 온도 차이를 계산합니다.

다음 평가를 수행하려면 앞에서 설명한 대로 양쪽에 중앙신경을 노출한다. 쥐를 등에 놓고 피부에 표시된 전극을 넣어 시작합니다. 쥐의 허벅지와 자극 및 기록 전극의 접지 전극이 왼쪽 상단 사지에 있습니다.

레코딩 전극을 조절, 플렉서 디지오럼 승리미 근육 배, 및 자극 전극에 대략 중앙 신경에 넣습니다. 10 밀리볼트의 자극 진폭으로 인수를 시작하고 점차적으로 두 볼트에 도달 할 때까지 10 밀리볼트 단계에서 증가합니다. 획득 하는 동안, 첫 번째 눈에 보이는 손가락 굴곡에 대 한 자극 진폭을 등록.

이것이 모터 자극 임계값입니다. 최소 자극 진폭, 화합물 근육 행동 잠재력을 얻기 위해 필요한, 신경 자극 임계값을 C.M.A.P.is. 마지막으로, 대표적인 C.M.A.P를 선택하여 수프라막아자극에 대응하여 다음 매개변수, 대기 시간, 진폭 및 지속 시간을 측정합니다.

플렉시온 강도 평가를 수행하기 위해 먼저 각 포파의 팔마 영역을 통해 5~6개의 실크 봉합사 루프를 통과하여 5cm 길이로 둡니다. 쥐를 등에 배치합니다. 왼쪽 포완으로 시작하여 동력계 후크에 봉합사 라인을 연결하고 후크에 너무 많은 부담을 주지 않고 앞포를 동력계와 정렬합니다.

자극 전극을 잡고 중앙 신경에서 대략. 자극 진폭을 1.5볼트로 조정하고 30초 동안 즉각적인 힘을 기록합니다. 획득된 플롯에서 최대, 최소 및 평균 힘 값과 곡선 아래 영역을 분석합니다.

중앙 신경에 의해 내면화되는 플렉서 카피 방변은 양자 간 제거되고 정밀한 규모로 무게가 됩니다. 일부 대표 결과에 관해서는, 파악 테스트에서, 긍정적 인 반응을 가진 쥐의 비율은 샴 그룹에서 가장 높으며 신경 이식 그룹에서 쥐에서 시간이 지남에 따라 점차적으로 증가합니다. 핀 찌르기 테스트 결과는 접목 또는 절제 그룹의 것과 비교하여 샴 그룹에서 더 높습니다.

래더 러닝 테스트에서 쥐의 속도는 쥐가 내측 실험실 병변에 제출한 것보다 샴 그룹에서 가장 높습니다. 라이터 중, 사다리를 실행하는 시간은 시간이 지남에 따라 중앙 신경 회복을 paring 하는 경향이 있다. 사다리 달리기 테스트에서 관찰되는 것과 유사하게, 쥐가 밧줄을 오르는 데 걸리는 시간은 중앙 신경이 부상하는 그룹에 비해 샴 그룹에서 열등합니다.

쥐 속도, 이 테스트에서, 쥐에 증가, 중앙 신경 복구 할 수 있는. 이 바 그래프에 나타난 바와 같이, 걷는 쥐의 분석은 발 인쇄의 형태에 변화를 표시하는 경향이있다. 이러한 변화는 종종 더 발음, 세그먼트 신경 병변보다 부상 분쇄에서.

이 그래프는 수술 후 처음 30일 동안 의전도 사이의 온도 차이를 검색하는 유용한 도구인 것으로 보인다. 그 온도 차이는 더 눈에 띄는, 더 심각 하 게 부상 중앙 신경쥐에서, 흥분 그룹에서 그들과 같은. 쥐의 굴곡 강도는 신경 회복정도와 직접적인 상관 관계가 있습니다.

회복이 최대일 때 정상에 가장 가깝고, 이 막대 그래프에서 볼 수 있듯이, 흥분과 신경 이식 군의 두 발 모두에서 강도를 비교합니다. 전기 신경 진도에 관하여, 각종 패턴은 관찰될 수 있습니다. 일반적인 C.M.A.P.잠재력은 샴 그룹의 쥐의 전형입니다.

Polyphasic C.M.A.P.is 연관되는 동안, 중앙 분리 신경의 병변의 가변 정도와, 호감및 신경 이식 단에서 일어나는 것과 같이. 절제 군에서는 C.M.A.P.굴곡 카피 방디의 파도와 형태가 중앙신경 회복에 의존하지 않는다. 이 두 이미지는 샴과 절제 그룹에서 이러한 근육을 보여줍니다.

이 논문에 나타난 바와 같이, 쥐 중앙분리기 신경은 말초 신경 병변 및 수리의 편리한 모델이다. 모터 및 감각 복구를 평가하기 위해 여러 표준화된 전략을 사용할 수 있습니다. 이들 중 대부분은 비 침습적이며 매일 평가를 허용합니다.

마지막으로, 실험 물리 치료 설정은, 인간 종에 결과의 규정을 용이하게, 임상 맥락에서 회복을 시뮬레이션 할 수 있습니다.