조직학적 검사 및 면역 조직화학을 위한 통합 안구 표면 조직을 얻기 위한 손상되지 않은 안구의 분리

우리의 실험실은 안구 발달과 질병에 초점을 맞추고 있습니다. 이 프로토콜은 해부된 마우스 헤드에서 두개골과 궤도 뼈를 순차적으로 제거하는 방법을 설명합니다. 눈꺼풀, 안구 표면, 렌즈 및 망막을 한 조각으로 모두 남깁니다. 이 프로토콜은 안구 표면 교훈에 관심이있는 안과 의사에게 도움이 될 것입니다. 나는 Dianlel Guo, 얼굴 뼈를 해부하면서 안구의 손상을 피하기 위해 시도 할 때 가능성이 투쟁기술을 말하는 것입니다. 이 해부 물질의 주요 장점은 안구 표면 상피 시트의 무결성이 잘 보존되고 안구 표면의 다른 부분은 하나의 단면도에서 조직학 또는 면역학에 의해 검사 될 수 있다는 것입니다. 연조직의 모든 작은 뼈와 파편을 잘라야 합니다. 이유, 그것은 그렇지 않으면 조직 섹션에 흉터 마크를 일으킬 것입니다. 마우스를 안락사한 후, 직선 가위를 사용하여 머리를 잘라 내고 비강뼈에서 시작되는 처산 중간선을 따라 양분합니다. 양분 된 머리의 각 절반을 깨끗한 페트리 접시에 넣고 날카로운 가위를 사용하여 턱과 혀를 잘라냅니다. 시광학 치아즘 위치 전에 뇌를 절단하여 시신경을 해제하십시오. 그리고 두개골 벽에 부착 된 후각 전구를 포함한 모든 뇌 조직을 제거합니다. 이제 나머지 모든 조직은 안구와 관련된 모든 두개골과 궤도 뼈를 가져야합니다. 나머지 부품을 PBS로 씻어 혈액과 모발 이물질을 청소하십시오. 4%파라포름알데히드를 함유한 50밀리리터 튜브에 배치하여 조직을 선불로 수정하여 실온에서 회전합니다. 접두사가 완료되면 PBS에서 해부된 머리를 세 번 빠르게 씻어 부러진 머리카락과 고정제를 더 제거하십시오. 조직을 10센티미터 페트리 접시에 넣고 두개골을 텍스트 프로토콜 중 하나에 표시된 평면을 따라 세 부분으로 자른다. 안구와 소켓은 두개골의 중간 부분에 민족, 정면 및 상악 뼈 아래에 숨겨져 있습니다. 4번 직선 집게 2쌍을 사용하여 ethmoid 골격을 벗겨내고 전두엽 및 상악 뼈를 완전히 노출시하십시오. 그런 다음 두개골 표면을 지리적으로 네 영역으로 나눕니다. 곡선 된 집게의 끝을 각 영역에 수평으로 삽입하여 상악 및 정면 골격을 순차적으로 제거합니다. 그 후, 근본적인 홍추와 주갈 뼈가 노출됩니다. 안구를 둘러싼 두 개의 뼈와 관련 피하 근육과 지방을 제거합니다. 눈꺼풀과 피부가 부착된 안구를 작은 사각형 모양의 블록으로 트리밍하여 조직 볼륨을 줄이고 포함시 조직을 방향을 지정합니다. 안구와 관련 조직을 4%의 파라포름알데히드로 다시 배치하고 4시에 밤새 계속 고치기