Name: 그람 음성 세균 패혈증의 신생아 화상 진찰 모형 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: 배우세요 생체 발광 E. coli를 이용한 신생아 패혈증 마우스 모델에서 실시간 세균 확산 추적 및 병원체 부담과 질병 마커의 상관관계 분석 방법. 이 프로토콜은 감염 역학을 연구하고 임상 전 치료 개입을 테스트하는 데 활용됩니다.

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저자는 공개 할 이해 상충이 없습니다.

신생아 마우스에서 세균 패혈증을 유도하기 위한 당사의 견갑골 감염 모델은 세균 병원체의 세로 확산을 실시간으로 연구하는 새로운 방법입니다. 인트라바이탈 이미징은 신생아에서 실시간으로 세균 보급을 탐구할 수 있는 기회를 제공합니다. 이것은 세균성 보급의 운동학을 이해하고 질병의 적당한 단계에서 호스트 반응 및 손상을 추가로 연구하기 위하여 중요합니다. 마우스 새끼는 세균 성 무접종의 피하, 피하 주입을 투여한다. 이 주입 기술은 주사 부위 내에서 덜 정밀도를 필요로하기 때문에 꼬리 정맥 및 복강 내 감염과 같은 다른 일반적으로 사용되는 대안보다 간단합니다. 이것은 새끼의 작은 크기를 감안할 때 중요합니다. 인트라바이탈 이미징은 동물을 희생할 필요 없이 시간이 지남에 따라 주변 조직및 중추 신경계로 세균증 및 보급의 세로 평가를 허용합니다. 유사한 화상 진찰 접근 및 기술은 암 생물학 및 전이의 연구 결과에 이용되었습니다20,21.</su...

세균성 패혈증은 감염1로부터적당한 보호를 제공하지 않는 생활의 첫번째 일에 있는 유일한 면역 단면도를 전시하는 신생아를 위한 중요한 관심사입니다. 신생아 패혈증은미국에서만매년 75,000건 이상의 사례를 차지하는 중요한 미국 의료 문제입니다. 심층에서 이 감염을 공부하기 위하여는, 인간적인 질병의 양상을 회상하는 새로운 동물 모형이 요구됩니다. Escherichia 대장균,O1:K1:H73을사용하여 신생아 마우스 감염 모델을 확립했습니다. 대장균은 미국에서 신생아 패혈증의 두 번째 주요 원인이지만 패혈증 관련 사망률4,5의대다수에 대한 책임이 있습니다. 그러나, 그것은 pre-term 및 매우 낮은 출생 체중 (VLBW) 아기가독립적으로5로 간주될 때 주요 한 원인입니다. K1 혈청형은 신생아6,7에서침습적 혈류 감염 및 뇌막염과 가장 자주 연관된다. 현재, 항생제와 지원 치료 이외의 다른 치료 옵션이 없습니다. 한편, 항생제 내성의 비율은 많은 병원성 박테리아에 대한 상승을 계속, 대장균의 일부 변종은 일반적으로 치료에 사용되는 항생제의 무리에 저항8. 따라서, 우리는 패혈증의 메커니즘과 신생아의 호스트 반응을 연구하는 방법을 생성하는 것이 필수적이다. 이러한 결과 현재 치료 및 감염 결과 개선 하는 데 도움이 수 있습니다.
신생아의 면역 상태는 성인에 비해 표현과 기능적 차이 모두 특징이다. 예를 들어, 인터류킨(IL)-10 및 IL-27과 같은 항염증 및 조절 세포카인의 높은 수준은, 코드 혈액 유래 대식세포에 의해 생성되는 것으로 나타났으며 뮤린 신네이트9,10,11의혈청에서 더 큰 수준에서 존재한다. 이는성인세포(10)와비교하여 신생아세포로부터 자주 보고되는 IFN-α, IFN-ɣ, IL-12 및 TNF-α 낮은 수준과 일치한다. 또한, 신생아 면역 계통은 성인12와비교하여 Th2 및 규정 T 세포 반응으로 기울어져 있다. 호중구, T 세포, B 세포, NK 세포 및 단핵구의 높은 숫자는 신생아에도 존재하지만, 중요한 기능 적 장애를 가진다. 여기에는 미성숙을 제안하는 세포 표면 마커 및 항원 프리젠 테이션의 발현에 결함이포함됩니다(13,14,15). 추가적으로, 신생아 호중구는 화학 계수 요인16로이동하는 그들의 능력에 있는 현저하게 결핍됩니다. 골수성 유래 억제제 세포(MDSC)는 또한 신네이트의 높은 수준에서 발견되며 최근에IL-2711의원천으로 나타났다. MDSC는 T세포(17)를향해 매우 억제된다. 전체적으로, 이 데이터는 감염에 증가한 감수성에 빌려주는 신생아 면제에 있는 한계를 보여줍니다.
신생아 패혈증 중 세균성 부담의 진행과 해부 보호 숙주 면역 반응의 진행을 연구하기 위해, 우리는 새로운 감염 모델을 개발했습니다. 생활의 일 3-4에 신생아 마우스는 복막 공간 또는 꼬리 정맥에서 주입하기 어렵다. 우리의 모형에서, 일 3 또는 4 새끼는 견갑각 성 지역으로 세균성 접종 또는 PBS를 피하로 관리됩니다. 전신 감염이 발생하고 발광 대장균 O1:K1:H7을 사용하여, 우리는 말초 조직에 전파된 세균 부담을 따르기 위하여 개별 신생아 마우스를 세로로 심상할 수 있습니다. 이것은 뮤린 신생아3에서패혈증 도중 박테리아의 보급의 운동을 이해하기 위하여 인트라베이티 이미징을 이용하는 첫번째 보고된 모형입니다.
여기서, 신생아 마우스에서 패혈증 대장균 감염을 유도하는 프로토콜을 설명한다3. 우리는 주입을 위한 세균성 접종을 준비하는 방법, 병리학평가를 위한 조직을 수확하는 방법, 유전자 발현 분석에 의한 염증성 마커의 측정, 세균부담의 열거를 기술합니다. 또한, 감염된 신생아의 인트랄트 이미징을 위한 발광 대장균의 사용과 신생아 면역 세포에 의한 세균성 살인의 정량화도 설명된다. 이 프로토콜은 또한 신생아에 있는 그밖 중요한 세균성 감염을 공부하기 위하여 적응될 수 있습니다. 여기에 제시된 데이터는 번역가능한 신생아 패혈증 모형에 있는 감염 역학을 이해하는 전반적인 새로운 접근을 나타냅니다.

<table><tbody><tr><td>1mL 인슐린 주사기</td><td>Coviden</td><td>1188128012</td><td>접종 또는 PBS 주입</td></tr><tr><td>10% 중립 완충 포르말린</td><td>VWR</td><td>89370-094</td><td>조직병리학</td></tr><tr><td>ACK 용해 완충액</td><td>Gibco</td><td>LSA1049201</td><td>세균 제거 분석</td></tr><tr><td>동물 문신 잉크 페이스트</td><td>Ketchum</td><td>KI1482039</td><td>동물 식별</td></tr><tr><td>동물 문신 잉크 녹색 페이스트</td><td>Ketchum</td><td>KI1471039</td><td>Animal identification</td></tr><tr><td>Anti-Ly-6B.2 Microbeads</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-100-781</td><td>Cell isolation</td></tr><tr><td>Escherichia coli O1:K1:H7</td><td>ATCC</td><td>11775</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli O1:K1:H7-lux (루시페라아제를 표현)</td><td>N/A</td> N<td>/A</td><td>WVU</td></tr><tr><td>에서 자체 제작E.Z.N.A. HP Total Extraction RNA Kit</td><td>Omega Bio-tek</td><td>R6812</td><td>RNA extration</td></tr><tr><td>DPBS, 1X</td><td>Corning</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>Difco Tryptic Soy Agar</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>236950</td><td>Bacterial growth</td></tr><tr><td>IL-1 beta Primer/probe (Mm00434228)Thermo</td> <td>Fisher Scientific</td><td>4331182</td><td>Cytokine expression qPCR</td></tr><tr><td>IL-6 Primer/probe (Mm00446190)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4331182</td><td>사이토카인 발현 qPCR</td></tr><tr><td>iQ Supermix</td><td>Bio-Rad</td><td>1708860</td><td>Real-time quantitative PCR</td></tr><tr><td>iScript cDNA Synthesis Kit</td><td>Bio-Rad</td><td>1708891</td><td>cDNA synthesis</td></tr><tr><td>Isolation Buffer</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>N/A</td><td>Bacterial clearance assay</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum CT and Living Image 4.5 Software</td><td>Perkin Elmer</td><td>N/A</td><td>Intravital imaging</td></tr><tr><td>LB Broth, Lennox</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP1427-500</td><td>Bacterial growth</td></tr><tr><td>EASYstrainer (Nylon Basket)</td><td>Greiner Bio-one</td><td>542 040</td><td>Cell strainer</td></tr><tr><td>SpectraMax iD3</td><td>Molecular Devices</td><td>N/A</td><td>Plate reader</td></tr><tr><td>Pellet Pestle Motor</td><td>Grainger</td><td>6HAZ6</td><td>Tissue homogenization</td></tr><tr><td>Polypropylene Pellet Pestles</td><td>Grainger</td><td>6HAY5</td><td>조직 균질화</td></tr><tr><td>프라임 열 순환기</td><td>Techne</td><td>3PRIMEBASE/02</td><td>cDNA synthesis</td></tr><tr><td>TNF-alpha Primer/Probe (Mm00443258)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4331182</td><td>Cytokine expression qPCR</td></tr><tr><td>TriReagent (GTCP)</td><td>Molecular Research Center</td><td>TR 118</td><td>RNA extration</td></tr></tbody></table>

그람 음성 세균 패혈증의 신생아 화상 진찰 모형

A Neonatal Imaging Model of Gram-Negative Bacterial Sepsis

신생아는 삶의 첫 달에 표시되는 독특한 면역 프로필로 인해 세균 성 패혈증의 위험이 증가합니다. 우리는 신생아의 높은 사망률을 담당하는 혈청형 인 대장균 O1:K1:H7의 병인을 연구하기위한 프로토콜을 설립했습니다. 우리의 방법은 감염의 진행 도중 다른 시점에서 신생아 새끼의 인탈 화상 진찰을 이용합니다. 혈액에 있는 박테리아의 측정에 의해 병렬된 이 화상 진찰, 선동적인 프로파일링 및 조직 조직 조직 병리학, 패혈증 도중 감염 역학을 이해하는 엄격한 접근을 의미합니다. 현재 보고서에서, 우리는 세균성 부담과 질병의 엄격의 비교를 위한 2개의 전염하는 접종을 모델링합니다. 우리는 잠복 감염이 10 시간 감염에 의하여 보급된 감염으로 이끌어 내는 것을 것을을 발견합니다. 24시간까지 발광 대장균의 감염은 혈액, 폐 및 기타 말초 조직에 풍부했습니다. 폐에서 염증성 사이토카인의 발현은 24시간에서 중요하며, 이는 세포 침투와 전염성 투여량으로 증가하는 조직 손상의 증거에 선행된다. 인트라바이탈 이미징에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 이것은 발광 신호 임계값 및 마취 도중 신생아로 생길 수 있는 몇몇 합병증을 포함합니다. 몇 가지 제한에도 불구 하 고, 우리는 우리의 감염 모델 신생아 뮤린 패 혈 증 동안 세로 감염 역학을 이해 하기 위한 통찰력을 제공 발견, 그 철저 하 게 현재까지 검사 되지 않은. 우리는 이 모형이 또한 초기 생활 도중 그밖 중요한 세균성 감염을 공부하기 위하여 적응될 수 있기를 기대합니다.

이 프로토콜은 신생아 마우스에서 세균 패혈증을 유도하고, 우리는 경도 내 근위 화상 진찰, 혈액내 박테리아의 열거, 병리학의 조직학적 평가 및 염증성 사이토카인 발현 프로파일을 사용하여 질병의 과정을 연구했습니다. 이환의 표시는 시간이 지남에 따라 E.coli의 낮은 (~7 x 106 CFU) 및 높은 (~7 x 106 CFU)에 감염된 신생아 새끼에서 관찰되었습니다. 더 큰 접종을 받은 새끼는 이동성 감소, 자세를 교정할 수 없음, 24시간 후 감염(hpi)으로 직립 위치를 유지하는 장애가 있는 고통을 더 두드러지게 표시했습니다. 그러나 일부 새끼들이 다른 새끼보다 더 나빠진 것처럼 보였기 때문에 다양한 이환율이 있었습니다. 감염 직후, 저용량 동물 1명은 기준선을 확립하기 위해 이미징 세션 중 이소플루란 노출로 인해 사망했습니다. 24 마치에 의해, 6 개의 고용량 동물 중 2 개는 전신 감염에 굴복 (33.3% 사망). 고용량 또는 저용량 접종을 받은 감염된 새끼는 2...

생체 발광 대장균 O1:K1:H7을 가진 신생아 마우스의 감염은 중요한 폐 염증 및 폐 병리를 가진 패혈증 감염을 초래합니다. 여기서는 전신 세균성 부담, 염증 성 프로파일링 및 폐 조직 병리학의 열거와 병행하여 세로 내 인트라비셔널 이미징을 사용하여 신생아 패혈증을 모델링하고 추가로 연구하는 절차를 설명합니다.

Neonates are at an increased risk of bacterial sepsis due to the unique immune profile they display in the first months of life. We have established a ...

우리의 프로토콜은 실험적인 신생아 패혈증 모형에 있는 세균성 보급 및 부담 추적을 실시간으로 허용하고, 병원체 부담과 질병의 그밖 마커를 상관시키는 기능을 허용합니다. 이 프로토콜은 개별 신생아 마우스에 있는 패혈증을 세로로 분석하는 것을 허용하고, 실시간으로 감염 역학 및 세균성 보급을 관찰하고 비교할 기회를 제공합니다. 신생아 패혈증에 대한 내정간섭의 전임상 시험은 박테리아의 호스트 통제의 효력의 감시를 허용하는 이 방법으로 수행될 수 있습니다.생체 안전 수준 2 캐비닛 내에서 연령 일치 새끼를 고용량 또는 저용량 쓰레기 그룹에 배치하여 시작합니다. 산후 3 또는 4 일에 접종 전에 모든 새끼의 무게를 기록하십시오. PBS 또는 생체 안전 캐비닛에 높은 또는 저용량 E.coli 럭스 접종을 가진 인슐린 주사기를 로드하고 얼음에로드 된 주사기를 배치합니다.신생아를 생물 안전 캐비닛 내의 깨끗한 표면에 주입하고 강아지를 덜어 두는 것처럼 목의 목덜미에서 피부를 올립니다. 바늘을 피부와 근육 사이에 만든 공간에서 피부 바로 아래에 서 두세요. 바늘이 피부 밑에서 느낄 수 있을 때, 역류를 방지하기 위해 피부의 꼬집어 넣은 부분을 동시에 방출하는 동안 무분비제의 50 마이크로리터를 주입한 다음 천천히 바늘을 제거하고 주의하십시오.모든 새끼가 같은 방식으로 주입되었을 때 새끼를 댐으로 돌려보습니다. 주사 직후와 그 후 적절한 실험 시점에서, E.coli 럭스 감염된 신생아 마우스와 댐을 가진 케이지를 생물 안전 수준 2 라미나르 플로우 후드에 넣고 마이크로 CT 컴퓨터에서 소프트웨어를 엽니다. 시스템을 초기화하고 스테이지 온도가 섭씨 37도에서 잠기고 CCD 온도가 음수 섭씨 90도에서 잠글 때까지 기다린 후, 최대 4개의 마취된 새끼를 이미징 챔버의 이미징 박스에 놓습니다.이미징 챔버 도어를 닫고 발광 이미징 옵션을 선택합니다. 열린 필터를 선택하고 다음필터를 설정하고 여기 필터를 차단하고 방출 필터를 엽니다. 500, 520, 560, 580, 600 및 620 나노미터를 선택합니다.그런 다음 새끼를 마취 복구 할 때까지 모니터링하여 댐으로 케이지로 되돌리기 전에 이미지를 이미지합니다. 적절한 실험 적 종점에서, 생물 안전 캐비닛에서, 오염을 방지하고 오른쪽에 동물을 배치하기 위해 70 %에탄올로 안락사 신천을 douse. 집게를 사용하여 복부와 후면 왼쪽 다리 사이의 피부를 파악하고 미세 팁 수술 가위를 사용하여 피부 절개를 합니다.그런 다음 전체 비장이 노출 될 때까지 동물의 뒤쪽으로 절개를 계속합니다. 집게와 가위를 사용하여 복부에서 비장을 제거하고 다운스트림 응용 프로그램에 적합한 솔루션에 배치합니다. 폐를 얻기 위해 가슴의 피부를 완전히 벗겨 내고 가위를 수직으로 잡고 흉골 의 바닥에 들어가 갈비뼈케이지가 분할 될 때까지 위쪽으로 자른다.집게를 사용하여 좌우 폐를 개별적으로 잡고 흉부 구멍에서 폐를 제거하십시오. 가위로 폐 조직에서 심장을 제거합니다. 그런 다음 폐를 다운스트림 적용에 적합한 용액에 배치합니다.체외 세균 성 살인 분석기를 수행하려면 감염되지 않은 비장을 멸균 60 mm 페트리 접시 내에 40 마이크로 미터 나일론 스트레이너에 넣고 10 %의 태아 소 혈청으로 보충된 PBS의 5 밀리리터를 함유하고 멸균 3 밀리리터 주사기 플런저를 사용하여 조직을 단일 세포 현탁액으로 분해합니다. 세포를 15 밀리리터 원심분리기 튜브로 옮기고 원심분리로 수집합니다. 3~4개의 비장당 적혈구 리시스 완충제 의 1밀리리터에서 펠릿을 다시 중단합니다.실온에서 5 분 후, PBS에서 비장을 세척하고 계산을위한 소 혈청 알부민과 2 밀리몰러 EDTA로 보충 PBS의 250 마이크로 리터에서 펠릿을 다시 중단. 다음으로, 제조업체의 프로토콜에 따라 적절한 면역자기 구슬로 Ly6 B2 양성 세포를 분리하고, 농축된 Ly6 B2 양성 세포를 100마이크로리터당 5개의 세포로 100마이크로리터당 흑백 96웰 플레이트에서 분리한다. 세균성 접종을 웰당 100 마이크로리터의 최종 부피로 원하는 복합체로 준비하고 세포 배양 인큐베이터에서 1시간 배양을 위해 세균성 접종또는 배지 100마이크로리터를 단독으로 첨가한다.인큐베이션이 끝나면, 배지를 젠타마이신 밀리리터당 100마이크로그램으로 보충한 200마이크로리터의 미생물을 교체하여 남은 세포외 균을 제거하고 세포를 세포 배양 배양 인큐베이터로 2시간 더 되돌려 보도록 한다. 배양의 끝에서 각 실험 시점에서, 다음 판독까지 세포 배양 배양 배양판의 각 우물에서 발광을 측정하기 위해 플레이트 판독기를 사용합니다. 대부분의 동물은 감염 후 24 시간에서 혈액에 있는 박테리아의 상부를 전시하는 동안, 몇몇 새끼는 혈액에 있는 낮거나 탐지할 수 없는 박테리아가, 이 시점에서 감염의 간격을 건의합니다.또한, 신생아 Ly6 B2 양성 비장 세포는 세포외 박테리아및 후속 젠타마이신 처리의 제거 전에 1 시간 동안 생물 발광 E.coli에 감염된 세균성 클리어런스를 나타내는 시간이 지남에 따라 감소하는 3 시간에서 높은 수준의 발광을 나타냈다. 발광 균의 살아있는 동물 화상 진찰은 감염 후 10 및 24 시간에 시간이 지남에 따라 신생아 새끼에 있는 박테리아 보급 그리고 성장의 증가를 추가확인합니다. 마이크로 CT와 함께 인트라바이탈 이미징은 뇌, 폐 및 기타 말초 조직 내의 감염 포시 식별을 용이하게 합니다.몇몇 고도로 감염된 마우스의 폐는 발광 세균 신호에 공동 국소화한 선동적인 통합과 일치하는 불투명한 지구를 보여줍니다. 추정된 선동적인 exudate의 이 지구는 감염되지 않은 통제 폐에서 관찰되지 않습니다. 대조군에 비해 염증성 사이토카인 발현의 현저한 증가는 또한 폐포 벽의 주목할 만한 두껍게, 증가된 폐포 출혈 및 이 동물에 있는 선동적인 침투와 상관관계인 낮고 높은 접종 단 둘 다에서 관찰됩니다.기억해야 할 가장 중요한 것은 주사를 수행 할 때 적절한 기술을 실행하고 마취를 투여 할 때 신생아에게 엄격한주의를 기울이는 것입니다. 이 기술을 사용하여, 우리는 면역 반응을 향상시키기 위한 내정간섭 및 호스트 지시한 치료를 공부하기 위하여 실시간으로 신생아 패혈증을 시각화할 수 있습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

출처: 세만, B. G., et.al. 그람 음성 세균 패혈증의 신생아 영상 모델. J. Vis. 경험 (2020)이 영상은 신생아 쥐 비장에서 호중구와 염증성 단핵구를 분리하여 발광 박테리아 살해 분석법에 적용하는 과정을 보여줍니다. 기계적 해리, 적혈구 용해, 자기 구슬 기반 세포 농축, 박테리아 배양, 항생제 보호를 포함합니다. 시간 측정된 발광 측정은 초기 박테리아 내화와 면역 매개 제거를 나타냅니다.

신생아 쥐 비장 식세포에 의한 박테리아 사살의 시험관 평가

출처: Seman, B. G. 외 그람 음성 세균성 패혈증의 신생아 영상 모델. J. Vis. 경험 (2020)이 영상은 캡슐화된 생물발광 박테리아를 이용한 신생아 마우스 모델을 시연하여 전신 감염을 연구합니다. 신생아 새끼들은 고용량 또는 저용량 박테리아 현탁액을 주사한 후 산후 관리를 위해 어미에게 돌려보냅니다. 캡슐화된 박테리아는 조기 면역 검출을 피하고 전신적으로 퍼지며, 발광 영상을 통해 시간이 지남에 따라 시각화됩니다. 이 모델은 신생아 쥐에서 감염 진행을 비침습적으로 추적할 수 있게 합니다.

캡슐화된 생물발광 박테리아를 이용한 신생아 쥐 감염 모델링

여기에, 절차는 대장균 K1의 문화와 신생아 쥐에 전신 감염의 설립을 설명합니다. 이것은 비 침습성 절차 맥락총에서 위장관 식민 전신 순환에 병원균의 전위, 및 중추 신경계의 침입을 허용한다.

Neuropathogenic의 비 침습 모델 대장균 신생아 쥐에 감염

주산기 질식에 따른 저산소성 허혈성 뇌병증은 동물 모델을 사용하여 연구할 수 있습니다. 우리는 신생아 저산소성-허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 확립하는 데 필요한 절차를 보여줍니다.

신생아 저산소 - 허혈성 뇌증의 돼지 모델

Encephalopathy of prematurity는 조산으로 인한 손상과 관련된 중추 신경계 이상을 포함합니다. 이 보고서는 융모막염을 모방한 자궁 내 일시적인 전신 저산소증-허혈 및 양수 내 지질다당류 투여(LPS)에 대한 임상적으로 관련된 쥐 모델, 그리고 감염 자극 및 태반 관류 부족이 CNS 발달에 미치는 관련 영향을 설명합니다.

미숙아의 모델링 뇌증은 흰쥐의 내부 - 양수 리포 폴리 사카 라이드와 태아 저산소증 - 허혈을 사용하여

이 프로토콜 설정 하 고 평가 하는 신생아 패 혈 증 7-하루-오래 된 쥐에 필요한 단계를 제공 합니다.

신생아 Polymicrobial 패 혈 증에 대 한 제어 마우스 모델

우리는 살아있는 유기체의 합병증 없이 모계 염증에 태아 노출을 시뮬레이션하기 위하여 chorioamnionitis의 모형을 개발했습니다 자손의 창자 발달에 FEMI의 효력을 검토합니다. 이것은 chorioamnionitis 다음 장 상해의 발달을 위한 기계론적인 원인의 연구를 허용합니다.

신생아 장 발달에 급성 chorioamnionitis의 효력을 연구하기 위하여 모성 염증에 태아 노출의 Murine 모형

이 프로토콜은 질병 발병에 대한 기계론적 연구에 사용할 수 있는 괴사성 장염(NEC)의 시험관 내 모델을 설명합니다. 인간 신생아 장, 내피 세포 및 중증 NEC가 있는 신생아의 장내 마이크로바이옴에서 추출한 장내 장내형 칩을 파종한 것이 특징입니다.

인간 신생아 장 장내염과 디스바이오틱 마이크로바이옴을 통합한 괴사성 장염의 미세유체 모델

조산(37주 분만)은 최적이 아닌 예방 및 치료 옵션이 있는 긴급한 글로벌 건강 문제&lt; 있습니다. 우리는 상행 질 세균 감염으로 인한 조산의 마우스 모델을 제시하고 그 결과 신생아 이환율과 사망률을 분석하는 방법을 간략하게 설명합니다.

마우스의 상승하는 질 감염, 조산 및 신생아 이환율 모델링

이 프로토콜은 괴사성 소장결장염(NEC)의 신생아 마우스 모델 및 신생아 쥐 소장에서 고유판 면역 세포의 후속 분리를 설명합니다.

면역 세포 프로파일링을 위한 괴사성 소장결장염 및 Lamina Propria 분리의 신생아 마우스 모델

배우세요 생체 발광 E. coli를 이용한 신생아 패혈증 마우스 모델에서 실시간 세균 확산 추적 및 병원체 부담과 질병 마커의 상관관계 분석 방법. 이 프로토콜은 감염 역학을 연구하고 임상 전 치료 개입을 테스트하는 데 활용됩니다.

그람 음성 세균 패혈증의 신생아 화상 진찰 모형

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