Name: 정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 34 s
Description: 배우세요 정보 인코딩 펩토이드 올리고머의 합성 및 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립 방법을. 이 기술은 루이스 산을 활용해 결합 재배열을 촉매하여 복잡한 분자 사다리 구조를 형성하며, 생체재료 및 공유유기구조체 연구에 활용됩니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 작품은 미국 에너지부, 과학부, 기초 에너지 과학부의 지원을 #DESC0012479. S.C.L.은 국립 과학 재단 대학원 연구 펠로우십 프로그램의 지원을 인정하며, A.F.A.는 아부다비 국영 석유 회사(ADNOC)의 지원을 인정합니다.

<ol><li>Seeman, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleic+acid+junctions+and+lattices%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Theoretical+Biology%22%5BJournal%5D)">Nucleic acid junctions and lattices.</a> Journal of Theoretical Biology. 99 (2), 237-247 (1982).</li>
<li>Rothemund, P. W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Folding+DNA+to+create+nanoscale+shapes+and+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Folding DNA to create nanoscale shapes and patterns.</a> Nature. 440, March 297-302 (2006).</li>
<li>Watt, A. A. R., Bothma, J. P., Meredith, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+supramolecular+structure+of+melanin%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">The supramolecular structure of melanin.</a> Soft Matter. 5 (19), 3754-3760 (2009).</li>
<li>Tørring, T., Voigt, N. V., Nangreave, J., Yan, H., Gothelf, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+origami%3A+A+quantum+leap+for+self-assembly+of+complex+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Society+Reviews%22%5BJournal%5D)">DNA origami: A quantum leap for self-assembly of complex structures.</a> Chemical Society Reviews. 40 (12), 5636-5646 (2011).</li>
<li>Wei, B., Dai, M., Yin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+shapes+self-assembled+from+single-stranded+DNA+tiles%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Complex shapes self-assembled from single-stranded DNA tiles.</a> Nature. 485 (7400), 623-626 (2012).</li>
<li>Clausen-Schaumann, H., Rief, M., Tolksdorf, C., Gaub, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+stability+of+single+DNA+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Mechanical stability of single DNA molecules.</a> Biophysical Journal. 78 (4), 1997-2007 (2000).</li>
<li>Rowan, S. J., Cantrill, S. J., Cousins, G. R. L., Sanders, J. K. M., Stoddart, J. F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRowan%2C+SJ+%22Dynamic+covalent+chemistry.+Angewandte+Chemie+-+International+Edition%22">Dynamic covalent chemistry. Angewandte Chemie - International Edition</a>. 41 (6), (2002).</li>
<li>Jin, Y., Yu, C., Denman, R. J., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+dynamic+covalent+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Society+Reviews%22%5BJournal%5D)">Recent advances in dynamic covalent chemistry.</a> Chemical Society Reviews. 42 (16), 6634-6654 (2013).</li>
<li>Furgal, J. C., Dunn, M., Wei, T., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+Applications+of+Dynamic+Covalent+Chemistry+from+Macro-+to+Nanoscopic+Length+Scales%5BTitle%5D)+AND+%22Dynamic+Covalent+Chemistry%3A+Principles%2C+Reactions%2C+and+Applications%22%5BJournal%5D)">Emerging Applications of Dynamic Covalent Chemistry from Macro- to Nanoscopic Length Scales.</a> Dynamic Covalent Chemistry: Principles, Reactions, and Applications. , 389-434 (2017).</li>
<li>Hartley, C. S., Elliott, E. L., Moore, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalent+assembly+of+molecular+ladders%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Covalent assembly of molecular ladders.</a> Journal of the American Chemical Society. 129 (15), 4512-4513 (2007).</li>
<li>Wei, T., Furgal, J. C., Jung, J. H., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long%2C+self-assembled+molecular+ladders+by+cooperative+dynamic+covalent+reactions%5BTitle%5D)+AND+%22Polymer+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Long, self-assembled molecular ladders by cooperative dynamic covalent reactions.</a> Polymer Chemistry. 8 (3), 520-527 (2017).</li>
<li>Dunn, M. F., Wei, T., Scott, T. F., Zuckermann, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aqueous+dynamic+covalent+assembly+of+molecular+ladders+and+grids+bearing+boronate+ester+rungs%5BTitle%5D)+AND+%22Polymer+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Aqueous dynamic covalent assembly of molecular ladders and grids bearing boronate ester rungs.</a> Polymer Chemistry. (18), 2337-2343 (2019).</li>
<li>Furgal, J. C., Van Dijck, J. M., Leguizamon, S. C., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accessing+sequence+specific+hybrid+peptoid+oligomers+with+varied+pendant+group+spacing%5BTitle%5D)+AND+%22European+Polymer+Journal%22%5BJournal%5D)">Accessing sequence specific hybrid peptoid oligomers with varied pendant group spacing.</a> European Polymer Journal. (118), 306-311 (2019).</li>
<li>Tozawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porous+organic+cages%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Porous organic cages.</a> Nature Materials. 8 (12), 973-978 (2009).</li>
<li>Tian, J., Thallapally, P. K., Dalgarno, S. J., McGrail, P. B., Atwood, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amorphous+molecular+organic+solids+for+gas+adsorption%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+-+International+Edition%22%5BJournal%5D)">Amorphous molecular organic solids for gas adsorption.</a> Angewandte Chemie - International Edition. 48 (30), 5492-5495 (2009).</li>
<li>Jin, Y., Wang, Q., Taynton, P., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+covalent+chemistry+approaches+toward+macrocycles%2C+molecular+cages%2C+and+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Dynamic covalent chemistry approaches toward macrocycles, molecular cages, and polymers.</a> Accounts of Chemical Research. 47 (5), 1575-1586 (2014).</li>
<li>Ren, F., Day, K. J., Hartley, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-+and+three-tiered+stacked+architectures+by+covalent+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Two- and three-tiered stacked architectures by covalent assembly.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 55 (30), 8620-8623 (2016).</li>
<li>Elliott, E. L., Hartley, C. S., Moore, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalent+ladder+formation+becomes+kinetically+trapped+beyond+four+rungs%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Communications%22%5BJournal%5D)">Covalent ladder formation becomes kinetically trapped beyond four rungs.</a> Chemical Communications. 47 (17), 5028-5030 (2011).</li>
<li>Tran, H., Gael, S. L., Connolly, M. D., Zuckermann, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solid-phase+submonomer+synthesis+of+peptoid+polymers+and+their+self-assembly+into+highly-ordered+nanosheets%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Solid-phase submonomer synthesis of peptoid polymers and their self-assembly into highly-ordered nanosheets.</a> Journal of Visualized Experiments. (57), 1-6 (2011).</li>
<li>Zuckermann, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptoid+origins%5BTitle%5D)+AND+%22Biopolymers%22%5BJournal%5D)">Peptoid origins.</a> Biopolymers. 96 (5), 545-555 (2011).</li>
<li>Sun, J., Zuckermann, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptoid+polymers%3A+A+highly+designable+bioinspired+material%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Peptoid polymers: A highly designable bioinspired material.</a> ACS Nano. 7 (6), 4715-4732 (2013).</li>
<li>Belowich, M. E., Stoddart, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+imine+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Society+Reviews%22%5BJournal%5D)">Dynamic imine chemistry.</a> Chemical Society Reviews. 41 (6), 2003-2024 (2012).</li>
<li>Giuseppone, N., Schmitt, J. L., Schwartz, E., Lehn, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scandium%28III%29+catalysis+of+transimination+reactions.+Independent+and+constitutionally+coupled+reversible+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Scandium(III) catalysis of transimination reactions. Independent and constitutionally coupled reversible processes.</a> Journal of the American Chemical Society. 127 (15), 5528-5539 (2005).</li>
<li>Shū, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scandium+triflate+in+organic+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Organic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Scandium triflate in organic synthesis.</a> European Journal of Organic Chemistry. 1999 (1), 15-27 (1999).</li>
<li>Wei, T., Furgal, J. C., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+deprotection+and+dynamic+covalent+assembly+using+a+dual+role+catalyst%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Communications%22%5BJournal%5D)">In situ deprotection and dynamic covalent assembly using a dual role catalyst.</a> Chemical Communications. 53 (27), 3874-3877 (2017).</li>
<li>Matsumoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid%2C+low+temperature+formation+of+imine-linked+covalent+organic+frameworks+catalyzed+by+metal+triflates%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Rapid, low temperature formation of imine-linked covalent organic frameworks catalyzed by metal triflates.</a> Journal of the American Chemical Society. 139 (14), 4999-5002 (2017).</li>
<li>Ma, X., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Approaches+and+challenges+in+the+synthesis+of+three-dimensional+covalent-organic+frameworks%5BTitle%5D)+AND+%22Communications+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Approaches and challenges in the synthesis of three-dimensional covalent-organic frameworks.</a> Communications Chemistry. , (2018).</li>
<li>Perron, V., Abbott, S., Moreau, N., Lee, D., Penney, C., Zacharie, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+the+selective+protection+of+aromatic+amines+in+the+presence+of+aliphatic+amines%5BTitle%5D)+AND+%22Synthesis%22%5BJournal%5D)">A method for the selective protection of aromatic amines in the presence of aliphatic amines.</a> Synthesis. 2 (2), 283-289 (2009).</li>
<li>Wei, T., Jung, J. H., Scott, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+covalent+assembly+of+peptoid-based+ladder+oligomers+by+vernier+templating%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Dynamic covalent assembly of peptoid-based ladder oligomers by vernier templating.</a> Journal of the American Chemical Society. 137 (51), 16196-16202 (2015).</li>
<li>Ouari, O., Chalier, F., Bonaly, R., Pucci, B., Tordo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+spin-trapping+behaviour+of+glycosylated+nitrones%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Chemical+Society%2C+Perkin+Transactions%22%5BJournal%5D)">Synthesis and spin-trapping behaviour of glycosylated nitrones.</a> Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions. 2 (10), 2299-2308 (1998).</li>
<li>Sun, J., Stone, G. M., Balsara, N. P., Zuckermann, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure-conductivity+relationship+for+peptoid-based+PEO-mimetic+polymer+electrolytes%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Structure-conductivity relationship for peptoid-based PEO-mimetic polymer electrolytes.</a> Macromolecules. 45 (12), 5151-5156 (2012).</li>
<li>Sartori, G., Ballini, R., Bigi, F., Bosica, G., Maggi, R., Righi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+%28and+deprotection%29+of+functional+groups+in+organic+synthesis+by+heterogeneous+catalysis%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Protection (and deprotection) of functional groups in organic synthesis by heterogeneous catalysis.</a> Chemical Reviews. 104 (1), 199-250 (2004).</li>
<li>Kim, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+truncation+of+N-acylated+peptoids+under+acidic+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Organic+%26+biomolecular+chemistry%22%5BJournal%5D)">Unusual truncation of N-acylated peptoids under acidic conditions.</a> Organic & biomolecular chemistry. 12 (28), 5222-5226 (2014).</li>
<li>Mannige, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptoid+nanosheets+exhibit+a+new+secondary-structure+motif%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Peptoid nanosheets exhibit a new secondary-structure motif.</a> Nature. 526 (7573), 415-420 (2015).</li>
<li>Edison, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conformations+of+peptoids+in+nanosheets+result+from+the+interplay+of+backbone+energetics+and+intermolecular+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Conformations of peptoids in nanosheets result from the interplay of backbone energetics and intermolecular interactions.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 115 (22), 5647-5651 (2018).</li>
<li>Kobayashi, S., Sugiura, M., Kitagawa, H., Lam, W. W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rare-earth+metal+triflates+in+organic+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Rare-earth metal triflates in organic synthesis.</a> Chemical Reviews. 102 (6), 2227-2302 (2002).</li>
<li>Fujinaga, S., Hashimito, M., Tsukagoshi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+the+composition+for+a+ternary+solvent+system+in+tube+radial+distribution+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Liquid+Chromatography+and+Related+Technologies%22%5BJournal%5D)">Investigation of the composition for a ternary solvent system in tube radial distribution chromatography.</a> Journal of Liquid Chromatography and Related Technologies. 38 (5), 600-606 (2015).</li>
</ol>

저자는 공개 할 것이 없다.

본 명세서의 기술은 정보가 펜던트 그룹의 순서대로 인코딩되는 정보 베어링 펩토이드 올리고머의 동적 공유 어셈블리를 설명합니다. 에틸렌 아탈 보호 알데히드 단량체와 함께 Alloc 보호 아민 단량체를 사용하면 직교 차단이 가능하여 자체 조립 반응 중에 비드 및 아세트탈 보호에 대한 Alloc 보호 가 가능하므로 합성 된 서열이 올리고머 화 및 특성화 이전에 조기에 반응하지 않도록합니다. 중요한 것은, 고체 상 합성은 UV 또는 보라색 광 조사 하에 비드로부터 올리고머 절단을 가능하게 하기 위해 광라빌 수지(photolabile resin)를 사용하여 수행되며, 산-비질, 에틸렌 아세탈 계 보호 군의 조기 보호를 배제한다. 몇 가지 대체 보호 해제 체계가 고려될 수 있습니다. 예를 들어, 우리는 처음에 이중 산-비질 보호 기(Boc-amine 및 에틸렌 아세탈-알데히드)를 강한 산에 의한 초기 탈방의 의도로 채택하고 중화하여 자가 조립 반응이 진행될 수 있도록 하였다; 그러나, 이 접근법은 염기의 첨가시 침전물의 즉각적인 생성을 초래했다. 대안적으로, 광나래빌 보호기인 2-(2-니트로페닐)의 프로실카보닐(NPPOC)을 가진 아민의 보호는, 알데히드가 정제 전에 삼불화산(TFA)으로 처리될 때 선택적으로 탈보호될 수 있는 것으로 구상되었다. 불행하게도, UV 광을 가진 보호 기의 상태 광용해에서도 광감작제의 존재 및 연장 된 조사 기간25후 양적 보호를 감당하지 못했다. 트리메틸릴레톡카보닐(즉, Teoc)은 아민 보호그룹으로 사용될 수 있으며 희토류 금속 트리플랫으로 처리시 분열을 당할 수 있습니다. 그러나 정량적 Teoc 보호는 에틸렌 아세탈 보호에 필요한 것보다 훨씬 더 높은 희토류 금속 트리플랫 하중을 필요로 합니다. 이 프로토콜의 경우, Teoc-amines가 사용될 수 있지만, 루이스 산 농도는 서브 정량적 아민 보호가 더 큰 자가 조립 구조에 문제가 될 수 있기 때문에 그에 따라 조정되어야 합니다. 알리파틱 작용기는 간략하게 고려되었으나, 알데히드의 보호를 해제하려면 펩티드 서열을 트렁킨 가혹한 조건이요구된다(32,33).
Neee와 Nma를 불활성 스페이서 잔류물로 통합하면 올리고머 용해도를 개선하고 전구체 올리고머의 실용성 대량 태깅을 가능하게하여 대량 분광법에 의해 생성 된 종의 준비 식별을 감당할 수 있습니다. 더욱이, 인접 한 백본 세그먼트선형, 트위스트 없는 올리고머34,35를형성 하기 위해 반대 회전 상태를 채택 하는 펩 토이드의 'Σ-strand' 형태를 감안할 때, 교대 동적 공유 및 불활성 스페이서 잔기를 통합 하는 시퀀스는 반응성 펜던트 그룹 동일한 방향으로 지향 하는 구조를 용이 하 게. 서브모노머 방법의 다양성, 1 차 아민의 크고 다양한 라이브러리는 펩토이드 올리고머를 추가로 수정하기 위해 사용될 수 있지만 높은 결합 효율을 유지하기 위해 프로토콜에 대한 조정이 필요할 수 있습니다.
올리고(peptoids)는 유리 반응용기(19)에서수동으로 합성될 수 있는 반면, 공정의 자동화는 매 잔류물 첨가에 대한 시간을 몇 시간에서 반 시간으로 감소시다. 또한 자동화는 단량체 및 세척 용매 폐기물의 양을 감소시며, 특히 시판되지 않는 1차 아민 단량체를 사용할 때 바람직합니다. 보호 된 아민 잔류물에서 Alloc 분열은 효율적인 반응이지만 팔라듐 산화는 불완전한 보호 를 초래할 수 있습니다. 따라서, 수지의 일부를 갈라테스트하고 ESI-MS로 탈방 정도를 특성화하는 것이 좋습니다. 시험 분열을 위해, 405 nm 조사에서 30 분 질량 분광법을 위한 충분한 펩토이드를 풀어 놓습니다. 부분 제보호는 혐기성 조건의 사용 또는 탈보호 반응을 반복하는 것으로 제한될 수 있다.
이 기사에서는 Sc (OTf)3을 다역할 시약으로 중점하는 반면, 이터비움 트라이플랫과 같은 다른 희토류 금속 트리플랫은 분자 사다리의 정보 지향 조립을 성공적으로 중재하는 것으로 나타났습니다. 특히, Sc(OTf)3은 희토류 금속 트리플랫중 가장 많은 루이스 산성이다. 따라서, 다른 희토류 금속트리플랫(24,36)에의해 제공되는 감소된 촉매 능력으로 인해, 완전한 에틸렌 아세탈 보호 및 가닥 해리효과를 위해 더 큰 등가물들이 요구될 수 있다. 필요한 등가물의 수는 가닥이 완전히 해리되는 지점을 관찰하여 MALDI 질량 분석법으로 결정할 수 있습니다. 해리는 자체 조립 공정에서 중요하며 상승된 온도에서 핵산 가닥의 용융과 유사합니다. 촉매의 후속 추출은 서열 특정 듀플렉스의 조립을 추진하는 동적 공유 페어링의 형성 및 중단을 가능하게합니다. 올리고머 가닥의 이 점진적인 어닐링은 다른 방법에 의해 경험된 운동 트랩(분자 사다리의 경우 레지스트리 밖의 종을 산출하거나 순서를 잘못 쌍으로 만들 수 있음)을 우회합니다.
클로로포름은 여기에 사용되는 클로로포름/아세토니트릴/물 삼차 시스템에서 상 분리로서 우수한 용매로서 자체 조립구조물(37)의침전을 초래하지 않고 루이스 산의 부분추출을 촉진한다. 또한, 클로로포름은 분자 사다리 용해도를 유지하면서 이민 형성을 촉진하는 몇 안되는 용매 중 하나입니다. 시스템의 동적 특성으로 인해 레지스트리 를 벗어난 양과 잘못 페어링된 이중 면류의 미량은 종종 관찰될 수 있습니다. 이 시스템은 추출 시 희토류 금속 트리플랫 농도의 작은 변화에 크게 영향을 받지 않지만, 때때로 불충분한 촉매 추출은 불완전한 혼성화 및 비특이적 올리고머 커플링의 상당 부분을 생성합니다. 이 경우, 단일 가닥의 완전한 해리가 공정에 필수적이기 때문에 일반적으로 촉매의 1.5 등가물로 먼저 다시 해리한 다음 즉시 다시 추출하는 것보다 두 번째 추출하는 것이 바람직합니다. 여러 가지 독특한 정보 부호인 분자 사다리를 동시에 조립하려면 등가물 및 총 반응 량을 유지하는 데 사용되는 희토류 금속 트리플랫 스톡 솔루션의 농도를 증가시켜야 할 수 있습니다.
이러한 자체 어셈블리는 주로 질량 분석법을 특징으로 하지만 형광 공명 에너지 전달(FRET)을 비롯한 다른 기술이 가능합니다. 제한 사항에는 필요한 재료의 양, 단량체의 경제성 및 신호 대 잡음 비율이 포함됩니다. 1H NMR과 같은 용매가 필요한 기술은 자체 조립 된 구조의 불용성으로 인해 추가로 고통을 겪을 수 있습니다. 또한, 희토류 금속 삼중팽창 농도 는 ICP-MS 또는 내부 표준이 있는 19FNMR과 같은 방법을 통해 결정할 수 있다.
매크로 및 수화 나노 구조 및 재료에 대한 향상된 제어를 향한 진전이 진행됨에 따라 정기적이지만 수정 가능한 어셈블리를 설계하고 제작해야 하는 과제가 발생합니다. 이 보고서에 설명된 프로토콜은 동적 공유 상호 작용을 통해 서열 선택적 어셈블리를 통해 이러한 나노 구조를 달성하는 경로를 제공합니다.

소규모 서브유닛이 열역학적 구동 경로를 통해 더 큰 아키텍처를 생성하는 자체 조립 공정은 π-스태킹 및 수소결합1,2,3,4와같은 분자 간 상호 작용을 일반적으로 활용하여 일반적으로 거시 및 초분자 나노 구조에 대한 향상된 제어를 제공했습니다. 특히, 핵산(즉, 폴리뉴클레오티드)은 왓슨크릭 염기 페어링에 의해 제공되는 높은 정보 밀도로서 놀랍도록 다재다능한 나노 시공 매체로 등장하여 복잡하고 서열 선택적구조4,5의조립을 허용한다. 이러한 과도 분자 간 결합의 본질적으로 낮은 강도는 하위 단위 재배열 및 오류 보정을 가능하게하는 반면, 결과 구조는 종종 열 및 기계적열화에 취약합니다 6. 대조적으로, 동적 공유 상호 작용7,8,9,온화한 조건하에서 가역적이거나 재배열 할 수있는 공유 결합 형성 반응의 클래스는 최근 사다리10,11, 12,13,케이지14,15,16및 스택17과같은 복잡한 거대 분자를 산출하기 위해 채택되었습니다. 결합 강도와 견고한 구조를 증가시켰습니다. 불행하게도, 이러한 공유 종의 비교적 낮은 재배열 비율에 의해 재배열 및 오류 확인을 위한 용량이 감소되고, 원하는 제품으로 자체 조립을 위한 그들의 용량을 감소시켰다18. 이러한 운동 트랩핑을 해결하기 위해 촉매 또는 가혹한 반응 조건은 종종 간단한 빌딩 블록과 함께 활용됩니다. 여기서, 우리는 올리고머 잔류 서열에 인코딩된 정보에 의해 혼성화가 지시되는 서열 특이적 올리고머로부터 분자 사다리의 자가 조립을 가능하게 하기 위해 운동 트래핑을 우회하는 과정을 보고한다.
이들의 합성 접근성을 감안할 때, 폴리(N-치환 글리신)s(즉, 펩토이드)는 분자 사다리가 조립되는 올리고머 전구체로서19가지로사용된다. 펩토이드는 펩타이드의 구조적 이소메로, 펜던트 그룹은 α-탄소20과결합되는 대신 백본 매개 질소에 부착된다. 고체 상 합성을 사용하여 펩토이드 사슬을 따라 동적 공유 펜던트 그룹의 정확한 배치가 용이하게 달성되어 복잡한 상분자 구조(21)로조립 할 수있는 전구체 올리고머의 설계가 가능합니다.
imine 연결성의 동적 공유 배열은 imine 발생 응축 반응이 각 결합형성으로 질량 분석법에 의해 자가 조립을 특성화하는 편리한 수단을 제공함에 따라 이 절차에서 사용되어 18 g/mol22의질량 감소를 초래한다. 더욱이, 아민과 알데히드 반응물 및 이민 생성물 사이의 평형은 산 농도를 변화시킴으로써 변화될 수 있다. 구체적으로, 희토류 금속 트리플랫은 평형에 영향을 미치고, 에틸렌 아세탈 보호 알데히드23,24,25를추가로 탈보호하는 데 사용된다. 참고로, 스산듐 트리플랫은 이미 상온26,27에서공유 유기 프레임워크(COF)의 합성을 돕는 최근의 성공을 포함하여 동적 공유 자성 조립 분야에서 일반적으로 사용되고 있다. 또한, 올리고 (펩토이드) 서열과 희토류 금속 triflate의 대조 용해도는 액체 - 액체 추출을 통해 평형 제어를 가능하게한다. 보고된 프로세스는 이 제어를 사용하여 정보 지향자가 조립하는 것을 방지하는 운동 장벽을 우회합니다.

<table><tbody><tr><td>1,4-Dioxane</td><td>Fisher Scientific</td><td>D1114</td><td>인증 ACS</td></tr><tr><td>2-(4-Hydroxyphenylazo)benzoic acid (HABA)</td><td>Millipore-Sigma</td><td>54793</td><td>MALDI-MS용 매트릭스 물질; &ge; 99.5%</td></tr><tr><td>4-(2-아미노에틸)아닐린</td><td>온타리오 화학</td><td>A2076</td><td>98%</td></tr><tr><td>4-시아노벤즈알데히드</td><td>오크우드 화학 049317</td><td></td><td>99%</td></tr><tr><td>4-메틸피페리딘</td><td>TCI America</td><td>P0445</td><td>&ge; 98.0%</td></tr><tr><td>4-톨루엔설포닐 클로라이드</td><td>오크우드 케미컬</td><td>BR1703</td><td>99%</td></tr><tr><td>50mL 고성능 원심분리기 튜브</td><td>VWR International</td><td>21008-240</td><td>자동 합성기에 사용되는 원심분리기 튜브</td></tr><tr><td>아세트산</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>빙하</td></tr><tr><td>아세트산 무수물</td><td>Fisher Scientific</td><td>A10</td><td>인증 ACS</td></tr><tr><td>HPLC용 아세토니트릴</td><td>Millipore-Sigma</td><td>34851</td><td>; 그라디언트 등급; &지; 99.9%</td></tr><tr><td>All-plastic Norm-Ject 주사기</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S7510-10</td><td>Luer-Slip 주사기</td></tr><tr><td>Allyl chloroformate</td><td>Acros Organics</td><td>221741000</td><td>97%</td></tr><tr><td>Bromoacetic acid</td><td>Alfa Aesar</td><td>A14403</td><td>&ge; 98.0 %</td></tr> <tr><td>클로로포름</td><td>밀리 포어 - 시그마</td><td>288306</td><td>무수; &ge; 99%; 안정제로 0.5-1.0% 에탄올 함유</td></tr><tr><td>Chloroform-d</td><td>Acros 유기물</td><td>AC320690075</td><td>NMR용;99.8 원자 % D; 0.75 ml 앰플에 포장됨</td></tr><tr><td>Dichlorodimethylsilane</td><td>Acros Organics</td><td>1133100</td><td>&ge; 99.0%</td></tr><tr><td>Dichloroethane</td><td>Fisher Scientific</td><td>E175</td><td>인증 ACS</td></tr><tr><td>디클로로메탄</td><td>Fisher Scientific</td><td>D37-4</td><td>안정화; ACS</td></tr><tr><td>Diethyl ether</td><td>Acros Organics</td><td>615080010</td><td>무수 인증; ACS 시약</td></tr><tr><td>디에틸렌 글리콜 모노 에테르</td><td>TCI America</td><td>E0048</td><td>&ge; 99.0%</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>Decon Labs</td><td>2701</td><td>200 프루프; 무수</td></tr><tr><td>에틸렌 글리콜</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>E178</td><td>인증</td></tr><tr><td>Fmoc-Photolabile SS 수지</td><td>CreoSalus</td><td>SA50785</td><td>100-200 메쉬; 1% DVB</td></tr><tr><td>유리 펩타이드 용기</td><td>Chemglass</td><td>CG-1866-02</td><td>고체상, T-보어 PTFE Stpk, 진공, 중간 프릿, GL 25 스레드</td></tr><tr><td>LC-6AD HPLC 펌프</td><td>Shimadzu Corporation</td><td></td><td>장비</td></tr><tr><td>LED 405nm</td><td>ThorLabs</td><td>M405L2-C1</td><td>펩토이드 LED 드라이버의 광 분열에 사용되는 405nm LED</td></tr><tr><td>펩</td><td>토이드 광 분열에 사용되는 LED 조명용 ThorLabs</td><td></td><td>LEDD1B</td> 드라이버</tr><tr><td>Liberty Blue 자동 펩타이드 합성기</td><td>CEM Corporation</td><td></td><td>장비</td></tr><tr><td>리튬 알루미늄 수소화물</td><td>Millipore-Sigma</td><td>199877</td><td>가루; 시약 등급; 95%; 주의: 약한 발화성, 불활성 가스 아래에서 취급 및 습기로부터 보호</td></tr><tr><td>Luna C18 분석 RP-HPLC 컬럼</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4252-E0</td><td>장비</td></tr><tr><td>Luna C18 준비 RP-HPLC 컬럼</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4253-P0-AX</td><td>장비</td></tr><tr><td>메탄올</td><td>Fisher Scientific</td><td>A412</td><td>인증 ACS</td></tr><tr><td>마이크로리터 주사기</td><td>Hamilton Company</td><td>80700</td><td>시멘트 바늘 (N)</td></tr><tr><td>N,N'-Diisopropylcarbodiimide (DIC)</td><td>Oakwood Chemical</td><td>M02889</td><td>&ge; 99.0%; 주의: DIC는 호흡기 흡입을 통해 눈, 피부에 해로울 수 있으며, 피부 민감성을 유발할 수 있습니다</td></tr>. <tr><td>N,N-Dimethylformamide</td><td>Millipore-Sigma</td><td>319937</td><td>ACS 시약; &ge; 99.8 %</td></tr> <tr><td>질산</td><td>Fisher Scientific</td><td>A200-212</td><td>인증 ACS Plus</td></tr><tr><td>질소 가스</td><td>극저온 가스</td><td></td><td>압력 하에서 내용물, 가열하면 폭발 할 수 있습니다</td></tr><tr><td>페닐 실란</td><td>오크 우드 화학</td><td>S13600</td><td>97 %</td></tr> <tr><td>Prominence SPD-10A UV / vis 검출기</td><td>Shimadzu Corporation</td><td></td><td>장비</td></tr><tr><td>p-Toluenesulfonic acid monohydrate</td><td>Millipore-Sigma</td><td>402885</td><td>ACS 시약; &ge; 98.5%</td></tr><tr><td>스칸듐(III) 트리플레이트</td><td>오크우드 화학009343</td><td></td><td>99%</td></tr><tr><td>일회용 바늘</td><td>엑셀 인터내셔널</td><td>26420</td><td>18G x 1 1/2&프라임;</td></tr><tr><td>나트륨 아지드</td><td>오크 화학</td><td>094448</td><td>99 %; 주의: NaN3은 납 및 구리와 반응하여 폭발성이 높은 금속 아지드를 형성할 수 있습니다. 급성 독성이 있으며 삼키거나 피부에 닿으면 치명적입니다.</td></tr><tr><td>중탄산나트륨</td><td>피셔 과학</td><td>S233</td><td>분말; 인증 된 ACS</td></tr><tr><td>수산화 나트륨</td><td>Fisher Scientific</td><td>S318-100</td><td>펠릿; 인증 된 ACS</td></tr><tr><td>황산나트륨</td><td>Fisher Scientific</td><td>S421-500</td><td>무수; 세부적인; 인증된 ACS</td></tr><tr><td>주사기 필터 0.45 &micro; m</td><td>VWR International</td><td>28145-497</td><td>PTFE, 폴리프로필렌 하우징이 있는 주사기 필터</td></tr><tr><td>Tetrahydrofuran</td><td>Fisher Scientific</td><td>T397</td><td>인증</td></tr><tr><td>테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐(0)</td><td>오크우드 케미컬</td><td>034279</td><td>98%</td></tr><tr><td>톨루엔</td><td>피셔 사이언티픽</td><td>T324</td><td>인증 ACS</td></tr><tr><td>트리페닐포스핀</td><td>오크우드 케미컬</td><td>037818</td><td>99%</td></tr></tbody></table>

정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립

Synthesis of Information-bearing Peptoids and their Sequence-directed Dynamic Covalent Self-assembly

이 프로토콜은 상호 보완적인 핵산 서열의 자가 조립을 위해 일반적으로 사용되는 열 사이클링을 모방하는 방식으로 쌍으로 결합된 동적 공유 상호 작용에 의해 매개된 정보 인코딩된 올리고머릭 가닥의 자가 조립 중에 관찰된 운동 트래핑을 우회하기 위해 Lewis acidic 다역할 시약을 사용하는 것을 제시합니다. 알데히드와 아민 펜던트 모이티를 베어링하는 1차 아민 단량체는 동적 공유 반응제 쌍으로 사용하기 위해 직교 보호 그룹과 함께 기능화됩니다. 변형된 자동화된 펩타이드 신디사이저를 사용하여, 1차 아민 단량체는 고체 상 서브모노머 합성을 통해 올리고(peptoid) 가닥으로 인코딩된다. 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)에 의한 정제와 전기 분무 이온화 질량 분석법(ESI-MS)에 의한 특성화시, 서열 특이적 올리고머는 알데히드 모에이티를 탈피하고 완전히 드란에 있는 반응물 쌍 평형에 영향을 미치는 루이스 산성 희토류 금속 트리플랫의 고부하를 받게 된다. 그 후, 루이스 산의 일부가 추출되어 상보적 서열 특이적 가닥의 어닐링이 매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 질량 분석법(MALDI-MS)을 특징으로 하는 정보 부호 분자 사다리를 형성할 수 있게 합니다. 이 보고서에 설명된 간단한 절차는 동적 공유 어셈블리 분야에서 일반적으로 경험되는 운동 트랩을 우회하며 견고하고 복잡한 아키텍처의 미래 설계를 위한 플랫폼 역할을 합니다.

분자 사다리로 서열 선택적 동적 공유 자기 조립을 겪는 정보 인코딩 된 펩토이드의 능력을 입증하기 위해, 대표적인 가닥, H2N-[Npam-Neee-Npal-Neee] 2-Npam-Nma, 그 상보적인 펩토이드 서열로 합성 및 혼성화되었다. 단량체 Npam 및 Npal(특징 1H NMR (500 MHz), 도 1)은최종 자체 조립 제품의 용해도를 돕는 Neee와 동적 공유 반응기 쌍으로 사용되었다. 부가적으로, 시판되는 Nma 단량체의 혼입은 두 상보적 서열 들 사이의 질량 분화를 가능하게 한다. 고체 상 서브모노머 합성이 완료되면, Alloc-group은 Pd(PPh3)4로제거하였다. 탈보호 전후, 수지의 일부를 405 nm 빛 이하로 절개하고 ESI-MS(도2)를특징으로 한다. 서열을 Prep HPLC에 의해 정제하고, 백색 분말을 달성하기 위해 동질화하고, 순도를 분석HPLC로 확인하였다(도3). 올리고(peptoid)는 이후 그 상보적인 서열,H2N-[Npal-Neee-Nam-Neee] 2-Npal, MALDI-MS에 의해 확인된 레지스트리 사다리를 감당하기 위해 혼성화되었다(그림4).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60442/60442fig1a.jpg"> 그림 1: 단량체 합성 계획 및 1H-NMR 스펙트럼. (A) 시약 및 조건이있는 단량체 합성 계획 : (i) 아릴 클로로 포메이트, 10 % 수성 아세트산, 1,4 -다이옥산, 실온, 하룻밤; (ii) 에틸렌 글리콜, 톨루엔-p-설포닉산, 톨루엔, 환류, 하룻밤; (iii) LiAlH4,무수 Et2O, 0°C 에 대해 4시간 동안, 12시간 동안 실온; (iv) 토실 염화물, THF, 0°C; (v)NaN3,DMF, 60 °C, 36 시간; (vi) 트리페닐포스핀, THF, 하룻밤. (b) 단량체 1H-NMR 스펙트럼 (500 MHz, CDCl3): (i) 4-(2-아미노에틸)-N-(알모카르보닐옥시)페닐알라민(Npam); (ii) 4-(1,3-디옥사시클로펜트-2-yl)벤질라민(Npal); (iii) 2-(2-에톡시에톡시)에틸아민(Neee). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60442/60442fig1alarge.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60442/60442fig2.jpg"> 도 2: 서열 특이적 올리고(펩토이드)의 합성 및 보호 해제. (A) H2N-[Npam-Neee-Npal-Neee] 2-Npam-Nma 전후의 구조 (B) ESI 질량 스펙트럼을 동반한 Alloc-보호 군 제거. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60442/60442fig2alarge.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60442/60442fig3a.jpg"> 그림 3: 정보 인코딩된 펩토이드의 정제 및 특성화. (a) 아세토니트릴(MeCN) 및 물의 선형 구배를 가진 예비 HPLC에 의한 가닥 정제의 HPLC 크로마토그램: (1) 30% MeCN, 0.1-2.1 분; (2) 30-95% MeCN, 2.1-16.1 분; (3) 95% MeCN, 16.1-23.1 분; (4) 95% MeCN, 23.1-26.1 min. Peaks i 및 ii는 각각 원하는 생성물을 포함하는 저분자 반응 부산물, 주로 DIC-우레아 및 올리고머 종에 해당한다. (B) 분석적 HPLC 크로마토그램 및 (C) ESI 질량 스펙트럼H2N-[Npam-Neee-Npal-Neee] 2-Npam-Nma 후 동포화. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60442/60442fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60442/60442fig4.jpg"> 도 4: H2N-[Npam-Neee-Npal-Neee] 2-Npam-Nma 및 그 상보적 서열, H2-[Npal-Neee-Nam-Neee]2-Npal의자체 조립. (A) 두 서열및 결과 시퀀스 구동 어셈블리의 구조. (b) 하룻밤 동안 실온에서 어닐링을 한 후 분자 사다리의 MALDI 질량 스펙트럼. 질량: 예상 [M +Na]+ = 3306.7, 발견 3306.0; 예상[M-1 imine+Na]+ = 3324.7, 발견 3323.9; 예상[M-2 imine +Na]+ = 3342.7, 발견 3342.8; 예상[M-2 imine + CH3OH + H]+ = 3352.8, 발견 3352.0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60442/60442fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

정보 부호화 된 펩토이드 올리고머의 합성과 동적 공유 반응체 쌍 및 루이스 산성 희토류로 아민과 알데히드를 사용하여 분자 사다리로 이러한 펩토이드의 시퀀스 지시자가 조립하기 위한 프로토콜이 제시됩니다. 다중 역할 시약으로 금속 triflates.

This protocol presents the use of Lewis acidic multi-role reagents to circumvent kinetic trapping observed during the self-assembly of information-encoded ...

이 프로토콜은 동적 공유 상호 작용에 의해 올리고메릭 서열의 정보 지향 조립을 가능하게 하며, 핵산의 서열 선택적 혼성화를 진정으로 모방하지만 스트랜드 간 결합 강도가 증가합니다. 동적 공유 어셈블리는 일반적으로 채권 재배열 및 오류 수정에 대한 용량이 제한되어 있기 때문에 간단한 아키텍처로 제한됩니다. 대조적으로, 루이스 산의 농도를 따라 상승하여 결합 해리에 영향을 미치고 그 후 채권 재배치를 촉매함으로써, 이 기술은 자기 조립 시스템의 널리 퍼진 운동 포획 제한을 완화한다.이 방법은 매우 낮은 결함률을 가진 공유 유기 프레임 워크에서 조직 기판의 지속적인 리모델링을 적응하고 수용 할 수있는 생체 물질 조직 인터페이스에 이르기까지 공유 결합 재배열 반응을 활용하는 다양한 분야에서 사용될 수 있습니다. 이 기술을 처음으로 수행 할 때, 개인은 장기간 어닐링 시간 후에도 기이하게 갇힌 어셈블리를 찾을 수 있습니다. 우리는 독점적으로 알데히드베어링 올리고머와 독점적으로 아민 잔류물 사이의 혼성화를 시도하는 처음 사용자를 조언, 인코딩 된 정보를 단순화하고 따라서 혼성화.이 절차를 시작하려면 0.125 그램의 FMOC 포토실실 고체 지지 수지의 무게를 측정하고 프릿화 자동 신디사이저 반응 용기에 추가합니다. 신디사이저의 전자 레인지 부분에 용기를 삽입합니다. 주요 용매 병을 DMF로 채우고 보호병을 DMF의 20%4-메틸피프리딘용액으로 채우고 폐기물을 비웁니다.다음으로, DMF에서 브로모아세산과 DIC의 1개의 어어 솔루션을 순차적으로 1.5밀리리터, 4.53밀리리터의 DMF에 아세트 산수화물0.47 밀리리터를 준비하여 5밀리리터 캡핑 솔루션을 만듭니다. NMP에서 사용할 각 기본 아민의 0.5 어어 용액을 준비합니다. 각 용액의 총 부피는 2.5 밀리리터가 적절한 기본 아민의 각 잔류물과 추가 2.5 밀리리터여야 합니다.자동화된 신디사이저 매니폴드에 모든 솔루션을 추가합니다. 자동 펩타이드 신디사이저를 사용하여 수지팽창, FMOC 그룹을 갈라내고, 텍스트 프로토콜에 설명된 변위 반응을 수행한다. 그 후, DCE의 5%디클로로디메틸틸릴레인용액으로 3방향 스톱콕을 장착한 프릿드 유리 반응 용기의 벽을 염화한다.30분 동안 앉아서 그릇을 빼내고 DCE와 메탄올로 씻어내십시오. 용기가 건조한 후 수지로 옮김합니다. 한 쪽 팔을 통해 질소 가스로 거품을 내고 다른 쪽 팔을 통해 진공을 당기는 동안 각 세척에 대해 5 밀리리터를 사용하여 DCM로 수지세 시간을 세 번 씻으십하십시오.건조하고 보호 및 분열될 때까지 수지와 부착된 올리고펩토이드를 보관합니다. 계속 할 준비가되면 10 분 동안 5 밀리리터의 DMF로 버블링하여 하루 이상 저장된 수지를 다시 팽창시. 용기를 배수하고 유리 펩타이드 용기에 작은 자기 교반 바와 3 밀리리터의 건조 DCM을 추가합니다.팔라듐 촉매의 0.1 등가물및 알록 그룹당 페닐실레인 25등가의 무게. 클램프를 사용하여 반응 용기를 교반판 위에 비스듬히 배치하여 수지가 용매에 매달려 있는 동안 부드러운 동요를 겪고 DCM이 증발하는 것을 방지하기 위해 용기를 캡한다. 1시간 후, 세척당 5밀리리터를 사용하여 용액을 걸러내고 DCM으로 수지세 시간을 3회 세척합니다.그런 다음 alloc 보호 해제를 다시 한 번 반복합니다. 다음으로, 메탄올과 DCM로 수지를 순차적으로 헹구고 수지와 마그네틱 스터드 바를 20 밀리리터 바이알로 옮길 수지와 마그네틱 스터드 바를 전달한다. DMF의 수지를 잠그고 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 저어주고 갈라줍니다.그런 다음 주사기 필터를 사용하여 해방된 올리고펩토이드를 수지로부터 분리하고 진공 하에서 용매를 제거한다. 50-50개의 물과 아세토나이트혼합물로 펩토이드를 재구성하고 반전된 상 전처리 HPLC로 정화한다. 정제 된 분획을 결합한 다음 동결하고 lyophilize하여 흰색이 아닌 분말을 생성합니다.ESI 및 MALDI 질량 분석법으로 분말을 분석합니다. 순도를 평가하기 위해 정제 된 올리고펩토이드의 분석 HPLC를 수행하십시오. 먼저, 자체 조립에 사용되는 각 올리고펩토이드 서열의 10밀리머 스톡 솔루션과 무수아 아세토닐로 스칸듐 트리플랫의 10 밀리머 스톡 솔루션을 준비한다.각 펩토이드 스톡 솔루션 20마이크로리터를 마그네틱 스터디 바가 장착된 3밀리리터 바이알에 추가합니다. 스톡 솔루션의 잠재적 아민 결합당 1.5 상당의 스캔듐 트리플랫 솔루션을 추가하고 충분한 물과 아세토닐릴을 추가하여 2%의 물과 아세토나이트 용액의 200 마이크로리터를 형성합니다. 알데히드의 아세틸 제거와 모든 가닥의 해리를 위해 섭씨 70도에서 부드럽게 저어줍니다.그 후, 200 마이크로리터의 클로로폼과 2밀리리터의 물로 바이알을 충전하십시오. 바이알을 부드럽게 흔들어 줍니다. 혼합물이 적어도 15 분 동안 서 있게 하십시오.완전한 위상 분리시 마이크로리터 주사기로 유기층을 추출합니다. 유기 층을 새로운 유리병으로 옮기고 일반적으로 6 시간이 걸리는 올리고머 어닐링을 위해 섭씨 70도에서 저어줍니다. 분자 사다리로 서열 선택적 동적 공유 자기 조립을 거치도록 정보 인코딩된 펩토이드의 능력을 입증하기 위해 대표적인 가닥은 보완적인 펩토이드 서열로 합성되고 혼성화된다.모노머스 NPAM과 NPAL은 NEEE와 함께 역동적인 공유 반응제로 채택되어 최종 자체 조립 제품의 용해도를 돕습니다. 고체 위상 서브모노머 합성이 완료되면 alloc 그룹이 제거됩니다. 보호 를 해제하기 전, 수지의 부분은 405 나노미터 빛 아래에서 갈라졌고 전기 분무 질량 분광법을 특징으로합니다.서열은 준비 HPLC에 의해 정제된 다음 오프 화이트 파우더를 달성하기 위해 lyophilized되고 순도는 분석 HPLC로 확인됩니다. 올리고펩토이드는 MALDI-MS에 의해 확인된 레지스트리 사다리를 감당하기 위해 상호 보완적인 시퀀스와 혼성화됩니다. 이 절차를 수행할 때, 수성 분획이 투명해질 때까지 레이어에 충분한 시간을 허용하여 충분한 촉매 추출을 보장하기 위해 적어도 15분 이상.이 어셈블리 절차를 완료한 후 혼성화 의 정도를 결정하기 위해 질량 분석법을 수행해야 합니다. 또한, 유도적으로 결합된 플라즈마 질량 분석법 또는 불소 NMR은 추출 후 스칸듐 농도를 평가하는 데 사용될 수 있다. 이 기술은 최근에 개발되었지만, 우리는 우리의 작업에 설명 된 생물 모방 접근 방식이 복잡한 나노 구조의 미래 설계 및 정보 지향 조립을 지시하는 데 도움이 될 것으로 예상합니다.여기에 사용되는 시약의 일부는 위험합니다. 이러한 화학 물질 또는 기타 화학 물질을 취급 할 때주의하십시오. 모든 개인 보호 장비를 착용하고 연기 후드 내부의 모든 실험을 수행합니다.

synthesis-information-bearing-peptoids-their-sequence-directed

Research

연구

JoVE Journal

Chemistry

화학

기본 장비 및 상용 시약과 관련된 단순하고 일반적인 수동 peptoid 합성 방법은 peptoids 쉽게 대부분의 실험실에서 합성 수있게 설명되어 있습니다. amphiphilic peptoid의 36mer의 합성, 정제 및 특성은 물론 높은 주문한 nanosheets로의 자기 조립과 같이 설명되어 있습니다.

높은 명령으로 Nanosheets에 Peptoid 폴리머 및 자기 조립의 고체 상 합성 Submonomer

이 논문은 자기 조립의 자연 프로세스에 의해 주문한 높은 펩타이드 기반 구조의 형성을 설명합니다. 이 방법은 시판 펩티드 및 일반적인 실험실 장비를 이용한다. 이 기술은 펩티드의 큰 다양성에 적용 할 수 있으며, 새로운 펩티드 어셈블리의 발견으로 이어질 수있다.

짧은 펩타이드의 자기 조립에 의해 주문 생체 고분자 구조의 형성

펩타이드 차 아미드 (학부모 교사 협의회)를 포함하지만, 펩티드, peptoids 및 N-메틸화 펩티드에 국한되지 않습니다 펩티 도미 메틱의 슈퍼 패밀리입니다. 여기에서 우리는 학부모 교사 협의회의 한 구슬 한 화합물 라이브러리를 합성하는 분할과 풀과 하위 단량체 전략을 결합 합성 방법을 설명합니다.

분할 및 풀 합성 펩타이드 급 아미드 도서관의 특성

프로토콜은 질량 분석에 의해 올리고 peptoids 시퀀스 분석 다음의 수동 합성에 설명 되어 있습니다.

합성 및 올리고 peptoids의 질량 분석 분석

Polyamine 기반 펩타이드 amphiphiles (PPAs)의 합성은 이러한 반응 기능 마스크 그룹 보호의 사리 분별이 사용 여러 아민 nitrogens의 존재로 인해 중요 한 도전 이다. 이 문서에서 우리는 자기 조립 분자의 이러한 새로운 클래스의 준비에 대 한 손쉬운 방법을 설명합니다.

Polyamine 기반 펩타이드 Amphiphiles (PPAs) 및 관련된 생체 자기 조립의 합성에 대 한 손쉬운 프로토콜

1, 2-dithiolane의 합성에 대 한 프로토콜 펩 티 드와 펩 티 드에서 자기 조립 결과 supramolecular 구조의 특성 수정.

합성 및 특성 1, 2-Dithiolane의 수정 자가 조립 펩 티 드

이 프로토콜 lysine-티로신-페닐알라닌 (KYF) tripeptide로 안정 된 올레 acids-platinum(II) 공액 nanoemulsion 합성 하는 효율적인 방법을 설명 합니다. 된 KYF는 공액의 자기 조립을 통해 가벼운 합성 조건에서 nanoemulsion 양식.

올레산의 Tripeptide 안정 Nanoemulsion

이 문서는 유기 용매 혼합물에서 감마 변형 펩타이드 핵산 올리고머로부터 나노 구조의 설계 및 자체 조립을 위한 프로토콜을 제공합니다.

감마 변형 펩타이드 핵산의 자가 조립을 유기 용매 혼합물의 복잡한 나노 구조로

우리는 2 차원 (2D) 전구체의 패턴과 재구성 입자의 합성 실험 내용을 설명합니다. 이 방법론은 polyhedra과 마이크로에서 센티미터 규모에 이르기까지 다양한 길이의 비늘에서 붙잡는 장치를 포함하여 모양의 다양한 입자를 생성하는 데 사용할 수 있습니다.

종이 접기 고취 패턴 및 재구성 입자의 자기 조립

DNA 타일링은 프로그래밍 가능한 나노 구조를 만드는 효과적인 접근 방식입니다. 우리는 단일 가닥 DNA 타일의 자체 조립에 의해 복잡한 2차원 모양을 구성하는 프로토콜을 설명합니다.

단일 가닥 DNA 타일에서 단지 두 차원 모양의 자기 조립 (self-assembly)

배우세요 정보 인코딩 펩토이드 올리고머의 합성 및 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립 방법을. 이 기술은 루이스 산을 활용해 결합 재배열을 촉매하여 복잡한 분자 사다리 구조를 형성하며, 생체재료 및 공유유기구조체 연구에 활용됩니다.

정보 베어링 펩토이드의 합성과 시퀀스 지향 동적 공유자 자체 조립

더 많은 동영상 탐색