생체멤브레인 포스 프로브 분광법에 의한 분자 스프링 상수 분석

이 비디오는 분자 스프링 상수를 측정하기 위해 생체 막 힘 프로브 또는 BFP를 사용하는 단계별 절차를 설명합니다. 힘 프로브에서, BFP는 최근 네이티브 셀 표면 또는 SITU 동적 힘 분광법 분석에서 나타났다. 이 기술의 주요 목표는 결합하는 단일 분자 유전학을 측정하는 것입니다.

이 데이터 분석 절차는 간단하지만 강력한 메시지이며 분자를 표현하는 세포막의 동적 힘과 염증, 특히 기계적 정보를 제공합니다. BFP 실험 주기 동안, 프로브 미생물군유전체는 적혈구 및 유언 검인, 표적 세포 및 프로브와 표적 사이의 리간드 수용체 분자 결합을 결합하는 계열 연결된 뇌 시스템으로 간주될 수 있다. Hooke의 법칙에 따라, 계열 커넥티드 스프링 시스템의 총 스프링 상수의 상호는 방정식이 보여주는 바와 같이 각 단일 구성 요소의 역 스프링 상수의 합과 같습니다.

적혈구의 스프링 상수는 오리피스내의 프로브 마이크로피펫의 방사형에 의존하는 이벤트 모션을 기반으로 계산됩니다. 적혈구, 적혈구와 유언 검인 및 마이크로 파이펫 흡입 압기 사이의 원형 접촉 영역. BFP 도로 데이터는 PA 번역기에 의해 대상 마이크로 파이펫의 움직임을 제어하는 홈메이드 왼쪽 뷰 가상 계측기에 의해 얻어진다.

전체 PFP 터치 주기는 5단계로 구성됩니다. 접근 방식.Impinge.Contact. 철회 및 해리. 처음에는 로부도 APICS 위치가 X가 검은 색 디샤인 0과 같기 때문에 표시되는 것을 강조합니다.

대상은 다음 에 충돌하고 부정적인 유언 검인 움직임을 일으킬 로브도 압축 조각이나 번역기에 의해 구동된다. 빨간색 대시 라인에서 0보다 작은 X로 유의하십시오. 철회 단계에서 빨간색 버스토 정점은 X에서 0 위치보다 작은 X에서 압축 상이라고 하는 0 위치와 동일한 X위치로 이동합니다.

결합이 리간드 수용체 분자 복합체 사이에서 형성되는 경우에, 적혈구는 그밖 긍정적인 방향과 더 상이할 것입니다. 이 X는 0 기간보다 큰 것을 후퇴 단계의 인장 단계라고 합니다. 후퇴 단계는 결합 분자의 스프링 상수를 결정하는 가장 중요한 부분입니다.

BSP 데이터 수집 플랫폼을 사용하여 힘 대 시간 도로 데이터를 수집합니다. 각 실험은 일반적으로 50~200개의 터치 주기를 기록하고 PFP 데이터 분석 소프트웨어를 엽니다. 노란색 폴더 아이콘을 클릭하고 두 번 클릭하여 해당 행 데이터 파일을 선택합니다.

우리는 프로그램에 있어. 그런 다음 위쪽 및 아래쪽 화살표 버튼을 클릭하여 이벤트 간에 전환합니다. 이상값 제외 기준을 사용하여 잘못된 이벤트를 차단합니다.

시간 형식으로 강제되는 내보내기 데이터 형식을 선택하고 적절한 상태 범위를 선택합니다. 내보내기 플롯 데이터 버튼을 클릭합니다. 내보낸 데이터는 기본적으로 텍스트 파일로 저장됩니다.

이 텍스트 파일에는 두 개의 데이터 열이 포함되어 있습니다. 그것은 시간 아빠를 나타내는 첫 번째 열과 각 시점에서 해당 힘을 나타내는 두 번째 열입니다. 스프레드시트 소프트웨어를 사용하여 힘 대 시간 곡선을 플롯하여 강제 대 변위 곡선을 가져옵니다.

윌로우 스틸 PSO 이동을 통해 각 데이터 포인트의 시간 값을 곱합니다. 각 데이터 포인트에서 가장 작은 변위 값을 빼서 첫 번째 데이터 점을 0으로 설정합니다. 이 가로 변환은 후속 스프링 상수 계산에 영향을 주지 않습니다.

힘 대 변위 곡선에서 새 힘 경사를 식별할 수 있는 경우 두 개의 서로 다른 액터 그룹이 다릅니다. 각각 압축 단계와 10 스타일 단계를 나타냅니다. 각 데이터 그룹에 회귀 선을 맞춥시게 합니다.

가파른 경사면선이 K1로 표시된 압축기 상에서 총 스프링 상수를 나타냅니다. 그리고 가장 작은 상단이었던 라인은 내가 언급 한 K2.As 바와 같이 표시된이 10 스타일 단계에서 라인을 나타내며, 총 스프링 상수는 각 구성 요소의 시리즈 스프링 상수의 아들의 상호입니다. 박동의 압축 단계에서 세포 모드로, 분자 결합은 늘어나지 않으므로 분자 결합 스프링 상수가 고려되지 않습니다. 대상 셀의 스프링 상수는 압축기 상중 동안 K1이 총 스프링 상수를 나타내는 위치를 나타내는 방정식으로 설명됩니다.

판매 모드의 10 스타일 단계에서, 총 스프링 상수는 적혈구 분자 결합의 uverse 봄 상수의 태양이다. 그리고 표적 셀은, K2가 전체 스프링 상수를 나타내는 분자 결합 스프링 상수를 계산하기 위해 표시된 방정식을 사용합니다. 10개의 정지 단계를 읽습니다.

비트에서 비트에서, B 변형은 무시할 수 있기 때문에, 표적 세포 스프링상수접근제로의 역구를 설명하는 용어, 따라서 압축기 상세의 총 스프링 상수는 다음 방정식으로 나타나는 적혈구 스프링 상수와 동일하다. 인장 단계에서, 분자 결합의 스프링 상수는 다음 방정식으로 나타나는 적혈구의 효과를 빼서 계산될 수 있다. 측면 바람 통합 태도 B, 베타 3 복합체, K562 세포 및 열혈분리 태도 B 베타 3 복합체의 스프링 상수를 수집하여, 뉴턴 또는 나노미터 스케일을 선택하여 유래된 스프링 상트의 평균 및 표준 편차를 계산한다.

이제 VFD 데이터에서 측정 및 스프링 상수에 대한 요구 사항이 무엇인지 더 잘 이해해야 합니다. 비트에서 셀 모드까지의 차이와 비트를 이길 수 있는 모드의 차이점을 알아차려 야 합니다. 다른 분자 제시 서비스는 스프링 상수의 측정에 다른 방어를 해야합니다.

결론적으로, 이 단계별 절차는 BFP를 사용하여 분자 스프링 상수 분석을 수행하는 방법을 설명합니다. 우리는 BFP 데이터 수집 및 DFS 분석을 하나의 컴퓨터 휴게 프로그램에 자동화하고 통합하기 위한 향후 노력이 이루어질 것으로 예측합니다. 전체 BFP 작업 데이터 분석을 전체적으로 사용자 친화적이고 높게 만듭니다.