재건 미세 수술에서 허혈 재관류 손상의 연구를위한 전 임상 쥐 모델

허혈 재관 전 부상은 재건 미세 수술에서 플랩 실패의 주요 원인입니다. 이 비디오는 이 병리생리학의 연구를 위한 전임상 동물 모형을 기술합니다. 쥐의 피상적 소이컬 상류혈관을 기반으로 하는 이 무료 피부 플랩 모델은 다양한 치료법과 화합물의 평가를 통해 허혈-재퍼퓨전 손상 관련 손상을 중화할 수 있다.

미세 수술 재건은 결함의 다양한 이상적입니다. 그러나, 이러한 절차는 허혈의 필수 기간을 보장 하 고 재관 전. 이 기간은 일반적으로 잘 용납되고, 미세 외과 절차의 성공률은 90%를 초과하지만, 수술 개정을 요구하는 플랩의 73.7%만이 완전히 안전할 수 있습니다.

또한, 손가락 환증 부상의 재농의 경우, 성공률은 약 60%이며 복합 조직 재이식의 경우, 상해가 타고난 면역을 활성화하기 때문에 허혈-재관전 상해 투영비율이 증가한다. 따라서, 이 병리학 현상의 연구 결과는 관심사입니다. 이 절차를 시작하려면 수술 마커를 사용하여 6 센티미터 플랩으로 3 센티미터를 그리며 6 센티미터 측면 중 하나가 복부 중간선과 일치하는지 확인하십시오.

다음으로 복부의 중간선에서 6센티미터 의 피부 절개를 하고, 2개의 수직 3센티미터 절개뿐만 아니라 첫 번째 절개와 평행한 6센티미터 중 하나를 만듭니다. 지정된 피부 플랩을 해부하기 시작하려면 가위와 Adson 집게를 사용하여 플랩을 올립니다. 두개골 부위에서 플랩을 코골이 영역으로 부드럽게 당깁니다.

플랩 페디클을 만지지 않고 또는 선박 벽을 손상시키지 않도록 가능한 한 적게 모험을 파악하여 해부하십시오. 8-0 사용 나일론 봉합사 사페누스 혈관, 측면 경부 대퇴 혈관, 근위 소척 대퇴 혈관을 합자에 의해 폐색. 혈관 페디클을 고정한 다음 8 시간 허혈 기간을 시작하기 위해 잘라냅니다.

분리된 식염수 용액을 사용하여 플랩을 인퓨전한 다음 미세 순환에서 정체된 혈액을 제거하십시오. 10-0 나일론 봉합사를 사용하여 미세 수술 해부학을 수행하십시오. 8시간의 허혈 후, 미세혈관 클램프를 제거하여 플랩을 레퍼퓨즈하고 혈관 가래를 확인합니다.

먼저, 전송 시간 초음파 유량계 및 미세 수술 프로브를 사용하여 혈류를 평가합니다. 유량 프로브의 초음파 감지 창에 대상 용기를 배치하여 유량을 정량화합니다. 좋은 커플링이 달성되고 용기가 장력없이 음향 창에 배치되면 디스플레이의 레코드 버튼을 클릭하여 데이터를 저장합니다.

그 후, 4-0 흡수성 봉합사를 사용하여 피부를 닫습니다. 플랩의 미세 순환을 평가하려면 레이저 반점 대비 분석을 사용합니다. 파일, 새 기록을 클릭하여 각 샘플및 각 후속 연구에 대한 새 레코딩을 만듭니다.

설치 패널이 표시되는 새 창이 열립니다. 여기서 프로젝트 이름, 제목, 연산자 및 기록 이름에 대한 정보를 편집합니다. 조직과 관련하여 레이저를 이동하여 작업 거리를 조정합니다.

관심있는 조직을 향해 레이저 머리를 확대하거나 내다보세요. 이미지 설정에서 원하는 너비와 높이를 입력하여 측정 영역을 표준화합니다. 점 밀도를 높게 설정합니다.

이미지 캡처 설정에서 레코딩의 프레임 속도와 기간을 선택합니다. 그런 다음 녹음 버튼을 클릭하여 녹음을 시작합니다. 설치 패널은 녹화 패널로 대체되고 데이터가 자동으로 저장됩니다.

프로시저 중에 스냅샷을 찍어 추가 비교를 가능하게 합니다. 그런 다음 ImageJ 소프트웨어를 사용하여 먼저 플랩 부위에 눈자를 배치하고 거시적 측정을 위해 제어 사진을 촬영하여 생존 및 괴사 영역을 측정합니다. ImageJ 도구 상자에서 직선을 선택하고 눈금자의 1센티미터 에 걸쳐 선을 그립니다.

분석, 설정 축척 및 알려진 거리에 대한 텍스트 상자에서 클릭하면 1센티미터의 값을 입력합니다. 다각형 선택 도구를 클릭하고 플랩 위에 다각형 선을 그려 실행 가능한 영역을 계산합니다. 분석을 클릭하고 측정하여 영역 값을 가져옵니다.

그런 다음, 자기 절단을 방지하기 위해 주택 전에 동물에 수술 후 드레싱을 배치합니다. 수술 후 7일 후, 플랩 생존 및 괴사 부위의 거시적 측정을 가능하게 하는 수술 부위를 촬영합니다. 이전에 설명된 레이저 반점 대비 분석 기술을 사용하여 관류 차이를 시각화하고 정량화하여 플랩의 미세 순환을 평가합니다.

거시적 분석 후, 4-0 봉합사를 제거하고 플랩을 올리고 통과 시간 초음파를 사용하여 혈관 페디클 혈류를 재평가합니다. 플랩을 1.5cm를 6센티미터로 측정하는 두 부분으로 세로분할하여 조직 샘플링을 수행합니다. 미세 수술 적 해부학의 생성 직후, 우리는 문헌에서 권장되는 최소 흐름보다 더 높은 혈류 값을 얻었다.

따라서, 모든 미세 수술 해부학은 수술 후 1 주일 특허되었다. 허혈성 모욕 시 혈류의 미세 순환 타락을 관찰하는 것은 레이저 반점 대비 분석 기술로 가능했다. 이것은 플랩 재관류 동안 즉각적인 과잉 주입을 포함하고 perioperatively, 더 적은 관류를 가진 다른 지역은 실제로 연구 결과의 끝 후에 7 일 괴사되었다 수술 후 플랩 괴사의 고위험이 있었다.

8시간 동안 허혈과 그 후속 재퍼퓨전 후 플랩 생존 지역은 약 40%였으며, 이 모델은 허혈성 모욕이 가해지는 플랩과 비교될 때 통계적으로 유의한 차이를 나타냈다. 플랩 페디클을 만지지 않고 또는 혈관 벽을 손상시키지 않도록 가능한 한 적게 출현을 파악하여 외과 기술로 인한 합병증을 피하기 위해 적절한 미세 수술 해부학을 수행하는 것을 기억하십시오. 수술 중, 대중 교통 시간 초음파 기술은 미세 수술 해부학의 혈류를 정량화하여 플랩 관류를 예측할 수 있게 합니다.

수술 후, 레이저 반점 대비 분석은 자유 플랩 내에서 흐름의 실시간 매핑의 반 연속성을 허용한다. 그것은 유망한 기술, 그러나 추가 연구가 필요. 이 비디오는 재건 미세 수술 분야에서 허혈 -재관류 손상을 중화하기 위해 치료제를 평가하기위한 적합한 모델의 프로토콜을 설명했습니다.