February 7th, 2020
프로토콜은 엘리베이터 수직 모션 및 관람수 회전을 사용하여 설치류의 수동 모션의 자율 및 행동 효과를 평가하기 위해 제공됩니다.
이러한 프로토콜은 자율 신경계 기능을 평가하고 전정 시스템 장애를 드러내기 위해 자율 시스템의 무결성과 정상적인 기능을 확립하는 데 중요합니다. 전정 기능 또는 모터 조정 적자는 자율 시스템에 손상을 신호 할 수 있습니다. 이러한 기술은 자율 기능의 무결성을 드러낼 수 있습니다.
행동 기술은 실험자가 도입한 변이에 취약할 수 있다. 우리는 같은 연구원이 실험 전반에 걸쳐 기술을 수행하고 모든 설치류를 동일하게 치료하는 것이 좋습니다. 엘리베이터 수직 모션 분석을 위해 2개월 된 200~250그램 의 쥐 4개를 22.5 x 20cm 플렉시글래스 박스에 넣고 상자를 안전하게 식히십시오.
상자를 엘리베이터 수직 모션 장치의 엘리베이터 패드에 놓고 가장 낮은 설정에서 장치를 켜면 적응을 합니다. 다음으로 진폭을 중립에서 22센티미터, 22cm 아래로 설정하고 초기 사이클 기간을 5분 동안 2, 500밀리초, 5분 동안 2, 000밀리초, 5분 동안 1, 500밀리초로 장치를 시작합니다. 그런 다음 장치를 2시간 동안 1, 000밀리초로 설정한 후 5분 동안 1, 500밀리초, 5분 동안 2, 000밀리초, 5분 동안 2, 500밀리초의 시간을 사용하여 장치를 역으로 감속합니다.
관람수 회전 절차의 경우, 플렉시글라스 용기를 나무 벤치에 놓고 쥐를 물체의 긴 축이 있는 용기에 넣고 관람선의 수평 회전 막대에 수직으로 배치합니다. 상자를 단단히 닫은 후, 유사한 질량을 가진 두 번째 쥐 세트를 두 번째 플렉시글라스 용기에 넣고, 체내의 긴 축은 관람차 회전 장치의 두 번째 팔에 수평 회전 막대에 수직으로 배치한다. 상자를 단단히 닫은 후 초당 16도에서 시계 방향으로 관람차 회전을 시작하여 초당 120도의 각도 속도에 도달하십시오.
관람차가 최고 속도에 도달하면 초당 48도에서 감속하여 초당 0도에 도달합니다. 1초 동안 일시 정지한 후, 컨테이너가 초당 16도에서 시계 반대 방향으로 계속 회전하여 초당 120도의 각도 속도에 도달한 후 초당 0도에 도달하기 위해 제곱된 48도에서 감속하게 됩니다. 그런 다음 약 720회 회전을 위해 세션당 2시간 동안 시계 반대 방향으로 회전합니다.
밸런스 빔 트레이닝을 위해 1위를 차지하여 1위를 차지하여 0.75미터 높이의 두 개의 나무 발판을 실험장으로 약 110cm 떨어져 있습니다. 마감 공구에 플라스틱 블랙 15 x 15 x 8센티미터 상자를 놓고 두 대변 사이에 좁은 2.5 x 130센티미터 나무 빔을 놓고 시작 의자에서 마무리 대변까지 대변 가장자리 사이의 100센티미터 거리를 남깁니다. 시작 의자에 램프를 놓고 램프를 켭니다.
그런 다음 방의 빛을 끄고 방이 가능한 한 어둡게 하고 조명이 켜진 모서리의 광선에 첫 번째 쥐를 소개합니다. 쥐가 그 의지를 교차하지 않으면 동물이 빔을 교차하도록 부드럽게 유도합니다. 3일 간의 훈련 끝에 훈련된 쥐를 빛 근처의 시작 의자에 놓고 즉시 스톱워치를 시작합니다.
쥐는 밸런스 빔을 빠르게 교차하고 마무리 대변의 블랙 박스에 들어가야합니다. 동물의 코가 마무리 의자에 어두운 상자에 들어가자마자 스톱워치를 중지합니다. 모션 처리 후 배변 계산을 위해 플렉시글라스 용기에서 40센티미터 의 개원 필드 박스로 쥐를 옮기고 각 설치류에 기인하는 플렉시글라스 상자에 대변 펠릿의 수를 계산합니다.
개방형 필드 행동 테스트의 경우 적외선 비디오 카메라를 사용하여 동물을 3분 동안 기록하고 결과 비디오 영상을 사용하여 각 동물에 대해 이동한 총 거리를 결정합니다. 여기서, 3일 간의 훈련 후 밸런스 빔을 통과하는 데 걸린 시간의 대표적인 밸런스 빔 결과가 나타난다. 엘리베이터 수직 움직임, 헤르츠 수직 움직임의 변화, 관람차 회전은 배변을 크게 증가시켰습니다.
또한 엘리베이터 수직 운동, 헤르츠 수직 움직임의 변화 및 관람차 회전은 이동한 개방필드 거리가 크게 감소했습니다. 쥐가 빔을 건널 때 동기부여와 자신감을 가져야 하기 때문에 밸런스 빔 훈련은 매우 중요합니다. 그렇지 않으면 평가 기간 동안 잔액이 측정되지 않습니다.
행동 절차에 따라, 자율 기능 및 세포 신호에 관심의 다른 약물의 효과 이러한 전정 자극 작용제를 사용 하 여 평가될 수 있다.
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이 기사는 설치류의 자율신경 및 행동 효과를 평가하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 엘리베이터 수직 운동 및 페리스휠 회전과 같은 기술이 자율신경계의 건강성을 평가하는 데 사용됩니다.
Assessing autonomic and behavioral responses to passive motion provides a translational model for evaluating vestibular and autonomic nervous system integrity in preclinical research. These assays enable mechanistic de-risking of compounds targeting motion sickness, anxiety, or neurodegenerative disorders by quantifying autonomic output through defecation, open-field activity, and motor coordination. The standardized, reproducible nature of the elevator vertical motion and Ferris-wheel rotation protocols supports early-stage target validation and phenotypic screening in drug discovery pipelines.
The assay fits within the discovery continuum from target hypothesis testing through lead optimization, particularly for CNS-active compounds where autonomic side effects are a concern.