Name: 뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 1 s
Description: 배우세요 뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술 최적화 방법을. 내관 삽입 기법을 활용하여 혈관 외반을 용이하게 하고, 두 명의 숙련된 외과의 협력으로 수술 시간을 단축하는 혁신적인 접근법입니다.

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이 사업은 푸젠성 보건교육 공동연구사업(WKJ2016-20), 중국 국립자연과학재단(81771271, 81800664), 중국 국가핵심R&D 프로그램(2018YFA0108)이 지원한 것이다. 304) 푸젠성(JAT170714), 중국 후난성 자연과학재단(2019JJ50842), 후난성 후산성 후샹 청년인재육성(2019RS2013) 및 후젠성 자연과학연구사업(JAT170714) 및 교육과학연구사업

동물(BALB/c, C57BL/6, 남성, 8-12주)은 샤먼 대학 실험실 동물 센터의 특정 병원균 이없는 시설에 보관되어 있습니다. C57BL/6은 받는 사람으로 사용되며 BALB/c는 기증자로 사용됩니다. 모든 절차는 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC) 지침에 따라 수행됩니다.
참고: 마이크로 가위, 마이크로 스트레이트 집게, 마이크로 커브드 집게 및 마이크로 바늘 홀더를 포함한 마이크로 수술 기구 세트가 작동에필요합니다(표 및 재료, 도 1B, C, D, E). 일회용 불독 클램프 1켤레(그림1F)가필요합니다. 외부 경정맥과 경동맥에 대한 두 개의 커프스는 현미경으로 10번 메스로 맞춤형 폴리아미드 튜브를 절단하여 제조한다. 정맥 과 동맥 커프의 직경은 각각 0.9mm와 0.55 mm입니다. 또한, 해당 정맥 커프에 대한 내부 튜브의 직경은 0.6 mm이며, 해당 동맥 커프에 대한 내부 튜브의 이것들은 0.28mm(도 1G)이다.
1. 받는 사람 준비
<ol><li>펜토바르비탈(60 mg/kg, i.p)으로 수령마우스를 마취시화합니다. 외상성 기계 클리퍼를 사용하여 오른쪽 측면 자궁 경부 부위의 머리카락을 제거하십시오.</li>
	<li>멸균 면 팁 어플리케이터를 사용하여 요오드 살균제로 수술 부위를 닦아, 70% 에탄올이 뒤따릅니다.</li>
	<li>조작 플랫폼에 마우스를 스핀 위치에 놓습니다. 멸균 거즈로 마우스를 덮습니다.</li>
	<li>안과 가위를 사용하여 하반신 1/3 목 중간선에서 오른쪽 어깨 쇄골 관절까지 의 횡절개를 합니다.</li>
	<li>마이크로 커브드 포스프로 오른쪽 외부 경정맥을 분리하여 충분한 길이를 노출하고, 전기응고를 통해 가지를 차단하고, 6-0 실크 봉합사를 사용하여 단상 끝에서 혈관을 리게이트합니다.</li>
	<li>불독 클램프를 사용하여 외부 경정맥을 근교로 고정한 다음 마이크로 가위를 사용하여 정맥을 합자로 비례적으로 변환합니다.</li>
	<li>100 U/mL 0-4°C 의 혈관 루멘을 세척하여 잔류 혈액을 제거합니다.</li>
	<li>마이크로 스트레이트 집게를 사용하여 정맥 커프를 통해 외부 경정맥을 당깁니다. 정맥 내부 튜브를 슬러멘에 삽입하고 마이크로 스트레이트 포셉(그림2A)으로커프 위에 혈관 벽을 적재한다.</li>
	<li>원주 8-0을 사용하여 커프의 근해 끝에 에버티드 용기 내시경을 수정합니다. 실크 봉합사(그림 2B).</li>
	<li>마이크로 스트레이트 집게를 사용하여 정맥 용기에서 정맥 내부 튜브를 철회하십시오.</li>
	<li>흉골의 내부 가장자리에 인접한 오른쪽 경동맥을 분리하기 위해 마이크로 곡선 집게로 무딘 해부를 수행합니다.</li>
	<li>불독 클램프를 사용하여 오른쪽 경동맥을 고정하고, 경동맥을 6-0 실크 봉합사를 사용하여 분리하고, 마이크로 가위를 사용하여 경동맥을 합자에 근접적으로 분리합니다.</li>
	<li>경동맥을 100 U/mL 0-4°C로 씻어 서 잔류 혈액을 제거합니다.</li>
	<li>동맥 소맷부리를 통과하고 동맥 내부 튜브를 마이크로 스트레이트 집게(도2C)를사용하여 동맥 용기에 삽입합니다.</li>
	<li>마이크로 스트레이트 집게를 사용하여 커프 위에 혈관을 에버트; 할례 8-0을 사용하여 에버트 용기 내분비 수정 실크 봉합사(그림 2D).</li>
	<li>마이크로 스트레이트 집게로 동맥 용기용기에서 동맥 내부 튜브를 인출합니다. 참고: 받는 사람의 하위 선 보존.</li>
</ol>2. 기증자 준비
<ol><li>펜토바르비탈 (60 mg/kg, i.p)으로 기증자 마우스를 마취시화합니다. 복부 부위의 모발을 제거하기 위해 외상성 기계 클리퍼를 사용합니다.</li>
	<li>조작 플랫폼에 마우스를 스핀 위치에 놓습니다. 멸균 거즈로 마우스를 덮습니다.</li>
	<li>멸균 면 팁 어플리케이터를 사용하여 요오드 살균제로 수술 부위를 닦아, 70% 에탄올이 뒤따릅니다.</li>
	<li>안과 가위로 복부 중복절개를 하고 복강을 노출시십시오.</li>
	<li>마이크로 커브드 집게를 사용하여 열등한 베나 카바를 노출한 다음, 열등한 베나 카바를 통해 체중 20g당 100 개의 U /mL 0-4 °C 의 200 μL을 정맥 주사합니다.</li>
	<li>안과 가위로 흉부 절제술을 수행하고, 양측 미다실 라인 절개를 통해 갈비뼈를 자르고, 전방 가슴 벽을 바깥쪽으로 뒤집어 흉부 구멍을 노출시합니다.</li>
	<li>마이크로 곡선 포셉으로 흉선을 소비합니다.</li>
	<li>대동맥을 노출한 다음 대동맥 아치를 통해 관상 동맥에 100 U/mL 0-4°C의 200 μL을 관상 동맥에 분산시한다. 참고: 가스 거품을 기증자 의 심장에 침투하지 마십시오.</li>
	<li>마이크로 가위를 사용하여 대동맥 아치의 시작 부분에서 오름차순 대동맥을 변속시합니다.</li>
	<li>마이크로 가위로 두 가지 주요 가지의 시작 부분에 폐 동맥을 횡단.</li>
	<li>우수한 베나 카바와 열등한 베나 카바를 6-0 실크 봉합사를 사용하여 근접하게 게이트하고 마이크로 가위를 사용하여 정맥을 합자에 분리합니다.</li>
	<li>폐 정맥을 함께 리게이트하고, 둘레, 단일 6-0 실크 봉합사를 사용하여, 마이크로 가이를 사용하여 합자에 정맥 가지를 잘라.</li>
	<li>주변 연조직에서 심장 이식편을 제거하십시오. 0-4°C 의 식염수로 보존하십시오.</li>
</ol>3. 심장 이식
<ol><li>기증자의 마음을 받는 사람의 오른쪽 목 부위에 거꾸로 놓습니다.</li>
	<li>기증자 심장의 폐 동맥을 마이크로 스트레이트 집게로 6-0 실크 루프에 입력합니다.</li>
	<li>혈관 루멘을 정맥 커프 주위에 감싸고 커프스 주변의 6-0 실크 봉합리 루프를 조여 선박 관절을 묶습니다.</li>
	<li>3.2 단계에서 설명된 단계를 수행하여 접목 및 동맥 커프의 대동맥의 해부학을 수행한다.</li>
	<li>고정된 경정맥을 풀어준 다음 고정된 경정맥을 놓습니다. 혈관 관절을 왜곡하지 않고 유지하고 혈류가 방해되지 않도록하십시오. 참고: 1분 이내에 200회 이상 으로 돌아오는 부비동 리듬은 정상으로 간주됩니다.</li>
	<li>따뜻한 (37 °C) 식염수를 사용하여 기증자 심장을 적분하고 접목이 출혈인지 여부를 검사합니다. 맥동 심장 이식을 피하 공간으로 설정한 다음 절개를 봉합합니다.</li>
</ol>4. 수술 후 치료 및 이식 평가
<ol><li>수술 후 이식 기능을 모니터링하기 위해 클램프 방출 후 정상 부비동 리듬및 정상 부비동 리듬의 보존 시간을 최소 5분 동안 기록한다.</li>
	<li>수령인이 마취에서 깨어날 때까지 받는 사람을 따뜻한 담요에 혼자 두십시오. buprenorphine 진통을 관리, 0.05 mg/kg, s.c, 수술의 끝에 및 매 12 수술 후 시간.</li>
	<li>매일 받는 사람의 체중 및 수술 후 복구 상태를 기록합니다. 수술일에 비해 체중 감소가 >15% 감소하는 경우, 발마비 마비 또는 감염, 말단 이소플루란흡입(21)을통해 수령인을 안락사시한다.</li>
	<li>매일 심Pation에 의한 이식 생존을 모니터링합니다. murine 동종 이식이 >72 시간 동안 살아남는 경우에 수술은 성공하기 위하여 여겨질 것입니다. 이전에 보고된 바와 같이 접목 기능을 채점하소서22: 스케일 3 - 격렬하게 맥동 및 주파수; 스케일 2 - 덜 맥동; 스케일 1- 세동 및 임박한 거부; 또는 배율 - 0, 심장 박동의 손실과 완전한 거부.</li>
</ol>

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<li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibiting+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4%28%2B%29+memory+T+cells+and+prolonging+allograft+survival+by+1alpha%2C25-dihydroxyvitamin+D%283%29+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Letters%22%5BJournal%5D)">Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice.</a> Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).</li>
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</ol>

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마우스 심장 이식 모델은 이식 면역학 연구를 위한 중요한 도구이며, 이 모델의 면역 메커니즘을 평가하기 위한 도구와 재료로 많은 수의 유전자 변형 마우스를 사용할 수 있다. 그러나 혈관 봉합사 및 혐오와 같은 미세 수술 기술적 과제는 광범위한 사용을 제한했습니다. 본 연구에서는, 우리는 뮤린 심장 이식의 특정 핵심 기술적인 도전을 조사하고 좋은 결과를 얻었습니다. 프로토콜의 중요한 단계는 커프스 위에 혈관 벽을 상한하는 스텐트로서 내부 튜브를 루멘에 삽입합니다. 이 최적화 단계는 광범위한 스트레칭의 필요성으로 인해 동맥 용기를 계속 괴롭히는 기술적 과제를 해결합니다. 미세 수술 기술이없는 개인은 2 개월 간의 훈련 후 기술을 수행하기 시작할 수 있으며,이 모델의 광범위한 적용에도 도움이될 것입니다.
우리의 경험에서, 적절한 내부 튜브는 이식 결과를 향상시킬 것입니다. 내부 튜브의 외부 직경은 받는 혈관의 내부 직경보다 약간 작아야합니다. 또한 미끄러운 표면을 가진 무딘 폴리 프로...

1973년 복부 내의 종단 간 해부학을 통한 마우스 이성애 심장 이식의 확립은 기본 이식 면역학 연구1에서중요한 이정표였다. 이 모델은 허혈 재관전 상해2,면역 거부 및 공차3,,4의메커니즘을 분석하기 위한 중요하고 유효한 도구를 제공했다. 그러나, 수술의 복잡하고 시간이 많이 소요되는 특성뿐만 아니라 감염의 잠재력은 심한 perioperative 복부 유착 및 염증 반응을 초래할 수 있으며, 이로 인해 이성애 심장 이식 모델에 대한 낮은 효율이 초래됩니다.
자궁 경부 이종성 심장 이식 기술은 1991년5년에첸에 의해 처음 기술되었다. 이 모델에서, 수령인의 외부 경정맥은 접목의 폐 동맥에 마취되고 경동맥은 상승대동맥에 마취된다. 이 방법의 주요 장점은 모니터링의 편리함과 수령인에게 외상을 줄이는 것입니다. 같은 해, 마쓰라는 외부 경정맥과 경동맥의 끝이 테플론 커프위에 상정되어 있는 개선된 기술을 설명했고, 외장 실크 합자6으로고정되었다. 몇몇 연구원은 또한 수령인7의외부 경정맥에 커프를 삽입하기 전에 기증자 심혼에 있는 오른쪽 폐 동맥에 커프를 고정했습니다. 지금까지, 커프 기술은 폐8,간9및 신장10 이식을 위한 것을 포함하여 각종 혈관 혈통 이식 모형에 널리 적용되었습니다.
현재까지 커프 기술과 관련된 몇 가지 어려움이 있습니다. 예를 들어, 경동맥은 추가탄성으로 인해 커프를 상회하기가 어렵고, 그 결과 조직이 뒤로 뒤집힌다. 따라서, 추가 연습 및 미세 수술 확장기는이 단계를 완료 하는 데 필요할 수 있습니다. 또한 자궁 경부 혈관 준비는 최대 25 분이 걸릴 수 있습니다.
이러한 문제를 해결하기 위해, 우리는 커프 기술을 기반으로 하고 혈관 벽의 환향을 돕는 내부 튜브를 사용하여 외부 경정맥과 경동맥에 커프를 고정하는 것을 포함하는 내부 튜브 기술을 소개합니다. 또한 간단한 교육을 통해 받는 사람 준비가 15.5 분으로 줄어듭니다. 이 기술은 수술의 복잡성을 감소시키고 추가 연습이나 혈관 확장제의 사용을 필요로하지 않습니다. 그것은 모든 이식 면역 연구에서 적용 될 수있다, 특히 받는 사람이 두 개의 심장 동종 이식을받는 동안 제 3 자 면역 내성을 확인하기위한, 복부 내에서 다른 하나 와 목(11)에다른. 우리는 또한 이 모형을 설치하기 위하여 두 명의 숙련된 외과 의사 사이 협력을 추천합니다, 한 외과 의사는 수령인 동물을 준비하고 다른 하나는 기증자 심혼을 수확하고 이식합니다. 이러한 공동 작업으로 작동 시간을 25분으로 단축할 수 있습니다. 이러한 최적화된 절차를 사용하여, 우리는 신유전자, 동종12,,,13,,14,,15,,16,,17,,18,19및 제노제닉 마우스 심장 이식모델(20)을확립했다.
내부 튜브 기술의 발달에 대한 근거는 높은 성공률을 가진 마우스 심장 이식 모델의 설립을 위한 수술 시간을 줄이는 것이었습니다. 자궁 경부 심장 이식 모델의 최적화는 전통적인 봉합및 커프기술(21)에비해 짧은 수술 기간에 높은 성공률의 획득을 용이하게 한다. 또한, 협력 모델은 단일 작업자와 함께 수행되는 수술에 비해 기증자 심장의 따뜻한 허혈성 시간을 더욱 줄일 수 있다.

<table><tbody><tr><td>동맥 커프</td><td>자체 제작</td><td></td><td>폴리아미드 튜브. 직경: 0.55mm, 길이: 1.0mm</td></tr><tr><td>동맥 내부 튜브</td><td>자체 제작</td><td></td><td>폴리아미드 튜브. 지름 : 0.28mm</td></tr><tr><td>마이크로 곡선 집게</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. 수술 도구 공장</td><td>WA3050</td><td>1/8 아크, 후크가없는 0.3mm 팁</td></tr><tr><td>마이크로 바늘 홀더</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. 수술기구 공장</td><td>WA2050</td><td>0.2mm 팁</td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. 수술기구 공장</td><td>WA1050</td><td>직선, 블레이드 길이: 10 mm</td></tr><tr><td>마이크로 직선 펜치</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. 수술 기구 공장</td><td>WA3060</td><td>0.15-mm 팁 훅 없음</td></tr><tr><td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog 클램프 Scanlan</td><td>International Inc</td><td>1001-531</td><td>클램핑 압력 20&ndash; 25g</td></tr><tr><td>정맥 커프</td><td>자체 제작</td><td></td><td>폴리아미드 튜브. 직경: 0.9mm, 길이: 1.2mm</td></tr><tr><td>정맥 내부 튜브</td><td>자체 제작</td><td></td><td>폴리아미드 튜브. 지름 : 0.6 mm</td></tr></tbody></table>

뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

뮤린 심장 이식은 40 년 이상 수행되었습니다. 미세 수술의 발전과 함께, 특정 새로운 기술은 수술 효율을 개선하기 위해 사용되었습니다. 우리의 실험실에서, 우리는 두 가지 주요 단계로 커프 기술을 최적화했습니다. 첫째, 내부 튜브 기술을 사용하여 외부 경정맥과 경동맥 혈관에 임시 내부 튜브를 삽입하여 커프스 위에 혈관의 전복을 용이하게 했습니다. 둘째, 우리는 두 경험이 풍부한 외과 의사의 협력을 통해 완전한 이성애 심장 이식을 수행했습니다. 이러한 수정으로 인해 작동 시간이 25분으로 단축되었으며 성공률은 95%였습니다. 이 보고서에서는 이러한 절차를 자세히 설명하고 추가 비디오를 제공합니다. 우리는 향상 된 커프 기술에 이 보고 는 뮤린 이종성 심장 이식에 대 한 실용적인 지침을 제공할 것입니다 믿고 기본 연구에 대 한이 마우스 모델의 유틸리티를 향상 시킬 것 이다.

수술 시간
훈련 후 숙련된 외과 의사는 내부 튜브 기술을 사용하여 35분 이내에 성공적으로 수술을 수행할 수 있으며, 수령인 준비를 위해 약 15.5분, 기증자 준비를 위해 10.9분이 필요하며, 기증자 심장 해부학에 4.4분이 필요합니다. 감기와 따뜻한 허혈 시간(기증자 제제에서 심장 이식까지)은 내부 튜브 기술 및 봉합 기술없이 커프 기술을 사용하여 수술에 비해 15.3 분으로 감소(표 1)21.
우리는 운영의 효율성을 더욱 향상시키기 위해 협력 모델을 설계했습니다. 회로도(도3)에도시된 바와 같이, 한 외과의사는 먼저 수혜자 준비를 시작하고 4-5분 후에 두 번째 외과 의사가 기증자 준비를 시작한다. 15-16 분 후, 첫 번째 외과 의사는 기증자 심장을 수확완료 한 시...

마우스 자궁 경부 이성애 심장 이식을 위한 커프 기술에 대한 내부 튜브 접근법을 도입하여 커프스 위에 혈관을 상회합니다. 우리는 두 경험이 풍부한 외과 의사 사이의 협력이 수술 시간을 현저하게 단축한다는 것을 발견했습니다.

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

안녕하세요, 모두들. 제 이름은 1991년부터 커프 기술이 심장 이식으로 사용되어 온 것으로 널리 알려져 있습니다. 의료 수술과 새로운 수술 기술에 큰 발전이 있었지만, 여전히 커프 기술에 따라 몇 가지 어려움이 있다.그것은 그들이 당신에게 상당히 수술 효율을 동일시 할 수있는 옵티모틱 하프 기술을 보여줍니다 공개의 한 형태입니다. 주요 절차는 바이저에 해당 튜브에 일시적으로 삽입하는 것입니다. 증거는 ISO거의 절반을 읽습니다.튜브 기술을 삽입합니다. 숙련 된 외과 의사는 95 %의 성공률로 35 분 이내에 수술을 수행 할 수 있습니다. 그런 다음 열 외과 의사 운영 모듈을 사용할 수 있으며, 이는 회의론에 나타나는 작업의 효율성을 더욱 향상시키고 수술 시간이 약 35 분으로 단축됩니다.감사합니다. 그리고 그것은 펜토바르비탈과 조리법과 마일을 연결합니다. 외상성 기계 클리퍼를 사용하여 오른쪽 후기 자궁 경부 부위의 머리카락을 제거하십시오.멸균 면 팁 어플리케이터를 사용하여 요오드 살균제로 수술 영역을 닦아 70% 에탄올이 있습니다. 조작 플랫폼에 마우스를 스핀 위치에 놓습니다. 멸균 거즈로 마우스를 덮습니다.안과 가위를 사용하여 하반신 1/3 NACMEC 라인에서 오른쪽 어깨 쇄골 관절까지 의 횡절개를 합니다. 마이크로 커브드 집게로 오른쪽 외부 중정 정맥을 분리하여 충분한 길이를 노출시합니다. 전기 응고를 통해 브런치를 잘라냅니다.그리고 디스토에서 선박을 찾아 6 개의 2 0 6 봉합사를 사용한다. 분말 클램프를 사용하여 외부 중글라 정맥을 근교로 고정합니다. 그런 다음 정맥을 마이크로 가위를 사용하여 합자에 근접적으로 변환합니다.잔류 혈액을 제거하기 위해 밀리리터 02 4 섭씨 4 섭씨 헤파린 현저한 당 100 단위로 혈관 루멘을 세척하십시오. 마이크로 스트레이트 포셉을 사용하여 정맥을 통해 외부 중글라 정맥을 당깁니다. 정맥 내부 튜브를 슬러멘에 스텐트가 넣고 마이크로 스트레이트 포셉으로 곡선 위에 용기 벽을 삽입합니다.경외 8-06 봉합사를 사용하여 곡선의 근위 쪽 끝에서 자극성 파소 내시경을 수정합니다. 마이크로 스트레이트 집게를 사용하여 정맥 용기에서 정맥 내부 튜브를 철회하십시오. 흉골의 내부 가장자리에 인접한 오른쪽 경동맥을 분리하기 위해 마이크로 집게로 무딘 해부를 수행합니다.밥콕 클램프를 사용하여 오른쪽 경동맥을 근교로 고정합니다. 6 ~06 봉합사를 사용하여 경동맥을 탈구하여 찾아보도록 한다. 그리고 마이크로 가위를 사용하여 경동맥을 합자에 근접적으로 거래합니다.잔류 혈액을 제거하기 위해 밀리리터 02 4 섭씨 4 섭씨 헤파린 현저한 당 100 단위로 경동맥을 씻으라. 동맥 곡선을 통과하고 마이크로 스트레이트 집게를 사용하여 동맥 내부 튜브를 동맥 용기에 삽입합니다. 마이크로 스트레이트 포셉을 사용하여 곡선 을 통해 선박을 목표로합니다.8-06 봉합사를 사용하여 반전된 촉진 내피를 수정합니다. 마이크로 스트레이트 집게로 동맥 용기에서 동맥 내부 팁을 철회하십시오. 마취와 감염은 받는 사람과 동일합니다.안과 가위로 복부 중간 선 절개를 하고 복강을 노출하십시오. 마이크로 커브 집게를 사용하여 열등한 베나 카바를 노출시합니다. 그리고 정맥 주사 200 밀리 리터 당 100 단위의 마이크로 리터 02 4 섭씨 도 헤파린 두현빛 당 20 열등한 베나 카바를 통해 체중의 그램.안과 가위로 소라코토믹을 수행합니다. 팔레트 Romita 보조 빛 절개를 통해 갈비뼈를 잘라. 흉부 구멍을 노출하기 위해 전방 가슴 벽을 바깥쪽으로 플라프합니다.마이크로 포셉으로 흉선을 소비합니다. 대동맥을 노출한 다음 대동맥 아치를 통해 관상 동맥에 100 단위의 200 마이크로리터를 밀리리터 02 4섭씨 4섭씨 헤파린현에 대동맥에 유의하게 한다. 마이크로 가위를 사용하여 대동맥 아치의 시작 부분에서 오름차순 대동맥을 변속시합니다.마이크로 가위로 두 가지 주요 가지의 시작 부분에 폐 동맥을 횡단. 6-02 봉합사를 사용하여 우수한 베나 카바 및 열등한 베나 카바를 찾아 마이크로 가위를 사용하여 정맥을 합자에 변환합니다. 폐 정맥을 일대적으로 사용하여 둘레로 06 봉합사에 06 봉합사를 사용하여 찾아서 마이크로 가위를 사용하여 합자에 대한 정맥 가지를 잘라냅니다.주변 연조직에서 심장 이식편을 제거합니다. 기증자의 마음을 받는 사람의 오른쪽 목 부위에 거꾸로 놓습니다. 마이크로 스트레이트 집게로 6 ~06 루프에 기증자 심장의 폐 동맥을 입력합니다.베나 카바 주위에 선박 루멘을 감싸고 종아리 주위에 6 ~06 봉합루프를 조여 선박 관절을 구부립니다. 접목 및 동맥 곡선의 대동맥의 해부학을 수행합니다. 응집된 경정맥을 풀어준 다음, 응집된 경정맥을 풀어 놓습니다.혈관을 결합하고 비틀게 하고 혈류가 방해받지 않도록 하십시오. 지나가는 심장 이식편을 피하 공간으로 설정한 다음 절개를 봉합합니다. 정상 부비동 리듬에 대한 시간을 기록하고 수술 후 이식 기능을 모니터링하기 위해 클램프 방출 후 적어도 5 분 동안 정상적인 부비동 리듬의 보존을 기록합니다.수령인이 마취에서 깨어날 때까지 받는 사람을 한 담요에 혼자 놓습니다. 함께 촬영, 우리의 수술은보고 된 커프 기술을 사용하지만, 우리는이에 기초하여 내부 코어 기술을 설립. 수술의 어려움을 줄이고 최적화 기술에 의해 해부학 시간을 단축.우리는 회로도에 표시된 수술의 효율성을 더욱 향상시키기 위해 이중 수술 통합 모토를 제안했습니다. 그리고 작동 시간이 약 25 분으로 단축됩니다. 완전히 MHC 일치하지 않는 BALBC 동종 이식 심장은 C57BL6 수령마우스로 이식 된 후 8 일 동안 거부 될 수 있습니다.우리의 연구에 사용 된 Syngeneic 심장 이식 은 수술 전에 정상 체중에 비해 15%의 체중 감소로 인해 1개의 드문 경우를 제외하고 100 일 이상 살아남았습니다. 7일째에 동종 이식의 조직 병리학은 조직 괴사와 침투하는 무거운 세포를 포함하여 급성 거부의 전형적인 특징을 밝혔습니다. Syngeneic 이식편은 심근세포 괴사 또는 염증성 세포 침투의 증거없이 정상에 가깝습니다.합성 심장 이식 후 100일 후, 해부학 부위의 혈관 내막류를 면역형광에 의해 수집하고 염색할 수 있다. 이 분석에서는, 혈관 벽의 역스나락, 혈전증 또는 친밀감의 두껍게 관찰되지 않았다. 전기 현미경 이미징은 매끄러운 내피질과 내피 세포가 있는 정기적인 경도 지각 형성이 표면에 명백한 퇴적물 없이 깔끔하고 밀접하게 배열되었다는 것을 밝혔습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

뮤린 자궁 심장 이식 모델은, 면역뿐만 아니라 허혈 재관류 손상 연구에 매우 적합하다. 우리는 비 봉합 커프 기술을 사용하여 절차를 수정이 방법으로 1,000 개 이상의 성공적인 이식을 수행 하였다.  여기서, 우리는 비디오를 보충하기위한이 기술의 추가 정보를 제공합니다.

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

원고는 마우스에 이소성 심장 이식을 수행하는 데 필요한 단계를 설명합니다.

쥐 이소성 심장 이식 기술

커프 기술은 기술적으로 어려운 작은 혈관의 봉합 문합을 피함으로써 마우스의 이소성 경추 심장 이식 모델을 단축하고 용이하게 합니다. 이 비디오 백서에 표시된 기술적 세부 사항을 통해 연구자는 실험실에서 이 모델을 설정할 수 있습니다.

마우스의 이소성 자궁 심장 이식

여기서, 우리는 자궁 경부 뮤린 모델에서 비 봉합술 커프 기술을 사용하여 마우스에서 이종성 대동맥 이식의 프로토콜을 제시한다. 이 모형은 만성 동종 이식 혈관병증 (CAV)의 근본적인 병리를 공부하기 위하여 이용될 수 있고 그것의 대형을 방지하기 위하여 새로운 치료에이전트를 평가하는 것을 도울 수 있습니다.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

본 프로토콜에서, 마우스 심장 이식 모델은 심장 동종이식 거부반응의 메카니즘을 조사하기 위해 사용된다. 이 이종 심장 이식 모델에서는 수술 효율이 향상되고 수정된 커프 기술을 사용하여 심장 이식의 자궁경부 종단 간 문합에 의해 심장 이식편의 생존이 보장됩니다.

마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술

마우스 심장 이식 모델은 이식 면역학을 연구하기 위한 귀중한 연구 도구입니다. 본 프로토콜은 층류 혈류를 허용하기 위해 수혜자의 총 경동맥 및 기증자의 폐동맥 트렁크에 커프를 배치하는 것을 포함하는 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식을 자세히 설명합니다.

혈관 수갑을 이용한 마우스 이종 자궁 경부 심장 이식

이 프로토콜은 마우스 orthotopic 간 이식에서 커프 기술을 사용하여 혈관 재건을 위한 기술 정보를 제공합니다.

Mouse Orthotopic Liver Transplantation에서 Cuff Technique을 사용한 혈관 재건

이 프로토콜은 마우스에서 커프가 없고 봉합 기반인 경추 이종성 심장 이식 기법을 제시하여, 이물질 간섭이 최소화된 생리학적 조건에서 기증자 특이적 면역 관용을 평가하기 위해 두 번째 이종성 심장 이식편을 신뢰성 있게 배치할 수 있도록 설계되었습니다.

마우스의 기증자 특이적 면역 내성을 평가하기 위한 2차 이종성 심장 이식을 위한 커프스 없는 봉합선 기반 자궁경부 모델

이 프로토콜은 마우스 자궁경부 심장 이식을 위한 단순화된 끝 투 측면 봉합 문합 기법을 제시하여, 이식 면역학 연구를 위한 견고하고 재현 가능한 모델을 제공합니다.

종단 간 문합 기법을 이용한 경추 이종성 마우스 심장 이식 이식 면역학 연구

이 비디오에서는, 우리는 CD40 - 활성화 및 면역의 유도를 연구하는 모델 항원 제시 세포 (APC)로 사용할 수 있습니다 C57BL / 6 마​​우스 splenocytes에서 murine B 세포의 확장 프로 시저를 보여줍니다.

B 세포의 CD40 - 정품 인증 Murine 모델

배우세요 뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술 최적화 방법을. 내관 삽입 기법을 활용하여 혈관 외반을 용이하게 하고, 두 명의 숙련된 외과의 협력으로 수술 시간을 단축하는 혁신적인 접근법입니다.

뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

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