Name: 우울증의 동물 모델 - 만성 절망 모델 (CDM) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: 배우세요 만성 절망 모델을 이용하여 생쥐에서 우울증 유사 상태를 유도하고 기분 장애의 생리 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 모델은 항우울제 효능 평가에 활용됩니다.

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이 연구는 University Clinic Freiburg, Department of Psychiatry and Psychotherapy 및 Berta-Ottenstein Program for Clinician Scientists (SV)의 내부 기금으로 자금을 지원했습니다. TS는 Medical Research Foundation (FRM) (AJE201912009450)과 University of Strasbourg Institute of Advance Studies (USIAS) (2020-035) 및 Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), France의 보조금으로 자금을 지원합니다.

모든 실험은 유럽 지침 (EU 2010/63) 및 독일 동물 보호법 (TierSchG), FELASA (www.felasa.eu/guidelines.php), 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 국가 동물 복지 단체 GV-SOLAS (www.gv-solas.de/index.html) 가이드에 따라 수행되었으며 프라이부르크 대학의 동물 복지위원회와 Comite d'Ethique en Matiere d'Experimentation Animale de Strasbourg (CREMEAS, CEEA35) 및 지방 당국. C57Bl6N 야생형 마우스의 성별 모두 10-14주(출생 후 70-98일, PND)에 야생형(WT) 지시 실험을 사용하였다. 스트레스 회복성 라인으로서, 전뇌 뉴런 CaMKII 프로모터 하에서 아데노신 A1 수용체의 발현이 강화된 트랜스제닉 마우스 라인9,15를 사용하였다. 실험 후, 마우스를 자궁경부 탈구에 의해 희생시켰다.
1. 준비
<ol><li>철저한 실험 계획을 포함하여 동물 연구 면허를 취득하십시오.</li>
	<li>도착: 도착시 동물 시설에서 동물을 키워 CDM을 수행하십시오. 동물을 외부 공급 업체로부터 구입 한 경우 새로운 환경에 적응하기 위해 최소 2 주 동안 허용하십시오.</li>
	<li>주거 : 동물을 수용하려면 추가 스트레스를 피하기 위해 새장이 최대 수의 동물로 채워지지 않도록하십시오. 주택 조건이 마우스 하우징의 국제 권장 사항 (자세한 내용은 see22)과 일치하고 항상 지속적으로 유지되도록하십시오. 참고 : 가장 중요한 표준 하우징 조건에는 시간당 25-120 회의 공기 변화, 12 시간의 밝은 어둠주기, 가능한 한 안정적인 온도 (20-24 ° C 사이에서 적어도 일정), 가능한 한 안정적인 습도 (적어도 45 % -65 % 사이), g아 먹는 재료 및 피난처가 있으며 개별 주택이 없는 개별 환기 케이지가 포함됩니다.</li>
	<li>시점: 하루 중 동시에 모든 실험을 수행합니다. 참고 : CDM에 대한 주간 시간의 영향을 확인하기위한 직접적인 평가는 이루어지지 않았지만 우울한 상태를 평가하는 대부분의 행동 테스트는 하루 중 시간에 따라 변화를 보여 주며23,24,25 낮에도 CDM에 영향을 줄 가능성이 큽니다.</li>
	<li>중첩 재료: 중첩 재료를 최소한으로 줄입니다. 케이지에 달리는 바퀴 등이 없는지 확인하십시오. 참고: 풍부한 환경은 우울한 상태의 유도를 방지합니다.</li>
	<li>그룹 구성: 동물들이 전체 실험 동안 동일한 그룹에 남아있도록 허용한다. 암컷 쥐를 다른 깔짚에서도 함께 그룹화하십시오. 수컷 쥐를 쓰레기 수컷 동물과 함께 그룹화하십시오. 다가오는 공격성, 특히 남성의 공격으로 인해 물기와 이발이 문제가 될 수 있으므로 그룹 구성에 특히 중점을 둡니다. 박탈이 주요 추가 스트레스 요인이기 때문에 단일 주택을 피하십시오.</li>
	<li>동물: 특정 차이가 관찰되었음에도 불구하고 다른 마우스 균주를 사용합니다.9,10. 빈번하게 사용되는 마우스 균주는 쌍을 이룬 통계 분석을 수행하기 위해 C57Bl6N. 라벨 마우스이다(단계 3.2.4 참조).</li>
	<li>동물 섹스 : 남성과 여성 마우스를 똑같이 사용하십시오.</li>
	<li>동물의 나이: 동물이 10주(70PND) 이상 되었는지 확인하십시오. 수영으로 인한 피로로 인해 어린 동물을 사용하지 마십시오.</li>
	<li>장비: 최소 2L의 용량, 24-26cm의 직경 및 30cm의 최소 높이를 가진 투명한 유리 실린더/비커를 사용하십시오. 추가 요구 사항에는 수온, 종이 타월, 적색 조명 가열 램프 / 난방 매트 또는 난방 소스, 타이머, 스톱워치, 조용한 환경을 확인하는 온도계가 포함됩니다. 오프라인 분석 및 문서화를 위해 수영 세션을 비디오 테이프로 녹화하십시오. 날짜와 시간이 개별 동물의 식별 코드 번호와 함께 테이프/파일에 계속 표시되는지 확인하십시오. 나중에 분석하고 추가 참조를 위해 파일을 저장합니다. 분석을 용이하게하기 위해 위가 아닌 유리 실린더의 측면에서 필름.</li>
</ol>2. 유도 단계
<ol><li>시작하기 전에<ol>
<li>물거나 이발사의 징후를 포함하여 이상에 대해 동물을 시각적으로 관찰하십시오. 동물이 최소한의 부상을 보이는 경우 실험 시리즈에서 전체 케이지를 제외하십시오. 실험 중에 부상이 악화되고 스트레스의 영향으로 마우스가 더 공격적으로 변함에 따라 수의사가 언제든지 이용할 수 있는지 확인하십시오.</li>
		<li>실험을 시작하기 전에 각 동물에 대한 체중을 구하십시오. 자주 관찰되는 체중 감소가 초기 체중의 20 %를 초과하지 않도록하십시오. 체중 감량이 20 % 이상인 동물을 배제하고 높은 고통으로 인해 즉시 안락사하십시오.</li>
		<li>비커 또는 실린더를 실온에서 물 (22-23 °C)에서 바닥에서 최소 20cm의 높이로 채우고 물 표면과 용기의 상부 경계 사이에 최소 10cm를 남겨 둡니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>공연<ol>
<li>동물을 부드럽게 물 속으로 옮기십시오. 수영 단계에서 익사를 방지하기 위해 동물을 지속적으로 관찰하십시오. 동물이 실험자를 볼 수없는 위치에서 관찰하십시오 (예 : 옆집 방에서 비디오 관찰).</li>
		<li>실험 시작 부분에 크로노미터를 설정합니다. 꼬리를 잡기 만하면 10 분 후에 동물들을 물에서 꺼내십시오. 종이 타월로 부드럽게 말리고 가열 조명 또는 난방 매트 아래에 두십시오.</li>
		<li>한 번에 하나의 동물만 평가합니다. 동물들이 서로를 볼 수 없도록 하십시오 (예를 들어, 방 분배기에 의한 실험 설정에서 하우징 케이지를 분리하십시오).</li>
		<li>5 일 연속 매일 10 분 동안 강제 수영 세션을 수행하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>마무리<ol>
<li>다섯 번의 수영 세션 후에 동물을 집 새장으로 옮기고 적어도 2 일 동안 휴식을 취하십시오. 그 후 특정 치료 중재를 시작하십시오.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 항우울 치료의 평가
<ol><li>시간 코스<ol>
<li>CDM을 사용한 급성 및 아만성 치료법을 평가하십시오. 과학적 질문에 따라 유도 단계와 판독 단계 사이의 휴식 기간을 조정하십시오.</li>
		<li>케타민의 급성 및 급속 작용 효능을 평가하려면 CDM의 유도 단계 후 짧은 휴식 기간 (며칠)을 선택하십시오. 치료 (즉, 복강내 주사)를 적용한 다음, 평가 (추가 수영 세션 또는 다른 평가 방법)를 직후에 수행한다.</li>
		<li>아만성 치료의 효과를 평가하려면 치료 기간을 최대 4 주까지 늘리십시오 (더 긴 치료 기간 동안 사용할 수있는 데이터가 없습니다). 예를 들어, 유도 단계 후 4주 동안 동물에게 이미프라민으로 경구 처리를 주고 그 후에 평가한다.</li>
		<li>치료 기간이 끝난 직후, 예를 들어, 다음날 우울한 상태를 평가하기 시작하십시오. 제어 및 실험 조건에 대해 항상 동일한 기간을 선택하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>부동성 시간<ol><li>개념 증명<ol>
<li>부동성 시간을 판독 방법으로 사용하려면 유도 단계 및 시험일의 매일을 평가하여 개념 증명을 제공합니다( 그림 1 참조). 추가 실험 시리즈의 경우 평가를 1일, 5일차 및 시험일로 줄입니다( 그림 1C 참조).</li>
			<li>각 실험을 비디오 테이프로 녹화합니다. 실험 조건에 눈이 먼 두 명의 훈련된 관찰자가 독립적으로 분석을 수행할 수 있도록 허용합니다. 비디오 분석을 통해 실험자는 다른 방의 동작을 관찰 할 수 있으므로 테스트와의 간섭을 최소화 할 수 있습니다 (예 : 보충 자료의 비디오 파일 참조).</li>
		</ol></li>
		<li>조건 : 수영 테스트 중에 세 가지 행동 조건을 관찰하고 확인하십시오 : 고군분투, 수영 및 부동성. 대부분의 연구자들은 부동성에 중점을 둡니다. 고군분투와 수영 사이의 추가 차별화는 거의 유용하지 않으며 분석의 복잡성과 지속 시간을 극적으로 증가시킵니다.<ol>
<li>고군분투 : 동물은 위협적인 상황에서 적극적으로 탈출하려고합니다. 이것은 모든 팔다리의 움직임과 벽을 향한 머리를 가진 실린더의 측면을 발로 밟는 것을 포함합니다. 물 표면은 전형적으로 약간 난류이다.</li>
			<li>수영 : 동물은 적어도 뒷발을 움직이고 물 위를 가로 질러 거리를 여행합니다. 그것은 적극적으로 탈출구를 찾고 있지만 선박의 유리 벽을 극복하려고하지는 않습니다. 수영은 물 표면 위의 발을 들어 올리는 것을 포함하지 않으며, 몸은 일반적으로 실린더의 벽과 평행하게 향합니다. 이 상태에서 동물들은 자주 돌아 다니거나 원을 그리며 움직입니다.</li>
			<li>부동성 : 동물은 얼어 붙은 자세로 가만히 있고 전혀 움직이지 않거나 꼬리 또는 앞발을 움직여 머리를 물 표면 위로 유지합니다. 수동 부동을 제외하고는 거리가 활발히 이동하지 않으며 앞발의 지시 된 움직임이 관찰되지 않습니다.</li>
		</ol></li>
		<li>추적<ol>
<li>오프라인 비디오 녹화를 사용하여 평가를 수행합니다. 두 명의 독립적이고 경험이 풍부한 심사관이 맹검 등급을 사용하고 두 등급 간의 평균을 계산하십시오.</li>
			<li>두 채점자의 결과가 이전에 결정된 범위 이상으로 다른 경우 등급을 반복합니다. 쥐를 지속적으로 관찰하면 고군분투, 수영 및 부동성 사이에서 다른 조건이 자주 변합니다.</li>
			<li>스톱워치를 사용하여 마우스가 물 속에 머무르는 10 분 동안 집중된 단계 (일반적으로 부동성)에서 보낸 총 시간을 측정하십시오. 진행중인 시간 측정을 변경하기 전에 약 2 초의 짧은 대기 시간을 고려하십시오 (예를 들어, 동물이 부동성으로 20 초 동안 남아 있고 1 초 미만 동안 한 번만 움직이고 다른 10 초 동안 부동성으로 돌아 오는 경우, 총 부동성 시간은 30 초입니다).</li>
		</ol></li>
		<li>통계: 상대적으로 높은 개인 간 표준 편차 (아마도 케이지에서 수영 테스트로의 계층 구조 의존 행동의 전송으로 인해 발생)로 인해 동물에게 페어링 된 (페어링되지 않은) 파라 메트릭 테스트를 수행 할 동물을 표시하거나 레이블을 지정합니다. 정규성 분포를 평가하고 특정 질문에 따라 사후 t-검정 또는 쌍을 이룬 t-검정을 사용하여 분산 분석(ANOVA)을 수행하여 서로 다른 그룹을 비교합니다. 부동성 시간(들)의 절대값 또는 정규화된 값으로 분석을 수행합니다.<ol>
<li>절대값: 1일째부터 5일째까지의 부동성 시간 및 시험일에 대한 평균 값을 SEM± 제공합니다( 그림 1A 참조). 1일과 5일째에 대한 평균 값을 비교하고, 바람직하게는 쌍을 이룬 t-검정을 사용하여 우울한 상태의 유도를 검증한다. 1일과 5일 사이에 유의한 차이가 있는 경우 5일의 평균값을 시험일의 평균 결과와 비교합니다. 한 실험에서 전형적인 그룹 크기가 6 ~ 10 마리의 동물인지 확인하고 야생형 동물에서 기준선과 유도 후 부동성 시간 사이에 상당한 차이가 있음을 기대하십시오. 기준선 차이로 인해 절대값이 사용되는 경우 쌍을 이루지 않은 t-검정과 서로 다른 그룹을 비교하는 것은 어렵습니다. 따라서 정규화된 값을 사용하십시오.</li>
			<li>상대적/정규화된 값: 정규화를 통한 다양한 치료 효과를 5일째의 개별 결과와 비교한 다음 이 값을 5일의 백분율로 표현 합니다(그림 1B 참조).</li>
		</ol></li>
		<li>제어 실험 참고: 수영 퍼포먼스는 운동과 관련이 있을 수 있습니다. 과잉 운동을 일으키는 물질은 위양성 결과 (즉, 부동성 시간의 감소)를 유발할 수 있습니다. 진정제뿐만 아니라 인위적으로 부동성 시간을 증가시킬 수 있습니다.<ol>
<li>수영 분석을 수행하기 전에 알려지지 않은 물질에 대한 운동 변화를 평가하십시오. 최소 10분 동안 별도의 동물 그룹에서 OFT(Open Field Test)를 사용합니다.</li>
			<li>CDM에서와 동일한 관찰 시간(10분)을 선택하여 높은 타당성을 갖는 부동성 시간의 측정을 통해 CDM 판독에 영향을 미칠 수 있는 시험된 화합물의 비특이적 하이퍼기관차 효과를 검출한다.</li>
			<li>상당한 하이퍼 기관차 효과의 경우, 항우울 효능을 평가하기 위해 수영 세션을 평가하지 말고 다른 판독 방법 (예 : 자당 선호도, 꼬리 서스펜션 테스트 등)을 사용하십시오.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>4. 우울한 상태의 발달에 대한 평가
<ol><li>우울 장애의 발달을 평가하기 위해, 유도 단계의 매일을 평가하여 부동성 시간을 측정하십시오. 참고: 이 경우, 매일 사이의 부동성 시간의 경미한 증가는 회복력을 나타내는 반면, 치료되지 않은 동물이나 야생형 동물에 비해 더 강하고 더 일찍 증가하면 스트레스로 인한 절망에 대한 취약성이 강화됩니다. 수영 이벤트 전에 마우스를 치료함으로써, 행동 절망의 발달에 관한 예방 개입 또는 트랜스제닉 마우스 라인을 평가할 수 있었다.</li>
</ol>

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모든 저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.

CDM 모델은 새로운 중재의 항우울 효능을 테스트하기위한 적절하고 확립 된 모델을 나타내며 우울증의 병리 생리학을 밝히기 위해 분자 또는 전기 생리학 실험을위한 연장 된 시간 창을 엽니 다. 특히 우울증과 같은 상태를 평가하기 위해 다른 테스트와 결합 할 때 CDM은 높은 얼굴 및 개념 타당성을 가지고 있습니다. 그것은 유도를위한 아만성 스트레스와 획득 된 무력감을 결합하고 오래 지속되는 우울한 상태를 만듭니다. 그것은 고전적인 항우울제의 단일 적용에 둔감하지만 아만성 적용에 반응하므로 인간의 상황을 모방합니다. 4 주간의 시간 창에서 다양한 종류의 항우울제, 비 침습적 뇌 자극, 수면 부족에서 신속하게 작용하는 항우울제 9,10,11에 이르기까지 다양한 항우울제 중재가 효능을 보여줍니다. 더욱이, 유도 단계 동안의 부동성 시간의 측정은 유도 단계 이전에 처리된 ...

주요 우울 장애와 같은 정서 장애는 가장 빈번하고 도전적인 정신 질환 중 하나이며 높은 개인의 고통1, 자살 위험의 증가2와 관련이 있으며 사회에 상당한 사회 경제적 부담을 초래합니다3. 그 영향에도 불구하고 치료 옵션은 제한되어 있으며 특히 지난 수십 년 동안 정신 약리학의 혁신 위기로 인해 새로운 항우울 중재의 개발이 시급히 필요합니다. 우울증의 병태생리학을 이해하고 잠재적인 새로운 제제를 시험하기 위해서는 합리적이고 유효한 동물 모델이 시급히 필요하다4. 거의 반세기 동안, 원래 Porsolt5에 의해 묘사 된 고전적인 강제 수영 테스트 (FST)는 잠재적 인 새로운 항우울제의 스크리닝을위한 유도 및 판독으로 사용되었습니다. 그것은 1 일째에 5-15 분 동안 강제 수영 기간, 후속 일회성 약물 적용, 및 다음날 다른 수영 기간에 물에서 움직이지 않는 마우스의 부분 평가로 구성됩니다. 부동성 시간은 누락 된 자연 탈출 행동을 나타내는 것으로 간주되었으며 마우스의 우울증과 같은 상태의 정도와 상관 관계가 있다고 생각되었습니다5.
고전적 FST는 과학계에서뿐만 아니라6,7,8 또한 대중 매체에서8 심하게 비판을 받았다. FST를 둘러싼 대부분의 논쟁은 고전적인 패러다임에서 단 1 일의 짧은 유도 및 치료 기간 때문입니다. FST는 인간의 우울증에 필적하는 상태라기보다는 오히려 급성 외상 모델을 나타낸다고 주장했다. 또한, Porsolt 검사는 잠재적 인 항우울제의 선별 도구로 적합 할 수 있지만 많은 항우울제의 지연된 발병을 무시합니다.
원래의 FST에서 파생 된 만성 절망 모델 (CDM) 9,10,11,12,13,14,15는 우울증에 대한보다 적절한 동물 모델을 나타냅니다. CDM에서 5 일 연속으로 반복되는 수영 스트레스는 급성 외상 효과를 피할 수 있습니다. 반복되고 계속되는 스트레스가 많은 상황에서 벗어나지 못함으로써 생쥐는 무력감, 항복 및 궁극적으로 절망의 상태를 발전시키는 것으로 생각됩니다. 이 패러다임은 외상 후 스트레스 장애의 발병시 일반적으로 경험되는 단일 급성 외상보다 인간의 우울증 발달에 대한 현재의 심리학 이론과 더 비슷합니다. CDM의 우울증 유사 상태는 최대 4주 동안 안정적이며9 따라서 항우울제가 혜택을 나타내기 위해 보통 2-4주가 필요한 임상 조건과 비교할 수 있는 더 긴 치료 기간에 대한 가능성을 열어줍니다16.
우울한 상태에 대한 평가는 다차원적이어야합니다. 고전적인 FST에서와 같이 부동성 시간의 측정은 유용하지만 유일한 결과 매개 변수로 사용해서는 안됩니다. 아래에 설명 된 다양한 방법은 우울한 인간에서 일반적으로 발견되는 증상에 따라 우울 상태의 다른 차원을 매핑 할 수 있어야합니다. 적합한 판독 평가는 탈출 행동 (부동성 시간9,10,17), 꼬리 정지 시험 (TST)9, 무쾌감증 (고전적 수크로오스 선호 시험 (SPT)18), 동기 부여 지향 행동 (코 찌르는 수크로오스 선호도 시험 (NPSPT)10), 기대 / 탐사 행동 (모호한 신호에 대한 반응19; Y-maze test9), 전기생리학(장기 가소성 측정(장기 강화, LTP; 장기 우울증, LTD)20), 분자 평가(즉각적인 초기 유전자(IEGs)의 활성화 패턴; 추가 스트레스 패턴21).
이론적으로, 반복적 인 수영 테스트는 부동성 시간에 대한 평가없이 우울한 상태를 유도하는 데 사용될 수 있습니다. 그러나 적어도 부동성 시간이 있는 개념 증명 실험 시리즈를 제공하는 것이 좋습니다. 추가적으로, CDM은 유도 단계 동안 부동성 시간을 측정함으로써 우울 유사 상태의 발달을 평가하기에 적합한 모델을 나타낸다. 수영 전에 치료된 특정 마우스 균주 또는 마우스는 스트레스에 대한 탄력성 또는 취약성 및 행동 절망의 유도에 대하여 평가될 수 있다.

<table><tbody><tr><td>비커, 2000 mL</td><td>Kimble Kimax</td><td>14000-2000</td><td>모든 용기 >2000ml 및 직경 24-26 cm</td></tr><tr><td>가능 디지털 온도계</td><td>Hanna Instruments</td><td>846-4708</td><td>모든 디지털 온도계 가능</td></tr><tr><td>Digitalwaage 200 g Dipse</td><td>DIPSE</td><td>tp200</td><td>모든 디지털 저울 가능</td></tr><tr><td>Lenovo ThinkCentre V50a-24IMB AiO 11FJ00DVGE - 60,5 cm</td><td>Lenovo</td><td>A 908278</td><td>모든 표준 퍼스널 컴퓨터 가능한</td></tr><tr><td>Logitech PTZ Pro</td><td>Logitech</td><td>1000005246</td><td>가능한 모든 고해상도 카메라</td></tr><tr><td>스톱워치 ROTILABO</td><td>Carl Roth</td><td>L423.1</td><td>가능한 모든 스톱워치</td></tr><tr><td>타이머 ROTILABO</td><td>Carl Roth</td><td>A802.1</td><td>모든 타이머 가능</td></tr></tbody></table>

우울증의 동물 모델 - 만성 절망 모델 (cdm)

Animal Models of Depression - Chronic Despair Model (CDM)

주요 우울 장애는 정신 질환의 가장 보편적 인 형태 중 하나이며 엄청난 개인의 고통과 사회 경제적 부담을 유발합니다. 그 중요성에도 불구하고 현재의 약리학 적 치료는 제한되어 있으며 새로운 치료 옵션이 시급히 필요합니다. 잠재적 인 신약을 찾는 핵심 요소 중 하나는 적절한 동물 모델에서 항우울 효능을 평가하는 것입니다. 고전적인 Porsolt 강제 수영 테스트는 우울증과 같은 상태를 유도하고 평가하기 위해 수십 년 동안이 목적으로 사용되었습니다. 그것은 강제 수영의 두 가지 짧은 기간으로 구성됩니다 : 첫 번째는 우울한 상태를 유도하고 두 번째는 다음 날 두 번의 수영 세션 사이에 주어진 에이전트의 항우울제 효과를 평가합니다. 이 모델은 잠재적 인 항우울제에 대한 스크리닝 도구로 적합 할 수 있지만 많은 항우울제의 작용 지연 발병은 무시합니다. CDM은 최근에 설립되었으며 주목할만한 차이점을 가진 고전 테스트의 수정을 대표했습니다. 마우스는 인간에서 우울증이 급성 스트레스보다는 만성적 인 것에 의해 유발된다는 생각에 따라 5 일 연속 수영을해야합니다. 며칠 (1-3 주)의 휴식 기간 동안 동물은 지속적인 행동 절망을 겪습니다. 표준 판독 방법은 추가 지연 된 수영 세션에서 부동성 시간을 측정하는 것이지만 동물의 기분 상태에 대한 더 넓은 시각을 얻기 위해 몇 가지 대체 방법이 제안됩니다. 행동, 분자 및 전기 생리학적 변화를 표적으로 삼는 여러 분석 도구를 사용할 수 있습니다. 우울한 표현형은 적어도 4 주 동안 안정적이며, 신속하지만 아만성 항우울제 치료 전략을위한 시간 창을 제공합니다. 또한, 우울한 상태의 발달의 변화는이 접근법을 사용하여 해결 될 수 있습니다. 따라서 CDM은 우울증을 더 잘 이해하고 새로운 치료 중재를 개발하는 데 유용한 도구입니다.

CDM의 유도 단계의 첫 번째 수영 세션에서, 마우스는 일반적으로 190 초에서 230 초 사이의 평균 부동성 시간을 나타내며, 이는 추가 수영 세션마다 지속적으로 상승합니다 (그림 1A). 이 증가는 처음 3 일 동안 더 두드러지며 지난 2-3 일 동안 고원과 같은 단계에 도달합니다. 5 일째에 측정 된 부동성 시간은 최대 4 주 동안 안정적으로 유지되며 안정적인 행동 절망을 나타냅니다. 개입의 항우울제 효능은 유도 단계의 마지막 날과 시험일 사이의 동물을 치료함으로써 평가될 수 있다. 수영 세션 중 절대 득점 시간은 매우 주관적이며 실험자, 나이, 성별 및 사용 된 마우스 라인에 따라 다릅니다. 그러나 세션 간의 상대적 차이는 작은 인터레이터 차이만으로 상당히 안정적입니다.
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우울증의 만성 절망 마우스 모델 (CDM)은 반복적 인 강제 수영 세션과 판독 된 또 다른 지연 된 수영 단계로 구성됩니다. 이는 적어도 4주 동안 안정한 만성 우울 유사 상태의 유도에 적합한 모델을 나타내며, 아만성 및 급성 치료 개입을 평가하기 위해 수정가능하다.

우울증의 동물 모델 - 만성 절망 모델 (CDM)

Major depressive disorder is one of the most prevalent forms of mental illnesses and causes tremendous individual suffering and socioeconomic burden. ...

만성 절망 모델은 기분 장애의 생리학 경로를 더 잘 이해하고 잠재적 인 항우울 치료 중재를 평가하기 위해 마우스에서 만성 우울 유사 상태의 유도에 적합한 모델을 나타냅니다. 반복적 인 스트레스는 인간의 우울증이 급성 스트레스보다는 만성적 인 스트레스에 의해 유발된다는 생각에 따라 우울한 상태를 유도하는 데 사용됩니다. CDM 유도의 효과는 최대 사주 동안 안정적이기 때문에 신속하게 작용하는 항우울제뿐만 아니라 대부분의 기존 항우울제와 같이 발병이 지연된 물질도 조사 할 수 있습니다.만성 우울 유사 상태를 유도하기 전에 쥐가 물거나 이발의 징후를 포함한 이상을 시각적으로 관찰하십시오. 동물이 부상의 징후를 보이는 경우 실험 시리즈에서 전체 케이지를 제외하십시오. 나중에 쌍을 이루는 파라메트릭 테스트를 수행하려면 각 마우스가 명확하게 표시되거나 레이블이 지정되어 있는지 확인합니다.또한 실험을 시작하기 전에 각 마우스의 무게를 측정합니다. 강제 수영 세션을 수행하려면 비커 또는 실린더에 실온에서 실온에서 적어도 20 센티미터 높이까지 채우고 물 표면과 선박의 상부 경계 사이에 최소 10 센티미터를 남겨 둡니다. 그런 다음 마우스를 물에 부드럽게 옮기고 타이머를 10 분 동안 설정하십시오.마우스가 익사하는 것을 방지하려면 실험자를 볼 수 없는 위치에서 물 속에 있는 동안 마우스를 지속적으로 관찰합니다. 10 분 후, 꼬리를 잡아 마우스를 물에서 꺼내십시오. 종이 타월로 마우스를 부드럽게 말리고 가열 조명 또는 가열 매트 위에 놓습니다.매일 각 마우스에서 강제 수영 세션을 다섯 일 연속으로 수행하십시오. 다섯 번의 수영 세션이 끝나면 동물을 집 새장으로 옮기고 적어도 이틀 동안 휴식을 취하십시오. 부동성 시간을 판독 방법으로 사용하려면 카메라를 사용하여 각 수영 세션을 기록하십시오.그런 다음 오프라인 비디오 녹화를보고 스톱워치를 사용하여 수영 테스트, 고군분투, 수영 및 부동성 동안 세 가지 행동 조건에서 마우스가 보낸 총 시간을 측정하십시오. 동물은 위협적인 상황에서 적극적으로 탈출하려고 할 때 고군분투하는 것으로 간주됩니다. 이것은 벽을 향한 머리로 실린더의 측면을 발로 밟고 모든 팔다리를 움직이는 것을 포함합니다.물 표면은 전형적으로 약간 난류이다. 동물은 적어도 발을 숨기고 물을 통해 거리를 여행 할 때 수영하는 것으로 간주됩니다. 그것은 적극적으로 탈출구를 찾지만 물 표면 위로 발을 들어 올리거나 선박의 유리 벽을 극복하려고 시도하지 않습니다.이 상태에서 동물들은 자주 돌아 다니거나 원을 그리며 움직입니다. 마지막으로, 동물은 부동성 단계에있는 것으로 간주됩니다. 얼어 붙은 자세를 유지하고 전혀 움직이지 않거나 꼬리 또는 앞발을 물 표면 위로 유지하기 위해 움직이면 수동 부동 외에는 거리가 활발히 이동하지 않으며 앞발의 지시 된 움직임이 관찰되지 않습니다.만성 절망 모델의 유도 단계에서, 첫 번째 수영 세션 동안, 마우스는 일반적으로 190 초에서 230 초 사이의 평균 부동성 시간을 보여 주며, 이는 추가 수영 세션마다 지속적으로 증가합니다. 다섯 번째 날에 측정 된 부동성 시간은 안정적인 행동 절망을 나타내는 네 주 동안 안정적으로 유지됩니다. imipramine, 수면 부족 및 케타민과 같은 항우울 중재는 부동성 시간을 크게 줄입니다.수면 부족이 회복과 결합 된 반면, 수면은 우울과 같은 표현형의 큰 변화를 나타내지 않습니다. 각 치료 그룹은 다섯 번째 날에 부동성 시간의 평균 값이 다르기 때문에 절대 값 대신 정규화 된 평균 값을 사용하여 다른 치료법을 비교해야합니다. 부동성 시간이 모든 오일 동안 변하지 않으면 적용된 스트레스가 적절하게 행동을 바꿀 수 없으므로 이러한 마우스를 사용하여 치료 효과를 평가할 수 없습니다.꼬리 서스펜션 테스트, 코 포크 수크로오스 선호도 테스트, 패치 클램프 기술 동안의 장기 효능 평가와 같은 다른 판독 방법은 동물의 행동 절망에 대한 더 넓은 시각을 기술하는데 사용될 수 있다. 부동성 시간의 측정은 만성 절망 모델의 중요한 부분이지만 결코 유일한 판독 방법이되어서는 안됩니다. 꼬리 서스펜션 테스트 또는 수크로오스 선호도 테스트와 같은 여러 가지 다른 평가를 사용해야합니다.

animal-models-of-depression-chronic-despair-model-cdm

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

이 문서에서는 모델 산후 우울증과 설치류 수유 불안에 ethologically 관련 패러다임과 같은 만성 주민 침입자 사회적 스트레스의 사용에 대해 설명합니다.

설치류 젖을의 모델 산후 우울증에 만성 사회적 스트레스를 사용하여

여기서, 아 만성 경증 패배 사회적 스트레스의 마우스 모델을 개발하기위한 방법을 설명하고 hyperphagia- 및 체중 증가 조갈증 다음과 같은 증상을 포함한 우울증 병원성 특징을 조사하기 위해 사용된다.

스트레스에 의한 행동 및 생리 적자를 이해 아 만성 및 온화한 사회 패배 스트레스의 마우스 모델

예측할 수 없는 만성 경미한 스트레스(UCMS) 프로토콜은 만성 스트레스 및 우울 증상과 관련된 행동 및 생리학적 변화를 연구하기 위한 검증된 방법입니다. UCMS 프로토콜의 부과 8 주간은 두 성별의 설치류에서 행동 변화와 나쁜 건강 결과를 유도합니다.

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이 프로토콜은 건강 한 쥐 만성 예측할 수에 노출에 의해 periodthrough 감염 스트레스 (CUS) 쥐 주어진된 시간 동안 우울증을 계약 수 새로운 모델을 설명 합니다.

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여기 쥐에서 예측할 수 없는 만성 가벼운 스트레스 프로토콜 선물이. 이 프로토콜 장기 우울증 같은 표현 형을 유도 하 고 행동 하 고 neuromolecular 우울증 같은 적자 반전에 상 상속 항우울제의 효능을 평가 하기 위해 수 있습니다.

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여기, 선물이 마우스 우울한 모델 설정, 만성 예측할 수 없는 가벼운 스트레스 (CUMS)와 관련 된 행동 변화를 관찰 하 고 Xiaoyaosan의 항 우울증 효과 평가 하는 프로토콜.

만성 스트레스 쥐에 Xiaoyaosan의 항 우울증 효과 평가

이 문서는 억제기를 사용하여 만성 적으로 고정 된 마우스에서 우울과 같은 행동의 유도에 대한 단순화 되고 표준화 된 프로토콜을 제공합니다. 또한, 우울증의 유도를 확인하는 행동과 생리 적 기술이 설명된다.

마우스에서 우울증과 같은 행동을 유도하기위한 만성 고정 스트레스 프로토콜

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