Generation of Mosaic Mammary Organoids by Differential Trypsinization

Stefany Rubio; Oscar Cazares; Hector Macias; Lindsay Hinck

doi:10.3791/60742

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Generation of Mosaic Mammary Organoids by Differential Trypsinization

차동 시도에 의한 모자이크 유방 오르가노이드 생성

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09:40 min

March 11, 2020

DOI: 10.3791/60742-v

Stefany Rubio¹, Oscar Cazares¹, Hector Macias¹, Lindsay Hinck¹

¹Department of Molecular, Cell and Developmental Biology,University of California, Santa Cruz

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

유방 동맥은 외부 근상피 및 내부 발광 상피 세포를 포함하는 이중 층 구조입니다. 제시된 것은 차동 트립시니화를 이용하여 오르가노이드를 준비하는 프로토콜이다. 이 효율적인 방법은 연구원이 별도로 유선 양식 및 기능에 있는 그들의 역할에 관하여 질문을 탐구하기 위하여 이 2개의 세포 모형을 조작하는 것을 허용합니다.

우리의 방법은 연구원이 조직 형태 및 기능에 그들의 개별 혈통 기여의 조사를 위해 다른 세포 모형을 격리하고 조작하는 것을 허용하기 때문에 중요합니다. 이 기술은 세포 유형을 분리하기위한 부드럽고 효율적인 방법이며, 그 결과 세포의 무결성은 3D 배양을 위해 보존됩니다. 이 기술은 또한 잘 특징적인 바이오 마커가 없는 세포를 격리하기 위하여 그밖 시스템에 적용될 수 있습니다.

10주에서 14주 된 암컷 마우스에서 2번, 3번, 4번, 5마리의 유방땀샘을 수확하기 위해 먼저 두 뒷다리 사이의 중간선에서 1센티미터 절개를 합니다. 잘라낸 것을 목까지 확장하고 중간선 절개에서 팔다리쪽으로 작은 측면 컷을 만듭니다. 그런 다음 동물의 양쪽에 핀으로 고정하기 전에 가르친 피부를 스트레칭합니다.

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