생물 의학 및 생물 공학 연구를 위한 문어 생태계 구축

우리의 프로토콜은 문어 환경을 유지하는 연구자, 수족관을 설정하는 방법을 설명하기 때문에 중요합니다, 문어의 매일 관리. 이 기술은 문어 치료 경험이없는 새로운 연구자에게 실험실에서 문어를위한 수족관 환경을 설정하고 연구를위한 건강한 문어를 유지합니다. 문어를 가진 새로운 연구원은 이 동물이 강한 헌신이 필요하다는 것을 깨닫는 것이 중요합니다.

그들은 매일 관리가 필요하고 수질은 동물이 도착하기 도 전에 안정적인 상태에서 지속적으로 모니터링 할 필요가있다. 문어 탱크가 성숙된 지 일주일 후, 성숙한 바닷물 8갤런을 탱크에 옮기고 탱크 바닥에 15킬로그램의 으깬 산호를 추가하여 별도의 새우 탱크를 설치합니다. 또한 몰딩을위한 은신처를 제공하기 위해 몇 가지 라이브 바위를 추가합니다.

그런 다음 탱크 가장자리에 캐니스터 필터를 부착하고 제조업체의 지시대로 설정합니다. 탱크에 부착 된 기석이 있는 튜브에 연결된 탱크 옆에 공기 펌프를 추가합니다. 분쇄된 산호 퇴적물이 탱크에 첨가되면 새우를 탱크에 첨가하고, 도착 시 새우를 추가하려면 먼저 출하물에서 작은 중식 해수 탱크로 새우를 이동하여 바이오 폐기물을 제거한 다음, 새우를 탱크에 직접 첨가할 수 있다.

모기 물고기는 도착 시 새우 탱크에 직접 첨가 할 수 있습니다. 새우와 생선에 생선 조각, 죽은 식물 또는 조류를 먹이세요. 매주 필터를 청소하고 필터 패드를 변경하고 물의 25 %를 변경합니다.

물 테스트 키트를 사용하여 식품 탱크에서 매일 질소, pH 및 온도 매개 변수를 확인하십시오. 물 질소 매개 변수가 높게 유지되면 물을 더 자주 변경하고 질소 흡수성 가방을 추가하십시오. 문제가 한 달 이상 지속되면 새우를 더 큰 탱크로 옮깁니다.

게 탱크의 경우 한쪽에 10킬로그램의 자갈을 쌓아 마른 땅을 만들고 다른 쪽을 한 갤런의 바닷물로 채웁니다. 그런 다음, 탱크에 직접 바이올린 게를 추가합니다. 게는 육지에서 대부분의 삶을 보내지만, 한 번에 며칠 동안 수중이 될 수 있으므로 장기적인 생존을 위해 부분적으로 수중 탱크가 중요합니다.

하루에 한 번 만먹는 피들러 게는 탱크 의 부분에 있는 접시에 생선 조각을 추가합니다. 먼저 게를 제거한 다음 바닷물의 100%를 변경하고 자갈을 청소하여 매주 탱크를 청소하십시오. 문어 바닷물 탱크 내에 조개와 홍합과 같은 해양 바이밸브 연체 동물을 배치합니다.

이 연체 동물은 또 다른 물 여과 메커니즘을 제공, 열립니다. 탱크에 문어를 도입하기 전에 암모니아, 아질산염 및 질산염 수준이 각각 백만 개당 5, 25 및 10 개 미만인지 확인하십시오. 탱크에서 문어 잉크를 제거할 수 있는 물 손 펌프를 사용할 수 있습니다.

이 절차에는 두 사람이 필요합니다. 도착 시 가방을 비늘에 놓고 문어로 가방의 무게를 기록하십시오. 동물을 탱크로 옮기는 동안 물 산소를 증가시키기 위해 가방에 기석을 추가합니다.

발송물의 온도와 아일린성을 측정하고 선적 후 장기간 질병의 경우를 기록합니다. 가방에서 탱크로 물을 옮기지 않고 탱크 구석에 운송 가방을 걸어 서 탱크 물에 부분적으로 잠긴 가방을 들고 운송 가방의 온도를 바꾸기 시작합니다. 가방에서 물 10%를 제거하고 싱크대 아래로 덤프한 다음 탱크에서 동일한 양의 물을 가방에 넣습니다.

가방의 수온이 탱크의 수온과 1도 이상 다를 때까지 10 분마다 반복하십시오. 그런 다음 장갑을 착용하고 양손을 문어 아래에 놓고 이송 중에 지원을 제공합니다. 두 번째 사람은 봉지 옆에서 흡입된 팔을 부드럽게 당겨야 합니다.

문어가 가방에서 꺼내나면 새 서식지의 물로 빠르게 이동하여 배송 가방에서 물을 최대한 적게 옮기세요. 핸드 펌프를 사용하여 탱크에 있을 때 문어가 방출되는 잉크를 제거합니다. 이제 동물의 대략적인 무게를 얻기 위해 물로 가방을 무게.

도착 후 처음 2 주 동안, 문어의 일일 소비를 모니터링, 이는 주위해야 4 받는 사람의 무게의 8%. 문어는 하루에 네 번 확인해야합니다. 이는 2주 후에 하루에 두 번 감소할 수 있습니다.

2주마다 동물의 무게를 측정하고 필요에 따라 음식 소비를 조정합니다. pH, 암모니아, 아질산염 및 질산염 수준에 대해 시판되는 바닷물 테스트 키트를 사용합니다. 키트와 함께 제공되는 4개의 테스트 튜브에 키트 지향 양탱크 물을 추가합니다.

테스트 키트에 명시된 대로 해당 튜브에 칼로리 반응제의 양을 추가합니다. 암모니아, 아질산염 및 질산염 수준이 각각 백만개당 5, 25 및 10 개 이상의 경우, 양말 필터에서 바이오 매스를 씻어 내거나 새로운 양말 필터로 변경합니다. 또한, 브러시로 스키머 의 상단에서 바이오 매스를 청소하고 탱크에 추가 탈모 박테리아를 추가합니다.

문제가 지속되면 물의 25%를 담수로 대체하십시오. 핸드 펌프를 사용하여 탱크에서 죽은 게와 새우 시체와 문어 배설물 물질을 모두 제거하십시오. 탱크에서 남은 살아있는 게를 모두 제거하고 저장 탱크로 다시 이동합니다.

다음으로 탱크 내에서 큰 물체를 다시 정렬합니다. 그런 다음 문어가 매일 먹을 게의 절반 수를 탱크에 소개합니다. 해동새우나 작은 수컷 피들러 게를 어린 문어에 먹이.

실험에 따라 게와 새우는 탱크의 어느 곳에서나 문어에 직접 도입할 수 있습니다. 매일 5개의 유령 새우를 제공합니다. 문어에 다양한 음식을 제공하려면 일주일에 한 번 살아있는 조개 나 홍합을 주고 항상 탱크 내부에 세 마리의 모기 물고기를 유지하십시오.

매주 위생을 위해 펌프 시스템을 청소하기 전에 스키머, 펌프 및 조류 빈 조명을 종료한 다음 물을 제거하기 전에 시스템의 자동 밸브를 끕니다. 마지막으로, sump 시스템에서만 스키머와 모든 물을 제거합니다. 조류 쓰레기통을 가볍게 문질러 벽에서 바이오매스의 대부분을 제거하고 브러시로 나머지 양프 영역을 청소한 다음 양말 필터를 제거하고 식초로 청소한 다음 건조시하십시오.

매주 다른 양말 필터로 회전하여 3개월마다 새 양말로 교체합니다. 스키머 의 상단에서 바이오 매스를 청소 한 후, 시스템에 다시 스키머를 넣고 바닷물로 리필하기 시작합니다. 펌프 영역이 채우기 시작하면 모든 시스템을 다시 켭니다.

플로트 밸브의 자동 상단이 꺼져 있을 때 물 추가를 중지합니다. 나사를 풀지 않는 테스트 튜브는 감각 운동 기능을 이해하고 문어의 메모리 기능을 학습하는 데 중요한 테스트입니다. 이 시험은 3개의 문어에 매일 행해졌고, 시험관을 여는 방법을 배우기 위하여 평균적으로 문어 4 일 걸렸습니다.

여기에 표시된 문어의 뇌와 팔의 초고 공간 해상도 MRI 이미지는 함께 5 억 개 이상의 뉴런을 포함하는 신경계를 형성합니다. 이것은 뇌와 광학 엽을 보여주는 머리의 관상 보기입니다. 팔의 관상 관상보기에서 축 코드는 7 개의 팔 각각에서 볼 수 있으며 빨판의 처상 보기는 복잡한 말초 신경 구조를 보여줍니다.

전체 동물의 3차원 형태학적 이미지를 생성하는 극저온 형광 단층 촬영 이미징은 470 나노미터 파장에서 팔을 따라 배치된 뇌와 빨판의 시각화를 허용했습니다. 소화 시스템은 555-640 나노미터 파장에서 시각화됩니다. 이 기술이 개발된 후 문어 움직임을 추적하고 분류하기 위해 기계 학습 도구를 사용할 수 있었습니다.