June 15th, 2020
여기에 제시된 프로토콜은 폐쇄형 흉부 카테터 삽입을 사용하여 동일한 동물의 우심실과 좌심실에서 압력-부피(PV) 루프를 생성하여 마우스의 뇌실 심장 기능을 평가하는 프로토콜입니다. 초점은 수술 및 데이터 수집의 기술적 측면에 있습니다.
이 프로토콜은 심장 기능의 포괄적이고 강력한 특성화를 가능하게 할 뿐만 아니라 마우스의 좌심실과 우심실에서 수축기 및 이완기 기능을 정량화할 수 있습니다. 이 기술은 동일한 동물에서 왼쪽 및 오른쪽 분류를 제안하기 때문에 마우스의 심장 기능에 대한 전반적인 특성화를 제안합니다. 우선, 흉골 설근을 측면으로 변위시켜 오른쪽 경동맥을 노출시키고 격리하기 위해 둔기 절개로 오른쪽 경동맥을 분리합니다.
그런 다음 겸자 모래 둔기 박리를 사용하여 경동맥을 미주 신경에서 분리하고 동맥 아래에 3개의 외과적 4-0 봉합사를 통과시키지만 신경은 통과시키지 않습니다. 우측 경정맥 격리를 위해 턱밑샘과 이하선을 측면으로 변위시킵니다. 오른쪽 경정맥을 시각화하고 겸자를 사용하여 오른쪽 경정맥을 둔탁하게 절개하고 노출시킵니다.
정맥을 조심스럽게 절개하여 주변 근막을 제거하고 겸자를 경정맥 아래로 통과시킵니다. 정맥 아래에 외과용 봉합사를 통과시키고 봉합사를 정맥의 두개골 쪽에 묶습니다. 지혈 클램프를 사용하여 머리 방향으로 봉합사에 부드러운 견인력을 가하고 경정맥 아래에 두 개의 추가 봉합사를 통과시킵니다.
두 번째 클램프를 사용하여 가장 원위 봉합사를 꼬리 방향으로 부드럽게 당기고 중간 봉합사에 느슨한 매듭을 만듭니다. 그런 다음 데워진 생리식염수 몇 방울을 예상되는 정맥 절개술 부위의 혈관에 놓습니다. 우심실 카테터 삽입을 위해 마우스를 실체 현미경 아래에 놓고 경정맥을 확인합니다.
정맥에 우수한 견인력을 부드럽게 가하고 두개골과 봉합사 사이에 140도 각도로 구부러진 30게이지 바늘을 삽입합니다. 바늘이 동축 방식으로 들어가도록 합니다. 삽입 시 바늘을 움직여 정맥 절개술을 확장하고 바늘 아래에 있는 6mm 카테터 팁을 정맥 절개술에 삽입합니다.
카테터를 우심실로 전진시킨 후 연속 모니터에서 고전적인 우심실 압력 파형을 모니터링하여 카테터의 올바른 위치를 확인합니다. 필요한 경우 우심실 축을 따라 카테터가 최적으로 배치될 때까지 카테터 샤프트를 부드럽게 회전합니다. 카테터가 우심실과 좌심실로 올바른 위치를 유지하려면 카테터를 움직이는 동시에 압력, 부피, 크기, 위상, 흔적을 주의 깊게 읽고 해석해야 합니다.
최적의 압력 크기 루프 신호를 얻었으면 콘솔에서 Enter 키를 눌러 기준선 스캔을 수행하고 심박수를 모니터링합니다. 압력 체적 루프를 생성하려면 X축 매개변수를 크기에서 체적으로 변경하고 압력을 Y축으로 유지합니다. 압력 볼륨 루프 신호가 최적일 때.
30초 동안 녹음합니다. 분석이 끝나면 기록을 중지합니다. 그런 다음 제거한 카테터를 헤파린 염화나트륨 용액에 넣습니다.
좌심실 카테터 삽입을 위해서는 겸자로 오른쪽 경동맥을 부드럽게 들어 올리고 두개골 봉합사를 묶어 동맥을 폐색합니다. 지혈 클램프를 사용하여 두개골 방향의 견인력을 혈관에 부드럽게 적용하고 클램프를 사용하여 가장 원위부 봉합사를 꼬리 방향으로 당깁니다. 중간 봉합사에 느슨한 매듭을 만들고 예상되는 동맥 절개술 부위의 혈관에 따뜻해진 생리식염수를 몇 방울 떨어뜨립니다.
현미경을 사용하여 꼬리와 중간 봉합사 사이의 두개골 부분에 초점을 맞추고 동맥에 우수한 견인력을 부드럽게 적용합니다. 우심실에 대해 입증된 대로 카테터를 삽입한 후, 압력 채널 기록에서 전형적인 대동맥 흔적이 나타나는 것을 확인한 후, 대동맥의 이완기 압력의 급격한 시장 가격 하락으로 인해 카테터를 좌심실로 전진시키는 것이 분명해질 것입니다. 좌심실 압력을 안정화하려면 압력 볼륨 루프를 사용하여 좌심실에서 카테터의 올바른 위치를 확인합니다.
녹음을 중지하고 카테터를 제거합니다. 카테터를 헤파린 염화나트륨 용액에 넣고 꼬리 봉합사를 묶습니다. 그런 다음 효소 세제로 카테터를 청소합니다.
이 그림에서는 경정맥을 통해 올바르게 삽입되고 우심실로 전진한 카테터에서 생성된 대표적인 최적 압력 루프를 관찰할 수 있습니다. 우심실 내의 부적절한 위치는 결함이 있는 압력 볼륨 루프의 출현으로 분명합니다. 대동맥 판막을 가로질러 좌심실로 카테터를 최적으로 역행적으로 배치하면 특정 압력 루프 패턴이 생성됩니다.
이는 카테터가 부적절하게 배치된 경우 결함이 있는 루프로 나타납니다. 이 기술을 사용하면 포괄적인 좌심실 수축기 압력 값을 얻을 수 있습니다. 또한 이완기 매개변수를 제공하고 수축성 및 광택성에 대한 수많은 고급 측정에 대한 정보를 제공합니다.
이 기술은 또한 좌심실 및 우심실의 효율성과 심실 위상의 후부하에 대한 평가를 용이하게 합니다. 이 기술은 심혈관 질환에서 우측 및 좌심실 기능을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 예를 들어, 폐고혈압에서 증가된 후부하에 대한 반응으로 우심실 기능을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.
전반적인 연습, 좋은 제거 필드, 좋은 수술 도구, 경동맥 각정맥을 수화하게 유지하는 것이 이 절차의 성공의 열쇠입니다.
이 프로토콜은 폐쇄된 가슴 카테터화를 통해 마우스의 심장 기능을 평가하는 방법을 상세히 설명합니다. 정확한 측정을 위해 필요한 수술 기술과 데이터 수집에 중점을 둡니다.