마우스의 스트레스를 줄이는 취급 기술

제 이름은 토마스 프리보트 박사입니다. 저는 중독 과 정신 건강 센터의 과학자이자 CAMH이며, 정신과 의학과토론토 대학의 조교수입니다. 내 그룹은 데이터 변동성을 줄이고 동물 복지를 개선하기 위해 쥐의 기준 불안과 반응성을 줄이는 데 특별한 관심을 가지고 있습니다.

마우스는 기본적인 과학 및 전임상 연구에서 귀중한 자산으로 입증되었지만, 기준선 불안과 실험실 동물의 반응성에 대한 세계 적인 통제는 거의 없으므로 실험실 간의 데이터 복제성을 복잡하게 만듭니다. 기준 불안에 주요 기여 요인은 통제되지 않는 환경 변수, 주택 조건 등, 환경 농축, 스트레스에 노출. 주거 조건과 농축의 표준화는 이 문제점을 개선하는 것을 도왔지만, 실험자와의 상호 작용 도중 스트레스에 노출은 아직도 마우스에서 크게 해결되지 않습니다.

꼬리 처리, 꼬리에 의해 마우스를 들어 올리는 과정은, 여전히 마우스 널리 사용되는 마우스 처리 기술입니다, 그것은 특히 스트레스에도 불구하고. 터널 처리 및 컵 핸들링을 포함하여 꼬리 처리에 대한 대안이 등장했습니다. 이러한 기술의 채택은 느렸습니다.

여기서는 컵 핸들링과 유사한 새로운 기술을 설명하며, 3일간의 습관또는 3D 취급으로 구현할 수 있습니다. 마우스의 반응성에 대응하여 상호작용의 정도와 복잡성을 점진적으로 증가시켜 특정 취급 이정표에 대한 반응으로 스트레스를 줄이고 일상적인 처리를 용이하게 할 수 있습니다. 우리는 행동 테스트에서 마우스에서 3D 취급의 효능을 평가, 불안 과 같은 행동을 평가, 실험자와 주변 스트레스 호르몬과의 상호 작용, corticosterone, 수준, 터널 처리 및 꼬리 처리 기술과 비교를 제공합니다.

케이지를 부드럽게 열고 뚜껑을 옆으로 놓습니다. 마우스를 집어 들기 전에 장갑을 낀 손을 홈 케이지에 소개합니다. 마우스가 약 30초 동안 손의 존재에 습관화하도록 합니다.

그런 다음 컵에 있는 손으로 마우스를 집어 들으려고 시도합니다. 마우스를 쉽게 집어들 수 없는 경우 양손을 함께 컵화하여 마우스를 케이지 구석으로 안내합니다. 그런 다음 두 손을 사용하여 마우스를 집어 들수 있습니다.

마우스가 케이지에서 제거되면 손을 가능한 한 평평하게 유지하고 엽니다. 마우스가 자유롭게 탐색할 수 있도록 합니다. 이렇게 하면 마우스가 단계별로 이동하고 물기 위험을 제한할 수 있는 플랫 플랫폼을 제공합니다.

손바닥을 들고 손을 열고 평평하게 잡습니다. 다른 손을 마우스에 인접하게 하고 마우스가 구속없이 손에서 손으로 자유롭게 이동할 수 있도록 합니다. 평평한 손으로 처리 한 1 분 후, 손의 손바닥을 이완하고, 부드럽게 손 사이에 마우스를 압연하기 전에, 머리에 마우스를 약간 컵.

4분 간 계속하여 손 사이의 부드러운 롤링과 열린 손을 자유롭게 탐험합니다. 마지막 2분 동안 대피소 테스트를 수행합니다. 마우스가 손의 가장자리로 이동하고 함께 두 손을 가져올 수 있습니다.

매우 천천히, 마우스가 손에 의해 형성 된 대피소 내부에 맞는 있도록 손을 컵. 필요한 경우 마우스가 빠져나갈 수 있도록 개구부를 남겨두십시오. 아무 구속도 없이 5~10초 동안 마우스를 대피소에 보관하십시오.

대피소 테스트를 지난 2분 동안 3~4회 반복합니다. 프로세스를 서두르지 마십시오. 마우스가 손에 갇혀 스트레스를 받는 것처럼 보이는 경우, 30초 동안 손과 자유 탐사 를 계속한 다음 대피소 테스트를 다시 시도하십시오.

30초 동안 자유롭게 탐색한 다음 케이지의 마우스를 부드럽게 교체합니다. 70%에탄올 또는 적절한 세척 용액으로 대변과 소변의 벤치 탑을 청소하십시오. 필요에 따라 대변과 소변의 장갑을 청소하고 새로운 케이지로 변경할 때 70 %의 에탄올로 장갑을 헹구거나 장갑을 교체하십시오.

둘째 날까지, 이미 컵 손으로 케이지에서 마우스를 제거하는 것이 가능해야한다. 마우스가 반응하는 것처럼 보이는 경우, 30초에서 1분 동안 열린 헤드의 평평한 손과 자유로운 탐색을 수행합니다. 그렇지 않으면 손과 대피소 테스트 사이의 롤로 진행하십시오.

첫날부터 2~3분 동안 손과 대피소 계단 사이의 역할을 수행한다. 각 단계를 여러 번 수행합니다. 마우스가 대피소 테스트에서 편안하게 보인다면 마우스를 뒤쪽과 머리에 애완 동물을 피하십시오.

마우스가 접촉을 피하려고 하지 않으면 코 찌르기로 이동합니다. 주미 의 끝에 마우스를 부드럽게 만지지 않습니다. 물거나 머리를 돌리려고 하지 않는다면, 이것은 습관의 좋은 징조입니다.

페팅 및 코 찌르기 테스트를 위해, 과정을 돌진하지 마십시오. 마우스가 손 안에 갇혀 스트레스를 받는 것처럼 보이거나 만지고 싶지 않은 경우 몇 분 동안 손 사이의 롤링을 계속 한 다음 다시 시도하십시오. 동물이 대피소에 잘 반응하고 머리를 찌르고 코 찌르면 약 3 분 동안 처리 한 후에이 세션을 중단하십시오.

그리고 동물이 탈출 시도, 손에서 점프 또는 손과의 접촉을 피하는 등 스트레스의 흔적없이 손을 탐구하고자하는 것처럼 보인다면. 마우스가 계속해서 스트레스의 징후를 나타내거나 대피소 테스트 또는 코 찌르기 테스트에 잘 반응하지 않는 경우, 첫날과 같이 5 분까지 세션을 계속하십시오. 케이지에 있는 마우스를 교체하고 벤치 탑과 장갑을 청소합니다.

셋째 날에는 같은 단계를 거치게 됩니다. 손의 손바닥에 마우스를 집어 들. 마우스를 손 사이에 옮길 수 있습니다.

마우스를 컵에 섞은 손에 부드럽게 감금합니다. 마우스가 이러한 단계에 잘 반응하면 마우스를 애무하고 코 찌르기 테스트를 시도하십시오. 셋째 날에는 마우스가 움직이지 않고 손바닥에 앉을 수 있을 만큼 편안해야 하며 약 2~3분 동안 이러한 단계를 진행할 수 있어야 합니다.

케이지에 있는 마우스를 교체하고 벤치 탑과 장갑을 청소합니다. 셋째 날. 동물이 경구 개간 또는 복막 주사와 같은 실험 목적으로 억제될 경우, 마우스는 목 핀치 테스트를 실시할 수 있다.

마우스를 목의 목덜미로 잡고 엄지와 집게 손가락 사이를 잡고 마우스를 손 위로 5센티미터 들어 올려 2~3초 간 들어올립니다. 이것은 일반적으로 성인 마우스에 대 한 불편 한 위치, 그리고 쥐 가 이동 근처 남아 있는 경우, 그들은 잘 처리 에 습관 하 고 주사에 대 한 억제 하기 쉬울 것 이다. 마우스를 평평한 손에 다시 놓고 1 분 동안 자유롭게 탐색 할 수 있습니다.

동물은 실험자와 자발적으로 상호 작용하려는 의지와 실험적인 맥락에서 취급의 용이성을 위해 시험되었습니다. 연구 1에서는, 실험자가 마우스를 픽업하려고 할 때 튜브 처리 또는 3D 취급에 의해 취급된 마우스는 달아나기 위하여 확률이 낮았습니다. 추가적으로, 3D 기술을 사용하여 처리된 한 마우스를 연구하는 것은 실험자의 손과 같은 사분면에 더 많은 시간을 보냈으며, 이는 실험자와 상호 작용하는 의지가 증가했음을 나타냅니다.

연구 2에서, 튜브 처리 또는 3D 처리에 의해 처리된 마우스는 꼬리 처리마우스에 비해 실험자가 마우스를 픽업하려고 할 때 달아날 가능성이 적었습니다. 그러나, 2연구에서, 취급 기술은 실험자의 손과 같은 사분면에 소요되는 시간에 크게 영향을 미치지 않았다. 3D 및 터널 처리의 효과는 불안과 같은 행동의 두 가지 테스트에서 꼬리 처리에 비해, 참신 억제 공급 테스트와 높은 플러스 미로.

연구 결과 하나에서, 참신 억제 된 먹이 시험에서, 처리 터널처리 및 3D 처리 마우스에 불안을 감소 하는 추세가 있었다. 높은 플러스 미로에서, 취급의 전반적인 효과가 없었다. Z-점수로 요약했을 때, 처리된 터널의 전반적인 불안이 현저하였고, 3D 처리된 마우스는 꼬리 처리마우스에 비해 있었다.

연구 2에서, 참신 억제 수유 테스트 또는 높은 플러스 미로에 불안 측정에 처리의 전반적인 효과 없었다. Z 점수로 요약할 때, 취급 기술은 불안에 전반적인 효력이 없었습니다. 스트레스의 생리적 척도로서, 우리는 꼬리 처리에서 혈청을 수집, 3D 처리 및 터널 처리 마우스를 처리 15 간단한 처리 세션 후 분 및 코티코스테론 수준을 테스트.

연구에서 취급의 전반적인 효력은 없었습니다. 연구 2에서, 3D 처리는 꼬리 처리에 비해 크게 감소 코르티코스테론 수준. 쥐의 취급 기술이 과학 계에 의해 널리 인식되지 않는다는 관측에 근거하여, 우리는 새로운 취급 기술의 사용을 기술했습니다.

제시 된 두 연구에서, 터널과 3D 처리는 포착 될 때 도망 마우스의 시도를 감소, 잠재적으로 일상적인 처리를 촉진. 추가적으로, 더 오래된 남성 마우스에서, 이 기술은 불안 같이 행동을 감소시키고 실험자와의 증가한 상호 작용을 감소했습니다. 젊은 여성에서.

이 기술은 처리에 응하여 관찰된 코르티코스테론 수준을 감소시다. 이 기술을 구현하는 것은 데이터 변동성을 줄이고, 동물 복지를 개선하며, 일상적인 취급을 용이하게 할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다.