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골수 유래 마스트 세포 배양을 위한 결정성 나노셀룰로오스 내장 아가로즈 생물재료 잉크의 제조
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JoVE Journal Bioengineering
Fabrication of a Crystalline Nanocellulose Embedded Agarose Biomaterial Ink for Bone Marrow-Derived Mast Cell Culture

골수 유래 마스트 세포 배양을 위한 결정성 나노셀룰로오스 내장 아가로즈 생물재료 잉크의 제조

Full Text
3,681 Views
09:32 min
May 11, 2021

DOI: 10.3791/62519-v

Leshern Karamchand1, Ashley Wagner1, Syed Benazir Alam1, Marianna Kulka1,2

1Nanotechnology Research Center,National Research Council Canada, 2Department of Medical Microbiology and Immunology,University of Alberta

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol offers a rapid method to evaluate the biocompatibility of a crystalline nanocellulose (CNC)/agarose composite hydrogel biomaterial ink with mouse bone marrow-derived mast cells. The assessment focuses on cell viability and the expression of specific cell surface receptors.

Key Study Components

Area of Science

  • Biomaterials
  • Tissue Engineering
  • Cell Biology

Background

  • Biocompatibility is crucial for biomaterial applications in tissue engineering.
  • Understanding immune cell responses to biomaterials is essential for successful transplantation.
  • Crystalline nanocellulose composites are promising for use in bioprinting.
  • Primary immune cells are sensitive to cytotoxic effects of biomaterials.

Purpose of Study

  • To provide a method for screening biomaterial inks for cytotoxic effects.
  • To facilitate the selection of biocompatible materials for 3D bioprinting.
  • To assess the viability and receptor expression of mast cells on biomaterial constructs.

Methods Used

  • Preparation of a bio ink cartridge for the INKREDIBLE+3D bioprinter.
  • Incubation of immune cells on biomaterial ink constructs.
  • Gentle washing to retrieve cells for downstream analyses.
  • Assessment of cell viability and phenotypic expression.

Main Results

  • The protocol allows for easy retrieval of immune cells from constructs.
  • Cell viability and receptor expression can be effectively measured.
  • Results indicate the biocompatibility of the tested biomaterial ink.
  • This method supports the development of bioprinted tissues for transplantation.

Conclusions

  • This protocol provides a valuable tool for assessing biomaterial compatibility.
  • It enhances the understanding of immune responses to biomaterials.
  • The findings can guide the selection of materials for tissue engineering applications.

Frequently Asked Questions

What is the significance of biocompatibility in biomaterials?
Biocompatibility ensures that biomaterials do not elicit adverse reactions in the body, which is crucial for successful tissue engineering and transplantation.
How does this protocol assess cell viability?
Cell viability is assessed through incubation of immune cells on biomaterial constructs followed by analysis of cell survival and receptor expression.
What types of cells are used in this study?
Mouse bone marrow-derived mast cells are used to evaluate the biocompatibility of the biomaterial ink.
What is the role of the INKREDIBLE+3D bioprinter in this protocol?
The INKREDIBLE+3D bioprinter is used to create constructs from the biomaterial ink for testing with immune cells.
Can this method be applied to other types of biomaterials?
Yes, this method can be adapted to assess the biocompatibility of various biomaterials used in tissue engineering.
What downstream analyses can be performed after cell retrieval?
Downstream analyses may include cytotoxicity assays and biomarker expression profiling.

이 프로토콜은 결정성 나노셀룰로오스(CNC)/아가로즈 복합 하이드로겔 생체재료 잉크를 마우스 골수 유래 마스트 세포와 함께 세포 표면 수용체의 세포 생존성 및 표현성 발현, 키트(CD117) 및 고친화도 이에 수용체(FcθRI)의 생체 적합성을 신속하게 평가하는 방법을 강조한다.

이 프로토콜은 복잡한 3D 바이오 프린팅 실험 전에 민감한 1 차 및 면역 세포에 대한 잠재적 인 세포 독성 효과에 대한 후보 생체 물질 잉크를 선별하는 쉽고 신속한 접근 방식을 제공합니다. 생체 물질 잉크 구조에 면역 세포의 배양 후, 세포는 하류 세포 독성 또는 바이오 마커 분석을 수행하기 위해 부드러운 세척에 의해 구조에서 쉽게 검색 할 수 있습니다. 이 프로토콜은 이식을 위해 향하는 생체 인쇄 조직이 1 차 세포 및 생체 적합성 생체 재료 잉크로 구성되어야하는 조직 공학과 직접 관련이 있습니다.

시작하려면 INKREDIBLE+3D 바이오 프린터에 설치할 바이오 잉크 카트리지를 준비합니다. 먼저, 3밀리리터 생체 재료 잉크 카트리지에서 파란색 엔드 캡을 제거하고 멸균 22 게이지 원식 생체 인쇄 노즐을 바이오 잉크 카트리지의 Luer 잠금 단말에 부착합니다. 인쇄헤드 하나 또는 PH1용 기압 공급 튜브를 카트리지의 반대쪽 끝에 연결하고 연결된 원뿔형 생체 인쇄 노즐을 PH1의 수직 슬롯에 삽입합니다.

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