Name: 쥐와 토끼 동맥류 모형에 있는 동맥류 관류 그리고 부모 동맥 Patency의 평가를 위한 형광 혈관 조영술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 8 s
Description: 학습하세요 형광 혈관 조영술(FVA)을 활용하여 쥐와 토끼 동맥류 모형에서 실시간 혈류를 시각화하고 동맥류 관류 및 부모 동맥 개통성을 평가하는 방법을. 이 비용 효율적인 기술은 수술 중 혈류 상태를 정확히 확인하여 혈관 생물학 연구에 활용됩니다.

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이 연구는 스위스 칸톤스피탈 아라우의 연구 보조금에 의해 부분적으로 지원되었다.

설치류는 동물 보호 시설에 보관되었고 실험은 스위스 베른 대학 (BE 108/16)과 (BE65/16)의 동물 복지위원회에 의해 검토되고 승인되었습니다. 모든 동물은 음식과 물에 무료로 접근 할 수있는 표준 실험실 식단에서 유지되었습니다. 모든 동물 실험은 3Rs(교체, 감소 및 정제)를 신중하게 고려하여 수행하였다. 10마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼와 48마리의 수컷 위스타 쥐가 포함되었다. 도착 지침은 엄격하게8을 따랐다.
참고: 20개의 측벽 동맥류는 기증자 토끼의 경동맥에 탈세포화된 동맥 혈관 주머니를 봉합하여 10마리의 토끼에서 만들어졌습니다. 또한, 48마리의 미세수술측벽 동맥류가4,9전에 기재된 바와 같이 48마리의 쥐에서 생성되었다. 이미징 절차 및 거시적 분석은 동맥류 생성 후 4주 후에 수행되었습니다.
1. 플루오레세인 비디오 혈관 조영술에 필요한 재료의 준비
<ol><li>여기 필터로 작동하는 파란색 밴드패스 필터(재료 표참조)를 눌러 손전등을 수정합니다. 그러면 토치는 청색광만 방출해야 합니다. 여과되지 않은 빛이 누출되지 않도록 검은 색 테이프를 사용하십시오.</li>
	<li>녹색 밴드 패스 필터 (예 : 현미경에 부착)를 장착하여 방출 광 필터로 작동합니다. 이제 녹색 표시등만 통과할 수 있습니다.</li>
</ol>2. 작업장 및 자재 준비
<ol><li>소독제로 작업 공간을 소독합니다.</li>
	<li>오염을 방지하기 위해 멸균 커튼으로 테이블을 덮습니다.</li>
	<li>수술시 멸균 기구를 사용하십시오.</li>
</ol>3. 수술을위한 동물의 준비
<ol><li>동물의 무게.</li>
	<li>마취를 유도하고 체중에 따라 복용량을 조정하십시오.<ol>
<li>토끼의경우 균형 잡힌 마취를 시작하십시오. 주사 중 한 손으로 눈을 보호하여 공포 반응을 줄입니다. 동물을 진정시키는 데 도움이 시트로 케이지를 덮는다.</li>
		<li>주입 전에 4 % 이소플루란과 96 % 산소로 가스실에서 쥐를 마취.</li>
	</ol>
</li>
	<li>마취의 깊이를 모니터링합니다. 발가락 사이를 꼬집어 동물이 잠들어 있는지 확인합니다.<ol>
<li>토끼를 등에 대고 재배치합니다. 그들은 반응해서는 안됩니다.</li>
		<li>쥐의경우 꼬리를 꼬집고 반응이 관찰되지 않도록하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>설치류의 눈에 연고를 바르면 건조를 방지할 수 있습니다. 쥐의 혀를 당겨 삼키는 기회를 피하십시오.</li>
	<li>마취의 보존으로 시작합니다.<ol>
<li>토끼의경우, 카테터화 (주입 포트가있는 22 G 차폐 IV 카테터, 재료 표참조) 귀 정맥. 균형 잡힌 마취를 유지하십시오. 3방향 스톱콕을 사용하여 여러 번동시 주사를 할 수 있습니다.</li>
		<li>쥐의경우 50 mg /kg 의 케타민 염산염과 0.5 mg / kg의 염산염염을 복강 내로 주입하십시오. 수술 중 유해한 발가락 핀치로 마취를 모니터링하십시오. 반응의 경우 추가 마취를 투여하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>동물을 스파인 위치에 테이프로 부착하고 절개 위치를 면밀히 면도합니다. 베타세닉으로 부위를 소독하십시오.<ol>
<li>토끼의경우, 특히 흉골 레도 마스타스 당 근육 주위에 목을 소독하십시오.</li>
		<li>쥐의경우 방광에서 트랜스버 결장으로 영역을 소독하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>수술 내내 마스크를 통해 산소를 관리하고 가열 패드로 체온을 유지하십시오.</li>
</ol>4. 동맥의 준비
<ol><li>최상의 결과를 얻으려면 선택한 혈관을 주변 조직9,10에서철저히 해부하십시오.<ol>
<li>쥐의경우, 꼬리 정맥을 식별 (덜 침습, 바람직하게는 생존 동물에 사용) 또는 불소 주입대퇴정맥을 해부4,11. 참고 : 토끼의경우 귀 정맥이 이미 마취에 사용되고 있기 때문에 플루오레세인 주사에는 혈관의 추가 해부가 필요하지 않습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>주변 조직과의 대비를 높이기 위해 선택한 용기 아래에 흰색 패드를 배치합니다.</li>
	<li>해부된 동맥의 현미경에 장착된 카메라를 초점.</li>
</ol>5. 형광 화상 혈관 조영술
<ol><li>빛의 노출로부터 보호하기 위해 플루오레세인 나트륨 (100 mg / mL, 재료 표참조)으로 채워진 5 mL 주사기를 알루미늄 호일로 덮습니다. 불을 끄고 (가능한 한) 불소 나트륨을 정맥 내로 주입하십시오. 광표백을 방지하기 위해 어둠 속에서 주입하십시오.<ol>
<li>토끼의경우, 카테터화 된 귀 정맥에 3 방향 스톱콕을 통해 0.3 mL / kg 플루오레세인 나트륨을 주입하십시오.</li>
		<li>쥐의경우 카테터 또는 25G 바늘을 통해 대퇴 정맥에 0.4 mL / kg 플루오레세인 나트륨을 주입하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>바늘이나 카테터를 0.5 mL 식염수로 씻어 모든 염료가 주입되도록 하십시오.</li>
	<li>수정된 손전등으로 수술장을 비춥시합니다.</li>
	<li>수정된 카메라로 촬영을 시작합니다. 혈류는 주사 후 몇 초후에 볼 수 있어야합니다 (그림 1). 참고: 여기서는 프레임 속도 = 50프레임/s, 초점 거리 = 70mm 및 F3.4를 사용했습니다.</li>
</ol>6. 거시적 분석
<ol><li>동맥류 및 모동맥 복합체를 절제하고, 미세가위로 모동맥을 열어 개통하여 개통을 거시적으로 평가하고, 모동맥과 음역의 오리피스의 내강을 평가한다(도 1,2)9. 동맥류의 크기를 측정합니다. 동맥류-부모-동맥 복합체는 추가 분석을 위해 저장될 수 있습니다 (예를 들면, 학문).</li>
</ol>

<ol><li>Kakucs, C., Florian, I. A., Ungureanu, G., Florian, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescein+Angiography+in+Intracranial+Aneurysm+Surgery%3A+A+Helpful+Method+to+Evaluate+the+Security+of+Clipping+and+Observe+Blood+Flow%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Fluorescein Angiography in Intracranial Aneurysm Surgery: A Helpful Method to Evaluate the Security of Clipping and Observe Blood Flow.</a> World Neurosurgery. 105, 406-411 (2017).</li>
<li>Ajiboye, N., Chalouhi, N., Starke, R. M., Zanaty, M., Bell, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unruptured+Cerebral+Aneurysms%3A+Evaluation+and+Management%5BTitle%5D)+AND+%22ScientificWorldJournal%22%5BJournal%5D)">Unruptured Cerebral Aneurysms: Evaluation and Management.</a> ScientificWorldJournal. 2015, 954954(2015).</li>
<li>Suzuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirmation+of+blood+flow+in+perforating+arteries+using+fluorescein+cerebral+angiography+during+aneurysm+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Confirmation of blood flow in perforating arteries using fluorescein cerebral angiography during aneurysm surgery.</a> Journal of Neurosurgery. 107 (1), 68-73 (2007).</li>
<li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+Video+Angiography+for+Evaluation+of+Dynamic+Perfusion+Status+in+an+Aneurysm+Preclinical+Experimental+Setting%5BTitle%5D)+AND+%22Operative+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Fluorescence Video Angiography for Evaluation of Dynamic Perfusion Status in an Aneurysm Preclinical Experimental Setting.</a> Operative Neurosurgery. , Hagerstown. (2019).</li>
<li>Raabe, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+evaluation+of+surgical+microscope-integrated+intraoperative+near-infrared+indocyanine+green+videoangiography+during+aneurysm+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Prospective evaluation of surgical microscope-integrated intraoperative near-infrared indocyanine green videoangiography during aneurysm surgery.</a> Journal of Neurosurgery. 103 (6), 982-989 (2005).</li>
<li>Riva, M., Amin-Hanjani, S., Giussani, C., De Witte, O., Bruneau, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indocyanine+Green+Videoangiography+in+Aneurysm+Surgery%3A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Indocyanine Green Videoangiography in Aneurysm Surgery: Systematic Review and Meta-Analysis.</a> Neurosurgery. , (2017).</li>
<li>Kuroda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+injection+fluorescein+videoangiography+in+aneurysm+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial injection fluorescein videoangiography in aneurysm surgery.</a> Neurosurgery. 72, 2 Suppl Operative 141-150 (2013).</li>
<li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Bioscience+Research+Reporting%3A+The+ARRIVE+Guidelines+for+Reporting+Animal+Research%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biology%22%5BJournal%5D)">Improving Bioscience Research Reporting: The ARRIVE Guidelines for Reporting Animal Research.</a> PLOS Biology. 8 (6), 1000412(2010).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Helsinki+rat+microsurgical+sidewall+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e51071(2014).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+bilobular%2C+bisaccular%2C+and+broad-neck+microsurgical+aneurysm+formation+in+the+rabbit+bifurcation+model+for+the+study+of+upcoming+endovascular+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques.</a> American Journal of Neuroradiology. 32 (4), 772-777 (2011).</li>
<li>Shurey, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rat+model+in+microsurgery+education%3A+classical+exercises+and+new+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">The rat model in microsurgery education: classical exercises and new horizons.</a> Archives of Plastic Surgery. 41 (3), 201-208 (2014).</li>
<li>Foster, S. D., Lyons, M. S., Runyan, C. M., Otten, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mimic+of+soft+tissue+infection%3A+intra-arterial+injection+drug+use+producing+hand+swelling+and+digital+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">A mimic of soft tissue infection: intra-arterial injection drug use producing hand swelling and digital ischemia.</a> World Journal of Emergency Medicine. 6 (3), 233-236 (2015).</li>
<li>Flower, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+technique+for+indocyanine+green+and+sodium+fluorescein+dye+angiography+of+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Injection technique for indocyanine green and sodium fluorescein dye angiography of the eye.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 12 (12), 881-895 (1973).</li>
<li>Yoshioka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantage+of+microscope+integrated+for+both+indocyanine+green+and+fluorescein+videoangiography+on+aneurysmal+surgery%3A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Neurologia+medico-chirurgica+%28Tokyo%29%22%5BJournal%5D)">Advantage of microscope integrated for both indocyanine green and fluorescein videoangiography on aneurysmal surgery: case report.</a> Neurologia medico-chirurgica (Tokyo). 54 (3), 192-195 (2014).</li>
<li>Ichikawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+and+Clinical+Experience+with+a+Simple+Device+for+Performing+Intraoperative+Fluorescein+Fluorescence+Cerebral+Angiography%3A+Technical+Notes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurologia+medico-chirurgica%22%5BJournal%5D)">Development of and Clinical Experience with a Simple Device for Performing Intraoperative Fluorescein Fluorescence Cerebral Angiography: Technical Notes.</a> Neurologia medico-chirurgica. 56 (3), 141-149 (2016).</li>
<li>Alander, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+indocyanine+green+fluorescent+imaging+in+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Biomedical+Imaging%22%5BJournal%5D)">A review of indocyanine green fluorescent imaging in surgery.</a> International Journal of Biomedical Imaging. 2012, 940585(2012).</li>
<li>Lane, B., Bohnstedt, B. N., Cohen-Gadol, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prospective+comparative+study+of+microscope-integrated+intraoperative+fluorescein+and+indocyanine+videoangiography+for+clip+ligation+of+complex+cerebral+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A prospective comparative study of microscope-integrated intraoperative fluorescein and indocyanine videoangiography for clip ligation of complex cerebral aneurysms.</a> Journal of Neurosurgery. 122 (3), 618-626 (2015).</li>
<li>Blair, N. P., Evans, M. A., Lesar, T. S., Zeimer, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescein+and+fluorescein+glucuronide+pharmacokinetics+after+intravenous+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Fluorescein and fluorescein glucuronide pharmacokinetics after intravenous injection.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 27 (7), 1107-1114 (1986).</li>
<li>Hillmann, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+optical+imaging+of+physiological+responses+to+photostimulation+in+human+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">In vivo optical imaging of physiological responses to photostimulation in human photoreceptors.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (46), 13138-13143 (2016).</li>
<li>Golby, A. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGolby%2C+AJ+%22Image-Guided+Neurosurgery%22">Image-Guided Neurosurgery</a>. , Elsevier Science. (2015).</li>
</ol>

모든 저자는 이해 상충을 확인하지 않습니다.

FVA는 설치류의 혈관을 검사하는 유망하고 단순한 방법이며 상용 장치 및 기성 장비로 수행 할 수 있습니다. FVA는 혈관이 먼저 적절한 해부를 필요로하기 때문에 혈관 무결성의 수술 중 평가가 필요한 수술 중에 구현 될 수 있습니다.
저자는 감염, 허혈 및 구획 증후군12와같은 부주의한 사건의 더 낮은 리스크 때문에 동맥 주입에 정맥 주입을 선호했습니다. 정맥 주사는 신뢰할 수있는, 공간 제한, 고농축 염색, 작은 염료 투여량13,14가필요합니다. 또한 정맥 주사는 플루오레세인14,15의빠른 클리어런스를 허용합니다. 다른 방법은 선택한 동맥에 직접 조영제를 주입하는 것입니다. 이 방법은 조사자가 혈액과 플루오레세인으로 수술 분야를...

완전한 동맥류 말살 및 부모 동맥 무결성의 증거는 동맥류 수술에서 가장 중요합니다. 도플러 초음파 검사, 기존의 대뇌 혈관 조영술 (DSA), 컴퓨터 단층 조영술 (CTA) 또는 자기 공명 혈관 조영술 (MRA) 1과 같은 부모 동맥개통 및 동맥류 폐색을 확인하는 몇 가지 옵션이있습니다. 2. 그러나, 이들은 종종 실험실 설정에서 사용할 수없는 비용이 많이 들고 시간이 많이 걸리는 방법입니다. 더욱이, 그(것)들은 운동 유물을 피하기 위하여 실험동물의 추가 적인 감미료를 위한 방사선 노출 또는 필요와 같은 관련 있는 부작용이 있을 수 있습니다.
새로운 혈관 내 장치의 수가 증가함에 따라 이러한 장치의 전임상 테스트가 연속적으로 필요합니다. 그러나, 이 연구 결과는 수시로 사후 분석 (예를 들면, 거시 병리학 및 조직학)에 의존하고 동적 관류에 대한 정보가 부족합니다. 또한, 연구원에 대 한 실험 적인 수술 절차 동안 즉각적이 고 신뢰할 수 있는 정보를 얻을 하는 것이 중요 할 수 있습니다. 형광 혈관 조영법은 비용 효율적이고 시각화 기술을 수행하기쉬운 1,3,4.
이와 같이, 인도시아닌 녹색 (ICG) 비디오 혈관 조영술은 임상 신경 외과적 절차에 자주 사용되며 광범위하게 5,6을연구하고있다. 플루오레세인 비디오 혈관 조영술(FVA)은 인간 시력의 파장 범위 내에 있는 형광 신호를 생성하는 추가적인 이점을 가진 대체 기술이며, 따라서 확장 스펙트럼 적외선 카메라없이 육안으로 볼 수 있습니다. 7. Fluorescein 비디오 혈관 조영술은 임상 뇌혈관 수술에 덜 자주 사용되며실험 환경에서 FVA에 대한 보고는 1,4가부족합니다.
이 보고서의 목적은 쥐와 토끼 전임상 뇌혈관 연구에서 FVA의 타당성 및 적용 범위를 입증하는 것입니다.

<table><tbody><tr><td>토끼용</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>알루미늄 호일</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>동물 면도기</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>블랙 테이프</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>블루 필터</td><td>Thorlabs MF475-35</td><td></td><td></td></tr><tr><td>바디 웜 플레이트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>카메라</td><td>Sony NEX-5R</td><td></td><td></td></tr><tr><td>카테터</td><td>22G Vasofix 안전</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Disinfictant</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluorescein 나트륨</td><td>Fluorescein Faure 10%</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Glas 플레이트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>녹색 필터</td><td>Thorlabs MF539-43</td><td></td><td></td></tr><tr><td>요실금 패드</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>주입 펌프</td><td>Perfusor Secura</td><td></td><td></td></tr><tr><td>케타민 염산염</td><td></td><td></td><td>모든 일반 제품</td></tr><tr><td>바늘</td><td>25G</td><td></td><td></td></tr><tr><td>산소</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>링거 용액</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>멸균 시트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>수술</td><td></td><td></td>기구 <td>마이크로 집게, 마이크로 가위, 무딘 수술 가위</td></tr><tr><td>외과 현미경</td><td>OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>주사기 2ml, 5ml, 50ml</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>테이프</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 방향 스톱 콕</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>토치 라이트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazin</td><td></td><td></td><td>모든 일반 제품</td></tr> <tr><td> 쥐 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>알루미늄 호일</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>동물 면도기</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>블랙 테이프</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>블루 필터</td><td>Thorlabs MF475-35</td><td></td><td></td></tr><tr><td>바디 웜 플레이트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>카메라</td><td>Sony NEX-5R</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Disinfictant</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>플루오레세인 나트륨</td><td>플루오레세인 포레 10%</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>그린 필터</td><td>Thorlabs MF539-43</td><td></td><td></td></tr><tr><td>요실금 패드</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>이소플루란</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>케타민 염산염</td><td></td><td></td><td>모든 일반 제품</td></tr><tr><td>메데토미딘 염산염</td><td></td><td></td><td>모든 일반 제품</td></tr><tr><td>바늘</td><td>25G</td><td></td><td></td></tr><tr><td>산소</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>판</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ringer's Solution</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>멸균 시트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>수술 기구</td><td></td><td></td><td>마이크로 집게, 마이크로 가위, 무딘 수술 가위</td></tr><tr><td>수술 현미경</td><td>OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, 독일</td><td></td><td></td></tr><tr><td>주사기 2ml, 5ml</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>테이프</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>토치 라이트</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

쥐와 토끼 동맥류 모형에 있는 동맥류 관류 그리고 부모 동맥 patency의 평가를 위한 형광 혈관 조영술

Fluorescence Angiography for Evaluation of Aneurysm Perfusion and Parent Artery Patency in Rat and Rabbit Aneurysm Models

뇌 동맥류 치료는 완전한 폐색을 달성뿐만 아니라 부모 동맥의 혈류를 보존에 초점을 맞추고있습니다. 플루오레세인 나트륨과 인도시아닌 녹색은 각각 혈류 및 혈관 관류 상태를 관찰하는 데 사용된다. 이 연구의 목적은 토끼와 쥐의 측벽 동맥류 유도 후 실시간 혈류, 혈관 관류 상태 및 동맥류의 폐색을 확인하고 이러한 종의 절차를 검증하기 위해 FVA를 적용하는 것입니다.
20 개의 측벽 동맥류는 기증자 토끼의 경동맥에 탈세포화 된 동맥 혈관 주머니를 봉합하여 10 마리의 토끼에서 만들어졌습니다. 또한, 48 마리의 미세 수술 측벽 동맥류가 48 마리의 쥐에서 만들어졌습니다. 생성 후 한 달에 후속 동안, 부모 동맥류 복합체는 해부되었고 FVA는 토끼의 귀 정맥 카테터 삽입과 쥐의 대퇴 정맥 캐터 삽입을 통해 정맥 플루오레세인 (10 %, 1 mL) 주사를 사용하여 수행되었습니다. 동맥류를 수확한 후, 가부장제가 거시적으로 평가되었습니다.
거시적으로, 토끼에 있는 16동맥류 중 14는 완전히 가려진 루미나에 있는 잔여 부모 동맥 관류가 없음을, 그러나 11 (79%) 표시했습니다 FVA에 의해 감지되었습니다. 4개의 동맥류는 기술적인 문제로 인해 제외되었습니다. 쥐에서, 잔류 동맥류 관류는 48건 중 25건에서 거시적으로 관찰되었다. 관류의 거시적 증거가없는 23 의 FVA는 22 동맥류 (96 %)의 발생률을 확인했습니다. FVA와 관련 된 불리 한 이벤트 는 없었다. 플루오레세인은 쉽게 적용할 수 있으며 특별한 장비가 필요하지 않습니다. 토끼와 쥐와 실험 환경에서 부모 동맥 무결성 및 동맥류 개통 /잔류 관류를 평가하기위한 안전하고 매우 효과적인 방법입니다. FVA는 조영제로 플루오레세신을 사용하여 동맥류와 기본 혈관의 개통을 제어하는 데 효과적인 것으로 보이며 심지어 수술을 우회하도록 조정할 수도 있습니다.

수술 중 심박수와 혈압을 모니터링했습니다. 평균 심박수는 토끼에서 193/min, 쥐의 경우 196/min이었습니다. 토끼의 체중은 3.05-4.18 kg이고 쥐의 무게는 335-690g이었습니다.
우리는 10 마리의 토끼 중 8 개에서 FVA를 수행 할 수있었습니다(그림1). 두 마리 토끼의 동맥류 검사 4회는 기술적인 문제로 인해 카메라로 기록되지 않았습니다. 쥐에 있는 FVA를 관련시키는 아무 기술적인 어려움도 보고되지 않았습니다. 그러나, FVA는 대퇴 정맥을 천공하는 어려움 때문에 1개의 쥐에서 수행될 수 없었다.
8마리의 토끼에서 16개의 동맥류 중, 2개의 동맥류는 부모 동맥의 지속적인 관류를 보였다(거시적으로 확인됨) (표 1참조) FVA는 잔류 관류를 가진 5개의 케이스를 확인했습니다. 14 마리의 토끼 동맥류는 거시적으로 잔류 관...

우리는 형광계 형광 비디오 혈관 조영술 (FVA)를 사용하여 쥐와 토끼에 있는 측벽 동맥류의 동맥류 관류 및 혈관 점성을 능률하게 평가하기 위하여 프로토콜을 제시합니다. 92.6 %의 긍정적 인 예측 값으로, 특별한 장비가 필요하지 않은 간단하지만 매우 효과적이고 경제적 인 방법입니다.

쥐와 토끼 동맥류 모형에 있는 동맥류 관류 그리고 부모 동맥 Patency의 평가를 위한 형광 혈관 조영술

Brain aneurysm treatment focuses on achieving complete occlusion, as well as preserving blood flow in the parent artery. Fluorescein sodium and ...

이 방법은 동맥류와 혈관에서 실시간 혈류를 시각화하는 신뢰할 수 있고 쉬운 기술이며 다른 동물 모델에서 사용할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 고가의 장치 나 광범위한 수술을 필요로하지 않고 수술 중 혈류의 시각화를 용이하게한다는 것입니다. 절차를 시작하기 전에 검은 색 테이프를 사용하여 녹색 밴드 패스 필터를 고정하여 손전등에 여기 필터 역할을합니다.손전등만 청색광을 방출하는지 확인합니다. 카메라에 녹색 밴드패스 필터를 장착하여 방출 광 필터로 작동합니다. 이제 녹색 표시등만 통과할 수 있어야 합니다.그런 다음 소독제로 작업 공간을 소독하고 오염을 방지하기 위해 멸균 커튼으로 테이블을 덮습니다. 토끼에서 형광 비디오 혈관 조영술 또는 FVA를 수행하기 위해 마취 된 동물이 척추 위치에 토끼를 배치하기 전에 통증 자극에 반응하지 않는 것을 확인합니다. 흉골 근육 주위목을 면도.해부된 동맥에 카메라를 집중하고 알루미늄 호일을 사용하여 100 밀리그램/밀리리터의 플루오레세인 나트륨을 함유한 5밀리리터 주사기를 덮습니다. 가능한 한 조명을 끄고 0.3 밀리리터/킬로그램의 형광 나트륨을 카테터의 주입 포트에 정맥내로 주입하십시오. 다음으로, 모든 염료를 주입되었는지 확인하기 위해 식염수 용액의 0.5 밀리리터로 주사기를 플러시하십시오.그리고 수정 된 손전등으로 수술장을 즉시 비춥시게합니다. 조명이 켜지자마자 수정된 카메라로 촬영을 시작합니다. 혈류는 주입 후 몇 초 이내에 볼 수 있어야합니다.혈관 조영술 후 혈관의 거시적 분석을 위해 후속 동물의 동맥류 및 부모 동맥 복합체를 절제하거나 임시 클립을 제거 한 후 동맥류 및 /또는 우회의 충진을 관찰하여 흐름의 시각적 확인을 수행합니다. 이 대표적인 연구에서 FVA는 토끼 10개 중 8개에서 수행될 수 있었습니다. 8마리토끼에서 확인된 16개의 동맥류 중 2개의 동맥류는 부모 동맥의 지속적인 관류를 보여주었으며, FVA는 잔류 관류를 가진 5건의 사례를 확인했습니다.14마리토끼 동맥류는 매크로로 잔류를 나타내지 않았으며, 11마리는 FVA를 사용하여 검출되었다. 잔류 관류는 48마리의 쥐 중 23마리에서 거시적으로 관찰되었고, 나머지 25마리의 쥐는 잔류 관류의 거시적 징후를 보이지 않았다. 그 후 FVA를 사용하여 거시적 인 관류가없는 23 동맥류 중 22 개가 확인되었습니다.전체적으로, 27개의 토끼와 쥐 결합케이스 의 25개는 92.6%의 민감도율 92.6%와 94.1%의 특이성 결과로, 이 절차를 시도할 때 가장 중요한 것은 혈관을 제대로 해부하고 형광을 투여하고 시각화할 때 어두운 방에서 일하는 것이다. 이 절차는 눈에 보이는 혈관의 혈류를 평가하기 위해 모든 동물 모델에서 사용할 수 있습니다.

fluorescence-angiography-for-evaluation-aneurysm-perfusion-parent

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

분기점 인간의 대뇌 동맥류을 흉내낸 동맥 분기 동맥류의 microsurgical 생성을위한 최적화된 기술이 설명되어 있습니다. 정맥 주머니는 모두 공통 경동맥 동맥의 인위적으로 만들어진 사실이 분기로 봉합니다. 촉진 microsurgical 기법과 적극적인 수술 anticoagulation와 진통제는 최소화 병적 속도와 높은 동맥 명백 속도로 이어집니다.

토끼 모델에서 Microsurgical 정맥 주머니 아티 - 분기점의 동맥류 : 기술적인 관점

이 동영상은 토끼 모델에서 혈관 관류를 시각화하기 위해 하행 대동맥에 조영제를 주입하여 혈관 조영술을 수행하는 기술을 설명합니다. 이 기술은 막힌 혈관과 회복 중 치료 후의 관류를 이해하는 데 도움이 됩니다.

혈관 조영술을 통한 혈관 관류 평가: 토끼 모델에서 혈관 관류를 시각화하기 위해 하행 대동맥에 조영제를 도입하는 기술

출처: Wanderer, S., et al. 동맥 주머니 : 토끼의 미세 수술 분기 동맥류 모델. J. Vis. Exp. (2020)이 영상은 엘라스타아제 처리된 혈관 주머니를 사용하여 토끼에서 실험적 동맥류 모델을 만드는 방법을 보여줍니다. 오른쪽 CCA의 일부를 절제한 후 파우치에 엘라스타아제를 투여한 다음 왼쪽 CCA를 봉합하여 혈류를 회복시킵니다. 그 결과 약해진 주머니 벽에 가해지는 스트레스는 동맥류 형성을 유발합니다.

엘라스타아제 처리된 혈관 파우치를 사용한 토끼의 실험적 동맥류 모델 개발

쥐의 미세수술 측벽 동맥류는 복부 대동맥에 대한 대동맥 이식편의 종단 간 문합에 의해 생성됩니다. 단계별 지침을 제시하고 성공적인 실험적 낭골 동맥류 생성을 위한 해부학적 및 외과적 세부 사항에 대해 논의합니다.

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델

이 문서는 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에 대동맥 직경 정량화에 대 한 murine 맥 관 구조 perfuse를 방사선 불 투과성 리드 기반 실리콘 고무를 사용 하 여 상세한 방법론을 설명 합니다.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

관상 동맥 유량 예비물(CFR)은, 휴식하는 관상 동맥 혈류에 대한 최대 관상 동맥 혈류의 비율로 정의된다. 우리는 폐쇄성 관상 동맥 질환이없는 상태에서 심혈관 위험 요소를 예측 할 수있는 기회를 제공하는 초음파를 통해 쥐에서 CFR을 평가하기위한 프로토콜을 제시합니다.

쥐의 심근 허혈 재관류 후 관상 동맥 흐름 예비의 평가

두개내 동맥류 치료를 위한 혈관 내 장치를 개발하고 테스트하는 것은 여전히 매우 중요합니다. 오늘날 사용되는 대부분의 동맥류 모델은 동맥 퇴화 벽의 중요한 특성이나 진정한 분기의 혈역학을 놓치고 있습니다. 따라서 우리는 토끼에서 새로운 동맥 파우치 분기 모델을 설계하는 것을 목표로했습니다.

토끼의 동맥 파우치 미세 외과 분기 동맥류 모델

이 프로토콜은 서로 다른 혈역학 (그루터기 및 분기 별자리)을 가진 두 개의 엘라 스타제 소화 동맥류가있는 토끼 모델을 만드는 단계를 설명합니다. 이를 통해 단일 동물 내에서 다양한 혈관 구조 및 혈역학 적 상태를 가진 동맥류에서 새로운 혈관 내 장치를 테스트 할 수 있습니다.

한 토끼에서 서로 다른 혈역학을 가진 두 개의 천골 엘라스타제 소화 동맥류 생성

여기에서는 혈관 내 장치 평가를 위해 토끼의 거대 분기 동맥류를 미세 수술로 만드는 기술을 설명합니다.

혈관 내 장치 평가를 위한 토끼의 거대 분기 동맥류의 미세외과 생성

우리는 periventricular leukomalacia (PVL), periventricular 흰색 물질 병변을 특징으로 조기 유아의 지배 뇌 손상의 마우스 모델을 만들었습니다. 와 / 전신 감염없이 Hypoxia / 국소 빈혈은 PVL의 주요 원인입니다. 일방적 경동맥 내고과 lipopolysaccharide 주입없이 /로 hypoxia 노출 P6 생쥐의 PVL과 같은 병변을 만듭니다.

Periventricular Leukomalacia의 마우스 모델

학습하세요 형광 혈관 조영술(FVA)을 활용하여 쥐와 토끼 동맥류 모형에서 실시간 혈류를 시각화하고 동맥류 관류 및 부모 동맥 개통성을 평가하는 방법을. 이 비용 효율적인 기술은 수술 중 혈류 상태를 정확히 확인하여 혈관 생물학 연구에 활용됩니다.

쥐와 토끼 동맥류 모형에 있는 동맥류 관류 그리고 부모 동맥 Patency의 평가를 위한 형광 혈관 조영술

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