Name: 쥐의 재현 가능한 집중 치료실 지향 내독소 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 56 s
Description: 학습하세요 쥐의 재현 가능한 집중 치료실 지향 내독소 모델을 통해 생리학적 및 분자적 매개변수를 반복적으로 평가하는 방법을. 이 모델은 패혈증 연구에 필요한 동물 수를 줄이고 윤리적인 실험 접근을 가능하게 합니다.

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저자는 Beatrice Beck-Schimmer (MD)와 Erik Schadde (MD)에게 비판적 인 검토와이 원고에 대한 귀중한 공헌에 감사드립니다.

이 프로토콜에 제시된 모든 실험은 스위스 취리히 광저우의 수의학 당국 (승인 번호 134/2014 및 ZH088/19)의 승인을 받았습니다. 또한이 실험에서 수행 된 모든 단계는 스위스 중소 과학 아카데미 (SAMS)의 동물 실험 지침 및 유럽 실험실 동물 과학 협회 연맹 (FELASA)의 지침에 따라 수행되었습니다.
1. 마취 유도 및 동물 모니터링
<ol><li>250-300 그램 (g)의 체중을 가진 수컷 Wistar 쥐를 병원균이없는 조건의 환기 케이지에 보관하십시오. 22 ± 1 °C의 주변 온도에서 12-12 시간의 빛 / 어두운 사이클을 제공하고 음식과 물에 자유롭게 접근 할 수 있습니다.</li>
	<li>마취 유도 박스에서 이소플루란(농도 3-5%)을 사용한 휘발성 유도에 의해 전신 마취를 30초 동안 유도하거나(그림 1A) 또는 대안으로 케타민/자일라진(체중 100g 당 10/1밀리그램(mg))을 1회 주사하여 마취를 유도합니다.</li>
	<li>동물을 작업장으로 옮기고 전체 실험 기간 동안 동물을 난방 매트에 놓습니다. 체온을 36.5 ~ 37 °C 사이로 유지하십시오.</li>
	<li>노즈콘을 사용하여 산소를 공급하십시오 (600 mL / 분). 휘발성 마취가 마취 유지를 위해 선택된 경우 이소플루란 2-3%를 첨가한다. 동물이 자발적으로 호흡하고 있는지 확인하십시오.</li>
	<li>기관 절제술과 동맥 및 정맥 카테터를 설치하기 전에 발가락 핀치 반사가 없어 마취 수준을 확인하십시오.</li>
	<li>주변 산소 포화도 모니터링(정상 산소 포화도 98 - 100%)을 통해 충분한 산소화를 확인합니다.</li>
	<li>눈을 보호하기 위해 연고 (비타민 A 연고)를 사용하십시오.</li>
	<li>도 1B에 표시된 바와 같이 멸균 수술기구와 카테터를 사이드 테이블에 준비한다.</li>
	<li>또한 그림 1C에 표시된 대로 압력 및 산소 포화도 모니터링을 준비합니다.</li>
</ol>2. 정맥 내 접근
<ol><li>정맥 접근을 용이하게하기 위해 쥐의 근위 꼬리에 지혈대를 바르십시오 (그림 2A).</li>
	<li>꼬리를 알코올로 3 번 소독하십시오.</li>
	<li>G26 정맥내 카테터를 두 개의 측면 꼬리 정맥 중 하나로 유도한다. 참고 : 우리의 경험에 비추어 볼 때 여기 정맥이 피부에 더 가깝게 위치하기 때문에 쥐 꼬리의 원위 부분에 정맥 내 접근을 배치하는 것이 더 쉽습니다. 또한, 캐너레이션에 실패한 경우, 근접하게 이동할 수 있는 충분한 공간이 있습니다.</li>
	<li>엄격하게 공기 주입을 피하십시오.</li>
	<li>정맥 내 카테터를 놓은 후 지혈대를 풀어줍니다.</li>
	<li>정맥 카테터를 접착 테이프로 제자리에 고정시킵니다(그림 2B).</li>
	<li>주사기 펌프를 정맥 내 접근에 연결하여 지속적인 유체 및 약물 적용을 수행합니다.</li>
	<li>볼루스액, 약물 적용 및 정맥 혈액 샘플링을 위해 3 방향 스토콕을 사용하십시오.</li>
</ol>3. 기관지 절제술
<ol><li>동물의 앞쪽 목 부위를 면도하십시오.</li>
	<li>면도 된 피부를 프로비돈 요오드 용액으로 3 번 소독하십시오.</li>
	<li>메스를 사용하여 약 2cm 세로 절개를 수행하십시오 (블레이드 번호 10 포함).</li>
	<li>2-0 실크 봉합사로 피부를 수축시킵니다.</li>
	<li>수술 가위로 후두와 기관을 무뚝뚝하게 준비하십시오 (그림 3A).</li>
	<li>3-5번째 기관 걸쇠에서 외과 용 마이크로 가위로 기관을 열어야합니다.</li>
	<li>멸균 기관 캐뉼라를 기관지에 삽입하십시오. 일방적 인 환기를 피하기 위해 캐뉼라를 너무 깊게 삽입하지 마십시오.</li>
	<li>2-0 실크 봉합사를 사용하여 캐뉼라를 제자리에 고정하십시오.</li>
	<li>캐뉼라를 환기 장치에 연결하여 압력 또는 볼륨 조절 환기를 가능하게 합니다(그림 3B).</li>
</ol>4. 동맥 접근
<ol><li>쥐 꼬리를 포비돈 - 요오드 용액으로 3 번 소독하십시오.</li>
	<li>복부 쪽에서 세로 1cm 정도의 메스 (블레이드 번호 10 포함)를 사용하여 피부를 자릅니다.</li>
	<li>조심하십시오, 꼬리 동맥의 부상을 피하기 위해 너무 깊게 자르지 마십시오.</li>
	<li>수술 현미경을 사용하여 동맥을 조심스럽게 노출시킵니다. 외과 용 마이크로 가위로 동맥 주위의 근막을 자르십시오.</li>
	<li>6-0 실크 봉합사를 사용하여 동맥의 원위 부분을 Ligate하십시오.</li>
	<li>근위 6-0 실크 봉합사를 준비하되 실크를 조이지 마십시오 (그림 4A).</li>
	<li>G-26 카테터를 원위 및 근위 실크 봉합사 사이의 동맥에 도입하십시오.</li>
	<li>카테터가 동맥에 있으면 근위 실크 봉합사를 조이고 카테터를 제자리에 고정시킵니다 (그림 4B).</li>
	<li>카테터를 압력 변환기에 연결하여 지속적인 동맥압 측정(정상 평균 동맥압: 60 - 100mmHg)을 제공합니다(그림 4C).</li>
	<li>또한, 압력 트랜스듀서에 연결된 카테터와 동맥 혈액 샘플링을 위한 G-26 카테터 사이에 3방향 스톱콕을 배치하십시오.</li>
</ol>5. 기준선 측정, 패혈증 유도 및 후속 측정
<ol><li>동물이 정상 상태에 도달 한 후 LPS를 주입하십시오.</li>
	<li>정상 상태에 도달하면 혈액 샘플을 수집하십시오 (일반적으로 15-30 분 후).</li>
	<li>혈액 샘플의 체액 손실을 링거의 용액으로 1:4의 비율로 대체합니다.</li>
	<li>패혈증을 유도하려면 LPS를 볼루스 또는 연속 LPS 적용으로 주입하십시오.</li>
	<li>볼루스 적용을 위해, 1 mg/mL의 농도로 인산염 완충 식염수(PBS)에 용해된 LPS/킬로그램 체중(kg) 1 mg을 주입하십시오.</li>
	<li>연속 적용을 위해, 주사기 펌프를 사용하여 전체 실험에 걸쳐 300μg의 LPS/kg/시간을 주입하십시오(LPS의 원액: PBS에 1mg/mL).</li>
	<li>공기 색전증을 방지하기 위해 항상 공기 주입을 피하십시오.</li>
	<li>실험을 시작하기 전에 유체 대체 프로토콜, 혈관 수축기 적용 프로토콜 및 낙태 기준 (예 : 유체 교체에도 불구하고 30 분 이상 동안 50 mmHg 이하의 평균 동맥 혈압으로 정의 된 저혈압)을 정의하십시오. 참고 : 링거 용액을 10 mL / kg / 시간의 속도로 지속적으로 주입하는 것이 좋습니다.</li>
	<li>주입된 양으로부터 유체의 임의의 연속 투여(예를 들어, 연속 LPS 적용을 위해)를 빼서 결과가 대조군의 그것들과 비교되도록 한다. 참고 : 실험이 끝날 때, 그리고 조직 학적 또는 생화학 적 검사와 같은 추가 분석을 위해 간, 신장 또는 비장과 같은 장기를 수확하기 전에 동물은 열등한 카바 정맥을 절개하여 안락사 할 수 있습니다. 안락사의 권장 방법은 열등한 정맥 카바를 절개하고 얼음처럼 차가운 식염수를 왼쪽 심장에 주사하기 전에 동물을 마취의 외과 적 평면으로 데려 오는 것입니다 특히 장기의 염증 마커를 평가해야하는 경우. 법적 요구 사항 및 현지 지침을 준수해야합니다. 패혈증 관련 장기 부전을 검증하기 위해, 신장의 관형 손상을 확인하기 위해 카스파제-3와 같은 프로-아폽토시스 마커와 α1-마이크로글로불린을 분석할 수 있다. CINC-1, MCP-1 및 IL-6과 같은 마커의 기관 특이적 분석은 또한 기관 특이적 염증 반응에 대한 정보를 제공할 수 있다.</li>
</ol>

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</ol>

저자는 제시된 연구와 관련하여 이해 상충이 없습니다. Martin Schläpfer는 의료용 가스, 특히 산소(O2) 및 이산화탄소(CO2)를 사용하는 환자의 수술 및/또는 마취의 부정적인 영향을 완화하기 위한 특허를 제출했습니다. 그는 스웨덴의 Sedana Medical과 스위스 Roche로부터 무제한 연구 보조금을 받았으며,이 작업과 관련이 없습니다.

여기에 설명 된 프로토콜은 매우 재현 가능하지만 배우기 쉬운 패혈증 모델을 허용하며, 이는 연구 질문에 따라 적응 될 수 있습니다. 심박수, 혈압 및 말초 동맥 산소 포화도와 같은 장기 기능을 언급하는 필수 생체내 데이터는 연속적으로 수집될 수 있고, 혈액 샘플링은 실험 전반에 걸쳐 반복적으로 수행될 수 있다. 또한, 유체 교체 프로토콜 및 혈관 프레서 지원과 관련된 수정을 설치할 수 있습니다. 동물의 혈류역학적 안정성을 감안할 때, 실험은 이전에 보고된 바와 같이 몇 시간에 걸쳐 수행될 수 있다8.
특정 연구 질문10,11에 답하기 위해 적절한 패혈증 모델을 선택해야한다는 점을 지적해야합니다. 모든 패혈증 모델에는 장점이 있지만 단점도 있습니다. 현재 기사에서는 내독소혈증 모델이 제시되어 강하지만 멸균 된 염증을 유발합니다. 패혈증...

패혈증과 더 심한 형태인 패혈성 쇼크는 감염의 근거에 있는 증후군으로, 사이토카인의 방출과 함께 염증 반응이 과도하게 일어나 면역 방어가 억제되고 치명적인 결과1,2로 생리적, 생화학적 변화를 일으킨다. 이 불균형 한 염증 반응은 폐, 신장 및 간과 같은 다양한 중요한 기관에서 장기 기능 장애 및 장기 부전을 초래합니다. 37%3의 패혈증은 환자가 중환자실(ICU)에 입원해야 하는 가장 흔한 이유 중 하나입니다. 패혈증의 사망률은 현재 약 20-30 % 4입니다. 신속하고 효과적인 항생제 치료가 가장 중요합니다5. 유체 및 혈관 압착기 소생술은 조기에 설치되어야하며, 그 외에는 치료가 순전히 지원적입니다6.
패혈증은 장기 기능 장애를 동반하는 박테리아, 곰팡이, 바이러스 또는 기생충에 대한 입증되거나 의심되는 감염으로 정의됩니다. 패혈성 쇼크 기준은 추가적인 심혈관 붕괴가 유체 치료에만 반응하지 않을 때 충족되며, 2 밀리몰 / 리터 이상의 젖산 수치가 존재할 때충족됩니다 2. 패혈증 관련 장기 부전은 모든 기관에서 발생할 수 있지만 심혈관 시스템, 뇌, 신장, 간 및 폐에서 매우 흔합니다. 패혈증으로 고통받는 대부분의 환자는 환자의 기도를 확보하고, 흡인으로부터 보호하며, 저산소증을 예방하거나 극복하기 위해 영감을받은 산소의 높은 비율로 긍정적 인 최종 호기 환기를 적용하기 위해 기관 내 삽관이 필요합니다. 기관관과 기계적 환기를 용인하기 위해 환자는 일반적으로 진정이 필요합니다.
그람 음성균의 막의 성분으로서 리포폴리사카라이드(LPS)와 같은 내독소는 톨형 수용체(TLR)47을 통해 강한 염증 반응을 유도한다. 정의된 경로의 활성화는 안정한 염증 반응을 보장한다. 사이토카인 유도 호중구 화학유인제 단백질 1(CINC-1), 단핵구 화학유인제 단백질 1(MCP-1), 및 인터루킨 6(IL-6)과 같은 사이토카인은 이 모델8에서 중증도 및 결과에 대한 예후 인자로 알려져 있다. 정맥내 LPS 적용은 래트 8,9에서 패혈증의 다양한 측면을 연구하는데 성공적으로 사용되어 왔다.
패혈증의 치료는 특히 예측 동물 모델의 부족으로 인해 여전히 도전입니다. 전신 염증의 활성화와 함께 내독소혈증이 약리학적 치료법의 개발을 위한 적절한 모델이라면 논쟁의 여지가 있다. 그러나, 잘 알려진 LPS 유도 TLR 4 경로를 통해 중요한 지식을 얻을 수 있다.

<table><tbody><tr><td>2-0 실크 봉합사</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>K833</td><td>표준 외과 26</td></tr><tr><td>정맥 카테터</td><td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td><td>391349</td><td>표준 마취 장비</td></tr><tr><td>6-0 LOOK 블랙 꼰 실크</td><td>Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA</td><td>SP114</td><td>표준 외과</td></tr><tr><td>Alaris 주사기 펌프</td><td>Bencton Dickinson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Mundipharma, Basel, Switzerland</td><td>7.68034E+12</td><td>GTIN 번호</td></tr><tr><td>곡선형 미세 팁 마이크로핀치</td><td>World Precision Instruments(WPI), Sarasota, FL</td><td>504513</td><td>혈관 준비 촉진</td></tr><tr><td>미세 팁 마이크로핀셋</td><td>World Precision Instruments(WPI), Sarasota, FL</td><td>501976</td><td>팁은 정기적으로 연마해야 합니다</td></tr><tr><td>Infinity Delta XL 마취 모니터링</td><td>Draeger, L&uuml; beck, 독일</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, 250 mL 병</td><td>Attane, Piramal, Mumbai, India</td><td>LDNI 22098</td><td>Standard vet. equipment</td></tr><tr><td>Ketamine (Ketalar)</td><td>Pfitzer, New York, NY</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli의 Lipopolysaccharide (LPS), 혈청형 055:B5</td><td>Sigma, Buchs, Switzerland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Q-tips small</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany</td><td>EH11.1</td><td>표준 수술</td></tr><tr><td>용 Ringerfundin</td><td>Bbraun, Melsungen, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tec-3 Isofluorane Vaporizer</td><td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td><td>더 이상 사용할 수 없음</td><td>표준 수의사 장비</td></tr><tr><td>Xylazine (Xylazin Streuli)</td><td>Streuli AG, Uznach, Switzerland</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

쥐의 재현 가능한 집중 치료실 지향 내독소 모델

A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

패혈증과 패혈성 쇼크는 중환자실에서 사망의 주요 원인으로 남아 있습니다. 패혈증 관리가 크게 개선되었음에도 불구하고 사망률은 여전히 20 ~ 30 %입니다. 패혈증 관련 다기관 부전 및 사망을 감소시키기 위한 새로운 치료 접근법이 시급히 필요하다. 견고한 동물 모델은 하나 또는 여러 가지 치료 접근법뿐만 아니라 생리 학적 및 분자 매개 변수에 대한 효과를 테스트 할 수 있습니다. 이 기사에서는 간단한 동물 모델을 제시합니다.
첫째, 전신 마취는 휘발성을 사용하거나 복강 내 마취에 의해 동물에서 유도됩니다. 정맥 내 카테터 (꼬리 정맥), 기관 절제술 및 동맥 내 카테터 (꼬리 동맥)의 삽입 후, 기계적 환기가 시작됩니다. 평균 동맥 혈압, 동맥 혈액 산소 포화도 및 심박수의 기준선 값이 기록된다.
인산염 완충 식염수에 용해 된 리포 폴리 사카라이드 (1 밀리그램 / 킬로그램 체중)의 주사는 톨과 같은 수용체 4를 통해 강력하고 재현 가능한 염증 반응을 유도합니다. 유체 교정뿐만 아니라 노르 에피네프린의 적용은 잘 확립 된 프로토콜을 기반으로 수행됩니다.
이 기사에서 제시 한 동물 모델은 배우기 쉽고 진정, 기계 환기, 지속적인 혈압 모니터링 및 반복적 인 혈액 샘플링을 갖춘 중환자 실에서 임상 패혈증 치료를 지향합니다. 또한이 모델은 신뢰할 수 있으므로 동물 연구의 3R (감소, 대체, 정제) 원칙에 따라 제한된 수의 동물로 재현 가능한 데이터를 사용할 수 있습니다. 패혈증 연구에서 동물 실험을 쉽게 대체 할 수는 없지만 반복적 인 측정은 동물을 줄이고 패혈성 동물을 마취 상태로 유지하면 고통을 줄일 수 있습니다.

제시된 시스템은 이전에 보고된 바와 같이 혈역학적으로 안정한 동물로 내독소혈증을 허용한다9. LPS 자극이 없는 동물에서 평균 동맥압이 안정적으로 유지되고 LPS 처리된 동물은 CINC-1(867 ng/mL), MCP-1(5027 ng/mL), IL-6(867 ng/mL)8과 같은 혈장 사이토카인(적용 후 6시간)에 의해 측정된 음성 염기 과잉 및 강한 염증 반응과 같은 패혈증의 특성을 발달시키고, 그림 5.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62024/62024fig01.jpg"> 그림 1 : 장비 준비 : 마취 / 산소 ...

여기에서, 우리는 쥐에서 재현 가능한 중환자 실 지향 내독소 모델을 제시한다.

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...

이 프로토콜은 생리적 및 분자 파라미터가 반복적으로 평가될 수 있는 내독소혈증의 강력하고 재현 가능한 모델이다. 이 접근법은 패혈증 연구의 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 우리의 모델은 동물 실험을 대체하지는 않지만 지속적인 진정을 통해 패혈증 모델을 정제하고 반복적 인 샘플링을 통해 동물의 수를 줄입니다.초보자는 동맥 및 정맥 카테터의 삽입으로 어려움을 겪을 수 있지만 이러한 기술을 습득하려면 제한된 교육 만 필요합니다. 전체 실험 설정의 시각화는 연구자가 ICU의 상황을보다 밀접하게 모방하기 위해 모델을 설정하거나 적응할 수있게 해줍니다. 마취 된 동물을 가열 매트로 옮기는 것으로 시작하십시오.체온을 섭씨 36.5도에서 37도 사이로 유지하십시오. 동물이 코 원뿔에 산소를 공급하여 자발적으로 호흡하고 있는지 확인하십시오. 기관 절제술과 동맥 및 정맥 카테터를 설치하기 전에 발가락 핀치 반사의 부재로 마취의 수준을 확인하십시오.눈을 보호하기 위해 연고를 사용하십시오. 충분한 산소화를 위해 압력 및 산소 포화도 모니터링과 함께 멸균 수술 도구 및 카테터를 준비하십시오. 쥐의 근위 꼬리에 지혈대를 바르면 정맥 접근을 용이하게하고 꼬리를 알코올로 세 번 소독하십시오.공기 주입을 피하면서 두 개의 측면 꼬리 정맥 중 하나에 26 게이지 정맥 내 카테터를 도입하십시오. 정맥 카테터를 놓은 후 지혈대를 풀고 접착 테이프로 정맥 내 카테터를 제자리에 고정시킵니다. 주사기 펌프를 세 방향 스토콕과 정맥 내 접근에 연결하여 지속적인 유체 및 약물 적용을 수행합니다.동물의 앞쪽 목 부위를 면도하여 기관 절제술을 시작한 다음 포비돈 요오드 용액으로 면도 된 피부를 세 번 소독하십시오. 메스 블레이드 번호 10을 사용하여 두 센티미터 세로 절개를 수행합니다. 2-0 실크 봉합사로 피부를 수축시킵니다.그런 다음 후두와 기관을 외과 용 가위로 열 수 있도록 무뚝뚝하게 준비했습니다. 멸균 기관 캐뉼라를 기관에 삽입하여 일방적 인 환기를 피하기 위해 너무 깊이 침투하지 않도록주의하십시오. 2-O 실크 봉합사를 사용하여 캐뉼라를 제자리에 고정시킨 다음 캐뉼라를 인공 호흡기에 연결하여 압력 또는 볼륨 조절 환기를 수행하십시오.실험을 시작하기 전에 유체 대체 프로토콜, 혈관 수축기 적용 프로토콜 및 낙태 기준을 정의하십시오. 포비돈 요오드 용액으로 쥐 꼬리를 세 번 소독 한 다음 메스를 사용하여 복부 쪽에서 피부 원을 세로 한 센티미터 정도 자르고 꼬리 동맥의 부상을 피하기 위해 너무 깊게 자르지 않도록주의하십시오. 수술 현미경을 사용하여 동맥을 조심스럽게 노출시킵니다.외과 용 마이크로 가위로 동맥 주위의 근막을 자르십시오. 그런 다음 근위 6-0 실크 봉합사를 수행하여 동맥의 원위 부분을 절제하지만 실크를 조이지 마십시오. 원위 및 근위 실크 봉합사 사이의 동맥에 26 게이지 카테터를 도입 한 다음 근위 실크 봉합사를 조여서 카테터를 제자리에 고정시킵니다.카테터를 압력 변환기에 연결하여 지속적인 동맥압 측정을 제공합니다. 또한 압력 변환기에 연결된 카테터와 동맥 혈액 샘플링을 위한 26게이지 카테터 사이에 세 방향 스톱콕을 놓습니다. 동물이 정상 상태에 도달한 후, LPS를 주입하여 패혈증을 유도하고 혈액 샘플을 수집한다.혈액 샘플의 체액 손실을 Ringer의 용액으로 하나 대 네 개의 비율로 교체하여 공기 색전증을 방지하기 위해 항상 공기 주입을 피하십시오. 평균 동맥압은 LPS 자극 유무에 관계없이 동물에서 안정적으로 유지됩니다. LPS 처리 동물은 음성 염기 과잉과 같은 패혈증의 특성을 발달시킨다.LPS 처리된 동물은 또한 강한 염증 반응을 전개시켰으며, 이는 화학유인제 단백질-1, 단핵구 화학유인제 단백질-1, 및 인터루킨-6과 같은 혈장 사이토카인에 의해 측정되었다. 이 프로토콜을 시도 할 때 유체 및 혈관 압착기 요법을 미리 정의하고 견고하고 재현 가능한 연구 데이터를 얻기 위해 종료 기준을 정의하는 것을 잊지 마십시오. 이 프로토콜은 다른 패혈증 모델에 적응될 수 있다.따라서 연구 질문은 가장 적합한 접근 방식으로 그리고 동물 복지의 감소, 개선, 대체의 원칙에 따라 대답됩니다.

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Methicillin 내성의 실험 심내막염 모델<em&gt; 황색 포도상 구균</em&gt; (MRSA) 쥐에서

여기에, 절차는 대장균 K1의 문화와 신생아 쥐에 전신 감염의 설립을 설명합니다. 이것은 비 침습성 절차 맥락총에서 위장관 식민 전신 순환에 병원균의 전위, 및 중추 신경계의 침입을 허용한다.

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Encephalopathy of prematurity는 조산으로 인한 손상과 관련된 중추 신경계 이상을 포함합니다. 이 보고서는 융모막염을 모방한 자궁 내 일시적인 전신 저산소증-허혈 및 양수 내 지질다당류 투여(LPS)에 대한 임상적으로 관련된 쥐 모델, 그리고 감염 자극 및 태반 관류 부족이 CNS 발달에 미치는 관련 영향을 설명합니다.

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내독소의 정맥 투여는 여러 병리학적 상태와 일치하는 용량 의존적인 생리학적 및 면역학적 변화를 안정적으로 유도합니다. 이 환원주의적 접근은 인간에 대한 전신 염증과 그 하류 효과에 대한 조사, 모델링 및 실험적 수정을 가능하게 합니다.

건강한 인간의 정맥 내 독소 과제 : 실험적 플랫폼 조사하고 전신 염증을 조절하는

면역 능력이 있는 설치류에서 폐 감염을 확립하는 방법이 설명되어 있습니다. 숙련되면 이 방법을 빠르고 쉽게 수행하여 S. pneumoniae, H. influenzae, P. aeruginosa, K. pneumoniae 및 A. baumannii의 많은 분리물에서 안정적인 감염을 유도할 수 있습니다.

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이 프로토콜은 장기간의 심각한 질병에 대한 중앙 카테터 삽입 마우스 모델을 설명합니다. 우리는 패혈증을 유도하기 위해 두골 결찰 및 천자 방법을 결합하고 수액, 약물 및 영양 투여를 위한 중심 정맥 라인을 사용하여 인간의 임상 환경을 모방합니다.

위독한 병의 마우스 모델에서 유체, 약물 및 영양 관리를위한 중심 정맥 라인의 사용

생체 발광 대장균 O1:K1:H7을 가진 신생아 마우스의 감염은 중요한 폐 염증 및 폐 병리를 가진 패혈증 감염을 초래합니다. 여기서는 전신 세균성 부담, 염증 성 프로파일링 및 폐 조직 병리학의 열거와 병행하여 세로 내 인트라비셔널 이미징을 사용하여 신생아 패혈증을 모델링하고 추가로 연구하는 절차를 설명합니다.

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돼지 내독소혈증 쇼크 모델로서의 지질다당류 주입

이 프로토콜은 기관지폐 이형성증의 분자 유발 요인에 대한 이해를 용이하게 하고 치료 번역을 향상시키기 위해 적절하지 않은 계면활성제 양, 고산소증, 고압 환기 및 염증을 포함하여 미숙아 폐에서 발생하는 초기 병원성 사건을 모델링하는 급성 폐 손상의 신생아 새끼 돼지 모델의 개발을 설명합니다.

미숙아 폐의 초기 환경을 재현하는 신생아 새끼 돼지 급성 폐 손상 모델 개발

본 연구에서는 기본 후두경을 사용하여 쥐에서 ALI를 발달시키는 비침습적 기기관내 삽입 기법이 입증되어 LPS가 폐에 정밀히 전달되도록 합니다. LPS는 후두경을 이용한 기관내관 을 통해 주입됩니다. 폐 손상의 규모는 여러 시점에서 평가됩니다.

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쥐의 재현 가능한 집중 치료실 지향 내독소 모델

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