성인 얼룩말 물고기를 사용하여 학습 및 메모리 연구에서 인지 평가를위한 연관 학습 도구로 셔틀 박스 분석

셔틀 박스 분석은 무딘 힘 외상 또는 제브라피시의 다른 유형의 뇌 손상에 따라 인지 장애의 진행 및 회복을 재현합니다. 셔틀 박스 분석기능을 사용하면 제브라피시의 단기 및 장기 메모리 모두에서 비교적 간단하고 빠르며 강력한 연관 학습 측정을 할 수 있습니다. 먼저 30.5~19~7.5센티미터 젤 박스를 5~19센티미터 의 수족관급 플렉시글래스를 45도 각도로 수정하여 셔틀박스를 준비한다.

그런 다음 탱크의 중간 지점을 표시하는 선을 만들어 물고기가 탱크의 중간을 교차했을 때 를 평가합니다. 셔틀 박스에 800 밀리리터의 시스템 물을 추가한 후, 2~3마리의 물고기를 시스템 물이 들어 있는 홀딩 탱크에 넣습니다. 셔틀 박스 분석이 수행될 어두운 방에 탱크를 둡니다.

다음으로 어두운 방에는 셔틀 박스 중앙에 물고기 한 마리를 놓습니다. 뚜껑을 고정하고 전극을 전원 공급 장치에 부착합니다. 물고기는 어둠 속에서 적응해야합니다.

모든 조명을 끄고 물고기를 셔틀 박스로 15분 간 안내합니다. 물고기가 자유롭게 탱크를 탐험 할 때 성공적인 적응을 고려할 수 있습니다. 물고기의 성공적인 적응 후, 수동으로 물고기에 의해 점유 측면에 젤 박스 벽에서 약 2 센티미터 800 루멘 붉은 렌즈 손전등을 빛난다.

물고기가 백금 와이어 옆에 쉬고 있다면 재판을 시작하지 마십시오. 물고기에 직접 빛 자극을 비추고 수동으로 자극의 지속적인 시각화를 보장하기 위해 빛과 물고기의 측면 움직임을 따르십시오. 성공하거나 실패한 재판에 대한 다음 조건 중 하나가 충족 될 때까지 빛 자극을 계속 제공합니다.

물고기가 빛 노출 후 15초 이내에 탱크의 중간 지점을 가로지르는 경우 시험이 성공적이라고 생각해 보십시오. 물고기가 중간 지점을 교차하면 즉시 빛 자극을 중지합니다. 시험이 실패하면 전기 전도 전원 공급 장치를 사용하여 1 암페어에 20 밀리볼트의 음수 충격 자극을 적용하고, 최대 4개의 충격으로 15초 동안 2초 를 번갈아 가며 또는 물고기가 상자의 중간 지점을 통과할 때까지 번갈아 가며.

그런 다음 빛과 음의 자극을 모두 종료합니다. 훈련 기간 전에 는 15 분 동안 어두운 조건에서 물고기를 떠나 셔틀 박스에 성공적으로 적응을 보장합니다. 그런 다음 물고기가 차지하는 측면의 젤 박스 벽에서 약 2센티미터 떨어진 800 루멘 붉은 렌즈 손전등을 수동으로 비춥춥습니다.

물고기에 직접 빛 자극을 비추고 자극의 지속적인 시각화를 보장하기 위해 빛과 물고기의 측면 움직임을 따르십시오. 빛이 물고기에 비추는 동안, 동시에 한 암페어에 20 밀리볼트의 불리한 충격 자극을 적용, 2 초에 번갈아, 최대 4 충격으로 15 초 동안 2 초 또는 물고기가 상자의 중간 지점을 통과 할 때까지. 일단 이것이 달성되면, 빛과 불리한 자극을 종료합니다.

25회 반복을 반복합니다. 완료되면, 물고기가 어두운 조건에서 15 분의 또 다른 적응 기간을 허용합니다. 초기 테스트 기간 동안 셔틀 박스에서 15분 동안 성공적으로 적응한 다음 최대 15초 동안의 라이트 자극만 적용하고 응답을 기록합니다.

물고기가 빛의 자극을 시작한 후 15초 이내에 셔틀 박스의 중간 지점을 가로질러 가는 경우 시험이 성공적이고, 물고기가 중간 지점을 넘어갈 때 즉시 빛의 자극을 멈춥시면 시험이 성공적이라고 생각해 보십시오. 물고기가 광선 자극을 시작한 후 15초 후에 셔틀 박스의 중간 지점을 가로지르지 않고 15초 후에 빛의 자극을 멈추면 시험이 실패한 것으로 간주하십시오. 초기 테스트 중에 실패한 시도 후 불리한 자극을 적용하지 마십시오.

초기 테스트 기간 이후에 단기 메모리 테스트를 수행합니다. 극적인 뇌 손상을 유도 하 고 테스트 하기 전에 4 시간 동안 기다립니다. 그런 다음 셔틀 박스에서 물고기를 15 분 동안 수용하십시오.

최대 15초 동안 의 빛 자극만 적용하여 단기 메모리를 평가하고, 빛이 꺼지기 전에 물고기가 상자의 중간 지점을 가로질러 지나거나, 시험 통과로 간주하거나, 실패한 시험으로 간주되는 15초 이내에 중간 지점을 넘지 못하는 경우 기록합니다. 각 시험 사이의 30초 휴식 기간으로 위의 단계를 25회 반복하고 성공적이고 실패한 시험 의 수를 기록합니다. 초기 테스트 후 4일 간 장기 메모리 테스트를 수행합니다.

외상성 뇌 손상을 유발하고 테스트하기 전에 4 시간 동안 기다린 다음 셔틀 박스에서 물고기를 15 분 동안 적응시하십시오. 최대 15초 동안 의 빛 자극만 적용하여 장기 메모리를 평가하고, 빛이 꺼지기 전에 물고기가 상자의 중간 지점을 가로질러 지나거나, 시험 통과로 간주하거나, 실패한 시험으로 간주되는 15초 이내에 중간 지점을 넘지 못하는 경우 기록합니다. 각 시험 사이에 30초 의 휴식 기간을 가진 위의 25번을 반복하고 성공적이고 실패한 시험의 수를 기록합니다.

인지 평가를 위한 학습 및 기억 패러다임에 대한 교육 개요는 여기에 표시됩니다. 8개월의 손상되지 않은 물고기, 젊은 성인, 18개월, 중년 성인, 24개월, 고령자, 고령자, 홍등등을 피하는 행동을 배우기 위해 비슷한 수의 시험이 필요했습니다. 심한 무딘 힘 외상성 뇌 손상 모델, 또는 STBI를 활용 한 후, 다른 연령대의 물고기는 부상 후 1 ~ 5 일 에 걸쳐 분석을 마스터하기 위해 시험의 유사한 수를 필요로했다.

STBI 다음 날, 모든 연령대의 물고기는 손상되지 않은 컨트롤보다 훨씬 큰 행동을 배우기 위해 비슷한 수의 시험이 필요했습니다. 손상되지 않은 물고기는 셔틀 박스를 빠르게 마스터하여 약 17 번의 시험에서 5 번의 연속 양성 시험을 달성한 반면, 가벼운 뇌 손상 또는 가벼운 TBI, 물고기는 행동을 배우기 위해 시험 횟수가 크게 증가했습니다. 이 적자는 2개의 온화한 TBI 후에 증가하고 3개의 온화한 TBI 상해 후에 더 상승했습니다.

손상되지 않은 물고기는 초기 테스트 기간에 비해 즉각적인 기억과 지연 된 메모리에 성공적인 시험의 퍼센트 차이의 약간의 증가를 나타낸다. 하나의 온화한 TBI에 따라, 물고기는 손상되지 않은 물고기에 비해 중요하고 즉각적인 기억 적자를 표시. 이 경향은 두 개의 온화한 TBI와 3개의 온화한 TBI 둘 다 에 따라 증가한 적자로 반복되는 상해로 계속되었습니다.

적용된 불리한 자극의 타이밍은 매우 중요합니다. 불리한 자극을 빛과 페어링하고 동시 제거는 그들의 협회를 고화시키고 패러다임에 매우 중요합니다. 분석법은 발달, 노화 및 인지 장애에 대한 환경적 영향을 조사하는 데 사용할 수 있는 신속한 평가 또는 복잡한 연관 학습을 허용합니다.