A Magnetic-Bead-Based Mosquito DNA Extraction Protocol for Next-Generation Sequencing

Tse-Yu Chen; Adam E. Vorsino; Kyle J. Kosinski; Ana L. Romero-Weaver; Eva A. Buckner; Joanna C. Chiu; Yoosook Lee

doi:10.3791/62354

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Biology

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A Magnetic-Bead-Based Mosquito DNA Extraction Protocol for Next-Generation Sequencing

차세대 시퀀싱을 위한 자기 비드 기반 모기 DNA 추출 프로토콜

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05:34 min

April 15, 2021

DOI: 10.3791/62354-v

Tse-Yu Chen¹, Adam E. Vorsino², Kyle J. Kosinski¹, Ana L. Romero-Weaver¹, Eva A. Buckner¹, Joanna C. Chiu³, Yoosook Lee¹

¹Florida Medical Entomology Laboratory, Department of Entomology and Nematology, Institute of Food and Agricultural Sciences,University of Florida, ²U. S. Fish and Wildlife Service, Pacific Islands Fish and Wildlife Office, ³Department of Entomology and Nematology,University of California Davis

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기에 설명된 DNA 추출 프로토콜은 모기에서 고품질의 DNA 추출을 생성하기 위하여 자기 구슬을 사용하여 입니다. 이러한 추출은 다운스트림 차세대 시퀀싱 접근 방식에 적합합니다.

이 예산 친화적 인 자기 비드 기반 DNA 추출 프로토콜은 자원 제한된 실험실 및 연구에 액세스 할 수있는 높은 처리량 시퀀싱을 합니다. 이 프로토콜은 고품질 DNA 추출을 위한 고가의 장비를 필요로 하지 않으며 높은 처리량 시퀀싱을 위한 질로 충분한 양의 DNA를 얻는 것이 어려운 특정 진단 또는 연구 상황에서 도움이 될 수 있습니다. 이 프로토콜은 일회성 데모로 쉽게 복제할 수 있습니다.

워크플로에 익숙해지려면 먼저 소수의 샘플로 시도해야 합니다. 우선, PCR 급수 의 100 마이크로리터를 추가하고 조직을 부드럽게하기 위해 섭씨 4도에서 1 시간 동안 배양하여 70 % 이상의 알코올에 저장된 모기 조직 샘플을 수화하십시오. 인큐베이션 후 물을 버리고 100 마이크로리터의 Proteinase K 완충 효소 믹스를 추가합니다.

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