뮤린 곰팡이 패혈증 모델에서 효율적인 꼬리 정맥 주사를위한 현대 온난화 / 억제 장치

가열 및 억제 장치는 꼬리 정맥 주사를 성공적으로 수행하기 위한 간소화된 기술을 제공하고, 통제된 환경에서 가열을 제공하며, 꼬리 정맥 주사를 수행하기 위한 효과적인 취급을 제공합니다. 이 기법을 시도하기 전에 프로토콜에 익숙해지고 식염수 주사를 연습하는 것이 중요합니다. 시각적 데모는 절차에 도움이 되는 팁과 주의 사항을 표시할 수 있는 기회를 제공합니다.

제 연구실의 박사후 연구원인 Junko Yano가 장비를 설치하고 제가 절차를 시연할 것입니다. 온난화 장치를 초기화하려면 깨끗하고 평평한 벤치 탑에서 온난화 장치를 감시하고 전원을 켜서 온도 조절기 전원 표시등이 켜져 있는지 확인하십시오.amp 녹색으로 켜집니다. 그런 다음 보온 챔버 내부에 침구 재료를 놓아 해당 영역을 건조하게 유지하고 열을 유지합니다.

안전 장치 설정을 위해 보호 장치를 온난화 장치 옆에 놓고 동물에 적합한 원뿔 크기를 결정하십시오. 유연한 알루미늄 원뿔의 기본 너비를 수동으로 조정하여 동물에게 적절한 구속력을 제공합니다. 또는 다양한 크기의 동물을 수용할 수 있도록 원뿔을 맞춤형 모델로 교체하십시오.

제어 다이얼을 사용하여 온도 조절기를 원하는 온도로 설정하고 히터 표시등이 빨간색으로 켜지고 전구가 켜져 있는지 확인합니다. 전구가 켜져 있는 동안 내부 온도 표시를 주의 깊게 모니터링하십시오. 목표 온도에 도달하면 자동으로 활성화됩니다.

높이 조정 손잡이를 사용하여 구속 플랫폼 콘 높이를 사용자에게 최적의 수준으로 배치합니다. 목표 온도에 도달하면 사육장에서 동물을 온난화 챔버로 부드럽게 옮깁니다. 온난화 챔버는 최대 20-30분 동안 4-6마리의 쥐 또는 1마리의 쥐를 안전하게 수용할 수 있습니다.

5-10분 동안의 열처리는 혈관 확장을 유도하고 꼬리 정맥의 가시성을 향상시키기에 충분합니다. 동물에게 빠른 호흡, 무기력 또는 점프 탈출 행동과 같은 급성 열 스트레스의 징후가 있는지 모니터링합니다. 꼬리 바닥으로 동물을 들어 올려 챔버에서 제거하고 구속 장치의 원뿔 구멍에 놓습니다.

동물이 앞다리로 원뿔의 먼 가장자리를 잡을 때 꼬리를 부드럽게 뒤로 당기고 열린 슬릿 사이로 꼬리를 통과시킵니다. 원뿔에서 튀어나온 뒷다리 중 하나를 고정하여 측면 정맥이 12시 위치에서 보이도록 합니다. 엄지와 검지 사이에 주로 사용하지 않는 손으로 꼬리를 중간에서 2/3 길이로 잡고 꼬리 위치와 혈관 확장을 유지하기 위해 측면 정맥에 약간의 장력을 가합니다.

70% 알코올을 적신 거즈 스폰지나 패드로 주사 부위의 피부를 닦습니다. 주로 사용하는 손으로 주사기를 잡고 바늘을 꼬리와 평행하게 놓습니다. 혈류 방향으로 바늘을 10-25도 각도로 삽입하고 2-4mm를 관통하여 정맥 내강으로 더 멀리 전진합니다.

용액을 천천히 주입하십시오. 주사 부위 위에 내성이 있거나 흰색 물집이 있는 경우 바늘을 제거하고 원래 주사 부위 위의 위치에 두 번째 주사를 시도하십시오. 한쪽 측면 정맥의 주입이 실패하면 동물을 반대쪽으로 재배치하고 반대쪽 정맥에 대해 더 많은 시도를 합니다.

바늘을 제거하고 주입 부위를 엄지 손가락으로 단단히 눌러 주입 된 용액이나 혈액의 역류를 방지합니다. 출혈이 멈출 때까지 깨끗한 거즈나 티슈 닦음으로 부드럽게 압박을 계속합니다. 동물을 우리로 되돌려 놓고 5분 동안 모니터링하여 동물이 더 이상 출혈하지 않고 정상적인 활동을 재개하는지 확인합니다.

온난화 챔버의 히터가 활성화되면 전구에 의한 열 방출로 인해 목표 온도에 따라 처음 5-15분 동안 내부 온도가 급격히 상승합니다. 히터는 감지된 내부 온도가 설정 온도를 초과하면 전구를 비활성화합니다. 그 후, 장치는 내부 온도를 유지하기 위해 자동으로 열 사이클을 반복합니다.

패혈증을 유발하는 혈류 칸디다증의 마우스 모델에서, 스위스 웹스터 마우스에서 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 이용한 정맥 주사 챌린지는 패혈증의 급속한 발병과 유기체의 확산을 일으켜 3-4일 이내에 높은 폐사율을 초래했습니다. 이와는 대조적으로, 동물은 독성 균주 칸디다 더블리니엔시스(Candida dubliniensis)에 대한 사전 면역 또는 백신 접종을 통해 패혈증으로부터 보호될 수 있으며, 독성 C.albicans에 의한 치명적인 IV 챌린지 후 95% 이상의 생존율을 달성했습니다. 백신을 접종하지 않고 치명적 감염에 걸린 동물은 패혈증으로 인한 이환율이 유의하게 증가한 반면, 백신을 접종한 동물군은 치명적 감염 후 경미한 증상을 보였다.

진행성 사망률과 백신 매개 보호의 결과는 4개의 독립적인 실험에서 재현성 있게 얻어졌습니다. 동물을 원뿔에 배치할 때 정맥에 접근하기 위해 바늘의 각도를 올바르게 조정하고 바늘을 정맥에 조정하고 정맥을 주입하도록 주의하십시오. 이 유선형 기술은 꼬리 정맥 주사를 수행할 수 있는 효율적이고 효과적인 수단을 제공하여 연구자의 과학적 결과를 향상시킬 것입니다.