성인 쥐의 복합 재생 말초 신경 인터페이스 (C-RPNI)의 제조

우리의 프로토콜은 생물학적 말초 신경 인터페이스의 활용을 통해 포퍼런트 감각 신경 자극의 제공과 함께 동시 모터 신경 신호 증폭을 허용한다는 점에서 중요합니다. 이 기술은 C-RPNI가 동일한 말초 신경 인터페이스 내에서 동시 모터 제어 및 감각 피드백을 허용하므로 절단을 가진 사람들에게 실제와 같은 보철 장치를 제공 할 수 있습니다. 절단을 가진 생활의 많은 장치는 직관적인 통제 및 의미 있는 감각 피드백이 부족하기 때문에 향상된 신경 보철 장치를 포기합니다.

이 기술은 모두 제공하며 보철 장치 포기를 방지할 수 있습니다. 이 기술은 약하거나 결석한 사지 또는 감각 적자를 가진 개인에게 적용되어 정확하고 직관적인 사지 제어를 제공하는 피드백 시스템에 대한 추가 통찰력을 제공할 수 있습니다. 말초 신경에 수술을 수행하는 것은 오류에 대한 여백이 적기 때문에 어렵습니다.

고품질 악기를 사용하고 종종 연습을 하는 것이 성공을 보장하는 가장 좋은 방법입니다. 외과 기술은 문학 적 형식에서 전달하고 배우기가 매우 어렵습니다. 구조 제작에 관련된 모든 단계를 관찰하는 것이 메서드를 마스터하는 열쇠입니다.

피부 이식편을 준비하려면 발가락 꼬집어 반응하지 않는 것을 확인한 후 마취 된 쥐의 눈에 연고를 바치게하십시오. 클리퍼를 사용하여 발의 전체 하부 뒷다리, 발목 영역 및 측면을 면도합니다. 순차알코올-요오도포비도용과 알코올 클렌징으로 발의 발바닥 표면에서 선택된 뒷다리를 소독한다.

탈착식 둥근 미세 그릿 연마 석재가 있는 핸드헬드 마이크로 모터 고속 드릴을 사용하여 발바닥 표면을 버라 서 분당 4, 000 회전의 속도로 표피를 제거하여 피부를 태우지 않도록 합니다. 기본 진피는 정확한 출혈과 빛나는 모양을해야합니다. 혈류를 늦추고 15번 메스를 사용하여 발바닥 피부를 급격히 제거하려면 지혈대를 하부 사지에 발라주세요.

탈수현상을 방지하기 위해 살린 촉촉한 거즈에 피부를 배치하고 출혈발에 거즈 랩을 적용하여 출혈을 늦출 수 있습니다. 해부 현미경 아래에 피부를 배치하고 피부 이식의 깊은 층에서 어떤 힘줄과 결합 조직을 제거하기 위해 현미경을 사용합니다. 얇은 진피 접목은 약간 불투명해야하며 진피만 포함하고 크기가 약 0.5 % 1 센티미터를 측정해야합니다.

그런 다음 조직을 구성 할 때까지 식염수 촉촉거제의 새로운 조각에 배치합니다. 근육 이식편을 준비하려면 15번 메스를 사용하여 발목 바로 위에서 무릎 바로 아래까지 하부 뒷다리의 전방 측면을 따라 세로 절개를 합니다. 피하 조직을 통해 해부하여 근본적인 근육을 노출시하십시오.

절개의 단상 양상에서, 하반신 근육의 힘줄 삽입을 노출. 티비아리스 전방은 일반적으로 근육의 가장 크고 가장 앞쪽입니다. 바로 아래이 근육에 후방은 흥분 자리 수 길이거짓말.

지역의 다른 힘줄에서 탈실 엑스텐소 디지오럼 긴 힘줄을 분리하려면 힘줄 아래에 집게의 두 타인을 삽입하고 힘줄 소풍을 일으키기 위해 위쪽 압력을 exsert에 던지도록 합니다. 힘줄의 조작은 발가락의 모든 동시 확장 발생한다. 날카로운 홍채 가위를 사용하여 말단 성도 절제술을 수행하고 기질을 사용하여 힘줄 의 기원을 찾기 위해 근교로 작동하는 주변 조직과 근육을 무뚝뚝하게 분리하십시오.

근위 힘줄이 시각화되면 홍채 가위를 사용하여 두 번째 테노절제술을 수행하고 근육 이식편을 식염수 에 적발하여 식염수 에 배치합니다. 일반적인 정각 신경의 격리 및 준비를 위해 허벅지 한 개를 면도하고 노출된 피부를 순차적인 알코올-베타딘 알코올 클렌징으로 소독하십시오. 마취된 쥐를 수술 현미경으로 가열 패드에 놓고 단면에서 시스틱 노치까지의 절개를 무릎의 열등한 부분으로 표시하고 대퇴골에서 기울어진다.

그런 다음 숫자 15 메스를 사용하여 기본 이두근 페모리스 근막을 통해 마크를 따라 절개를합니다. 이두근 여성근을 통해 이두근 여성스러움의 근간을 조심스럽게 해부합니다. 일반적인 정동맥 신경의 확인에 따라, 마이크로 미세 기울어진 집게와 microscissorsors를 사용하여 다른 좌골 에서 일반적인 사내 신경을 주의 깊게 분리하십시오.

어떤 느린 결합 조직을 제거 분해하 고 신경 무릎의 표면을 교차 하는 시점에서, 급격 하 게 한 쌍의 미세 scissorsorssor 그런 다음 일반적인 복막 신경에서 남은 결합 조직을 조심스럽게 해방시키고 근교로 작용하여 신경을 약 2센티미터의 길이로 풀어주세요. 신경은 섬세하고 사소한 실수는 지속적인 기능 적자를 일으킬 수 있습니다.

빈번한 연습, 정밀한 수술 기구, 이상적인 손 포지셔닝 및 지원은 이 기술을 마스터하는 데 핵심적인 것입니다. C-RPNI 구조를 제조하려면 근육 이식편을 해부 현미경 아래에 배치하고 모든 중앙 건선 조직뿐만 아니라 힘줄 끝을 그대로 남겨 둔 에미슘의 작은 중앙 부분을 제거하십시오. 8-0 사용 나일론 봉합사 및 두 개의 중단 된 바늘, 신경의 양쪽에 에피미슘이없는 근육 이식부위에 일반적인 복막 신경의 대각선 끝의 에피뇌란을 확보.

대퇴골에서 멀리 직면 신경 근육 접합과 근접 및 Dismd 둘 다 스티치 를 중단 한 6-0 나일론과 대퇴골 periosteum에 근육 이식을 확보. 8-0으로 두기 나일론 스티치는 근육 이식편 내의 신경에 느슨함을 조성하기 위해 일반적인 복중신경 에피뉴리움에 고정근육 이식편에 대한 열등한 중앙 마진에 있다. 근육 이식에 피부 이식편을 배치하여 근육에 놓여있는 진피의 깊은 여백으로 신경과 근육의 대부분을 완전히 덮습니다.

근육의 경계를 넘어 연장하는 진피를 다듬고 8-0을 사용 나일론은 근육 이식에 피부 이식편을 일주 적으로 고정하기 위해 봉합사를 중단했습니다. 이두근 페모리스 근막을 5-0 색색 봉합사로 흐르는 방식으로 구조 위에 닫고 4-0 색색 봉합사로 오버리 스킨을 닫습니다. 그런 다음 수술 부위를 알코올 패드로 바꾸고 항생제 연고를 적용한 후 쥐가 전체 재림까지 모니터링을 통해 케이지 메이트와 분리된 음식과 물공급으로 회복할 수 있도록 하십시오.

성공하면 3 개월 후에 구조의 외과 적 노출이 다시 혈관화된 근육과 피부와 구성에 대한 집게 근위를 가진 일반적인 관내 신경을 부드럽게 압박하는 것이 눈에 보이는 근육 수축을 초래할 것입니다. 조직학적 분석은 실행 가능한 피부, 신경 및 근육을 보여줘야 합니다. 면역 염색은 또한 각각 그들의 신경 근육 접합및 감각 끝 기관에 모터 및 감각 신경 재내측을 드러낼 것입니다.

전기 생리학적 테스트는 C-RPNI 제조 후 3개월 및 9개월 에서 입증된 바와 같이 생체 내에서 이러한 구조에서 수행될 수 있다. 여기서, 단일 및 합산 복합 근육 작용 잠재력 및 합성 감각 신경 작용 전위 신호는 그래픽 형식으로 전기 생리학적 테스트 중에 얻은 신호가 표시됩니다. 근육 이식편에서 최적이 아닌 결과는 특성 복합 근육 작용 잠재적 파형이 결여된 감쇠된 신호로 표시됩니다.

진피 성분의 수준에서 최적이 아닌 결과는 일반적으로 상당한 배경 잡음으로 파형의 약화를 포함한다. 좋은 품질의 악기는 매우 중요합니다. 가위는 날카롭고 집게는 손상없이 진피 이식및 신경의 매우 정확한 처리를 용이하게하기 위해 미세 기울어져야한다.

제조 후, 이 방법은 전기 생리학적 조사에서 이질및 포퍼런트 피드백 루프에 대한 더 많은 통찰력을 제공하는 신호 기능을 더욱 특성화하는 데 활용할 수 있습니다. C-RPNI는 감각 적 피드백을 허용하지만, proprioception에 대한 폐쇄 루프 피드백 시스템을 설립 할 수 있는지 여부는 불분명합니다. 현재 실험실에서 이 문제를 해결하고 있습니다.