Name: 칸디다 알비칸스 위장관에서 최면 모포 발생을 연구하는 Ex vivo 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-01T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: 학습하세요 Candida albicans의 최면 모포 발생을 연구하는 ex vivo 분석법을. 장 대사물질이 진균 형태 발생에 미치는 영향을 밝히고 장 내 병원체 연구에 활용할 수 있습니다.

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저자는 미드웨스턴 대학 세포 및 분자 코어 연구 시설에서 자원과 지원을 인정합니다.

모든 동물 프로토콜은57이전에 설명된 바와 같이 중서부 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 승인되었다. 미드웨스턴 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회는 MWU IACUC 프로토콜 #2894 따라이 연구를 승인했습니다. MWU 동물 관리 정책은 실험실 동물의 인도적 관리 및 사용에 대한 공중 보건 서비스 (PHS) 정책과 동물 복지법 (AWA)에 명시된 정책을 따릅니다.
1. 마우스 연구 표준 프로토콜
<ol><li>남성과 여성 C57BL/6J 마우스를 적어도 6 주 오래 사용 하십시오. 체파오레존(0.5 mg/mL)의 유무에 관계없이 멸균물로 보충하십시오.<ol>
<li>5의 그룹으로 공동 집 마우스, 모든 남성 또는 모든 여성 마우스를 포함하는 각 케이지와. 마우스 표준 마우스 차우와 물(400mL 병을 통해)을 항상 제공합니다.</li>
		<li>음식과 수위가 충분하도록 매일 케이지를 확인하고, 조난의 징후를 위해 마우스를 검사하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>케이지 수유 병에 남은 물에 관계없이 신선한 항생제가 제공되도록 48h마다 물을 cefoperazone로 교체하십시오.</li>
	<li>5\u20127 일간의 cefoperazone 치료 후, CO2 질식을 통해 마우스를 안락사하여 확립 된 IACUC 프로토콜을 관찰합니다. 자궁 경부 탈구를 통해 죽음을 확인합니다.</li>
	<li>자동 클래브 멸균 날카로운 끝 가위와 자동 클라브 멸균 집게를 사용하여 마우스를 해부.<ol>
<li>안락사 후 복부가 노출되는 모든 사지를 고정하여 해부 표면에 동물을 고정하십시오.</li>
		<li>해부 동안 모피가 집게, 가위 또는 창자 섹션에 달라붙지 않도록 70%의 에탄올로 복부 부위를 분사하십시오.</li>
		<li>집게를 사용하여 복부 의 바닥에 피부 의 한 부분을 꼬집고 들어 올리고 가위를 사용하여 피부와 기본 근막을 통해 작은 절개를 만듭니다. 이 절개를 만들 때 세쿰이나 장 벽을 뚫지 않도록 주의하십시오.</li>
		<li>이 컷을 늑골 케이지로 확장하여 복막 구멍이 부분적으로 노출됩니다. 위쪽과 측면으로 확장양쪽의 초기 절개 지점에서 컷을 만듭니다.</li>
		<li>이러한 플랩을 측면으로 당기고 해부 표면에 고정하여 복막 구멍을 완전히 노출시합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>집게를 사용하여 기관을 추출하는 동안 가위를 사용하여 위와 대장의 탈구 부위에서 절단을 하여 각 섹션에서 가장 많은 양의 장 함량을 수집합니다.</li>
	<li>기관을 제거할 때는 개별 구성 요소의 파열을 피하십시오. 위장, 소장, cecum 및 대형 내장을 각각 근위와 탈구 끝에서 가위를 사용하여 분리하십시오.</li>
	<li>각 섹션에서 각 창자 내용물의 수집을 위해 가위를 사용하여 각 섹션의 단면 끝에서 단일 절개를 한 다음 집게를 사용하여 1.5 mL 미세 원심 분리 튜브로 직감 함량을 수동으로 추방합니다.</li>
	<li>전 생체 내 애사에 대해 -80°C에 내장 콘텐츠를 저장합니다.</li>
</ol>2. 효모 추출물 펩톤 덱스트로스(YPD) 식기 판 준비
<ol><li>1 L 유리 병에 효모 추출물 펩톤-덱스트로스 국물 분말 25g, 10g의 천, 초순수수를 500mL의 최종 부피에 넣습니다.</li>
	<li>121°C에서 30분 동안 액체 사이클에서 자동 클락을 사용하여 미디어를 살균합니다.</li>
	<li>라미나르 플로우 후드 아래에 약 20mL의 한천 미디어를 멸균 페트리 플레이트에 붓습니다. 500 mL의 천은 약 25 플레이트를 산출해야합니다.</li>
	<li>사용할 준비가 될 때까지 4 °C에 접시를 보관하십시오.</li>
</ol>3. 최면 형태 형성 분석에 대한 Ex vivo 준비
<ol><li>C. 알비칸S SC5314의 신선한 문화를 YPD 한천 접시에 적시고 밤새 30°C에서 배양합니다.</li>
	<li>하룻밤 재배 C. albicans SC5314 문화에서 2 ~ 3 개의 중간 크기의 개별 식민지를 선택하고 인산 완충식 식염수 (PBS)의 1 mL에서 다시 중단합니다.</li>
	<li>-80°C 냉동고에서 냉동 용기 내용을 검색하고 25°C에서 해동합니다.</li>
	<li>새로운 1.5 mL 튜브에 약 150 mg의 장 내 내용의 무게.</li>
	<li>PBS의 150 μL (장 내 함량 및 PBS1:1 중량 대 부피 비율)로 장 내 내용을 다시 일시 중단합니다.</li>
	<li>30s의 고속으로 소용돌이가 장 내 함량을 균질화하고 실온에서 약 1분 동안 앉을 수 있도록 합니다.</li>
	<li>원심분리기균질은 1000 x g에서 3분 동안 균일합니다.</li>
	<li>새로운 1.5 mL 튜브로 상체를 전송합니다.</li>
	<li>3.7 및 3.8 단계를 반복하여 상체의 모든 잔해를 제거합니다.</li>
	<li>C. 알비칸 SC5314 이내무통의 10 μL을 이 상체에 추가합니다.</li>
	<li>잘 섞고 37°C에서 4~5시간 동안 배양합니다.</li>
</ol>4. 최면 형태 형성 분석에 대한 장균성 추출물에 대사 산물을 외인성 첨가
<ol><li>-80°C 냉동고에서 냉동 용기 내용물을 회수하고 PBS에서 1:1 비율(중량: 부피)으로 다시 중단됩니다.</li>
	<li>창 자 내용 및 PBS 혼합물에 창 자 대사 산물의 원하는 농도 추가.</li>
	<li>30s의 고속으로 소용돌이가 대사산물을 함유한 장내 함량을 균질화하고 실온에 약 10분 동안 앉을 수 있도록 합니다.</li>
	<li>원심분리기균질은 1000 x g에서 3분 동안 균일합니다.</li>
	<li>새로운 1.5 mL 튜브로 상체를 전송합니다. 4.4 및 4.5 단계를 반복하여 상차의 모든 잔해를 제거합니다.</li>
	<li>C. 알비칸 SC5314 이내 무큐럼의 10 μL을 이 상체에 추가합니다. 잘 섞고 37°C에서 4~5시간 동안 배양합니다.</li>
</ol>5. C. 알비칸스 형태 발생 분석 (면역 염색 및 이미징)
<ol><li>샘플을 1000 x g에서 2분 동안 원심분리하고 파이펫팅을 통해 상퍼를 폐기합니다.</li>
	<li>100 μL의 2% 파라포름알데히드(PFA)로 샘플을 15분 간 수정합니다.</li>
	<li>1000 x g의 원심분리기는 2분 동안 피펫팅을 통해 상류부를 폐기합니다.</li>
	<li>PBS 1mL로 샘플을 두 번 세척합니다. 샘플을 세척하려면 부드럽게 파이프를 사용하여 PBS에서 펠릿을 다시 중단하십시오. 이 하이픈 구조를 손상 시킬 수 있기 때문에 샘플을 소용돌이 하지 마십시오. 다시 서스펜션 후 원심분리기는 1000 x g에서 2분 동안 피펫팅을 통해 상체를 폐기합니다.</li>
	<li>폴리클론 C. 알비칸 항체(1:100 희석)를 함유한 PBS의 100μL에서 실온에서 샘플을 30분 동안 배양한다.</li>
	<li>PBS 1mL로 샘플을 세 번 세척합니다. 참고: 형광 항체를 사용하는 경우, 모든 희석 및 세척 단계는 사진 표백을 피하고 시료 수명을 개선하기 위해 희미한 빛으로 수행되는 것이 좋습니다.</li>
	<li>1:500 희석시 항래비게이그 알렉사플루어 488 항체를 함유한 PBS의 100 μL에서 실온에서 15분 동안 샘플을 배양한다. 사진 표백을 피하기 위해 어두운 서랍이나 방에서 인큐베이션을 수행합니다.</li>
	<li>PBS 1mL로 샘플을 세 번 세척합니다.</li>
	<li>PBS의 100 μL에서 샘플을 다시 중단하고 이미징을 위해 96웰 플레이트로 이송합니다. 참고: 이미지화되지 않을 때는 96웰 플레이트를 알루미늄 호일로 감싸서 사진 표백을 피하는 것이 좋습니다.</li>
	<li>형광 이미징 현미경을 사용하여 20배 및 40배 의 객관적렌즈를 사용하는 이미지 곰팡이 세포. 녹색 형광 단백질 (GFP) 필터 (흥분 파장 470/40 및 방출 파장 525/50)를 사용하여 형광을 감지하십시오.</li>
</ol>

저자는 경쟁 적인 재정적 이익 이나 이해의 다른 충돌.

여기에서 기술된 방법은 기관에 있는 C. albicans 최면 형태발생에 대한 항생제, 규정식, xenobiotic 및 치료 충격의 효력을 조사하는 새로운 방법을 제시합니다. 전신 감염의 대부분은 기관21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,</su...

칸디다 알비칸스는 일반적으로 기만적이지만 면역 절인 개인1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12, 12, 12에서생명을 위협하는 감염을 유발할 수 있는 악성 형태로 형태학적 변화를 겪을 수 있습니다. C. 알비칸은 항진균 치료2,14,15에서도40\u201260% 사망률을 가진 전신 외장 감염의 주요 원인이다. C. albicans는 여성 생식시스템(16,17)및 건강한 개인의구강(18)과 위장관(GI)19,20,전신 감염의 대부분을 기관에서 유래하는 등 상이한 숙주 틈새에 거주하고 있지만, 또한, 전신 감염의 근원은 종종 GI요로 확인된다21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34. C. 기관의 알비칸 병원성은 광범위한 요인에 의해 영향을 받습니다. 그러나, 독성에 필요한 주요 특징은 효모 세포 형태에서 악성 최음세포형태(35,36,37,38,39,40,41,42, 43,44)로의 전환이다. C. 알비칸스 감염 시 기관으로부터의 부착 및 보급은 기막 효모에서 악성 최면으로 전환하는 능력과 매우 관련이 있어 곰팡이가 침습적 질환44,45,47,48,49,50,51,52,53을유발할 수 있다.
n-아세틸글루코사민을 포함한 창자에 있는 다양한 요인은 C. albicans에의하여 최면 형성을 조절합니다. 따라서, 기관54,55,56에서이 곰팡이 병원균의 최면 형태발생에 관한 지식의 격차를 좁히는 것이 중요하다. 최근 증거에 따르면 다양한 장 대사산물이 체외57,58,59,60에서 C. 알비칸의 최면 형태 발생을 차별화적으로 제어한다는 것을 나타낸다. 그러나, 기술적 제약은 생체 내 의 자궁 내의 C. 알비칸최면 형성, 특히 염색 효모 및 최면 세포 및 최면 발달의 정량적 분석을 연구하려고 할 때 문제를 제시한다. 기관에서 C. 알비칸스 최면 형태발생을 이해하기 위해, 전 생체 내 방법은 균질 최면 형태발생에 대한 대사산물의 효과를 연구하기 위해 마우스로부터 균질화 된 장 함량의 용용 추출물을 사용하여 개발되었다. C. albicans GI 감염에 저항하고 영향을 받기 쉬운 마우스에서 창자 견본을 이용하는, 이 방법은 GI 관에 있는 곰팡이 최면 형태발생에 대사 산물, 항생제 및 xenobiotics의 효력을 확인하고 공부하는 것을 도울 것입니다.

<table><tbody><tr><td>1 - 10 &마이크로; L 피펫 팁</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-707-454</td><td>기타</td></tr><tr><td>100 - 1000 &마이크로; L 피펫 팁</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-707-400</td><td>기타</td></tr><tr><td>20 - 200 &마이크로; L 피펫 팁</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-707-451</td><td>Misc</td></tr><tr><td>2-methylbutyric acid</td><td>Sigma</td><td>193070-25G</td><td>최면 억제 화합물</td></tr><tr><td>488 염소 항 토끼 IgG</td><td>Invitrogen (Fisher)</td> <td>A11008</td><td>IF 염색 2 차</td></tr><tr><td>ab 한</td><td></td>천 <td>Fisher BP1423-500</td><td>YPD 한천 구성</td></tr><tr><td>요소 자동 이미징 현미경</td><td>Keyence</td><td>BZX700</td><td></td></tr><tr><td>칸디다 알비칸스 항체</td><td>Invitrogen (Fisher)</td><td>PA1-27158</td><td>IF 염색 1차</td></tr><tr><td>ab cefoperazone</td><td>Cayman</td><td>16113</td><td>항생제</td></tr><tr><td>데옥시콜산</td><td>Sigma</td><td>30960</td><td>hyphal-inhibitory compound</td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Fisher</td><td>D16-500</td><td>hyphal-promoting compound</td></tr><tr><td></td><td>Fisher</td><td>08-885</td><td></td></tr><tr><td>젖산</td><td>Alfa Aesar</td><td>AAAL13242-06</td><td>최면 억제 화합물</td></tr><tr><td>리토콜산</td><td>Sigma</td><td>L6250-10G</td><td>최면 억제 화합물</td></tr><tr><td>팔미트산</td><td>Sigma</td><td>P5585-10G</td><td>최면 억제 화합물</td></tr><tr><td>파라포름알데히드</td><td>Alfa Aesar</td><td>A11313</td><td>IF 염색 고정성</td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS), 10x</td><td>알파 Aesar</td><td>J62692</td><td>PBS 구성 요소</td></tr><tr><td>p-tolylacetic acid</td><td>SCBT</td><td>sc-257959</td><td>hyphal-inhibitory compound</td></tr><tr><td>sebacic acid</td><td>Sigma</td><td>283258-250G</td><td>hyphal-inhibitory compound</td></tr><tr><td>sharp ended scissors</td><td>Fisher</td><td>28301</td><td></td></tr><tr><td>sterile Milli-Q water</td><td>N/A</td> N<td>/A</td><td>Misc</td></tr><tr><td>YPD Broth</td><td>BD Biosciences</td><td>242810</td><td>YPD 한천 구성 요소</td></tr></tbody></table>

칸디다 알비칸스 위장관에서 최면 모포 발생을 연구하는 ex vivo 분석

An Ex vivo Assay to Study Candida albicans Hyphal Morphogenesis in the Gastrointestinal Tract

위장(GI) 관내 칸디다 알비칸스 최면 형태발생은 다양한 환경 신호에 의해 엄격하게 제어되며, 이 기회성 곰팡이 병원균의 보급 및 병원성 발생에 중요한 역할을 한다. 그러나, 생체 내 기관에서 곰팡이 최해를 시각화하는 방법은 이러한 형태 발생 과정을 제어하는 환경 신호의 이해를 제한하는 도전적이다. 여기에 설명된 프로토콜은 장 동형 추출물에서 최면 형태 발생의 시각화를 위한 새로운 ex vivo 방법을 보여줍니다. 전 생체 분석기를 사용하여, 이 연구는 항생제 처리된 마우스에게서 cecal 내용이, 그러나 처리되지 않은 대조마우스에서, 창자 내용에서 C. albicans 최면 형태발생을 승진시키는 것을 보여줍니다. 또한, 항생제 처리된 마우스로부터 세칼 내용물의 특정 군을 다시 첨가하면 자궁 내형성 전 생체내를 분화한다. 종합하면, 이 프로토콜은 기관에서 C. albicans 최면 형태발생을 제어하는 환경 신호를 식별하고 조사하는 새로운 방법을 나타냅니다.

이러한 결과는 탄가마니실험실(60)의 이전 연구 결과와 함께 C. 알비칸이 위장에서 가져온 장용 균질 추출물에서 전 생체을 재배할 때, 치료되지 않은 대조군 및 항생제 처리 마우스의 소장 및 대형 장, C. 알비칸스는 일반적으로 효모 형태학(도1B)으로개발된다는 것을 나타낸다. 그러나, 항생제 처리된 마우스에서 세칼 추출물에서 재배될 때, C. 알비칸스는 쉽게 형태발생을 겪으며, 효모와 최면 형태를 함유한 시료(도1B); 이것은 대조군 마우스에서 발생하지 않습니다. 이는 항생제 처리된 세칼 추출물에서 자란 샘플에서 최해 형태의 현저한 증가를 보였지만, 다른 항생제 치료장추출물(60)에서는그렇지 않은 이전 결과를 뒷받침한다. 이러한 결과는 항생제 치료가 C. albicans의 ...

이 연구에서 기장 균질 추출물과 면역형광 스테인링을 사용하여 기술된 전 생체 분석법은 기관에서 칸디다 알비칸스의 최면 형태 발생을 검사하는 새로운 방법을 나타낸다. 이 방법은 창자에 있는 형태유전학 전이를 통제하는 환경 신호를 조사하기 위하여 이용될 수 있습니다.

칸디다 알비칸스 위장관에서 최면 모포 발생을 연구하는 Ex vivo 분석

Candida albicans hyphal morphogenesis in the gastrointestinal (GI) tract is tightly controlled by various environmental signals, and plays an important ...

이 비디오에서 입증 된 프로토콜은 곰팡이 최면 형태 발생에 대한 장 대사 산물의 역할을 이해할 수 있게합니다. 이 전 생체 내 기술은 체외 연구가 복제할 수 없는 방식으로 곰팡이 최면 형태 발생을 연구하기 위한 장의 가장 가까운 근사치를 더 많거나 적게 합니다. 이 방법은 다른 장내 병원체에 장 대사 산물의 역할을 연구하기 위해 적용 될 수있다.자동 살균 된 날카로운 말단 가위와 집게를 사용하여 마우스를 해부합니다. 안락사 후, 복부를 노출하기 위해 모든 사지를 고정하여 해부 표면에 동물을 고정. 모피가 집게, 가위 또는 창자 섹션에 달라붙지 않도록 70%에탄올로 복부 부위를 분사하십시오.집게를 사용하여 복부 의 바닥에 피부 의 한 부분을 꼬집고 들어 올리고 피부와 근본적인 근막을 통해 작은 절개를 만들어 cecum 또는 장 벽을 뚫지 않도록주의하십시오. 복막 구멍을 부분적으로 노출 흉곽에이 컷을 확장 한 다음 양쪽에 초기 절개 지점에서 시작하여 위쪽과 측면으로 확장 절단합니다. 이 플랩을 측면으로 당기고 해부 표면에 고정하여 복막 구멍을 완전히 노출시합니다.가위를 사용하여 위와 대장의 탈경 부위에서 절단을 보다 우수하게 만드는 동안 위스포프로 위관을 추출하여 가장 많은 양의 장 함량을 수집합니다. 기관을 제거할 때는 개별 구성 요소의 파열을 피하십시오. 위장, 소장, cecum 및 큰 내장을 근위와 탈구 끝에서 분리합니다.각 섹션에서 창자 내용물의 수집을 위해, 단상 끝에 단일 절개를 한 다음 수동으로 집게와 1.5 밀리리터 미세 센티스 리퍼지 튜브로 장 내침을 추방. 샘플을 영하 80도에서 저장하여 전 생체 내 에세이를 보관하십시오. C.albicans SC5314의 신선한 문화를 YPD 한천 접시에 적시고 섭씨 30도에서 하룻밤 동안 배양하십시오.다음 날, 2~3개의 중간 크기의 개별 식민지를 선택하고 PBS의 1밀리리터로 재보설한다. 냉동고에서 냉동 용기 내용을 검색하고 섭씨 25도에서 해동하십시오. 약 150밀리그램의 장내 함량을 새로운 1.5 밀리리터 튜브로 옮기고 150마이크로리터의 PBS로 재보선다.30초 동안 고속으로 샘플을 소용돌이쳐 내장 함량을 균질화하고 실온에서 약 1분 동안 앉을 수 있도록 합니다. 원심분리기는 3분 동안 1, 000회 G에서 균질화한 다음, 상체관을 새로운 1.5 밀리리터 튜브로 옮기어 파편을 옮기지 않도록 주의합니다. 원심분리를 반복한 후, C.albicans 접종의 10 마이크로리터를 상체에 넣고 잘 섞고 샘플을 섭씨 37도에서 4~5시간 동안 배양합니다.C.albicans에 외인성 대사 산물의 효과를 테스트하기 위해, 창자 함량 및 PBS 혼합물에 대사 산물의 원하는 농도를 추가한 다음 30 초 동안 고속으로 샘플을 소용돌이시키고, 10 분 동안 실온에 앉아서 원심 분리 및 접종을 수행하십시오. 곰팡이 세포 배양을 1, 000회 G에서 2분 동안 원심세포 배양을 원심분리하고 상퍼를 폐기한다. 15분 동안 2%PFA의 100마이크로리터로 샘플을 수정한 다음 원심분리를 반복하고 상신자를 폐기합니다.원고 방향에 따라 PBS의 1 밀리리터로 샘플을 두 번 세척한 다음, 폴리클론 C.albicans 항체를 사용하여 PBS의 100 마이크로리터에서 실온에서 샘플을 배양합니다. 인큐베이션 후 PBS로 샘플을 세 번 더 세척하여 광표백을 피하기 위해 희미한 빛으로 작업합니다. 어두운 방에서, 1 ~ 500 희석에 안티 토끼 IgG 알렉사 플루오 488 항체를 포함하는 PBS의 100 마이크로 리터에서 실온에서 샘플을 배양.PBS의 1 밀리리터로 샘플을 세 번 세척한 후, PBS의 100 마이크로리터로 샘플을 다시 중단하고 이미징을 위해 96웰 플레이트로 옮기습니다. 20X 및 40X 객관적렌즈와 녹색 형광단백질 필터를 사용하여 형광 이미징 현미경으로 곰팡이 세포를 이미지화합니다. C.albicans가 위장, 소장 및 치료되지 않은 대조군 및 항생제 치료 마우스의 큰 장에서 가져온 장 균질 추출물에서 전 생체 균증이 재배되면 일반적으로 효모 형태로 개발됩니다.그러나, 항생제 처리된 마우스에서 세칼 추출물에서 재배될 때, C.albicans는 효모와 최해 형태의 결과로 쉽게 형태 발생을 겪는다. 이것은 항생제 처리가 C.Albicans의 최면 형태 발생을 유도하는 cecal 환경에 있는 변경을 일으키는 원인이 된다는 것을 표시합니다. 항생제 처리된 마우스의 세포 균질에 포도당의 외인성 첨가는 대규모 최면 발달 ex vivo를 보였다.이러한 결과는 항생제 처리된 마우스의 세포 균주에 다시 창자 대사산물의 추가가 C.albicans의 형태발생을 차별화적으로 조절한다는 것을 건의합니다. 이 프로토콜을 시도할 때, 장 내 내용의 희석을 최적화하면 잔해 수집없이 장 대사 산물을 충분히 수집할 수 있습니다. 2대 1 미디어-투-용기 콘텐츠 희석을 초과하지 말고 가능하면 희석을 낮추도록 목표로 하십시오.이 기술은 어떻게 창 자 충격 하이픈 개발에 특정 대사 산물 을 탐구 하기 위해 지금 사용 되 고, 연구원 더 나은 곰 팡이 병 신에 창 자 대사 산물의 역할을 이해할 수 있도록.

an-ex-vivo-assay-to-study-candida-albicans-hyphal-morphogenesis

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

이 비디오는 피하 조직에서 칸디다 알비칸스의 생물막 형성을 연구하기 위한 생체 내 마우스 모델의 개발을 보여줍니다. 이 실험은 생물막 발달을 위해 동물의 등 부위에 칸디다균에 감염된 장치를 이식하는 것을 포함합니다.

칸디다 알비칸스 In Vivo 마우스 모델의 생물막 형성

이 비디오는 곰팡이 생물막에 대한 항체의 효과를 연구하는 시험관 내 기술을 보여줍니다. 병원성 진균 Candida tropicalis는 aspartyl proteinase 2 (Sap2)를 분비하는 독성 인자를 분비하여 생물막 형성을 촉진합니다. 생물막 성숙을 억제하는 Sap2 특이적 항체를 함유한 열 불활성화 혈청을 도입하면 발색 분석을 사용하여 곰팡이 세포의 생존력을 평가합니다.

Candida tropicalis Biofilm에 대한 항체의 효과를 평가하기 위한 체외 분석

우리는 라이브 세포 영상 현미경에 대한 방법을...

곰팡이 병원체 Phagocytosis의 라이브 셀 비디오 현미경

현재 문서 곰팡이 독성 메커니즘에 대한 우리의 지식을 향상 할 수있는 유용한 도구가 될 것입니다 인간 대 식세포와 통성 세포 내 인간의 곰팡이 병원균 칸디다 글라 브라의 상호 작용을 연구하는 체외 세포 배양 모델 시스템을 구축 할 수있는 프로토콜을 설명합니다.

설립<em&gt; 체외</em&gt; 시스템의 세포 내 행동을 연구하는<em&gt; 칸디다 글라 브라</em&gt; 인간 THP-1 식세포에

마우스 피하 모델에서 칸디다 알비칸스 생물막 발달의 실험적 절차를 제시합니다. 진균 생물막은 군집 형성 단위의 수를 결정하고 생성되는 빛의 양이 생존 가능한 세포의 수와 일치하는 비침습적 생물 발광 이미징에 의해 정량화되었습니다.

생물 발광 영상에 이어 마우스 피하 모델의 의학 관련 외국 기관에 칸디다 알비 칸스 (Candida albicans)에 바이오 필름 ​​개발

여기, 선물이 미생물 상호 작용을 공부 하는 다양 한 호스트 모델로 선 충 류 꼬마 선 충 .

선 충 꼬마 선 충-모델을 다양 한 비보에 호스트-미생물 상호작용 연구

이 프로토콜에서는 호스트 생리 적 조건 하에서 Candida albicans 에 biofilm 형성을 시각화 하는 사용자 지정 가능한 자동화 된 미세 장치를 사용 하 여를 설명 합니다.

Candida albicans 자동 미세 장치를 사용 하 여에서 Biofilm 형성의 시각화

이 프로토콜의 목적은 포유류 위장관에서 칸디다 알비칸스 세포 모양 및 국소화를 시각화하는 것입니다.

시투 혼성화에서 형광을 사용하여 뮤린 위장에서 칸디다 알비칸스의 시각화

이 원고는 비침습적 공초점 현미경을 사용하여 포유류 숙주에서 활성 감염 동안 형태 형성 표현형에 대해 중간 크기의 칸 디다 알비칸스 돌연변이 라이브러리를 스크리닝하는 방법을 설명합니다.

포유류 숙주에서 활성 감염 중 칸디다 알비칸스 돌연변이 균주에서 형태형성 표현형을 스크리닝하기 위한 생체 내 이미징 사용

경쟁 유도 실험 직접 하나의 마우스로 두 개의 서로 다른 세포 인구의 철새 속성을 평가하실 수 있습니다. 여기 우리는 전 생체내 생성 인내심 트로픽 대 비 직감 트로픽 T 세포의 마이 그 레이션을 비교하여이 절차를 설명합니다.

굿 - 트로픽 T 세포의 마이 그 레이션을 공부 경쟁력 호밍 Assays

학습하세요 Candida albicans의 최면 모포 발생을 연구하는 ex vivo 분석법을. 장 대사물질이 진균 형태 발생에 미치는 영향을 밝히고 장 내 병원체 연구에 활용할 수 있습니다.

칸디다 알비칸스 위장관에서 최면 모포 발생을 연구하는 Ex vivo 분석

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