Name: 쥐의 티비아리스 전방 근육의 최대 동면 성 파타닉 힘 측정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 39 s
Description: 학습하세요 쥐의 티비아리스 전방 근육에서 등척성 강직성 힘 측정 방법을 통해 좌골신경 손상 후 운동 기능 회복을 정량적으로 평가하는 검증된 실험 기법을. 이 프로토콜은 말초신경 재생 연구에 필수적인 생체 지표를 제공합니다.

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이 간행물에 보고된 연구는 상 번호 RO1 NS 102360의 밑에 건강의 국가 학회의 신경장애 그리고 치기의 국가 학회에 의해 지원되었습니다. 이 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 국립 보건원의 공식 견해를 나타내는 것은 아닙니다.

모든 동물 절차는 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC A334818)의 승인을 받아 수행되었습니다.
1. 힘 변환기의 교정
<ol><li>컴퓨터가 USB-6009 다기능 I/O 데이터 수집(DAQ) 장치에 제대로 연결되어 있는지 확인하여 힘 변환기에 연결해야 합니다. 참고: 다른 쥐 균주 및 종은 더 높은 힘이 44로예상되기 때문에 다른 로드 셀 힘 트랜스듀서가 필요할 수 있다.</li>
	<li>진공 베이스 조절 레버 암에 장착된 포스 트랜스듀서에 변형된 수술 용 헤모스타에서 제작된 맞춤형 클램프를 부착합니다. 참고: 맞춤형 클램프는 장력 조정을 허용하는 조임 나사로 변형된 수술 용 이모로구성됩니다(그림 1).</li>
	<li>쥐 뒷다리를 고정하기 위한 두 개의 나무 블록이 있는 맞춤형 아크릴 유리 테스트 플랫폼을 테이블에 배치합니다. 참고: 우레탄과 같은 다른 재료는 K-와이어가 침투하여 고정할 수 있는 한 나무 대신 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>클램프, 강제 변환기 및 조절 가능한 레버 암 조합을 진공 베이스를 사용하여 테스트 플랫폼에 수직으로 부착합니다.</li>
	<li>교정 가중치에 대한 후크 또는 루프를 클램프에 고정합니다.</li>
	<li>컴퓨터를 켜고 소프트웨어(예: LabVIEW)를 엽니다.</li>
	<li>소프트웨어가 열리면 ITF 측정을 위한 맞춤형 가상 기기(VI)를시작합니다(그림 2). 참고: 그림 2에는 VI 스니펫에 LabVIEW 코드가 포함되어 있습니다. 이 VI 스니펫은 LabVIEW의 블록 다이어그램으로 드래그할 수 있습니다. 자동으로 그래픽 코드로 변환됩니다. 이 실험을 위해 샘플링 속도는 각 반복에 대해 읽을 25개의 샘플이 있는 2000Hz에서 설정되었습니다.</li>
	<li>왼쪽 상단 모서리에 있는 흰색 화살표를 눌러 VI를 실행하고 새 교정을 선택합니다. 새 창이 열립니다.</li>
	<li>0 무게(연결된 후크 또는 루프가 있는 클램프만)로 교정 프로세스를 시작하고 확인을누릅니다.</li>
	<li>연속적으로 10, 20, 30 및 50 그램의 무게를 추가하고 각 체중 측정 사이에 확인을 누릅니다.</li>
	<li>다섯 가지 측정값이 모두 수집되면 프로세스를클릭합니다.</li>
	<li>VI의 그래프가 양수 선형곡선(그림 3)을표시하는 경우에만 값을 수락합니다.</li>
	<li>클램프, 강제 변환기 및 조절 가능한 레버 암 조합을 테스트 플랫폼에서 수평으로 재배치합니다. ITF를 측정하는 데 사용되는 위치입니다.</li>
	<li>0을 클릭하면 창이 자동으로 닫힙니다.</li>
</ol>2. 동물 과목
<ol><li>300-500 g 사이의 무게 남성 루이스 쥐를 사용. 참고: 신경 재생의 비교를 위해, 자동 절제술의 무게와 발생률이 변형에 의존적이고 ITF10,32,45,46,47의결과에 엄청난 영향을 미칠 수 있기 때문에 대조군과 실험 군 모두에서 동일한 쥐 균주를 사용하는 것이 필수적이다.</li>
</ol>3. 외과 적 준비
<ol><li>수술 전에 필요한 모든 수술 기구를 준비하십시오(재료의 표).</li>
	<li>동물을 계량하여 필요한 양의 마취를 결정합니다.</li>
	<li>산소에 3%의 이소플루란으로 가스가 있는 챔버에 쥐를 배치하여 마취를 유도한다.</li>
	<li>10부 짜리 케타민(100 mg/mL)과 1부 자일라진(100 mg/mL)의 칵테일을 사용하여 쥐를 1mL/kg의 체중1mL/kg의 투여량으로 사용하여 쥐를 심층 투여합니다. 발가락 핀치에 대한 반응과 호흡 속도를 관찰하여 마취의 깊이를 모니터링합니다.</li>
	<li>케타민/자일라진 칵테일의 초기 투여 후 약 30분 후, 케타민(100 mg/mL)의 체중 0.3-0.6mL/kg의 추가 용량을 투여하여 전체 절차 전반에 걸쳐 적절한 마취를 유지하며, 이는 낮은 호흡률과 핀치에 대한 부재 반응으로 정의된다. 주의: 과다 복용으로 는 상쇄 될 수 없기 때문에 필요한 마취를 꼼꼼하게 관리하는 것이 중요합니다.</li>
	<li>전기 클리퍼를 사용하여 쥐의 뒷다리를 조심스럽게 면도하십시오.</li>
	<li>37°C에서 체온을 유지하기 위해 가열 패드에 쥐를 놓습니다. 선택적으로, 직장 온도계를 사용하여 체온을 모니터링할 수 있다.</li>
	<li>5mL의 염화나트륨(NaCl)을 쥐의 목에 걸쳐 느슨한 피부에 피하하여 시술 전반에 걸쳐 적절한 수분 공급을 유지한다.</li>
	<li>이 절차의 비 생존 특성으로 인해 외과 분야와 계측기는 멸균될 필요가 없습니다. 외과 의사는 개인 보호 장비 (PPE)를 사용해야하며 외과 용 루페는 해부학 구조의 적절한 시각화를 권장합니다.</li>
</ol>4. 일반적인 회내 신경에 외과 접근
<ol><li>쥐를 먼저 측정할 측면에 따라 오른쪽 또는 왼쪽 측면 재배치 위치에 놓습니다.</li>
	<li>수술 번호 15 블레이드를 사용하여 더 큰 트로챈터에서 시작하는 대퇴골과 평행한 후부 허벅지의 피부에 2-3cm 절개를 만듭니다.</li>
	<li>이두근 여성근과 글루푸스 막시무스와 광두측기 근육 사이의 평면을 확인하고 이러한 근육을 분리하고 근본적인 좌골 신경을 노출하기 위해 동방신기 가위를 사용하여 무딘 해부를 수행합니다.</li>
	<li>상골 신경의 삼중을 찾아 더 나은 접근을 얻기 위해 재트랙터를 배치합니다. 상시 신경의 3개의 가지는 일반적인 관상 신경, 티비알리스 신경 및 sural 신경을 포함합니다.</li>
	<li>곡선된 미세 수술 집게를 사용하여 상골 신경의 일반적인 복리동맥 신경 분기 (일반적으로 가장 복부 분기)를 격리합니다. 참고: 불확실성의 경우 외과 신경 자극기로 고립 된 신경을 부드럽게 자극하고 운동 반응을 관찰하십시오. 일반적인 복막 신경의 자극은 발의 dorsiflexion에 있는 결과.</li>
</ol>5. 해부 티볼리스 전방 근육 힘줄의 해부
<ol><li>TA 근육과 삽입을 노출시키기 위해 무릎 관절에서 시작하여 뒷발의 메디오도르산 쪽으로 내려가는 하반신의 전방 측면에서 피부를 절개하십시오.</li>
	<li>수술 블레이드 No. 15와 메스를 사용하여 주변 조직에서 해부 TA 근육 힘줄을 해부.</li>
	<li>모기 집게를 사용하여 TA 근육 힘줄을 삽입쪽으로 무뚝뚝하게 해부하고 가능한 한 해반으로 힘줄을 자른다. 근위 TA 근육을 방해하지 않고 신경 혈관 혈통을 보존하십시오. 참고: 정기적으로(약 5분마다) 냉각 및 건조를 방지하기 위해 0.9% NaCl(37°C)으로 TA 근육을 촉촉하게 합니다.</li>
</ol>6. 이소메트릭 파탄력 측정
<ol><li>양극성 전극 케이블과 접지 케이블을 양극성 자극기 장치에 연결합니다.</li>
	<li>양극 전극 케이블의 다른 쪽 끝을 소형 전극에 부착합니다. 참고: 기준 전극(적색, 양극)은 탈경과 활성 전극(블랙, 음극) 근접형을 배치해야 합니다.</li>
	<li>가열 패드와 함께 동물을 테스트 플랫폼으로 옮기습니다.</li>
	<li>쥐의 뒷다리를 나무 블록에 고정하여 발목을 통과하는 두 개의 1mm Kirschner 와이어와 무릎의 후방 측면을 피하는 단두골의 측면 콘딜을 사용하십시오. 주의: 대퇴골 콘딜에 등대적으로 위치한 포라이트 동맥과 정맥에 혈관 손상을 피하십시오.</li>
	<li>진공 베이스를 사용하여 사용자 지정 클램프가 있는 홀더를 테스트 플랫폼에 연결합니다.</li>
	<li>포스 트랜스듀서에 부착된 클램프에 탈단 TA 근육 힘줄을 고정합니다. 참고: 클램프 및 힘 트랜스듀서는 TA 근육의 경과와 평행하게 배치되어야 합니다.</li>
	<li>일반적인 회음 신경에 접근하기 위하여 쥐의 후방 허벅지에 재트랙터를 놓습니다. 참고: 상주 신경과 그 가지는 냉각 및 건조를 방지하기 위해 가열 된 0.9 % NaCl (37 °C)로 촉촉하게 유지되어야합니다.</li>
	<li>주변 근육에 접지 케이블을 삽입하십시오(예: 광대스 측삭 근육). 참고: 잔디 SD9 자극기는 전기 적 유물을 줄이기 위해 접지 케이블이 필요합니다. 최신 자극기는 추가 접지 케이블이 필요하지 않을 수 있습니다.</li>
	<li>일반적인 복종 신경을 하위 소형 전극에 연결하고 플랫폼의 홀더를 사용하여 위치를 수정합니다(도4). 참고: 일반적인 복종 신경만 하위 소형 전극에 매여 있는지 확인합니다.</li>
	<li>근육 길이의 최적화<ol>
<li>양극성 자극기 장치를 켜고 다음과 같이 설정을 조정하십시오: 정사각형 단면 펄스, 지연 2 ms, 자극 펄스 지속 시간 0.4 ms, 자극 강도 2 V. 참고: 지연은 펄스 동기화와 펄스의 선행 가장자리 전달 사이의 시간을 결정합니다.</li>
		<li>매개 변수 테스트를 선택하고 VI에서 트리거 컬렉션을 켭니다.</li>
		<li>힘 변환기에 부착된 레버 암을 조정하여 근육 길이(preload)를 늘립니다.</li>
		<li>10g의 프리로드에서 시작하여 최대 활성 근육력이 결정될 때까지 10g의 증분을 사용하십시오.</li>
		<li>각 프리로드에 대해 양극성 자극기 장치의 버튼을 사용하여 서로 두 개의 단일 트위치를 서로 직접 적용합니다. 출력은 화면에 표시되며 쥐는 발의 dorsiflexion을 표시해야합니다. 참고 : 신경을 자극하기 전에, 항상 신호를 주변 조직에 실시하지 않도록 면 기울어진 어플리케이터를 사용하여 신경을 둘러싼 모든 초과 0.9 %의 NaCl을 제거합니다.</li>
		<li>측정을 중지하려면 VI에서 트리거 컬렉션을 다시 누르십시오.</li>
		<li>프로그램이 자동으로 두 개의 피크 출력 힘을 감지하면 수락을 클릭합니다. 프로그램이 이러한 출력 힘을 자동으로 선택하지 않는 경우 Decline를 누르고 수동으로 피크를 선택합니다. 두 피크 출력 힘은 평균 피크 출력력(그림 5)으로평균됩니다.</li>
		<li>평균 피크 출력 력에서 프리로드를 빼서 활성 근육 력을 계산합니다.</li>
		<li>추세를 시각화하고 최대 활성력을 인식하기 위해 각 프리로드에 대한 활성 힘을 적어 둡니다(그림6). 스프레드시트도 사용할 수 있습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>등대식 파탄력 측정<ol>
<li>이상적인 근육 길이를 결정한 후, 파탄 근육 수축을 시작하기 전에 5 분 동안 제로 프리로드에서 근육을 쉬게하십시오.</li>
		<li>한편, 파라미터 테스트에서 VI의 주파수 테스트로 전환하고 양극성 자극기 장치에서 자극 강도를 10V로 조정한다.</li>
		<li>각각 2ms 및 0.4 ms에서 지연 및 자극 펄스 지속 시간을 유지합니다.</li>
		<li>최대 힘 고원이 관찰될 때까지 30Hz의 증분으로 30Hz에서 시작하여 증가하는 자극 주파수를 사용하여 동위원소 파탄 근육력을 측정합니다.</li>
		<li>트리거 컬렉션을 클릭하고 미리 정해진 최적의 근육 길이로 설정합니다.</li>
		<li>양극성 자극기 장치의 반복 버튼을 눌러 최대 5초 동안 또는 힘 피크가 명확하게 관찰될 때까지 테탄자극을 유도한다. 참고 : 신경을 자극하기 전에, 항상 신호를 주변 조직에 실시하지 않도록 면 기울어진 어플리케이터를 사용하여 신경을 둘러싼 모든 초과 0.9 %의 NaCl을 제거합니다.</li>
		<li>데이터를 수집하려면 트리거 수집을 다시 누르고 최대 출력 힘을 문서화합니다. 프로그램이 최대 출력 력을 자동으로 감지하지 못하는 경우 Decline를 누르고 수동으로 피크를 선택합니다.</li>
		<li>다음 파탄 근육 수축을 시작하기 전에 5 분 동안 제로 프리로드에서 근육이 다시 쉬게하십시오. 참고: 정기적으로(약 5분마다) 냉각 및 건조를 방지하기 위해 0.9% NaCl(37°C)으로 TA 근육을 촉촉하게 합니다.</li>
		<li>최대 힘 고원에 도달할 때까지 자극 주파수를 계속 늘릅니다. 힘 고원은 최대 등색 파탄력으로 정의됩니다. 참고: 이 단계 후, K-와이어를 제거, 스테이플 또는 봉합 피부를 봉합하고 4 단계에서 시작, 반대 뒷다리에 전체 절차를 반복.</li>
	</ol></li>
</ol>

저자는 공개 할 것이 없습니다.

이 프로토콜은 쥐모델(32)에서TA 근육의 정확한 최대 ITF 측정값을 획득하기 위한 이전에 검증된 방법을 설명합니다. 실험신경 재건 치료 후 최대 강도의 회복은 신경이 재생뿐만 아니라 대상 근육과 작업 연결을 했다는 것을 증명하기 때문에 임상 설정에 대한 주요 관심사입니다. ITF는 쥐 상골 신경모델(32)과같은 작은 신경 갭 모델에서 사용될 수 있으며, 프로토콜에 대한 몇 가지 변형과 함께, 또한 더 큰 신경 갭 토끼모델(33)에도사용될 수 있다. 
일관되고 신뢰할 수 있는 최대 등대 측정을 보장하기 위해 고려해야 할 몇 가지 중요한 단계가 있습니다. 골격 근 부작용을 방지 하기 위해 마취의 종류를 신중 하 게 선택 의 중요성은 이전에 설명 되었습니다32,...

외상성 말초 신경 손상에 따른 운동 기능의 상실은 환자의 삶의 질과 사회경제적 상태에 큰 영향을 미친다1,2,3. 이 참을성 있는 인구의 예후는4년 동안 외과 기술에 있는 최소한의 개선 때문에 가난한 남아 있습니다. 직접 엔드 투 엔드 장력 없는 상신성 수리금 은제 수술 재건을 형성합니다. 그러나, 자가 신경 이식의 확장된 신경 간격 의 상호 처리가 있는 경우에우수한것으로 입증되었습니다5,6. 관련 기증자 부위 이환율 및 자가 신경 이식의 제한된 가용성은 대체 기술에 대한 필요성을부과했다7,8.
실험적인 동물 모델은 말초 신경 재생의 메커니즘을 해명하고 다양한 재건 및 약리학적 치료 옵션의 결과를 평가하는 데 사용되어 왔다8,9. 쥐 상골 신경 모델은 가장 자주 사용되는 동물모델(10)이다. 그들의 작은 크기는 쉽게 처리하고 집을 수 있습니다. 그들의 최상급 신경 재생 잠재력으로 인해, 결과의 내정간섭 그리고 평가 사이 감소된 시간은 상대적으로 더 낮은 비용11,12귀착될 수 있습니다. 그 사용의 다른 장점은 인간 신경 섬유에 형태학적 유사성과 비교 / 역사적 연구의 높은 수를 포함한다13. 후자는 신중하게 접근해야하지만, 연구 사이의 다양한 결과 측정으로 결과14,15,16,17,18을비교하기가 어렵다.
신경 재생 범위를 평가하는 결과 측정은 전기생리학에서 히스토모홈에 이르기까지 다양하지만, 이러한 방법은 상관관계를 암시하지만 반드시 직접 운동기능(14,15)의반환을 측정하지는 않는다. 재생 신경 섬유기능 연결 의 수의 과대 평가를 일으킬 수있는 적절한 연결을하지 않을 수 있습니다14,15,19,20. 최종 장기의 올바른 재관전을 입증하기 위한 가장 우수하고 임상적으로 가장 관련성이 가장 좋은 측정은 근육기능(21,22,23)에대한 평가를 유지한다. 그러나 동물 모델에 대한 모터 기능 평가 도구를 만드는 것은 어려운 일입니다. Medinaceli 외. 먼저 실험적인 말초 신경 연구에서 기능적 회복을 평가하는 가장 자주 사용되는 방법인 워킹 트랙 분석을 설명하였으며,21,24,25,26,27, 28. 보행 트랙 분석은 걷는 쥐21,29에서발자국의 측정을 기반으로 좌골 기능 지수 (SFI)를 정량화한다. 발가락 수축, 자동 절단, 인쇄의 번짐 및 다른 재관전 측정과 의 상관 관계가 좋지 않은 것과 같은 보행 트랙 분석의 주요 한계는 기능적회복(30)및31의정량화를 위한 다른 파라미터의 사용을 필요로 한다.
루이스쥐(32)와 뉴질랜드 토끼(33)의 이전 연구에서, 우리는 티비알리스 전방(TA) 근육에 대한 등도성 파상력(ITF) 측정을 검증하고 신경 수리34,35,36,37,38,39의다양한 유형의 신경 회복 후 근육 회복평가에서 그 효과를 입증하였다. TA 근육은 상대적으로 큰 크기 때문에 잘 적합, sciatic 신경의 연속 적 분지및 잘 해명 생화 확성 특성에 의해 내부40,41,42,43. 근육 길이(preload force) 및 전기 파라미터가 최적화되면 ITF는쥐(32)와 토끼(33)에서각각 4.4%와 7.5%의 좌우 가변성을 제공한다.
이 문서는 쥐 강차 신경 모델에서 ITF 측정의 상세한 프로토콜을 제공합니다, 필요한 사전 수술 계획의 철저한 설명을 포함, 수술 접근 및 일반적인 관상 신경및 해부 TA 근육 힘줄. 자극 강도 및 지속 시간에 미리 정해진 값을 사용하여 최적의 근육 길이 및 자극 펄스 주파수가 정의됩니다. 이 네 가지 매개 변수를 사용하면 ITF를 일관되고 정확하게 측정할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>0.9% 염화나트륨</td><td>Baxter Healthcare Corporation, Deerfield, IL, USA</td><td>G130203</td><td></td></tr><tr><td>1mm Kirshner 와이어</td><td>Pfizer Howmedica, Rutherford, NJ</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Adson Tissue</td><td>Forceps ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>MTK-6801226</td><td></td></tr><tr><td>양극 전극 케이블</td><td>잔디 기기, Quincy, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>양극 자극기 장치</td><td>Grass SD9, Grass Instrument, Quincy, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>면 팁 애플리케이터</td><td>Cardinal Health, Waukegan, IL, USA</td><td>C15055-006</td><td></td></tr><tr><td>곡선 모기 집게</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>MTK-1201112</td><td></td></tr><tr><td>포스 트랜스듀서 MDB-2.5</td><td>트랜스듀서 기법, Temecula, CA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>거즈 스폰지 4x4</td><td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td><td>2733</td><td></td></tr><tr><td>접지 케이블</td><td>잔디 악기, Quincy, MA</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>이소 플루란 챔버</td><td>N / A</td> N <td>/ A</td><td>맞춤형</td></tr><tr><td>케타민</td><td>Ketalar, Par Pharmaceutical, Chestnut, NJ</td><td>42023-115-10</td><td></td></tr><tr><td>LabView Software</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Loop</td><td>N / A</td> N <td>/ A</td><td>맞춤형</td></tr><tr><td>미세 수술 곡선 집게</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>JFA-5B</td><td></td></tr><tr><td>미세 수술 가위</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>SAS-15R-8-18</td><td></td></tr><tr><td>미세 수술 직선 집게</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>JF-3</td><td></td></tr><tr><td>Retractor</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>AG-124426</td><td></td></tr><tr><td>메스 블레이드 No. 15</td><td>Bard-Parker, Aspen Surgical, Caledonia, MI, USA</td><td></td><td></td>371115</tr><tr><td>Slim Body Skin Stapler</td><td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td><td>8886803512</td><td></td></tr><tr><td>초소형 전극</td><td>Harvard Apparatus, Holliston, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Nerve Stimulator</td><td>Checkpoint Surgical LCC, Cleveland, OH, USA</td><td>9094</td><td></td></tr><tr><td>Terrell Isoflurane</td><td>Piramal Critical Care Inc., 베들레헴, 펜실베니아, 미국</td><td>H961J19A</td><td></td></tr><tr><td>테스트 플랫폼</td><td>N/</td><td>A</td><td>맞춤형</td></tr><tr><td>테톤토미 가위</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>ASIM-187</td><td></td></tr><tr><td>추적 가능한 빅 디지트 타이머/스톱워치</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA, USA</td><td>S407992</td><td></td></tr><tr><td>USB-6009 다기능 I/O 데이터 수집(DAQ) 장치</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td>779026-01</td><td></td></tr><tr><td>진공 베이스 홀더</td><td>노가 엔지니어링 & Technology Ltd., Shlomi, Isreal</td><td>N/A</td><td>부착된 클램프는 맞춤 제작</td></tr><tr><td>무게(10g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820010.4</td><td></td></tr><tr><td>무게(20g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820020.4</td><td></td></tr><tr><td>무게(50g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820050.4</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Xylamed, Bimeda MTC Animal Health, Cambridge, Canada</td><td>AN-번호 XYL002</td><td></td></tr></tbody></table>

쥐의 티비아리스 전방 근육의 최대 동면 성 파타닉 힘 측정

Maximum Isometric Tetanic Force Measurement of the Tibialis Anterior Muscle in the Rat

외상성 신경 상해는 상당한 기능적인 손실 귀착되고 세그먼트 신경 결함은 수시로 자가 간 신경 이식의 사용을 필요로 합니다. 그들의 제한된 가용성 및 관련 기증자 측 이환율 때문에, 신경 재생 의 필드에 있는 많은 연구 결과는 세그먼트 신경 격차를 다리를 내기 위하여 대체 기술에 집중합니다. 외과 또는 약리학적 실험 치료 옵션의 결과를 조사하기 위해 쥐 시차 신경 모델은 종종 생체 분석으로 사용됩니다. 쥐 모델에는 신경 재생의 정도를 결정하는 다양한 결과 측정이 있습니다. 대상 근육의 최대 출력 력은 실험 요법의 임상 번역을 위한 가장 관련성이 높은 결과로 남아 있습니다. 파상성 근육 수축의 동급력 측정은 이전에 쥐와 토끼 모델 모두에서 신경 부상 또는 수리 후 모터 회복을 평가하기위한 재현 가능하고 유효한 기술로 설명되었습니다. 이 비디오에서는 최적화된 매개 변수를 사용하여 쥐 좌골 신경 결함 모델에서 티비알리스 전방 근육의 기능적 회복을 평가하는 이 귀중한 절차의 단계별 지침을 제공할 것입니다. 우리는 일반적인 관상 신경 및 티볼리스 전방 근육 힘줄의 외과 접근 그리고 해부 이외에 필요한 외과 전 준비를 설명할 것입니다. 등대식 파탄력 측정 기법이 상세합니다. 최적의 근육 길이 와 자극 펄스 주파수를 결정하고 최대 파상풍 근육 수축을 측정하는 것이 입증된다.

ITF 측정을 측정하는 데 5개의 매개 변수가 사용됩니다. 여기에는 근육 장력(preload force), 자극 강도(전압), 자극 펄스 주파수, 0.4 ms의 자극 지속 시간 및 2ms의 지연이 포함됩니다. ITF를 측정하기 전에, 최적의 근육 장력은 파라미터 테스트 중에 2V의 강도에서 두 개의 단일 트위치 근육 수축을 사용하여 결정되어야 한다. 이러한 자극은 발의 등등 플렉시션을 유발하고VI(도 5)에서그래프에 출력 신호를 생성한다. 이러한 단일 트위치 곡선은 수축 기간을 직접 나타내는 빠른 수직 상승스윙을 가지며, 이완 기간을 보여주는 느린 수직 감소 기간이 뒤따릅니다. 이 프로그램은 이 두 개의 피크 출력 힘을 평균하지만, 활성 력은 평균 출력 력에서 프리로드 힘을 빼서 수동으로 계산해야 합니다. 도 5의예에서, 10g의 예는 411.09g(4.03 N) 및 379.78g(3.73 N)의 2개의 피크 출력 력을 초...

모터 회복의 평가는 실험적인 말초 신경 연구에서 벤치마크 결과 측정으로 남아 있습니다. 쥐의 티볼리스 전방 근육의 동면 파탄력 측정은 경련성 신경 결함의 재구성 후 기능적 결과를 평가하는 귀중한 도구입니다. 방법과 뉘앙스는이 문서에 자세히 설명되어 있습니다.

Traumatic nerve injuries result in substantial functional loss and segmental nerve defects often necessitate the use of autologous interposition nerve ...

이 비디오의 전반적인 목표는 쥐의 티비알리스 전방 근육의 동포메트릭 파타닉 력을 측정하는 방법에 대한 단계별 지침을 제공하는 것이며, 역동성 신경 손상 또는 재건 후 기능적 회복을 평가하는 재현 가능하고 검증된 방법을 제공하는 것입니다. 쥐 상반신경 결함 모델은 종종 말초 신경 부상에 대한 실험 치료 옵션을 평가하는 데 사용됩니다. 쥐의 세그먼트 신경 결함에 대한 금 표준 치료를 복제하기 위해, 일반적으로 시상 신경의 10 밀리미터 세그먼트는 중간 자동 이식으로 제자리에 반전 절제된다.실험적 치료에서 신경 갭은 신경 동종 이식 또는 도관과 같은 다른 기술을 사용하여 재구성 될 수 있습니다. 이러한 실험 기술의 임상 번역을 위해, 표적 근육에서 운동 기능 회복의 정도를 측정하는 것이 중요하다. 이 비디오에서, 우리는 일반적인 복막 신경을 자극 해서 티비리얼 전방 근육을 위해 그렇게 하는 방법을 설명할 것입니다.힘 변환기를 보정하여 절차를 시작합니다. 프로시저 테이블에 두 개의 나무 블록이 포함된 테스트 플랫폼을 배치합니다. 컴퓨터가 데이터 수집 장치에 연결되어 있는지 확인하여 힘 변환기에 연결해야 합니다.진공 베이스를 사용하여 힘 변환기를 테스트 플랫폼에 수직으로 부착합니다. 교정 가중치에 대한 루프를 클램프에 고정합니다. 소프트웨어를 열고 가상 계측기를 실행하여 등자극성 파탄력 측정을 하고 새로운 교정을 선택합니다.교정은 루프에서 0 무게로 시작됩니다. 연속적으로 10, 20, 30 및 50 그램의 무게를 가지고 각 중량 측정 사이에 데이터를 수집합니다. 5개의 중량 측정이 모두 수집되면 프로세스를 선택합니다.성공적인 교정의 경우 그래프는 양수 선형 곡선을 묘사하고 계속할 값을 받아들여야 합니다. 클램프에서 루프와 가중치를 제거하고 테스트 플랫폼에서 힘 변환기를 수평으로 재배치합니다. 0을 선택하여 교정 프로세스를 완료합니다.이소플루란 챔버를 사용하여 마취를 유도 한 후 뒷다리를 면도하고 쥐를 37도 가열 패드에 놓습니다. 케타민과 자일라진 칵테일의 인트라피톤 주사로 쥐를 심층적으로 마취하고 전체 절차 전반에 걸쳐 적절한 수분 상태를 유지하기 위해 5~6밀리리터의 식염수를 피하합니다. 쥐를 측면에 놓고 대퇴골과 평행한 2~3센티미터 의 후반 허벅지 절개를 만듭니다.좌골 신경의 복막 신경 분기를 노출하기 위해, 이두근 여성근과 이 근육 사이의 근막 평면을 해부하여 둔부 막시무스와 광대 한 측면 근육에서 이두근 여

maximum-isometric-tetanic-force-measurement-tibialis-anterior-muscle

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

우리는 송곳니 hindlimb의 근육 강도와 반복 편심 수축으로 근육 응답을 측정하기 위해 최소한 - 침략과 고통없이 방법을 설명합니다.

VIVO 개 근육 기능 분석에

생체내에</em수축 유도 부상 및 복구의 비침습 모니터링> 쥐 모델

이 동영상은 수술 준비와 쥐 안쪽 gastrocnemius 근육 준비의 수축 반응을 연구하는 데 필요한 절차를...

쥐 절차<em&gt; 현장에서</em&gt; 골격근 수축 등록

사지 근육 수축성 및 수동 기계적 성질의 변화는 근육 질환에 중요한 생체 있습니다. 이 원고는 손쥐 신근의 digitorum longus의와 tibialis 앞쪽에 근육에서 이러한 속성을 측정하는 생리 assays에 대해 설명합니다.

신근 Digitorum의 Longus 근육의 근육 기능의 평가<em&gt; 예 생체</em&gt;와 Tibialis 앞쪽에 근육<em&gt; 현장에서</em&gt; 마우스에

화학적으로 피부 또는 투과성이 골격근 섬유의 수축 특성의 분석은 하나의 근육 세포의 수준에서 근육 기능을 평가함으로써 강력한 수단을 제공한다. 이 문서에서 우리는 준비하는 유효하고 신뢰할 수있는 기술 개요 및 테스트는 시험 관내에서 골격 근육 섬유를 투과성이.

투과성이 골격 근육 섬유에 의해 생성 된 최대 아이소 포스의 측정

우리는 비골 신경의 자극과 쥐 뒷다리의 앞쪽 가랑이 구획의 수축에 따라 발의 배측 굴곡을 측정하기 위한 생체 내 프로토콜을 설명합니다. 이러한 측정은 근육 복구 및 재생에 대한 골격근 병리학 및 조직 공학 접근 방식을 평가하는 데 필수적인 번역 도구입니다.

의 응용 프로그램<em&gt; 생체</em&gt; 조직 평가를위한 쥐 앞정 전방의 기능 테스트는 골격근 수리 엔지니어링

쥐 골격 근육 수축 기능의 측정 치료 개입의 효능 뿐만 아니라 질병의 진행을 추적 하는 데 사용할 수 있는 유용한 도구입니다. 여기 같은 마우스에서 시간이 지남에 따라 반복 될 수 dorsiflexor 근육의 비-침략 적, vivo에서 평가 설명 합니다.

비-침략 적 쥐에서 Dorsiflexor 근육 기능 평가

무릎 근간근의 정량화는 노화, 질병, 부상 및 재활에 대한 기능적 적응을 이해하는 것이 필수적입니다. 생체 무릎 확장 이소메트릭 피크 파타닉 토크에서 반복적으로 측정하는 새로운 방법을 제시합니다.

마우스에서 무릎 엑스텐서 근육 기능의 생체 측정

본 프로토콜은 마취된 돼지에서 일반적인 비골 신경의 전기 자극을 통해 얻어진 생체내 토크 데이터의 평가 및 해석에 대한 간결한 실험 세부사항을 기술한다.

생체 내 돼지의 Hindlimb Dorsiflexor 등각 토크 측정

이 프로토콜은 남용 유발 건병증의 생체 내 모델에 대해 쥐 아킬레스건에서 정량화 가능하고 통제된 피로 부상을 유도하는 데 사용되는 테스트 시스템을 제시합니다. 이 절차는 쥐의 발목을 관절 액추에이터에 고정하는 것으로 구성되며, 이 액추에이터는 맞춤형으로 작성된 MATLAB 스크립트로 수동 발목 배측굴곡을 수행합니다.

과사용 유발 건병증의 In Vivo 모델을 위한 수동 발목 배굴곡 검사 시스템

여기에서, 우리는 경피적 근육 자극을 사용하여 쥐 발바닥 굴곡근에서 생체 내에서 토크-각속도-동력 관계를 비침습적으로 측정하기 위한 새로운 프로토콜을 제시합니다. 이 설정을 사용하면 힘 변환기/길이 컨트롤러 시스템에서 등장성 근육 수축을 간단하게 테스트하여 일상적인 움직임의 일정한 부하 특성을 더 잘 표현할 수 있습니다.

쥐 발바닥 굴근에 대한 생체 내 정하중(등장성) 및 등속(등속성) 토크-속도-전력 프로파일의 구성

학습하세요 쥐의 티비아리스 전방 근육에서 등척성 강직성 힘 측정 방법을 통해 좌골신경 손상 후 운동 기능 회복을 정량적으로 평가하는 검증된 실험 기법을. 이 프로토콜은 말초신경 재생 연구에 필수적인 생체 지표를 제공합니다.

쥐의 티비아리스 전방 근육의 최대 동면 성 파타닉 힘 측정

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