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3D 스페로이드 모델에서 암세포 침입의 시간 해결 형광 화상 진찰 및 분석
3D 스페로이드 모델에서 암세포 침입의 시간 해결 형광 화상 진찰 및 분석
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JoVE Journal Biology
Time-Resolved Fluorescence Imaging and Analysis of Cancer Cell Invasion in the 3D Spheroid Model

3D 스페로이드 모델에서 암세포 침입의 시간 해결 형광 화상 진찰 및 분석

Full Text
6,975 Views
07:42 min
January 30, 2021

DOI: 10.3791/61902-v

Louisiane Perrin1, Theodore Tucker1, Bojana Gligorijevic1,2

1Bioengineering Department,Temple University, 2Cancer Biology Program,Fox Chase Cancer Center

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a protocol for the fabrication of a spheroid imaging device, enabling dynamic and longitudinal fluorescence imaging of cancer cell spheroids to investigate mechanisms of cell invasion in real-time. The technique demonstrates enhanced efficiency and cost-effectiveness for modeling solid tumor invasiveness.

Key Study Components

Research Area

  • Cancer biology
  • Cell invasion dynamics
  • Imaging techniques

Background

  • Invasion of cancer cells into the extracellular matrix is crucial for understanding metastasis.
  • Current methods often lack efficiency and scalability for high-throughput applications.
  • Imaging spheroids can provide insights into cellular behaviors in a more biologically relevant context.

Methods Used

  • 3D printing and PDMS fabrication for spheroid imaging device
  • Cancer cell spheroids of mammary carcinoma
  • Longitudinal fluorescence imaging

Main Results

  • The protocol successfully enables real-time imaging of cancer cell invasion.
  • Embedding spheroids in collagen facilitated longitudinal studies of invasion over six days.
  • Image processing procedures were validated for analyzing spheroid area and morphology over time.

Conclusions

  • This study validates a novel spheroid imaging technique with potential applications in cancer research.
  • The findings emphasize the importance of real-time monitoring in understanding cancer cell dynamics.

Frequently Asked Questions

What is a spheroid imaging device?
A device designed to enable dynamic imaging of cancer cell spheroids, facilitating studies of invasion and cellular dynamics.
How is the device built?
It involves 3D printing a spacer, mixing PDMS, and curing it between glass plates to create the imaging inserts.
What types of cells can be studied?
While demonstrated with mammary carcinoma, the assay is adaptable for various solid tumors.
What are the main benefits of this method?
It improves experimental efficiency, reduces costs, and allows for enhanced real-time monitoring of cell behavior.
How long can spheroids be imaged?
Spheroids can be imaged longitudinally over an extended period, as tested over six days in this study.
Can the technique be used for other biological applications?
Yes, the method can be adapted for various research applications focused on cell invasion and behavior.
Is image processing required?
Yes, the protocol includes a simple image processing procedure to analyze spheroid invasion quantitatively.

여기에 제시된 스페로이드 이미징 장치의 제조를 위한 프로토콜이 있습니다. 이 장치는 암 세포 스페로이드의 동적 또는 세로 형광 이미징을 가능하게합니다. 이 프로토콜은 또한 암세포 침입의 분석을 위한 간단한 화상 처리 절차를 제공합니다.

이 프로토콜은 실시간으로 세포 외 매트릭스로 암세포의 침입을 지배하는 메커니즘을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 스페로이드 침입 분석법을 쉽게 설정하고 효율성과 비용을 향상시키는 간단한 스페로이드 이미징 장치를 사용한다는 것입니다. 우리는 유방 암종을 모델링하기 위해 스페로이드 침입 분석기를 사용하여 시연하는 동안,이 분석은 주변 의 건강한 조직에 어떤 고형 종양의 침입을위한 훌륭한 모델입니다.

스페이서의 3D 프린팅 후, 플라스틱 컵에서 크로스 링커에 기본 폴리머의 10:1 비율을 밖으로 무게와 철저하게 컵에 결과 PDMS 솔루션을 혼합 일회용 파이펫을 사용합니다. 컵을 진공 챔버에 넣고 진공 압력을 신속하게 방출하여 혼합물 표면에 갇힌 공기를 제거하고 나머지 기포를 방출합니다. 3D 프린팅 스페이서를 섭씨 100도에서 5분간 배양하여 유연성을 높이고 100%의 이소프로파놀로 두 개의 유리 판을 청소합니다.

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