Name: 선형 스테이플러를 사용하여 쥐의 Roux-en-Y 위 우회에 대한 프로토콜 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 58 s
Description: 배우세요 선형 스테이플러를 사용한 쥐 Roux-en-Y 위 우회 수술 프로토콜. 작은 위 주머니를 만들어 인간 해부학을 모방하고, 체중 감소 및 대사 개선 메커니즘을 연구하는 비만 수술 동물 모델을 구축합니다. 생존율 88.9%를 달성합니다.

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이 연구는 신진 대사와 비만 수술 연구 상을 위한 미국 사회에 의해 투자되었습니다. 에티콘은 정봉주, 스테이플러, 클립을 정중하게 공급했습니다. 수석 저자의 박사 학위 연구는 앨버타 대학 임상 조사 프로그램과 알버타 이노베이트 임상 의 펠로우십에 의해 투자되었다. 우리는 또한 RYGB 해부학의 그녀의 의학 삽화에 대한 미셸 트란에게 감사드립니다.

동물 사용 프로토콜은 알버타 대학의 건강 과학 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었습니다 (AUP000030000). RYGB 해부학을 보여주는 다이어그램은 그림 1을 참조하십시오.
1. 루앙-Y 위 우회
<ol><li>동물 준비 및 수술 설정<ol>
<li>수술 1주일 전에 쥐에게 경구 재수화 요법과 액체 식단을 제공하여 단단한 식단과 물을 제공하여 이 새로운 식단에 적응합니다.</li>
		<li>수술 전 12-18시간 동안만 물에 접근할 수 있는 빠른 쥐.<ol>
<li>쥐가 침구 재료를 섭취할 수 없도록 제기 된 와이어 플랫폼에서 쥐를 금식하십시오.</li>
		</ol>
</li>
		<li>피하 긴 buprenorphine 지속 방출 (SR)와 쥐를 주입 1 수술 직전에 mg/ kg.</li>
		<li>모든 수술 기구, 수건 및 커튼을 오토클레이브합니다.</li>
		<li>작동 표면, 가열 패드 및 마취 코 콘을 70 % 에탄올로 청소하십시오.</li>
		<li>수술 중인 현미경, 마취 기계 및 수술 외과 의사를 위한 인체 공학적 방식으로 공급장치로 작동 표면을 설정합니다.</li>
		<li>온도 조절 된 가열 패드를 사용하고 37 ° C로 설정합니다.</li>
		<li>멸균 드레이프나 수건을 가열 패드 위에 놓습니다.</li>
		<li>50mL 멸균 원문 튜브를 0.9% 식염수로 채웁니다.</li>
	</ol></li>
	<li>마취 유도 및 준비<ol>
<li>이전에 확립된프로토콜(15)에따라 4% 이소플루란을 사용하여 마취를 유도한다.</li>
		<li>통증 반응이 없는지 확인하기 위해 네 개의 사지의 뒷발에 압력을 가하십시오.</li>
		<li>5분마다 적절한 마취와 호흡 속도를 확인하십시오.</li>
		<li>건조를 방지하기 위해 양눈에 윤활유를 바르십시오.</li>
		<li>복부에서 머리를 면도.</li>
		<li>포비단 요오드 용액으로 복부를 청소하십시오. 용액이 건조하고 멸균 장갑으로 변경할 수 있습니다.</li>
		<li>복부를 드러내기 위해 커튼에 개구부로 쥐를 휘감습니다.</li>
		<li>계측기, 봉합사, 면봉, 10mL 주사기를 시술 중에 쉽게 접근할 수 있는 위치에 놓습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>중앙 분리근<ol>
<li>메스를 사용하여 복부의 상부 미드라인에서 3cm 절개를 하면 xyphoid 프로세스 바로 아래에 랜드마크로 만듭니다.</li>
		<li>가위를 사용하여 근막과 복막을 나누어 리나 알바의 미드라인을 유지하여 복부미누스의 출혈을 줄입니다. 출혈이 있는 경우 열 또는 전기 카우터리로 제어하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>위장 동원<ol>
<li>두 개의 젖은 면 봉면을 사용하여, 무딘 해부 위 부착.</li>
		<li>조밀한 접착력이 발생할 때 열 소감을 사용하여 위장을 소작하지 않도록 위 부착물을 주의하여 나눕니다. 위장과 부속품 간 엽 사이의 인대를 급격히 나누어 위장 동원으로 간 파열의 위험을 줄입니다.</li>
		<li>더 큰 혈관, 특히 짧은 위 동맥에, 6-0 폴리 프로필렌 봉합사를 사용 하 여 리게이트.</li>
		<li>식도의 오른쪽 단면에 창을 만들지만 왼쪽 위 동맥에 근위. 면 봉봉이 이 지역에 후방으로 도달할 수 있도록 하십시오. 복부 밖에서 외장화 될 수있을 때 위장이 적절하게 동원됩니다.</li>
	</ol></li>
	<li>제주눔을 파악하고 나눕니다.<ol>
<li>횡단 메소콜론에 부착되어 관찰할 때까지 제주눔을 근접적으로 따라트레츠의 인대를 식별한다.</li>
		<li>7cm를 비스탈리게 측정하고, 막질 혈관 사이의 위치를 식별하고, 대장을 마이크로 가위로 나눕니다. 창자를 나눌 때 페이어의 패치를 피하십시오. 장간이 아닌 창자를 나눕니다.</li>
		<li>오염을 최소화하기 위해 창자를 나누기 전에 깨끗하고 식염수에 젖은 스폰지를 놓습니다.</li>
		<li>작은 창자의 경계에 있는 막에 작은 횡단 용기의 존재를 확인하고 출혈을 피하기 위하여 소꾼으로 이것을 분할하십시오.</li>
		<li>장막 기1cm를 막갈아 기질베이스로 계속 나눕니다.</li>
		<li>근위와 단위 제주를 식별합니다. 쥐의 오른쪽에 젖은 거즈 아래에 근위 제주넘을 놓고 쥐의 왼쪽에 해명 한 제주넘을 놓는다.</li>
	</ol></li>
	<li>위장 스테이플링<ol>
<li>45mm 선형 커팅 스테이플러를 삽입하여 이복의 흰색 선에 3.5mm 의 스테이플 높이를 사용하여 더 작은 파우치를 만듭니다. 스테이플러를 발사하기 전에 10 s를 기다립니다.</li>
		<li>헤스테아제(hemostasis)를 보장하기 위해 스테이플 라인에 거즈를 사용하여 압력을 1분 동안 배치합니다. hemostasis 혼자 압력으로 달성 되지 않는 경우, 스테이플 라인을 따라 출혈 은 8 봉합사의 6-0 폴리 프로필렌 그림을 사용 하 여 오버셀.</li>
		<li>이전에 만든 창에 위장을 가로 질러 두 번째 스테이플 화재를 수행합니다. 스테이플러를 발사하기 전에 10 s를 기다립니다. 기혈을 보장하기 위해 스테이플 라인을 따라 압력이 유지되고 오버스윙이 필요할 수 있습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>위장제 절제술<ol>
<li>위장을 스테이플링한 직후 위장을 만드십시오. 이에 있는 지연은 위가 두 번째 위 주식 후에 불연속이기 때문에 위 팽팽하고 포부를 일으키는 원인이 될 수 있습니다.</li>
		<li>11블레이드 메스를 사용하여 말단 파우치에서 위장을 만듭니다. 위 절제술을 통해 위 내용을 표현합니다. 이것은 위 팽팽과 포부를 방지하기 위하여 중요합니다. 마이크로 가위를 사용하여 이 위장을 약 5mm로 길게 합니다. 위장은 면 면봉 팁이 들어갈 수 있을 만큼 충분히 큽하게 됩니다.</li>
		<li>위절제술에 인접한 제주눔의 단부한 끝을 동원하여 간질이 뒤틀리지 않도록 배치한다.</li>
		<li>아나스토모증을 봉합하는 동안, 식염수에 흠뻑 젖은 거즈로 덮고 식염수를 정기적으로 다시 바르는 것으로 창자를 촉촉하게 유지하십시오.</li>
		<li>6-0 폴리디옥사네 또는 폴리프로필렌 봉합사를 사용하여, 아나스토모증의 열등한 마진에 체류 봉합사를 놓고 스냅을 사용하여 부드럽게 철회하십시오. 세 매듭으로 넥타이.</li>
		<li>아나스토모증의 우수한 여백에 스테이 봉합사를 놓고 스냅을 사용하여 부드럽게 후퇴하십시오. 6 노트와 넥타이.</li>
		<li>아나스토모의 전방 측면을 연속적인 방식으로 봉합하여 폭 1mm, 너비 1mm를 따로 떼어 내어 뒤쪽을 복용하지 않도록 주의하십시오.</li>
		<li>봉합사가 열등한 체류 봉합사에 도달하면 6 노트를 추가로 묶어 두십시오.</li>
		<li>전방측이 완료되면 창자와 위를 뒤집어 백질 결함을 통해 열등한 체류 봉합사를 통과합니다. 스냅을 다시 바르고 열등하게 철회합니다.</li>
		<li>해부학의 후방 측의 경우, 전체 두께가 6-0 봉합사, 1mm 너비, 간격 1mm 간격으로 뒤쪽을 복용하지 않도록주의하십시오. 이들은 각각 여섯 매듭으로 묶여있다. 참고: 해부학의 전방 측면은 연속적인 방식으로 봉합되고 후방 측면은 중단된 방식으로 수행됩니다. 이것은 지속적인 둘레 폐쇄와 관련된 잠재적 인 협착 또는 협착을 방지합니다.</li>
		<li>해부학을 가로질러 발광 내용을 부드럽게 밀어 누출을 확인하십시오. 누출이 있는 영역이 있는 경우 중단된 봉합사로 조심스럽게 보강하십시오. 여분의 봉합사로 보강 할 때 백월을 복용하지 않도록주의하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>제주노제노스토미<ol>
<li>위장제 절제술에서, 측정 20cm disisto.</li>
		<li>11블레이드 메스를 사용하여 시간 제분에 제주노토미를 생성합니다. 페이어의 패치를 통해 제주를 하지 마십시오.</li>
		<li>이 제주노토미는 비장기 사지와 동일한 크기인 마이크로 가위를 사용하여 확장한다. 면 면봉이 내부에 맞는지 확인하십시오.</li>
		<li>간질의 비틀림이 없는 이중성 사지를 놓습니다.</li>
		<li>상급및 열등한 면에 6-0 체류 봉합사를 가진 위드제주절제술과 유사하게 해부학을 수행한다. 전방 측은 연속 봉합사로 수행되며 후방 측은 중단된 봉합사로 수행됩니다.</li>
		<li>이 해부학 동안 창자를 식염수로 촉촉하게 유지하십시오.</li>
		<li>해부학을 통해 발광 내용을 부드럽게 밀어 누설을 확인하십시오. 누출이 있는 영역이 있는 경우 중단된 봉합사로 보강하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>대장과 위장 재배치<ol>
<li>파우치, 잔재 위장 또는 간의 비틀림이 없는지 확인하십시오. 간의 왼쪽 엽이 위장에 앞쪽이고 압축 간 허혈을 일으킬 수 있으므로 파우치 뒤에 갇히지 않도록하십시오.</li>
		<li>비틀림이 없는 천연 자세로 복부에 창자를 배치합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>복부 폐쇄<ol>
<li>3-0 폴리글락틴으로 근막을 연속적인 방식으로 닫습니다. 3-0 폴리디옥사네도 사용될 수 있다.</li>
		<li>2-0 실크로 피부를 연속적인 방식으로 닫습니다.</li>
	</ol></li>
	<li>마취 출현<ol>
<li>이소플루란을 0으로 줄이지만 산소를 계속 보충합니다.</li>
		<li>절개에 대한 스플래시 블록으로서 국소 마취제를 관리한다.</li>
		<li>목 뒤의 피하 조직에서 정상 식염수(D5NS)에서 피하 5% 덱스트로스 10mL를 투여한다.</li>
		<li>쥐가 완전히 깨어 나기 전에 엘리자베스 쥐 칼라를 놓습니다. 불편을 유발하기에는 너무 단단하지 만 잘 맞도록 주의하십시오. 참고: 칼라는 상처 의 결해를 방지하기 위해 5 일째까지 유지됩니다.</li>
	</ol></li>
</ol>2. 샴 수술
참고 : 샴 수술은 RYGB와 유사하게 수행되지만, 마취는 수행되지 않습니다.
<ol><li>위장술이 생성된 다음 6-0 폴리디옥사넨 또는 폴리프로필렌 봉합사로 닫힙시다.</li>
	<li>제주노토미는 트레츠의 인대에 7cm 의 결설을 일으킨 다음 6-0 폴리디옥사네 또는 폴리프로필렌 봉합사로 폐쇄된다.</li>
</ol>3. 수술 후 치료
<ol><li>수술 후 치료<ol>
<li>개별적으로 쥐를 집게하고 고체 음식이 침구와 발광 방해의 소비를 방지하기 위해 재도입 될 때까지 제기 와이어 플랫폼에 보관하십시오. 참고: 수술 후 식단은 위장절 절제술의 부종이 고체 식단의 조기 재개와 함께 방해를 일으킬 수 있으므로 점차적으로 재개됩니다.</li>
		<li>쥐가 피부 변화에 대해 상승 와이어 플랫폼에있는 동안 매일 발을 검사합니다.</li>
		<li>처음 72 시간 동안 물과 구강 재수화 치료 다이어트에 쥐를 유지합니다.</li>
		<li>첫 번째 72h에 대해 12h마다 10mL의 D5NS를 투여한다.</li>
		<li>쥐가 통증에 있는 것처럼 보이는 경우에 0.01 mg/kg에 피하 짧은 연기 buprenorphine를 관리합니다. 쥐 그리나이스 스케일은 통증16을평가하는 데 사용됩니다.</li>
		<li>수술 후 3일째에는 설치류 액체 식단을 추가합니다. 물과 구강 재수화 요법을 계속 제공합니다.</li>
		<li>수술 후 5일째에 고지방 식단을 다시 시작합니다. 물과 액체 식단을 계속 제공합니다. 엘리자베스 칼라를 제거합니다.</li>
		<li>수술 후 7일째에는 액체 식단을 중단합니다.</li>
		<li>수술 후 10-14일에 피부 봉합사를 제거하십시오.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

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</ol>

Ethicon은 45mm 선형 절단 스테이플러 2개, 스테이플러 리로드 2개, 폴리프로필렌 봉합사 6개를 공급했습니다. 저자는 선언할 다른 이해 상충이 없습니다.

RYGB는 작은 위 파우치 (30mL 미만)의 생성을 포함하고, 이중 성 사지와 루 사지의 생성(도 1). 인간에서, biliopancreatic 사지는 전형적으로 30 50 cm이고 위 잔재, 간 및 췌장에서 분비를 수송합니다. Roux 사지는 일반적으로 길이가 75 에서 150cm이며 섭취 식품의 기본 채널입니다. 일반적인 채널은 두 사지가 결합하고 췌장 효소와 담즙 혼합으로 소화와 흡수의 대부분이 발생하는 곳에 남아있는 작은 창자 탈산이다(17)섭취 식품.
RYGB에서 체중 감소의 메커니즘은 멀티 모달. 작은 위 주머니는 기계적 제한을 통해 음식 섭취를 감소시킵니다. 우회는 소장의 상당 부분이 칼로리와 영양분을 흡수하지 않기 때문에 영양 성분을 초래합니다. 최근에는 RyGB 이후 체중 감량에도 중요한 역할을 하는 장 호르몬이 있다는 연구 결과가 나오게 되었습니다. 이들은 주로 g...

비만 및 타입-2 당뇨병은 세계적인 전염병1이되었습니다. 비록 의료 체중 감소 환자에서 당뇨병을 향상 시킬 수 있습니다., 심한 당뇨병을 가진 사람들은 비만 수술에서 가장 혜택. Bariatric 수술은 체중 감량과 개선 또는 타입-2 당뇨병2,3,심지어 오랜 질병을 가진사람들4에안전하고 효과적인 것으로 입증되었습니다. 현재 금표준 Roux-en-Y 위 우회(RYGB) 수술과 같은 대사 성 비만 절차는 포도당 항상성에 신속하고 지속적인 개선을 유도하는 동시에 당뇨병 약물의 필요성을감소시키는 5,6,7.
RYGB 후, 포도당 항상성 개선이 급속히 발생하고 체중감소8과무관하다. 두 가지 주요 이론은 신진 대사 수술 후 발생하는 당뇨병 면제와 관련된 대사 변화를 설명하기 위해 제안되었습니다. 첫째, 힌구트 가설은 우회 후, 소화되지 않은 영양소의 높은 농도가 GLP-1과 같은 호르몬의 방출을 향상시키는 황반장에 도달한다고 가정합니다. 다른 한편으로는, 전구 가설은 근위 장을 우회하는 것이 항인크레틴 호르몬의 분비를 감소시킨다는 것을 건의합니다. 이 두 가지 효과 모두 포도 당 물질 대사의 초기 개선으로 이어질 수있습니다 9.
동물 모델은 이러한 메커니즘을 연구할 수 있는 강력한 도구가 될 수 있습니다. 그러나 마우스 또는 쥐 모델을 활용하는 데 큰 장벽은 이러한 절차를 수행하는 데 기술적 어려움입니다. 대부분의 연구는 마우스 또는 쥐 모델10,11,12에 의존했다. 마우스 모델은 마우스 위가 스테이플러장치(11)를사용하기에는 너무 작기 때문에 어려웠으며 사망률은 17~52%13에 이르는 매우 높다. 쥐에서, 몇몇 프로토콜은 위12,14를분할하기 전에 위 혈관의 복잡한 결찰 때문에 기술적으로 수행하기 가 어렵습니다. 다른 모델은 스테이플러를 사용하여 위를 분할하지만 포스트 RYGB 인간 해부학(11)과일치하지 않는 큰 파우치를 둡니다. 이 모델에서는 쥐 모델의 선형 스테이플러를 사용하여 RYGB를 수행하는 방법에 대한 자세한 지침을 제공하여 인간의 해부학에 더 부합하는 위 주머니를 더 많이 제공합니다. 전반적으로, 이 절차는 우수한 생존율 및 신진 대사 결과와 연관되었습니다.

<table><tbody><tr><td>2-0 실크 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>K533</td><td></td></tr><tr><td>3-0 Vicryl 봉합사</td><td>Ethicon</td><td>J219H</td><td></td></tr><tr><td>4% 이소플루란</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>5% 포도당 및 0.9% 염화나트륨 용액 - 1000 mL</td><td>Baxter</td><td>2B1064</td><td></td></tr><tr><td>50 mL 원추형 원심분리기 튜브</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>6-0 프롤렌 봉합사</td><td>Ethicon</td><td>8805H</td><td></td></tr><tr><td>마취기</td><td>N/A</td><td></td><td></td></tr><tr><td>해당 없음 동물 헤어 면도기</td><td>N/A</td><td></td><td></td></tr><tr><td>해당 없음 베타딘 솔루션</td><td>N/A</td> N<td>/</td>A <td></td></tr><tr><td>잠금 장치가 있는 Castrojievo 바늘 홀더 14cm(부드러운 곡선)</td><td>세계 정밀 기기</td><td></td> 503258 <td></td></tr><tr><td>ECHELON FLEX 관절 내시경 선형 절단기</td><td>Ethicon</td><td>EC45A</td><td></td></tr><tr><td>이코노미 핀셋 #4</td><td>세계 정밀 기기</td><td>501978</td><td></td></tr><tr><td>ENDOPATH ETS 굴절식 선형 절단기 45mm 재장전</td><td>Ethicon</td><td>6R45B</td><td></td></tr><tr><td>원적외선 온난화 패드 컨트롤러 온난화 패드(15.2cm W x 20.3cm L), 패드 온도 프로브 및 10개의 일회용, 비멸균 슬리브 보호대</td><td>Kent Scientific</td><td>RT-0515</td><td></td></tr><tr><td>대형 쥐 엘리자베스 칼라</td><td>Kent Scientific</td><td>EC404VL-10</td><td></td></tr><tr><td>액체 다이어트 급식 튜브(150mL)</td><td>Bio-Serv</td><td>9007</td><td></td></tr><tr><td>액상 다이어트 급식 튜브 홀더(짧게 조절 가능)</td><td>Bio-Serv</td><td>9015</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 모기 집게</td><td>세계 정밀 기기</td><td>500452</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>세계 정밀 기기</td><td>503365</td><td></td></tr><tr><td>마우스 다이어트, 고지방 칼로리(60%), 소프트 펠릿</td><td>Bio-Serv</td><td>S3282</td><td></td></tr><tr><td>No. 11 블레이드 및 메스 핸들</td><td>해당 없음</td><td></td><td></td></tr><tr><td>OPMI Vario 수술 현미경</td><td>ZEISS</td><td>S88</td><td></td></tr><tr><td>이중 바닥 그리드</td><td>Tecniplast</td><td>GM500150 이중 바닥 그리드</td><td></td></tr><tr><td>설치류 액체 다이어트, Lieber-DeCarli '82, 제어, 4리터/가방</td><td>Bio-Serv</td><td>F1259</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨 관개 0.9% 용액 - 500mL</td><td>Baxter</td><td>JF7633</td><td></td></tr><tr><td>멸균 면봉</td><td>N/A</td> N<td>/A</td><td></td></tr><tr><td>멸균 드레이프</td><td>N/A</td> N<td>/</td>A <td></td></tr><tr><td>멸균 타월</td><td>N/A</td> N<td>/</td>A <td></td></tr><tr><td>열 소추기 장치</td><td>World Precision Instruments</td><td>501293</td><td></td></tr></tbody></table>

선형 스테이플러를 사용하여 쥐의 roux-en-y 위 우회에 대한 프로토콜

A Protocol for Roux-en-Y Gastric Bypass in Rats using Linear Staplers

Roux-en-Y 위 우회 (RYGB)는 일반적으로 가혹한 비만 및 타입-2 당뇨병의 처리를 위해 수행됩니다. 그러나, 체중 감량과 신진 대사 변화의 메커니즘은 잘 이해 되지 않습니다. 여러 가지 요인은 역할을 할 것으로 생각된다, 감소 칼로리 섭취를 포함, 영양 흡수 감소, 포만증 증가, 포만 촉진 호르몬의 방출, 담즙 산 대사의 변화, 창 자 microbiota에 변경.
쥐 RYGB 모델은 이러한 메커니즘을 연구하기에 이상적인 프레임워크를 제공합니다. 마우스 모델에 대한 이전 작업은 17에서 52 %에 이르는 높은 사망률을 보였으며 입양을 제한했습니다. 쥐 모델은 외과 자극에 더 많은 생리적 예비를 보여주고 외과 스테이플러의 사용을 허용하기 때문에 기술적으로 채택하기가 더 쉽습니다. 그러나 외과 용 스테이플러의 한 가지 과제는 종종 인간에서 RYGB를 대표하지 않는 큰 위 주머니를 남긴다는 것입니다. 
이 프로토콜에서, 우리는 외과 스테이플러를 사용하여 작은 위 주머니귀착되는 쥐에 있는 RYGB 프로토콜을 제출합니다. 쥐의 위위를 제거하는 두 개의 스테이플러 화재를 활용하여 일반적인 인간 RYGB에 따라 그와 유사한 작은 위 주머니를 얻습니다. 외과 스테이플링은 또한 날카로운 분열보다 더 나은 hemostasis결과. 또한, 쥐의 선위는 어떤 땀샘을 포함하지 않으며 그것의 제거는 RYGB의 생리학을 변경해서는 안됩니다.
RYGB 코호트의 체중 감소 와 대사 변화는 14 주에 상당히 낮은 포도당 내성을 가진 가짜 코호트에 비해 중요했다. 또한, 이 프로토콜은 RYGB 이후 88.9%의 우수한 생존률을 가지고 있습니다. 이 프로토콜에 설명된 기술은 이전 미세 수술 경험 없이 획득할 수 있습니다. 일단 마스터되면,이 절차는 RYGB의 메커니즘과 효과를 연구하기위한 재현 가능한 도구를 제공합니다.

동물 및 주택 36 명의 수컷 Wistar 쥐는 쌍으로 보관되었고 6 주부터 60 % 멸균 설치류 고지방 식단을 공급받았습니다(그림 2). 16주에 RYGB 또는 가짜 수술을 받았습니다. 첫 번째 수술 후 주 후, 쥐는 높은 지방 다이어트에 재개 되었다. 쥐의 절반은 수술 후 2 주에 안락사되었고 나머지 절반은 수술 후 14 주에 안락사되었습니다.
사망률 전반적으로, 33 (91.7%) 쥐는 계획된 연구 종점에 살아남았습니다. 초기 안락사를 겪고있는 모든 쥐는 수의사에 의해 부검을 받았다. 24시간 이내에 두 마리의 쥐가 안락사되었습니다. 한 RYGB는 포부 폐렴염을 가지고 있었고, 한 개의 가짜 쥐는 구제 할 수없는 창자와 근막 염을 했다. 또 다른 RYGB 쥐는 위사 절제에서 마취 누출로 인해 2 주에 안락사되었다. 전반적으로, RYGB 쥐의 88.9%...

Roux-en-Y 위 우회 (RYGB)는 비만과 당뇨병을 치료하기 위해 수행됩니다. 그러나, RYGB의 효능의 기본 메커니즘은 완전히 이해되지 않습니다, 연구는 동물 모델에서 높은 사망률로 이어지는 기술적 인 어려움에 의해 제한됩니다. 이 문서에서는 성공률이 높은 쥐에서 RYGB를 수행하는 방법에 대한 지침을 제공합니다.

선형 스테이플러를 사용하여 쥐의 Roux-en-Y 위 우회에 대한 프로토콜

Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) is commonly performed for the treatment of severe obesity and type 2 diabetes. However, the mechanism of weight loss and ...

Roux-en-Y 위 우회는 가혹한 비만 및 타입-2 당뇨병의 처리를 위한 일반적으로 수행되는 절차입니다. 그러나, 체중 감량및 신진 대사 개선에 기여 하는 정확한 메커니즘 잘 이해 되지 않습니다 및 여러 요인 역할을 생각. 쥐 Roux-en-Y 위 우회 모델은 이러한 메커니즘을 연구하는 훌륭한 프레임 워크를 제공합니다. 프로토콜.동물의 준비 와 수술 설정. 포비단 요오드 용액으로 복부를 청소하십시오. 용액이 건조하고 멸균 장갑으로 변경되도록 합니다.복부를 드러내기 위해 커튼에 개구부로 쥐를 휘감습니다. 악기, 봉합사, 면봉 및 10 밀리리터 주사기는 시술 중에 쉽게 접근 할 수있는 위치에 배치됩니다. 중간 복강경.메스를 사용하여 복부의 상부 미드라인에서 3센티미터 절개를 만들며, 시포이드 공정 바로 아래에서 랜드마크로 만듭니다. 가위를 사용하여 근막과 복막을 나누어 리나 알바에 미드라인을 유지하여 직사각형 복부출혈을 줄입니다. 출혈이 있는 경우 열 또는 전기 카우터리로 제어하십시오.위장을 동원. 두 개의 젖은 면 봉면을 사용하여, 무딘 해부 위 부착. 조밀한 접착력이 발생할 때 열 소감을 사용하여 위 부착물을 나누어 위장소작을 피하기 위해 주의를 기울입니다.위장과 부속품 간 엽 사이의 인대를 급격히 나누어 위장 동원으로 간 파열의 위험을 줄입니다. 더 큰 혈관, 특히 짧은 위 동맥에 대 한, 6-0 폴리 프로필렌을 사용 하 여 리게이트. 식도의 오른쪽 단면에 창을 만들지만 왼쪽 위 동맥에 근위.면 봉봉이 이 지역에 후방으로 도달할 수 있도록 하십시오. 복부 밖에서 외장화 될 수있을 때 위장이 적절하게 동원됩니다. jejunem을 식별하고 나눕니다.횡단 메소콜론에 부착된 것을 관찰할 때까지 제주눔을 근교로 따라트레츠의 인대를 식별한다. 7센티미터를 측정하고, 막질 혈관 사이의 위치를 식별하고, 대장을 마이크로 가위로 나눕니다. 창자를 나눌 때 페이어의 패치를 피하십시오.장간이 아닌 창자를 나눕니다. 오염을 최소화하기 위해 창자를 나누기 전에 깨끗하고 식염수에 젖은 스폰지를 놓습니다. 작은 교차 선은 일반적으로 작은 창자의 경계에 있는 막질에 존재하고 이것은 출혈을 피하기 위하여 소꾼으로 분할됩니다.장간 을 1 센티미터 간질 베이스로 계속 나눕니다. 근동과 단위 jejunem을 식별합니다. 쥐의 오른쪽에 젖은 거즈 아래에 근위 제주넘을 놓고 쥐의 왼쪽에 해명 한 제주넘을 놓는다.위장을 스테이플링합니다. 45mm 선형 커팅 스테이플러를 삽입하여 서복의 흰색 선에 3.5mm 의 스테이플 높이를 사용하여 더 작은 파우치를 만듭니다. 스테이플러를 발사하기 전에 10초 기다립니다.헤모스아제(hemostasis)를 보장하기 위해 스테이플 라인에 거즈를 사용하여 압력을 1분 동안 배치합니다. hemostasis 혼자 압력으로 달성 되지 않는 경우, 스테이플 라인을 따라 출혈 6-0 폴리 프로필렌 그림-8 봉합사를 사용 하 여 오버셀. 두 번째 스테이플 화재는 이전에 만든 창으로 위장을 가로 질러 수행됩니다.스테이플러를 발사하기 전에 10초 기다립니다. 기혈과 오버세잉이 필요할 수 있도록 스테이플 라인을 따라 압력이 유지됩니다. 위장제 절제술. 위장을 스테이플링 한 직후에 위장이 만들어집니다.이에 있는 지연은 위가 두 번째 위 주식 후에 불연속이기 때문에 위 팽팽하고 포부를 일으키는 원인이 될 수 있습니다. 11 개의 블레이드 메스를 사용하여 말단 파우치에서 위장을 만듭니다. 위 절제술을 통해 위 내용을 표현합니다.이것은 위 팽팽과 포부를 방지하기 위하여 중요합니다. 마이크로 가위를 사용하여 이 위장을 약 5mm로 길게 합니다. 위 절제술을 통해 위 내용을 표현합니다.위절제술에 인접한 제주눔의 단부한 끝을 동원하여 간질이 뒤틀리지 않도록 배치한다. 아나스토모증을 봉합하는 동안, 식염수에 흠뻑 젖은 거즈로 덮고 식염수를 정기적으로 다시 바르는 것으로 창자를 촉촉하게 유지하십시오. 6-0 폴리디옥사네 또는 폴리프로필렌 봉합사를 사용하여, 아나스토모증의 열등한 마진에 체류 봉합사를 놓고 스냅을 사용하여 부드럽게 철회하십시오.세 매듭으로 넥타이. 아나스토모증의 우수한 여백에 스테이 봉합사를 놓고 스냅을 사용하여 부드럽게 후퇴하십시오. 6 노트와 넥타이.아나스토모증의 전방 측면을 봉합하여 폭 1mm, 1밀리미터를 따로 따로 물고 뒤쪽을 복용하지 않도록 주의를 기울입니다. 봉합사가 열등한 체류 봉합사에 도달하면 6 노트를 추가로 묶어 두십시오. 전방측이 완료되면 창자와 위를 뒤집어 백질 결함을 통해 열등한 체류 봉합사를 통과합니다.스냅을 다시 바르고 열등하게 철회합니다. 해부학의 후방 측의 경우 전체 두께를 배치하고 6-0 봉합사를 1mm 너비로 중단하고 뒤쪽을 복용하지 않도록주의를 기울여 1 밀리미터 간격을 두드냅니다. 이들은 각각 여섯 매듭으로 묶여있다.해부학의 전방 측면은 연속적인 방식으로 봉합되고 후방 측면은 중단된 방식으로 수행됩니다. 이것은 둘레 연속 폐쇄와 관련된 잠재적인 협착 또는 협착을 방지합니다. 해부학을 가로질러 발광 내용을 부드럽게 밀어 누출을 확인하십시오.누출이 있는 영역이 있는 경우 중단된 봉합사로 조심스럽게 보강하십시오. 여분의 봉합사로 보강 할 때 뒤쪽 벽을 복용하지 않도록주의하십시오. 제주노제노절제술. 위체다노절제술에서 20cm를 측정합니다.11블레이드 메스를 사용하여 시간 제분에 제주노토미를 생성합니다. 페이어의 패치를 통해 제주를 하지 마십시오. 이중성 사지와 동일한 크기인 마이크로 가위를 사용하여 이 제주노토미제를 확장합니다.면 면봉이 내부에 맞는지 확인하십시오. 간질의 비틀림이 없는 이중성 사지를 놓습니다. 상급및 열등한 면에 6-0 체류 봉합사를 가진 위드제주절제술과 유사하게 해부학을 수행한다.전방 측은 연속 봉합사로 수행되며 후방 측은 중단된 봉합사로 수행됩니다. 이 해부학 동안 창자를 식염수로 촉촉하게 유지하십시오. 해부학을 통해 발광 내용을 부드럽게 밀어 누설을 확인하십시오.누출이 있는 영역이 있는 경우 중단된 봉합사로 보강하십시오. 창자와 위장을 재배치. 파우치, 잔재 위장 또는 간의 비틀림이 없는지 확인하십시오.간의 왼쪽 엽이 위장에 앞쪽이고 압축 간 허혈을 일으킬 수 있으므로 파우치 뒤에 갇히지 않도록하십시오. 복부 폐쇄. 3-0 폴리글락틴으로 근막을 연속적인 방식으로 닫습니다.3-0 폴리디옥사네도 사용될 수 있다. 2-0 실크로 피부를 연속적인 방식으로 닫습니다. 결과. 모든 코호트는 수술 전 상당한 체중 증가를 했다.Roux-en-Y 위 우회를 겪고 있는 쥐는 가짜 수술을 받은 쥐에 비해 고지방 식단에 수술 후 체중이 낮았습니다. 고지방 식단에 수술 후 체중 변화는 수술 후 모든 시점에서 통계적으로 유의했다. 가짜 수술에 비해 복막 내성 포도당 내성 검사 중 곡선 아래 의 하부 영역으로 Roux-en-Y 위 우회 후 포도당 내성이 개선되었습니다. 결론.이 절차는 쥐 모델의 선형 스테이플러를 사용하여 루-엔-Y 위 우회를 수행하여 위 주머니가 인체 해부학에 더 잘 어울려 수행됩니다. 전반적으로, 이 절차는 우수한 생존율및 중요한 체중 감소 및 신진 대사 효력과 연관되었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

위장 연결 쥐 모델을 이용하여 많은 연구가 최근 Roux-EN-Y 위장 작업의 기본 생리 메커니즘을 밝히기 위해 실시되었습니다. 이 문서는 입증이 실험 도구의 장점과 한계를 이해하기 위해 우리의 출판 위장 바이패스 쥐 모델의 기술적 및 실험적 세부 사항을 논의하는 것을 목표로하고있다.

쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이패스 수술

이 비디오는 비만 수술 - Roux-en-Y 절차에 대해 설명합니다. 이것은 장의 중간 부분인 제주눔(jejunum)을 잘라 두 개의 장 팔다리를 생성하는 것을 포함한다. 담도사지(biliary limb)는 기존 장 루프에 부착되고 소화 사지(alimentary limb)는 위에 부착되어 위 우회를 만듭니다. 여기에 생성된 위 우회로는 영양소 흡수를 줄이고 체중을 효율적으로 줄이는 데 도움이 됩니다.

Roux-en-Y 위 우회 시술: 쥐 모델에서 위 절제술을 위한 비만 수술 절차

비만 수술은 체중을 줄이고 병적 비만과 자주 관련된 치명적인 대사 합병증(당뇨병, 비만, 이상지질혈증)을 줄이는 가장 효율적인 방법입니다. 비만 수술의 마우스 모델은 당뇨병, 고혈압 및 이상지질혈증에 대한 이러한 수술의 유익한 효과 뒤에 있는 분자 메커니즘을 해독하기 위한 고유한 자산입니다.

소매 절제술의 기술 및 쥐에서 Roux-EN-Y 위장 바이 패스를 수정

이 프로토콜은 쥐에 한 문 합 위 우회 (OAGB)의 성능입니다. 연산자는 길고 관 붙인 위 주머니 뒤에 손으로 수 놓은 문 합을 수행 합니다. 이 모델에 대 한 연산자 재현 biliopancreatic 인간;에 일반적인 다리 사이 동일한 비율 따라서, biliopancreatic 사지 35 cm를 측정 한다.

쥐에서 한 문 합 위 우회 (OAGB)

단일 문합 십이지장-회장 우회술(SADI-S)은 중요한 대사 효과가 있는 새로운 비만 절차입니다. 이 기사에서는 마우스에서 SADI-S의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 제시합니다.

생쥐의 단일 문합 십이지장-회장 우회술(Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice)

구조화 된 프로토콜은 셀룰러 유전체 분광법 (CDS)를 사용 특발성 측만증의 예후를 예측하는 기능 테스트와 같은 세포 기반 분석을 위해 제시된다. 분석은 신선하거나 냉동 된 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC를)로 수행 될 수 있고 절차는 4 일 안에 완료된다.

세포 유전 분광법을 사용하여 특발성 척추 측만증의 예후 예측을위한 세포 기반 분석 프로토콜

최근에 우리는 땀 모니터링을 위한 소형 무선 장치를 개발했습니다. 이 기사에서는 교감신경 활동 테스트의 예와 함께 땀 모니터링을 위해 장치를 사용하는 방법에 대한 자세한 프로토콜을 제시합니다.

소설을 사용하여 땀 모니터링에 대한 자세한 프로토콜, 소형, 무선 장치

이 비디오는 쥐의 정맥 삽입 수술 후 근육 내막 증식증의 발달을 연구하는 모델을 보여줍니다.

정맥 삽입 위치 모델 : 바이 패스 이식 개통을 연구하기위한 적절한 모델

이 문서에서는 마우스에 심폐 바이패스를 수행 하는 방법을 설명 합니다. 이 새로운 모델은 장기 손상에 관여 하는 분자 메커니즘의 조사를 촉진할 것 이다.

마우스 모델에서 심폐 바이패스: 새로운 접근

임상 선형 가속기는 암세포에 대한 광범위한 투여량 비율의 생물학적 효과를 결정하는 데 사용될 수 있다. 우리는 세포 기지를 둔 계산서를 위한 선형 가속기를 설치하는 방법 토론하고 암 줄기 같이 세포를 위한 세포 기지를 둔 세포 같이 세포는 부착한 문화로 성장한 현탁액 및 세포주에서 종양구로 성장했습니다.

체외 방사선 생물학 실험을 수행하기위한 선형 가속기 의 사용

배우세요 선형 스테이플러를 사용한 쥐 Roux-en-Y 위 우회 수술 프로토콜. 작은 위 주머니를 만들어 인간 해부학을 모방하고, 체중 감소 및 대사 개선 메커니즘을 연구하는 비만 수술 동물 모델을 구축합니다. 생존율 88.9%를 달성합니다.

선형 스테이플러를 사용하여 쥐의 Roux-en-Y 위 우회에 대한 프로토콜

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