Conjunctival Commensal Isolation and Identification in Mice

Kirsten Smith-Page; Abirami Kugadas; Tiffany Lin; Mary Delaney; Lynn Bry; Mihaela Gadjeva

doi:10.3791/61672

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Conjunctival Commensal Isolation and Identification in Mice

마우스의 결막 장금 격리 및 식별

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07:52 min

May 1, 2021

DOI: 10.3791/61672-v

Kirsten Smith-Page¹, Abirami Kugadas¹, Tiffany Lin¹, Mary Delaney^2,3, Lynn Bry^2,3, Mihaela Gadjeva¹

¹Department of Medicine, Division of Infectious Diseases, Brigham and Women's Hospital,Harvard Medical School, ²Massachusetts Host-Microbiome Center, Department of Pathology, Brigham and Women's Hospital,Harvard Medical School, ³Clinical Microbiology Laboratory, Department of Pathology, Brigham and Women's Hospital,Harvard Medical School

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여기에 제시된 것은 미생물 기반 방법 및 MALDI-TOF 질량 분석법에 의한 후속 식별을 통해 독특한 눈 면봉 및 배양 기반 농축 단계를 사용하여 호기성 및 학부성 혐기성 마우스 결막 성 세균의 격리 및 증폭을 위한 프로토콜이다.

이 방법은 눈에 적대적인 환경 때문에 도전적인 가능한 안구 결막 미생물을 식별합니다. 안구 미생물군유전체가 존재하는지, 안구 질환의 세균성 존재가 어떻게 변하는지에 대한 답을 하는 데 도움이 될 수 있습니다. 실행 가능한 미생물과 비실행성 미생물을 모두 식별하는 DNA 염기서열분석과는 달리,이 방법은 가능한 미생물만 식별하여 안구 공생 커뮤니티에 대한 명확한 이해를 합니다.

연구에 따르면 비자가면역및자가면역안구건조증과 같은 안구 질환을 진단하기 어려운 것은 독특한 안구 세균성 존재가 있는 것으로 내다볼 수 있다. 이 방법은 특유의 미생물 서명으로 안과 질환을 진단하는 데 사용될 수 있습니다. 먼저 면봉할 마우스 수에 적합한 양의 면 타격과 이쑤시개를 자동화한 다음, 면 타격의 1/2 센티미터 길이조각을 꼬집고 가장자리를 당겨 서 타격을 막기 직전에 멈추는 평평한 단일 다공성 층을 형성하여 애타게 합니다.

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