Name: 쥐 중추 신경계에서 안티 센스 올리고 뉴클레오티드의 내 전달 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: 배우세요 쥐 중추 신경계로 안티센스 올리고 뉴클레오티드를 전달하는 카테터 이식법. 이 방법은 약동학 및 약력학 평가에 활용되며 비용이 저렴하고 안전하여 신경과학 연구에 유용합니다.

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이 기사에 설명된 ASO를 공급해 주신 Ionis 제약에 감사드립니다.

모든 생체 내 절차는 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 미국 국립 보건원 가이드에 의해 명시된 지침을 따르는 Biogen 기관 동물 사용 및 관리 위원회 (IACUC) 승인 된 프로토콜에 따라 수행되었습니다.
1. 재료 및 악기 준비
<ol><li>특별 가이드 캐뉼라를 준비합니다.<ol>
<li>컷 오프 휠 (또는 날카로운 톱)이있는 회전 도구를 사용하여 19G 바늘의 두 끝을 잘라내어 ~ 1.5-2cm 길이의 가이드 캐뉼라(그림 1Aiii)를생성합니다. 회전 공구의 연삭 휠을 사용하여 두 끝을 부드럽게 합니다. 참고 : 또는, 사전 제작 및 멸균 가이드 캐뉼라 상업 공급 업체(재료표)에서구입할 수 있습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>카테터/와이어 어셈블리를 준비합니다.<ol>
<li>PE-10 튜브 (폴리에틸렌 튜브, 직경 0.011 인치)의 8cm 긴 조각을 잘라 경내 카테터 역할을합니다. 에탄올 내성 마커 펜으로 한쪽 끝에서 2cm 를 표시합니다. 폴리테트라플루오로에틸렌 코팅 스테인레스 스틸 와이어에서 11cm 길이의 스타일 와이어를 잘라. 스타일 와이어(그림1Aii)를PE-10 카테터의 내루에 삽입합니다(그림1Ai). 참고: 각 동물에 대해 카테터/와이어 어셈블리세트(그림 1Av)가필요합니다. 대안적으로, 카테터 및 스타일 와이어는 상용 공급 업체(재료표)에서구입할 수 있습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>전달 카테터 어셈블리를 준비합니다.<ol>
<li>PE-50 카테터 (5−10cm, 폴리에틸렌 튜브, 직경 0.023 인치)의 조각을 잘라(그림 1Bi). PE50 카테터의 한쪽 끝에 23G 튜빙 어댑터를 삽입한다(도1Biv). 이 쪽의 끝은 수술 시 100 μL주사기(물자 표)에연결될 것이다. 허브가 잘리는 수정된 30G 바늘을삽입(그림 1Biii)을약 0.5 cm의 PE-10 튜브(그림1Bii)에넣고 PE-10 튜브를 카테터의 다른 쪽 끝에 연결합니다.</li>
		<li>전달 카테터 어셈블리의 30 G 바늘 말단(도1Bv)은수술 시 랫트에 이식된 PE-10 카테터의 말단에 연결될 것이다. 참고: 대안적으로, 전달 카테터 어셈블리(그림1Bv)는상용 공급업체로부터 구입할 수 있다(재료표).</li>
	</ol>
</li>
	<li>가이드 캐뉼라-바늘 조립체(그림1Avi)를23 G 바늘 끝에 가이드 캐뉼라(그림1Aiii)를놓음으로써 준비한다.</li>
	<li>12시간 동안 에틸렌 옥사이드 멸균기를 사용하여 가이드 캐뉼러 및 와이어/카테터 세트를 포함한 모든 수술 기구를 멸균합니다. 참고 : 카테터를 제외한 모든 수술 기구는 오토 클레이브 할 수 있습니다. 카테터는 고온에서 녹습니다.</li>
</ol>2. 수술 준비
참고: 이 절차는 200 g과 400 g 사이 체중을 가진 남성과 여성 Sprague Dawley 쥐에 일상적으로 수행됩니다. 두 마리의 쥐는 음식과 물에 무료로 접근 할 수있는 12 시간 빛 / 어두운 주기에서 케이지 당 보관됩니다.
<ol><li>쥐의 무게와 마취를 유도하기 위해 이소플루란 챔버에 배치 (O2에서1-5 % 이소플루란, 효과에 적정). 참고 : 쥐는 절차 전반에 걸쳐 코 콘을 통해 깊은 마취를 유지하기 위해 이소플루란으로 지속적으로 마취됩니다. 대체 마취 방법(예를 들어, 케타민 100 mg/kg 및 자일라진 10 mg/kg의 투여)은 IACUC의 승인을 받아 사용될 수 있다.</li>
	<li>쥐가 발가락 핀치에 반응하지 않을 때 꼬리에서 꼬리 흉부 척추로 등을 면도하고 면도 한 쥐를 가열 패드 위에 놓은 멸균 시트에 놓습니다.</li>
	<li>요추 부위의 척추를 구부리기 위해 쥐의 복부 아래에 50 ml원추형 원심분리튜브를 배치하고(그림2A)안과 연고를 눈에 바릅니다.</li>
	<li>지속적인 방출 buprenorphine 주입 (1.0 mg/kg; 재료 표) 쥐에 피하. 노출된 피부를 교대로 포비톤과 알코올 스크럽으로 닦고 이 것을 세 번 반복합니다. 참고: 다른 통증 완화는 IACUC 프로토콜에 의해 승인된 대로 사용될 수 있습니다.</li>
	<li>수술 부위에 페네스트레이션된 멸균 투명 드레이프로 동물을 드레이프합니다.</li>
</ol>3. 수술
<ol><li>50 mL 원추형 튜브에 의해 지지되는 쥐를 사용하면 골반 위의 근육 사이의 두 가지 자연적인 구덩이를 식별합니다 (그림 2A의화살표). 한 손으로 는 그 구덩이를 들고, 부드럽게 누르고 로스트랄 방향으로 척추를 느끼고 척추 사이의 첫 번째 주요 들여 쓰기를 찾아 다른 손을 사용하여 이것은 S1과 L6 척추 사이의 추간판 공간입니다(그림 2B ).</li>
	<li>L5와 L6 척추와 사출 부위 사이의 다음 들여쓰기, 추간판 공간을 식별하기 위해 약간 장밋빛으로 이동합니다(그림 2A에서*). 주사 부위가 절개 부위의 중심에 있도록 주사 부위가 절개 의 중심에 있도록 로스트랄에서 꼬리까지 중간선을 따라 피부에 2cm 이하의 길이를 만들기 위해 메스를 사용합니다 (그림 2A의점선).</li>
	<li>근육 층을 시각화하기 위해 결합 조직을 해부하기 위해 해부 가위를 사용합니다. 그런 다음 L6 요추 척추의 등쪽 척추 과정을 즉시 측면으로 근육 캡슐에 1cm 절개를합니다. 참고: 이 시점에서 L6 요추의 뼈를 시각화할 수 있습니다.</li>
	<li>가이드 캐뉼라-니들 어셈블리를 6차 요추의 앞쪽 측면에 위치시키고 바늘의 끝이 척추관에 침투할 수 있도록 6척추의 앞쪽 측면을 따라 추간판 공간으로 밀어 넣습니다. 바늘을 따라 가이드 캐뉼라를 밀어 내고 가이드 캐뉼라만 남기고 23G 바늘을 제거합니다. 참고: 바늘을 삽입하기 전에 무딘 집게를 사용하여 L6 요추의 등쪽 과정을 찾는 것이 좋습니다. 일반적으로 CSF 유체는 바늘 허브에 들어가는 것을 볼 수 있습니다 (이 액체는 혈액의 힌트로 칠해질 수 있지만 해가 수행되었거나 바늘이 올바르게 배치되지 않았다는 것을 나타내지는 않습니다). 저자는이 절차 동안 많은 양의 혈액이나 심한 출혈을 본 적이 없습니다. 어느 쪽이든 발생하면 수의사에게 연락하여 적절한 치료를 결정하고 동물을 안락사시켜야하는지 확인해야합니다.</li>
	<li>카테터 와이어 어셈블리를 가이드 캐뉼라에 삽입합니다. 카테터 와이어 어셈블리를 척추 운하까지 약 45° 각도로 각도를 조정하고 끝을 척추 관으로 약 0.3cm 강제로 넣습니다.</li>
	<li>가이드 캐뉼라를 제거하고 카테터를 스타일 와이어로 제자리에 둡습니다. 그림 1Bvi와같이 카테터의 경막 외 끝에서 약 2.5 cm의 스타일 와이어를 제거하고 2cm 마크가 운하 입구 (근육 아래 보이는)가 될 때까지 카테터를 척추 관으로 진행합니다. 참고 : 삽입 된 카테터는 지주막 공간으로 장전되어야합니다. 성공적인 배치는 그 공간에서 카테터를 자유롭게 움직일 수 있어야합니다.</li>
	<li>스타일 와이어를 완전히 철회하고 CSF가 이식된 카테터에 들어가는 것을 볼 수 있다.</li>
	<li>30 G 바늘 단부를 통해 이식된 카테터의 말단에 전달 카테터 어셈블리를 연결합니다(그림1Bv, vi).</li>
	<li>멸균 식염수 60 μL을 100 μL 주사기(플러싱 주사기)에 적재합니다. 시험 화합물(예를 들어, ASO 용액)의 30 μL의 볼루스를 제2 주사기(주입 주사기)에 로드한다.</li>
	<li>플러싱 주사기(식염수로 로드됨)를 전달 카테터 어셈블리의 튜브 어댑터 끝에 연결합니다(그림1Bv). 20 μL의 멸균 식염수를 경내 공간에 주입하십시오 (주입 전 홍조).</li>
	<li>주사주사기(테스트 화합물로 로드됨)를 전달 카테터 어셈블리의 튜브 어댑터 끝에 연결합니다(그림1Bv). 30 μL의 시험 화합물을 30s 이상의 내 공간에 주입하십시오. 참고 : ASO의 일상적인 주입 량은 척수와 피질에서 좋은 녹다운을 달성하기 위해 30 μL입니다. 그것은 사출 볼륨 화합물 분포에 영향을 미칠 수 있습니다 보고 되었습니다12,비록 다른 주입 볼륨 테스트 되지 않은. 다른 화합물 이나 부피를 사용 하는 경우, 안전 및 효과 경험적으로 결정 될 필요가.</li>
	<li>3.10단계를 반복하고 카테터를 40 μL의 멸균 식염수(주입 후 플러싱)로 세척합니다. 그런 다음 이식 된 카테터에서 전달 카테터 어셈블리를 분리합니다. 참고: 주입 전 및 사후 플러시는 화합물의 국소 격리를 감소시키고 로스트랄구조(12)로의분포를 개선하는 것으로 생각된다.</li>
	<li>무균 절단 및 열 밀봉 이식 카테터: 비드 멸균기에 한 쌍의 멸균 해부 포셉을 넣고 매우 뜨거울 때까지 놓고 집게의 뜨거운 끝으로 튜브를 고정합니다. 참고: 이 작용은 카테터를 녹입니다. 따라서 튜브의 구멍이 붕괴되고 모든 면이 서로 달라붙어 무균 방식으로 튜브를 밀봉한 다음 피하 공간에 배치됩니다.</li>
	<li>흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 남은 열 밀봉 카테터를 결합 조직에 고정합니다. 그런 다음 흡수할 수 없는 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 고정된 열 밀봉 카테터 위로 피부를 닫습니다. 참고: 상처 클립은 IACUC 프로토콜의 승인을 받은 대로 사용할 수도 있습니다. 이 기술은 우리의 손에 일회성 주사에 사용되었지만 반복 주사와 호환됩니다. 반복 주사의 타당성은 IACUC의 승인을 통해 경험적으로 평가되어야합니다.</li>
	<li>거즈와 식염수를 사용하여 피부에서 혈액을 씻고 동물이 가열 된 인큐베이터에서 마취에서 회복 될 때까지 이동하여 홈 케이지 (케이지 당 2 마리의 쥐)로 돌아갑니다. 참고: 같은 날 여러 쥐에 대한 수술을 수행할 때, 물을 사용하여 혈액을 제거하고 동물 들 사이에 가열 된 건조 비드 멸균기 (적어도 20 s, 식히는 시간)를 사용하여 다시 살균하는 도구를 청소하십시오. 새로운 악기 세트는 5 마리의 동물마다 사용됩니다.</li>
	<li>수술 후 적어도 3일 동안 매일 동물을 모니터링하고 IACUC 프로토콜에 따라 수술 후 매주 동물을 계속 모니터링합니다. 참고: 합병증(소변 보존, 절개 감염, 발작 또는 마비와 같은 신경 장애)이 발생하는 경우, 수의사에게 연락하여 적절한 치료를 결정하고 동물을 안락사시켜야 하는지 확인해야 합니다. 서방성 부프레노르핀이 사용되지 않는 경우, 통증 완화는 IACUC 프로토콜에 따라 수술 후 매일 주어져야 한다.</li>
</ol>4. IT 주입 후 조직 별 녹다운 평가
<ol><li>ASO의 IT bolus 주입 후 2 주, 뇌의 다른 영역을 수집 (즉, 대뇌 피질, 줄무늬와 소뇌) 척수의 다른 세그먼트뿐만 아니라 (즉, 자궁 경부, 흉부, 요추). 상서항 RNA 추출 키트를 이용하여 총 조직 RNA를 추출하고 앞서13일설명한 바와 같이 cDNA 합성 반응을 수행한다. 참고: 표준 시약은 다음 의 아그라피와 함께 qPCR에 사용되었다: 랫 말랏1 및 랫트 GAPDH. 상대적인 전사체 수준은2-ΔΔCT 방법(CT=임계값 사이클)을 사용하여 계산하였다.</li>
</ol>

<ol><li>Abbott, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+CNS+barriers%3A+evolution%2C+differentiation%2C+and+modulation%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Dynamics of CNS barriers: evolution, differentiation, and modulation.</a> Cellular and Molecular Neurobiology. 25 (1), 5-23 (2005).</li>
<li>Greene, C., Campbell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tight+junction+modulation+of+the+blood+brain+barrier%3A+CNS+delivery+of+small+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Barriers%22%5BJournal%5D)">Tight junction modulation of the blood brain barrier: CNS delivery of small molecules.</a> Tissue Barriers. 4 (1), e1138017(2016).</li>
<li>Daneman, R., Engelhardt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+barriers+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Brain barriers in health and disease.</a> Neurobiology of Disease. 107, 1-3 (2017).</li>
<li>Ballabh, P., Braun, A., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+blood-brain+barrier%3A+an+overview%3A+structure%2C+regulation%2C+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">The blood-brain barrier: an overview: structure, regulation, and clinical implications.</a> Neurobiology of Disease. 16 (1), 1-13 (2004).</li>
<li>Cardoso, F. L., Brites, D., Brito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+at+the+blood-brain+barrier%3A+molecular+anatomy+and+possible+investigation+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Looking at the blood-brain barrier: molecular anatomy and possible investigation approaches.</a> Brain Research Reviews. 64 (2), 328-363 (2010).</li>
<li>Larsen, J. M., Martin, D. R., Byrne, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+delivery+through+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Medicinal+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Recent advances in delivery through the blood-brain barrier.</a> Current Topics in Medicinal Chemistry. 14 (9), 1148-1160 (2014).</li>
<li>Brinker, T., Stopa, E., Morrison, J., Klinge, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+look+at+cerebrospinal+fluid+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids+Barriers+CNS%22%5BJournal%5D)">A new look at cerebrospinal fluid circulation.</a> Fluids Barriers CNS. 11, 10(2014).</li>
<li>Standifer, K. M., Chien, C. C., Wahlestedt, C., Brown, G. P., Pasternak, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+loss+of+delta+opioid+analgesia+and+binding+by+antisense+oligodeoxynucleotides+to+a+delta+opioid+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Selective loss of delta opioid analgesia and binding by antisense oligodeoxynucleotides to a delta opioid receptor.</a> Neuron. 12 (4), 805-810 (1994).</li>
<li>Wahlestedt, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligodeoxynucleotides+to+NMDA-R1+receptor+channel+protect+cortical+neurons+from+excitotoxicity+and+reduce+focal+ischaemic+infarctions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Antisense oligodeoxynucleotides to NMDA-R1 receptor channel protect cortical neurons from excitotoxicity and reduce focal ischaemic infarctions.</a> Nature. 363 (6426), 260-263 (1993).</li>
<li>Wahlestedt, C., Pich, E. M., Koob, G. F., Yee, F., Heilig, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+anxiety+and+neuropeptide+Y-Y1+receptors+by+antisense+oligodeoxynucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Modulation of anxiety and neuropeptide Y-Y1 receptors by antisense oligodeoxynucleotides.</a> Science. 259 (5094), 528-531 (1993).</li>
<li>Mazur, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+simple%2C+rapid%2C+and+robust+intrathecal+catheterization+method+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of a simple, rapid, and robust intrathecal catheterization method in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 280, 36-46 (2017).</li>
<li>Wolf, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+dual-isotope+molecular+imaging+elucidates+principles+for+optimizing+intrathecal+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation+Insight%22%5BJournal%5D)">Dynamic dual-isotope molecular imaging elucidates principles for optimizing intrathecal drug delivery.</a> Journal of Clinical Investigation Insight. 1 (2), e85311(2016).</li>
<li>Becker, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+reduction+of+ataxin-2+extends+lifespan+and+reduces+pathology+in+TDP-43+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Therapeutic reduction of ataxin-2 extends lifespan and reduces pathology in TDP-43 mice.</a> Nature. 544 (7650), 367-371 (2017).</li>
<li>Zhang, X., Hamblin, M. H., Yin, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long+noncoding+RNA+Malat1%3A+Its+physiological+and+pathophysiological+functions%5BTitle%5D)+AND+%22RNA+Biology%22%5BJournal%5D)">The long noncoding RNA Malat1: Its physiological and pathophysiological functions.</a> RNA Biology. 14 (12), 1705-1714 (2017).</li>
<li>Crooke, S. T., Witztum, J. L., Bennett, C. F., Baker, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA-Targeted+Therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">RNA-Targeted Therapeutics.</a> Cell Metabolism. 27 (4), 714-739 (2018).</li>
<li>DeVos, S. L., Miller, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+intraventricular+delivery+of+drugs+to+the+rodent+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Direct intraventricular delivery of drugs to the rodent central nervous system.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), e50326(2013).</li>
<li>McCampbell, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotides+extend+survival+and+reverse+decrement+in+muscle+response+in+ALS+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotides extend survival and reverse decrement in muscle response in ALS models.</a> Journal of Clinical Investigation. 128 (8), 3558-3567 (2018).</li>
<li>Schoch, K. M., Miller, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+Oligonucleotides%3A+Translation+from+Mouse+Models+to+Human+Neurodegenerative+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Antisense Oligonucleotides: Translation from Mouse Models to Human Neurodegenerative Diseases.</a> Neuron. 94 (6), 1056-1070 (2017).</li>
<li>Lane, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+Antisense+Technology+into+a+Treatment+for+Huntington%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Translating Antisense Technology into a Treatment for Huntington's Disease.</a> Methods in Molecular Biology. 1780, 497-523 (2018).</li>
<li>Wurster, C. D., Ludolph, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotides+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Therapeutic+Advances+in+Neurological+Disorders%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotides in neurological disorders.</a> Therapeutic Advances in Neurological Disorders. 11, (2018).</li>
<li>Haché, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrathecal+Injections+in+Children+With+Spinal+Muscular+Atrophy%3A+Nusinersen+Clinical+Trial+Experience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Child+Neurology%22%5BJournal%5D)">Intrathecal Injections in Children With Spinal Muscular Atrophy: Nusinersen Clinical Trial Experience.</a> Journal of Child Neurology. 31 (7), 899-906 (2016).</li>
<li>Goodkey, K., Aslesh, T., Maruyama, R., Yokota, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nusinersen+in+the+Treatment+of+Spinal+Muscular+Atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Nusinersen in the Treatment of Spinal Muscular Atrophy.</a> Methods in Molecular Biology. 1828, 69-76 (2018).</li>
<li>Wurster, C. D., Ludolph, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nusinersen+for+spinal+muscular+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Therapeutic+Advances+in+Neurological+Disorders%22%5BJournal%5D)">Nusinersen for spinal muscular atrophy.</a> Therapeutic Advances in Neurological Disorders. 11, (2018).</li>
</ol>

저자는 바이오젠, 주식회사 또는 아이오니스 제약의 모든 직원입니다. 저자는 Ionis 제약에서 기사에 설명 된 안티 센스 올리고 뉴클레오티드를받을 수 있습니다.

본 문서는 쥐 CNS내로 직접 치료제를 전달하는 강력한 방법을 보여준다. 이론적으로, 유사한 기술은 더 작은 크기 때문에, 방법이 더 도전적 일 수 있더라도, 마우스에서 또한 수행될 수 있습니다. 따라서, 우리 그룹은 다른 투여 경로를 통해 동일한 목표에 도달하는 CNS 약물 전달을 위해 마우스에서 intracerebroincular (ICV) 주사를 수행합니다. 이 방법은 또 다른 연구16에기재되어 있다.
여기에 설명된 방법의 장점은 고가의 장비나 특수 공구가 필요하지 않다는 것입니다. 그림1A에 표시된 카테터/와이어 어셈블리를 미리 준비하는 것이 좋습니다. 연구에 쥐가 있는 만큼 적어도 많은 카테터/와이어 어셈블리를 준비해야 하지만, 수술 중에 일부 카테터/와이어 어셈블리가 손상되거나 교체될 경우를 대비하는 것이 좋습니다.
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중추 신경계 (CNS)의 혈관 시스템은 항상성의 중요한 레귤레이터로 진화하여 분자의 트래픽을 제어하고 영양소를 공급하고 폐기물을 제거합니다. 이 시스템은 또한 내피 세포의 벽을 따라 단단한 접합부가 조밀하게 분포되어 있기 때문에 외부 병원균의 공격으로부터 첫 번째 방어선입니다. 이 단단한 접합은 혈액 두뇌 방벽의 1개의 양상을 구성합니다 (BBB). BBB는 영양소 및 에너지 요구(예를 들어, 이온, 포도당)를 충족시키는 데 필요한 분자의 수송을 허용하지만, 또한 독성 화학물질뿐만 아니라 병원체의 통과를 선택적으로 제한한다1,2,3.
아이러니하게도, 병원균과 독성 화학물질의 통과를 제한하는 BBB의 동일한 보호 기능은유기체에대한 전신 투여 후 치료적 치료로 CNS에 쉽게 접근할 수 있는 우리의 능력에 큰 장애가 된다2. 4,5. BBB의 이러한 역할은 신약 유통 기술의 과다한 개발을 촉발시켰으며6.
이러한 장애를 극복하는 한 가지 방법은뇌와 척수7,8,9,10을지속적으로 투과시키는 뇌척수액(CSF)에 약물을 직접 주입하는 것이다. 이 기사에서는, 우리는 쥐 척추의 카우다 에퀴나 공간에 카테터의 내부 단부를 완전히 배치하여 요추 내 공간으로 에이전트를 성공적으로 전달하는 방법을 설명합니다. 이 절차에 대한 설명은 이전에 Mazur 외11.
이 프로토콜은 표적 유전자의 정량적 중합효소 연쇄 반응(qPCR) 분석에 의해 평가될 때 CNS에 대한 안티센스 올리고뉴클레오티드(ASO) 전달의 90% 이상의 성공률을 매우 발휘한다8. 이 절차는 쥐의 100 %가 수술에서 생존하고 수술 상처 주위에 최소한의 붓기와 고통의 흔적을 보이지 않는 것처럼 동물에게 최소한의 불편 을 초래합니다 (예 : 과잉 행동, 탈수, 순환, 균형 상실, 음식 섭취 감소, 및 탈수) 수술 후 관찰 중. 여기에 설명된 방법의 또 다른 장점은 고가의 장비나 특수 공구가 필요하지 않다는 것입니다.

<table><tbody><tr><td>3M Steri-Drape 접착 조리개가있는 소형 드레이프</td><td>3M</td><td></td><td>1020</td></tr><tr><td>70 % 에탄올</td><td>Decon Laboratories, Inc</td><td></td><td>8416-160Z</td></tr><tr><td>알코올 면봉 스틱</td><td>Dynarex</td><td></td><td>NO 1204</td></tr><tr><td><a href = "https://punchout.fishersci.com/shop/products/bd-general-use-syringes-5/22124967?crossRef=BD%20302830#?keyword=BD+302830">BD 범용 주사기 1 mL Luer-Lok 팁</a></td><td>BD</td><td>1ml TB Luer-Lok 팁</td><td>BD 302830</td></tr><tr><td>BD Intramedic PE Tubing</td><td>BD</td><td>폴리에틸렌 튜빙 PE50 직경 0.023 in</td><td>BD 427400 (10ft, Fischer Scientific 22-204008) 또는 427401 (100ft, Fischer Scientific 14-170-12P)</td></tr><tr><td>BD Intramedic PE 튜빙</td><td>BD</td><td>폴리에틸렌 튜빙 PE10 직경 0.011 in</td><td>BD 427410 (10ft, Fischer Scientific 14-170-11B) 또는 4274011 (100ft, Fischer Scientific 100ft, Fischer Scientific 14-170-12B)</td></tr> <tr><td>BD Intramedic PE 튜빙 어댑터</td><td>BD</td><td>23 게이지 intramedic luer stub adaper</td><td>BD 427565 또는 Fisher Scientific 14-826-19E</td></tr><tr><td>BD PrecisionGlide 일회용 바늘 30G</td><td>BD</td><td></td><td>BD 305128</td></tr><tr><td>Buprenorphine Sustained Release-lab</td><td>ZooPharm</td><td>처방전 필요</td><td></td></tr><tr><td>에틸렌 옥사이드 살균제</td><td>Andersen Sterilizer INC.</td><td>AN 74i, 가스 살균기</td><td>AN 74i</td></tr><tr><td>가이드 캐뉼라</td><td>BD</td><td>19G x 1 WT (1.1 mm x 25mm) 바늘</td><td>BD 305186</td></tr><tr><td>해밀턴 주사기 100ul</td><td>해밀턴 컴퍼니</td><td>해밀턴 주사기 100ul</td><td></td></tr><tr><td>핫 비드 살균기</td><td>정밀 과학 도구</td><td></td><td>STERILIZER MODELNO FST 250</td></tr><tr><td>안과 연고</td><td>Dechra veterranery product</td><td></td><td>17033-211-38</td></tr><tr><td>Pocket Pro 애완 동물 트리머</td><td>Braintree Scientific</td><td></td><td>CLP-9931 B</td></tr><tr><td>포비돈 스크럽</td><td>PDI</td><td></td><td>S48050</td></tr><tr><td>식염수</td><td>Baxter</td><td>염화나트륨 0.9% 정맥 주입 BP 50ml</td><td></td></tr><tr><td>FE1306G 메</td>스 <td>깃털</td><td>일회용 메스</td><td>No. 10</td></tr><tr><td>소형 동물 가열 패드</td><td>K& H 제조</td><td></td><td>모델 # 1060</td></tr><tr><td>Stylet Wire</td><td>McMaster-Carr</td><td>1749T14</td><td>LH-36233780</td></tr><tr><td>수술 수건 드레이프</td><td>Dynarex</td><td></td><td>4410</td></tr><tr><td>수술 용 가위 및 집게</td><td>FST 및 Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td></td><td>4-0 또는 5-0</td></tr><tr><td>가이드 캐뉼러</td><td>그레인저</td><td>로터리 도구 (Dremel)를 만드는 도구</td><td>14H446 (Mfr: EZ456)</td></tr><tr><td></td><td></td><td>EZ lock cut off 휠</td><td>1PKX5 (Mfr: 3000-1/24)</td></tr><tr><td></td><td></td><td>그라인딩 휠, 알루미늄 산화물</td><td>38EY44 (Mfr: EZ541GR)</td></tr><tr><td></td><td></td><td>EZ lock 맨드릴</td><td>1PKX8 (Mfr: EZ402-01)</td></tr><tr><td></td><td></td><td>다이아몬드 휠 바닥 타일</td><td>3DRN4 (Mfr: EZ545)</td></tr><tr><td>이 절차를 위해 미리 만들어지고 멸균된 재료의 대체 소스</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>투여 카테터 시스템</td><td>SAI 주입 시스템</td><td></td><td>RIDC-01</td></tr><tr><td>가이드 캐뉼라</td><td>SAI 주입 시스템</td><td></td><td>RIDC-GCA</td></tr><tr><td>내부 카테터</td><td>SAI 주입 시스템</td><td>RIDC-INC</td>탐침 와이어 <td></td></tr><tr><td></td><td>SAI 주입 시스템</td><td></td><td>리디씨-스티</td></tr></tbody></table>

쥐 중추 신경계에서 안티 센스 올리고 뉴클레오티드의 내 전달

Intrathecal Delivery of Antisense Oligonucleotides in the Rat Central Nervous System

혈액 뇌 장벽 (BBB) 중추 신 경계에 혈액에서 잠재적으로 독성 또는 병원 성 에이전트의 입구에 대 한 중요 한 방어 (CNS). 그러나, 그것의 존재는 또한 극적으로 CNS에 체계적으로 관리된 치료에이전트의 접근성을 낮춥시다. 이를 극복하는 한 가지 방법은, 이러한 제제를 뇌척수액(CSF)에 직접 주입하여 BBB를 우회하는 것이다. 이것은 삼투성 펌프를 사용하여 연속 주입을 위해 카테터를 이식하거나 단일 볼러스 전달을 위해 수행 할 수 있습니다. 본 문서에서는, 우리는 성인 쥐 척추의 카우다 에퀴나 공간에 직접 이식된 카테터를 통해 CNS 표적화 안티센스 올리고뉴클레오티드(ASO)의 전달을 위한 외과 프로토콜을 기술한다. 대표적인 결과로서, 우리는 쥐 CNS의 다른 지구에 있는 표적 RNA를 쓰러뜨리는 이 카테터 삽입 시스템을 통해 단일 볼루스 ASO 내(IT) 주입의 효능을 보여준다. 절차는 안전하고 효과적이며 고가의 장비 또는 수술 도구가 필요하지 않습니다. 여기에 설명 된 기술은 뿐만 아니라 다른 양식에 약물을 제공 하도록 적응 될 수 있다.

여기에 기재된 방법을 사용하여, 우리는 긴 비코딩(linc) RNA Malat1을 표적으로 하는 인산완충 식염수 PBS 또는 300 μg의 단일 볼루스와 함께 성인 암컷 쥐(250-300 g; n=10/군)의 두 그룹을 주입하였다; 우리 실험실에서 우리는 Malat1이 뇌와 척수를 포함한 모든 조직14에서유비쿼터스로 그리고 높은 수준으로 표현되었기 때문에 Malat1 ASO를 도구 화합물로 일상적으로 사용합니다. Malat1 ASO는 RNA를 저하시키는 RNaseH1 매개 메커니즘15를 통해 작동하여 녹다운(KD)을 초래합니다. 여기에서 기술된 실험에서, 우리는 ASO의 납품 후에 2 주, 척수의 요추 세그먼트 뿐만 아니라 두뇌의 다른 지구 (즉, 대뇌 피질, striatum 및 소뇌)를 수집했습니다. 수집된 각 영역으로부터의 RNA를 qPCR을 통해 추출 및 분석하여 Malat1 RN...

여기서, 우리는 척추의 요추 내 공간에 카테터를 이식하여 쥐 중추 신경계에 약물을 전달하는 방법을 설명합니다. 우리는 안티 센스 올리고 뉴클레오티드의 전달에 초점을 맞추고, 이 방법은 뿐만 아니라 다른 치료 양식의 전달에 적합 하지만.

The blood brain barrier (BBB) is an important defense against the entrance of potentially toxic or pathogenic agents from the blood into the central ...

이 프로토콜은 쥐의 중추 신경계에 치료제를 직접 전달하여 쥐 질병 모델에서 약동학, 약물 역학 및 새로운 치료법의 효능을 평가할 수 있습니다. 이 절차는 안전하고 효과적이며 고가의 장비 또는 수술 도구가 필요하지 않습니다. 이 절차를 시연하는 것은 이첸과 이루오, 내 실험실에서 연구 과학자가 될 것입니다.특별 가이드 캐뉼라를 준비하려면 휠이 잘린 로터리 도구를 사용하여 19 게이지 바늘의 양쪽 끝을 잘라 약 1~2센티미터 길이가이드 캐뉼라를 얻습니다. 그런 다음 로터리 공구의 연삭 휠을 사용하여 양쪽 끝을 부드럽게 합니다. 카테터 와이어 조립을 준비하려면 각 동물의 인트라테칼 카테터 역할을 하기 위해 직경 011인치 PE10 튜브의 8센티미터 길이의 PE10 튜브를 잘라냅니다.에탄올 내성 마커 펜을 사용하여 각 튜브의 한쪽 끝에서 2센티미터 의 마크를 만듭니다. 각 동물에 대해, 8센티미터 PE10 카테터의 루멘에 폴리테트라플루오로틸렌 코팅 스테인리스 스틸 와이어에서 절단 된 11 센티미터 긴 스타일 와이어를 삽입합니다. 배달 카테터 조립을 준비하려면 직경 5~10cm 023인치 PE50 카테터를 자르고 23게이지 튜브 어댑터를 카테터의 한쪽 끝에 삽입합니다.그런 다음 허브가 잘려낸 30 게이지 바늘을 PE10 튜브의 약 0.5센티미터 조각으로 잘라내고 PE10 튜브를 카테터의 다른 쪽 끝에 연결합니다. 가이드 캐뉼라 바늘 조립을 준비하려면 23 게이지 바늘 끝에 가이드 캐뉼라를 놓습니다. 수술을 시작하기 전에 수술 테이블에 가열 패드를 놓고 멸균 드레이프 시트로 패드를 덮습니다.시트에 50mL 원심분리기 튜브를 놓고 마취된 실험 쥐의 발가락 핀치에 대한 반응부족을 확인한다. 동물의 무게를 측정 한 후, 꼬리에서 caudal 흉부 척추에 뒷면을 면도하고 경향이 위치에 멸균 시트에 면도 쥐를 배치합니다. 50mL 튜브를 복부 아래에 배치하여 요추 부위의 척추를 구부리고 안과 연고를 눈에 바릅니다.다음으로, 피하하여 1킬로그램당 1밀리그램의 지속적인 방출 부프레노르핀을 주입하고 순차적인 포비도네와 알코올 스크럽으로 노출된 피부를 청소합니다. 펜에스트처리된 멸균 투명 시트로 동물을 드레이프합니다. 카테터의 배치및 화합물의 주입을 위해, 면도 골반 위의 근육 사이의 두 가지 천연 구덩이를 식별하고, 한 손으로 구덩이를 잡고, 부드럽게 누르고 척추 사이의 첫 번째 주요 들여쓰기를 찾기 위해 로스트랄 방향으로 코달에서 척추를 느낄 수있는 다른 손을 사용합니다.S1과 L6 척추 사이의 무척추 동물 공간을 식별 한 후 약간 장밋빛으로 움직여 L5와 L6 척추 사이의 추간판 공간을 식별하십시오. 메스를 사용하여 로스트랄에서 코달 방향으로 중간선을 따라 이 부위의 피부와 근육 캡슐에 2센티미터 이상의 긴 절개를 하여 주사 부위가 절개의 중심에 있게 한다. 해부 가위를 사용하여 근육 층이 시각화 될 때까지 결합 조직을 해부하십시오.L6 요추 척추의 등쪽 척추 과정에 즉시 근육 캡슐에 1 센티미터 절개를합니다. 제6요추 척추의 전방 측면 근처에 가이드 캐뉼라 바늘 조립을 배치하고 바늘의 끝이 척추 운하에 침투할 수 있도록 여섯 번째 척추의 전방 측면을 따라 추간판 공간으로 어셈블리를 밀어 넣습니다. 무딘 집게를 사용하여 L6 요추 척추의 등쪽 척추 과정을 찾은 다음 여섯 번째 척추의 전방 측면을 따라 바늘을 구산구 공간으로 밀어 넣습니다.가이드 캐뉼라를 바늘을 따라 제자리에 밀어 넣고 바늘을 제거하고 카테터 와이어 어셈블리를 가이드 캐뉼라에 삽입합니다. 카테터를 척추 운하에 약 45도 각도로 기울여 카테터의 끝을 운하로 약 0.3cm 밀어 넣습니다. 카테터의 내트라테칼 끝에서 약 2.5센티미터의 스타일 와이어를 제거하고 카테터의 2센티미터 표시가 근육 아래에 보일 때까지 카테터를 척추 운하로 전진시다.카테터가 제자리에 있을 때 가이드 캐뉼라를 제거하여 카테터와 스타일 와이어를 제자리에 놓습니다. 카테터를 척추 운하로 진출하여 두 센티미터 표시가 운하 입구에 있고 스타일 와이어를 완전히 철회할 때까지 진행합니다. 대뇌 척수액은 이식된 카테터에 들어가는 것을 시각화할 수 있다.그런 다음 30 게이지 바늘 끝을 통해 이식 된 카테터의 단면 끝에 전달 카테터 어셈블리를 연결합니다. 다음으로, 멸균 식염수 60마이크로리터를 100 마이크로리터 주사기에 적재하고 시험 화합물의 30 마이크로리터를 두 번째 주사기로 로드합니다. 식염수 주사기를 전달 카테터 조립의 튜브 어댑터 끝에 연결하고 멸균 식염수 20 마이크로리터를 내트라테칼 공간으로 플러시합니다.식염수의 모든 플러시 된 경우, 식염수 주사기를 볼러스로드 주사기로 교체하고 30 초 동안 인트라 테칼 공간에 테스트 화합물의 30 마이크로 리터를 주입. 모든 볼러스가 전달되면 볼루스로드 주사기를 다른 식염수로드 주사기로 교체하고 카테터를 식염수 40 마이크로리터로 플러시합니다. 식염수의 두 번째 부피가 전달되면, 이식 된 카테터에서 배달 카테터 어셈블리를 분리하고 매우 뜨거운 열 살균 해부 집게 한 쌍을 사용하여 튜브를 고정하여 절단하고 이식 된 카테터를 열 밀봉합니다.흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 열 밀봉 카테터를 결합 조직에 고정한 다음 흡수할 수 없는 봉합사를 사용하여 피부를 닫습니다. 그런 다음 거즈와 식염수로 피부의 혈액을 씻고 쥐를 완전한 보상이 될 때까지 모니터링하여 가열 된 인큐베이터에 놓습니다. 본 대표적인 실험에서, 단일 볼루스 안티센스 올리고뉴클레오티드 전달 후 수집된 모든 지역에서 매우 양호한 녹다운을 얻어낸 바와 같이.그러나, 어느 정도의 지역 적 변동성은 척수로 측정되어 가장 높은 백분율의 녹다운을 나타냈다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 기타 치료제를 성공적으로 주입한 후 적절한 모델로, 약물역학, 약물역학 및 치료제의 효능을 평가할 수 있다.

intrathecal-delivery-antisense-oligonucleotides-rat-central-nervous

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

출처: Chen, Y., et al. 쥐 중추신경계에서 안티센스 올리고뉴클레오티드의 척수강내 전달. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 쥐 모델의 요추 척추에 이식된 카테터를 통해 테스트 화합물을 뇌척수액(CSF)으로 전달하는 방법을 보여줍니다. 이 화합물은 CSF를 따라 뇌와 척수로 순환하고 뉴런으로 들어가 치료 가능성을 제공합니다.

쥐 중추신경계에 대한 테스트 화합물의 척수강내 전달

출처: Li, D., et al. 성인 마우스에서 재조합 아데노 관련 바이러스의 직접 척수강내 주사. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 깨어 있는 마우스의 뇌척수액(CSF)에 아데노 관련 바이러스(AAV)를 척수강내 주사하는 절차를 보여주며 주사기 준비, 척추 정렬 및 정확한 바늘 삽입을 다룹니다. 이 방법은 표적 유전자 전달을 검증하여 CNS 치료의 잠재력을 뒷받침합니다.

중추신경계 질환 치료를 위한 마우스 모델에서 바이러스의 척수강내 전달

우리는 카테터를 이식하거나 마우스의 오른쪽 측면 뇌실에 알약 주입을 수행하여 중추 신경계에 약물을 대상으로하는 방법을 설명합니다. 우리는 안티센스 올리고 뉴클레오티드의 전달에 특히 초점을 맞 춥니 다. 이 기술은 다른 약물과 쥐에 쉽게 적응할 수있다.

설치류 중추 신경계에 약물을 직접 심실 배달

이 보고서는 짧은 지속 가벼운 마취 쥐의 요추 척수의 siRNA의 지역화 된 형질에 대한 막내 바늘 구멍의 간단하고 빠른 방법을 설명합니다.

마우스의 빠른 비 침습 요추 경 막내 주사를 통해 생체 siRNA의 형질과 척수에있는 유전자 넉다운에

쥐에서 대규모 중앙 신경 유전자 배달 방법 적용 됩니다. 이 예제에서는 목적은 전체 척수에 영향을 미치는 질병을 모방 이다. 광범위 한 변환, 주변 관리에서 CNS에 치료 단백질을 전달 하기 위해 사용할 수 있습니다.

메서드 및 Adeno 관련 바이러스를 쥐의 정 맥 관리 및 중앙 신경 전달의 평가 대 한 팁

여기에 우리가 작은 동물에 게 효율적인 adeno 관련 바이러스 전달 되도록 하 여 중앙에서 변환 효율 예측 점수 시스템 구축 바이러스 솔루션에서 1 %lidocaine 염 산 염을 사용 하 여 직접 intrathecal 사출 기법 제시 lidocaine에 의해 유도 된 과도 함의 정도 따라 신경 시스템.

성인 쥐에 있는 재조합 형 Adeno 관련 바이러스의 직접 Intrathecal 주입

여기서, 우리는 중추 신경계에서 효과적인 유전자 침묵이 가능하게 하는 뇌 표적화 펩티드-siRNA 제제의 비강 내 투여를 위한 마우스의 적절한 배치를 가능하게 하는 마우스 포지셔닝 장치를 이용한 프로토콜을 제시한다.

중추 신경계에 비강 siRNA 전달 하는 동안 마우스의 배치에 대 한 위치 장치

본 프로토콜은 유전자 편집 및 약물 전달을 위해 신생아 마우스에서 척수강내 주사를 수행하기 위한 단계별 지침을 설명합니다.

게놈 편집 및 약물 전달을 위한 신생아 마우스의 척수강내 주사

어린 쥐의 요추 수조에 주사를 놓는 수술 절차가 설명되어 있습니다. 이 접근법은 유전자 치료 벡터의 척수강내 전달에 사용되어 왔지만, 이 접근법은 세포 및 약물을 포함한 다양한 치료제에 사용될 수 있을 것으로 예상됩니다.

Intrathecal vector delivery in juvenile rats via lumbar cistern injection(요추 수조 주입을 통한 어린 쥐의 척수강내 벡터 전달)

요추 척추내 주사는 중추 신경계에 유전자 요법을 전달하기 위한 번역적으로 관련된 투여 경로를 나타냅니다. 신생아, 청소년 및 성인 마우스와 쥐의 요추 척추 내 주사에 대한 이 포괄적이고 표준화된 프로토콜은 연구자들이 전임상 유전자 치료 연구에 이 기술을 채택하도록 안내하는 것을 목표로 합니다.

마우스와 쥐에서 중추 신경계 표적화를 위한 유전자 치료 벡터의 요추 내 주입

이 글에서는 성체 마우스에서 CNS 표적 치료제의 테스칼 내 전달 방법을 자세히 설명하며, 프로토콜의 정확성과 반복 주사 허용에 중점을 둡니다. 이 연구에는 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 SOD1-ALS 모델 마우스에서 돌연변이 SOD1 발현을 감소시킨 검증 연구 결과가 포함되어 있어, 신경퇴행성 질환 전임상 연구에서 이 접근법의 유용성을 뒷받침합니다.

SOD1-ASO의 요추 수막내 주사, 인간 SOD1-G93A ALS 마우스에서 정밀한 중추신경계 표적 지정과 예측 효능을 위한 방법

배우세요 쥐 중추 신경계로 안티센스 올리고 뉴클레오티드를 전달하는 카테터 이식법. 이 방법은 약동학 및 약력학 평가에 활용되며 비용이 저렴하고 안전하여 신경과학 연구에 유용합니다.

쥐 중추 신경계에서 안티 센스 올리고 뉴클레오티드의 내 전달

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