Name: 소우의 자손에서 이전에 냉동 된 심장 조직에서 미토콘드리아 전자 전송 복합체 측정 : 운동 유발 미토콘드리아 생물 에너지 변화를 평가하는 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-16T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: 학습하세요 냉동 보관된 심장 조직에서 미토콘드리아 풍부 샘플을 준비하는 방법을. 부드러운 조직 분쇄 기법을 사용하여 미토콘드리아 수율을 극대화하고 실험 동물 사용을 최소화할 수 있습니다.

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이 작품은 캔자스 시티 대학의 교내 보조금으로 압둘바키 아그바스와 다니엘 바레라의 여름 연구 펠로우십에 의해 재정적으로 지원되었습니다. 저자들은 얀 탈리 박사의 편집 작품에 감사한다.

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<li>Osto, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+mitochondrial+respiration+in+previously+frozen+biological+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Measuring mitochondrial respiration in previously frozen biological samples.</a> Current Protocols in Cell Biology. 89 (1), 116(2020).</li>
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</ol>

저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.

이 프로토콜의 중요한 단계는 여기에 표시됩니다. 첫째, 조직 균질화 는 조직 균질화 과정에서 과도한 깎아 지른듯한 효과가 적용되지 않도록 신중하게 처리해야합니다. 초기 조직 균질화에 대한 압력 사이클링 기술 (PCT)의 일부인 조직 분쇄기가 사용되어야합니다. 이 단계는 냉동 조직 조건으로 인해 이미 깨지기 쉬운 미토콘드리아를 더 파괴 할 수있는 유리 온 유리 균질화 (도 1B)의 과도한 뇌졸중 주기를 줄일 수 있습니다. 둘째, 냉동 조직 중량은 미토콘드리아 농축 제제의 충분한 양을 얻는 것이 중요할 것이다. 권장되는 시작 조직 량은 조직의 근원에 따라 0.8g 보다 큽것입니다. 심장 조직은 미토콘드리아10,11에서 매우 풍부합니다. 따라서 권장량은 미토콘드리아 농축 제제를 얻기에 충분합니다. 셋째, 모든 절차는 차가운 방에서 수행...

이 프로토콜의 목표는 조직 용해및 미토콘드리아의 추출을 향상시키는 조직의 저에너지 기계적 중단의 새로운 기술로 이전에 냉동 된 심장 조직에서 미토콘드리아 농축 된 준비를 얻기위한 상세한 단계를 제공하는 것이었습니다. 이 방법으로, 높은 전단 응력 또는 고온 및 짧은 균질화 시간 (10-12 s)을 생성하지 않고 추출 효율을 향상 달성할 수 있게된다1.
보관된 냉동 조직으로부터 미토콘드리아를 얻으려면 기능2 및 생화학 연구를 모두 수행하는 귀중한 자산입니다3 그렇지 않으면 정확한 실험 조건하에서 쉽게 반복할 수 없다. 고전적인 포터-엘베젬 테플론 유봉 유리 균질화제 또는 두스균제제는 사용되었으며 여전히 간, 신장 및 뇌와 같은 연조직을 균질화하기 위해 연구 실험실에서 사용되고 있습니다. 그러나 근육과 심장과 같은 단단한 조직을 균질화하려면 더 많은 균질화 시간, 효소 치료, 고속 균질화 및 광범위한 사용자 경험이 필요합니다. 이것은 근육과 심장과 같은 단단한 조직에서 미토콘드리아와 같은 온전한 세포기관을 추출하는 데 불리합니다. 본 프로토콜에 기재된 방법은 미토콘드리아-농축 제제를 얻어 미토콘드리아-농축 제제를 얻어 미토콘드리아-단백질 복합체 및 이들의 초복합형성을 운동및 앉아있는 뿌리에서 태어난 자손으로부터 수확하고, 액체 질소에서 플래시 냉동, 향후 사용을 위해 -80°C에 저장된다. 이 방법을 사용하면 사용자가 이전에 냉동 보관된 조직에서 미토콘드리아 농축 제제를 분리할 수 있습니다.
임신 한 설치류에 대한 외부 나노 물질 노출은 임신 4 동안 자손에 심장 기능 과 미토콘드리아 호흡 및 생체 에너지에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 임신 중 태아 근세포 생물 에너지에 에어로빅 운동 유도 긍정적인 변화 아직 문서화 되지 않은. 그러나, 신흥 연구는 임신 중 모계 유산소 운동이 태아 심장 기능에 긍정적 인 영향을 미친다는 증거를 제공합니다5. 추가 증거를 제공하기 위해, 임신 중 자손 심장 미토콘드리아 호흡기 사슬 복합체 (즉, 복합 V를 통한 복합 I)에 대한 모계 운동의 세로 적 효과에 대한 분석이 수행되었습니다.
이 연구는 결과 모성 운동이 자손의 심장 미토콘드리아에 있는 에너지 생산의 효율성을 향상시킨다는 것을 건의할 수 있기 때문에 중요한 건강 관련성이 있습니다. 이 연구에서, 뿌리 (암컷 돼지)는 두 가지 이유로 동물 모델로 사용되었다 : (i) 심장 생리학은 인간6과 유사하고, (ii) 다른 시점에서 자손에서 심장 조직 수확은 기관 IACUC 승인하에 가능하다. 제안된 연구 결과는 모계 운동 및 자손의 심장 조직의 세포 및 생화학적인 메이크업에 그것의 잠재적인 긍정적인 효력을 연결하는 근본적인 질문의 많은 대답을 목표로 합니다. 이 접근법은 임신 도중 태아 심장 근구 내의 생체 에너지 변화의 문제점을 해결한 길고 비용이 많이 드는 종방향 연구 결과에서 얻은 이전에 동결된 심장 조직에서 온화하면서도 효과적인 미토콘드리아 격리 기술을 요구합니다. 이 연구에서 설명된 방법은 분석 및 기능 적 연구를 위한 미토콘드리아 농축 제제를 위해 이전에 냉동 보관된 조직의 큰 금액을 활용할 수 있게 합니다. 연구 결과는 또한 자궁과 그 너머에 있는 심장 건강에 임산부 운동의 효력을 결정하는 미래 연구 결과로 이끌어 낼 수 있던 예비 데이터를 제공함으로써 이 필드에 있는 지식 격차를 채우는 것을 도울 것입니다.

<table><tbody><tr><td>아미노산 카프로산</td><td>Sigma/Aldrich</td><td>A2504-100G</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Hu Total OxPhos complex kit</td><td>Invitrogen</td><td>458199</td><td></td></tr><tr><td>anti-VDAC 항체</td><td>abcam</td><td>ab15895</td><td>사용 1 &micro; g/mL</td></tr><tr><td>Coomassie G-250</td><td>ThermoSientific</td><td>20279</td><td></td></tr><tr><td>Coomassie GelCode Blue</td><td>ThermoScientific</td><td>24592</td><td></td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Cabiochem</td><td>300410</td><td></td></tr><tr><td>Glass-Glass 유봉 균질화기</td><td>VWR</td><td>KT885451-0020</td><td></td></tr><tr><td>Image Studio</td><td>LICOR</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IR-Dye conjugated anti-Rabbit Ab</td><td>LICOR</td><td>LC0725</td><td></td></tr><tr><td>멀티웰 플레이트 리더</td><td>BioTek</td><td>Synergy HT</td><td></td></tr><tr><td>고유 분자량 마커</td><td>ThermoFisher</td><td>BN2001</td><td></td></tr><tr><td>나일론 메쉬 모노필라멘트</td><td>Small Part Inc</td><td>CMN-74</td><td></td></tr><tr><td>오비탈 쉐이커</td><td>ThermoScientfic</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCT 슈레더</td><td>압력 Bioscience Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SEA BLOCK 차단 버퍼</td><td>ThermoScienctific</td><td>37527</td><td></td></tr><tr><td>슈레더 PULSE 튜브</td><td>압력 Bioscience Inc</td><td>FT500-PS</td><td></td></tr><tr><td>탁상용 원심분리기</td><td>Eppendorf</td><td>5418</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Amresco</td><td>M150-1G</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin 억제제</td><td>Amresco</td><td>M191-1G</td><td>새로운 준비 필요</td></tr></tbody></table>

소우의 자손에서 이전에 냉동 된 심장 조직에서 미토콘드리아 전자 전송 복합체 측정 : 운동 유발 미토콘드리아 생물 에너지 변화를 평가하는 모델

Measuring Mitochondrial Electron Transfer Complexes in Previously Frozen Cardiac Tissue from the Offspring of Sow: A Model to Assess Exercise-Induced Mitochondrial Bioenergetics Changes

미토콘드리아 전자 전달 복합체(ETC) 프로파일은 운동된 뿌리기로 태어난 자손의 심장 조직에서 변형됩니다. 이 가설은 미토콘드리아 ETC 및 초복합 프로파일을 평가하기 위해 가벼운 격리 절차를 사용하여 미토콘드리아를 격리하여 테스트되었습니다. 여기에 설명된 절차는 이전에 동결된 보관된 심장 조직의 처리를 허용하고 미토콘드리아 ETC 복합체, 초복합체 및 ETC 복합 활동 프로파일의 평가를 위한 신선한 미토콘드리아 제제의 필요성을 제거하였다. 이 프로토콜은 다중 항체 기반 면역 블로팅 및 블루 네이티브 젤 전기 포근을 사용하여 슈퍼 복합 평가에서 최적의 ETC 단백질 복합 측정을 설명합니다.

프로토콜에 따라 심장 조직에서 미토콘드리아농축 단백질 혼합물의 좋은 수율을 준비하였다. 미토콘드리아농축 단백질 혼합물의 약 15 mg/mL은 뿌리의 자손으로부터 수확된 평균 1.2g의 냉동 심장 조직으로부터 수득하였다. 미토콘드리아 제제의 양은 (i) 개별 전자 전달 복합체(ETC)를 평가하기 위한 표준 면역블롯 분석을 수행하기에 충분했다(즉, 복합체-I, II, III, IV 및 복합-V), (ii) BN 페이지 및 면역블롯 분석에 의한 미토콘드리아 슈퍼콤플렉스 평가, (iii) 컴플렉스선택에 대한 한정으로 제한된 효소분석. 개별 ETC 단백질 복합체에 대해 제기된 항체의 칵테일은 각 항체가 하나의 단일 면역블롯 분석에서 자체 표적 단백질을 인식할 기술적 타당성을 제공한다.
미토콘드리아농축 단백질은 심혼의 좌심실으로부터 제조되었고, 뿌리의 자손으로부터 수득하였다. 두 그룹의 심장 조직은 출생 후 다른 시점에서 수확되었다 (48 h, 3 개월, 6 개월, 9 개월). 임산부 운동...

이전에 냉동 보관 된 고체 조직에서 미토콘드리아 농축 샘플의 준비는 다양한 실험 양식에서 미토콘드리아의 기능적 및 분석 평가를 모두 수행 할 수 있었습니다. 이 연구는 냉동 심장 조직에서 미토콘드리아농축 제제를 준비하고 미토콘드리아의 분석 평가를 수행하는 방법을 보여줍니다.

The mitochondrial electron transfer complex (ETC) profile is modified in the heart tissue of the offspring born to an exercised sow. The hypothesis ...

이 프로토콜은 사용자가 이전 연구에서 수집및 보관된 냉동 조직에서 미토콘드리아 샘플을 준비할 수 있기 때문에 중요합니다. 이 프로토콜은 또한 조직 수확을 위한 살아있는 동물의 사용을 감소시킵니다. 이 기술을 사용하면 사용자가 이전에 냉동 된 아카이브 조직을 사용하여 미토콘드리아 농축 샘플을 부드러운 조직 파쇄 방법을 사용하여 제조 할 수 있습니다.이 준비 방법은 미토콘드리아 제제의 수율을 극대화합니다. 프로토콜을 읽으면 모든 구성 요소 와 도구의 가용성을 보장하고 완전히 충전 된 파쇄기 드라이브를 확인하고 단계에 익숙해지기 위해 원치 않는 조직과 함께 운동하는 것이 좋습니다. 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 연구 동료 인 Edina Kosa가 될 것입니다.우선, 심장 조직을 포함하는 튜브의 무게를 기록합니다. 이제 빈 튜브의 무게를 측정하고 심장 조직의 순 무게를 얻기 위해 이전에 기록 된 무게에서 빼냅니다. 얼어붙은 심장 조직을 얼음-차가운 용액의 비커에 직접 넣습니다.5분간 저어줍니다. 동시에 핀셋을 사용하여 가능한 한 많은 혈액을 얻기 위해 조직에 약간의 압력을 가합니다. 집게로 조직을 꺼내 깨끗한 필터 종이 타월로 심장을 짜서 혈액을 제거하십시오.그런 다음 조직을 얼음 차가운 용액의 또 다른 비커에 넣습니다. 5 분 동안 조직을 교반 한 후, 종이 타월에 조직을 부드럽게 말리고 지방, 응고 혈액, 오리클 및 근막을 제거합니다. 심실 조직을 풀.조직 샘플을 분쇄하려면 50~300밀리그램의 심장 조직을 램 측의 조직 분쇄챔버에 넣고 램 쪽을 닫습니다. 그런 다음 튜브의 캡 측에 세척 버퍼의 약 0.2 ~ 0.8 밀리리터를 추가합니다. 튜브 도구를 사용하여 분쇄기 캡으로 분쇄기 챔버를 과도하게 조이지 않고 아늑하게 캡하십시오.파쇄기 챔버를 분쇄자 홀더 유닛에 넣고 램 면을 아래로 내려 놓습니다. 분쇄기 캡으로 완전히 충전된 분쇄기 드라이버의 비트를 삽입하고 결합하여 비트가 제자리에 고정되도록 한 다음 분쇄기 홀더의 압력 표시등이 약 2개의 설정에 도달할 때까지 분쇄기 챔버의 분쇄기 드라이버에 압력을 가합니다. 트리거를 누르고 두 개의 설정을 유지하면서 파쇄기 드라이버를 약 10~12초 동안 실행합니다.튜브를 관찰하여 리시스 디스크를 통해 조직 질량의 전부 또는 대부분을 상부 분쇄기 챔버로 파쇄하고 전달하고 필요한 경우 튜브를 분쇄자 홀더로 돌려 보내 파쇄를 계속합니다. 시료를 분쇄한 후 분쇄기 챔버를 홀더 유닛 밖으로 들어 올리고 튜브 도구를 사용하여 분쇄기 캡을 제거하고 나중에 다른 조직 샘플의 교차 오염을 피하기 위해 동일한 샘플 내에서만 사용하는 것이 좋습니다. 파쇄된 심장 조직을 40밀리리터의 세척 완충제로 세컨드 비커로 옮기고 교반판에 있는 동안 중간 속도로 5분간 조직을 저어줍니다.미리 젖은 나일론 메쉬 모노필라멘트를 통해 서스펜션을 필터링합니다. 여과를 폐기한 후 파쇄된 조직을 10밀리리터의 세척 완충제로 필터에 세 번 세척합니다. 세척된 조직을 50밀리리터 비커로 옮기고, 20밀리리터의 세척 버퍼를 자기 교반에 넣습니다.트립신 용액의 0.5 밀리리터를 추가하면서 15분 동안 지속적으로 저어줍니다. 교반을 통해 약 반쯤 티슈 서스펜션을 느슨하게 장착된 핸드헬드 유리 온 글래스 균질화제로 전달하여 15밀리리터의 부피를 보유할 수 있다. 거품을 생산하지 않고 4 ~ 5 개의 부드러운 스트로크로 서스펜션을 균질화하십시오.그런 다음, 50 밀리리터 비커에 호모게네이트를 놓고 교반 접시에 섞습니다. 다음으로, 트립신 억제제가 함유된 절연 버퍼10밀리리터를 균질에 넣고 부드럽게 교반하면서 배양한다. 나일론 필터를 통해 서스펜션을 다시 걸러낸 후 필터를 50밀리리터 원추형 튜브에 저장하고 필터에 남은 미립자 분획을 유리 온 유리 균질화제로 옮긴다.세척 버퍼의 15~20밀리리터에서 25~30초 동안 손으로 부드럽게 균질화합니다. 호모게네이트를 여과물과 결합하고 튜브의 균형을 맞추고 원심분리기를 사용한 다음 플라스틱 파이펫을 사용하여 상피 펠릿 의 상단에서 0.2 밀리리터를 남깁니다. 나일론 필터를 사용하여 결과 상체를 새로운 원뿔 튜브로 필터링하여 오염및 원심분리기를 한 번 더 피하십시오.상체를 폐기한 후 펠릿을 파손하거나 오염시키는 것을 방지하기 위해 튜브 측면에 격리 버퍼를 추가하여 펠릿을 2~3회 세척한다. 매번 푹신한 흰색 외부 림 레이어를 폐기하십시오. 각 튜브에 절연 버퍼 5밀리리터를 추가하고 1 밀리리터 팁 또는 새로운 이송 파이펫이 있는 파이펫을 사용하여 펠릿을 분해한 다음 서스펜션을 추가 절연 버퍼 20밀리리터로 희석하고 섭씨 4도에서 15분 동안 서스펜션을 8, 500 X g에서 원심분리합니다.상체를 폐기한 후 펠릿을 5밀리리터로 먼저 회수한 다음, 섭씨 4도에서 15분 동안 8, 500 X g에서 재차중단 버퍼와 원심분리기의 15밀리리터를 추가로 회수한다. 이제 상체를 버리고 씻은 그대로 미토콘드리아가 들어있는 갈색 펠릿을 저장합니다. 프로테아제 억제제를 포함한 재중단 완충제의 250 마이크로리터에서 미토콘드리아 농축 펠릿을 다시 중단한다.Aliquot는 25 마이크로리터 부피의 현탁액을, 액체 질소의 빠른 동결 및 몇 년 동안 섭씨 80도 깊은 냉동고에 보관하십시오. 프로토콜에 따라 미토콘드리아농축 단백질은 두 그룹의 뿌리에 태어난 자손의 심장부에서 제조되었다. 하나는 임신 중에 운동을했고 다른 하나는 앉아있었습니다.ETC 단백질 프로파일 분석은 운동 된 뿌리의 자손이 ETC 복합체 중 일부에서 상대적으로 감소 된 수준을 제시한다는 것을 밝혔다. 미토콘드리아 단백질은 3~8%의 그라데이션 BN-PAGE에서 해결되었으며 항체 칵테일로 면역 프로브를 하였다. 운동과 앉아있는 그룹 모두 여러 초복합체를 전시합니다.관찰 된 눈에 띄는 슈퍼 컴플렉스 증가는 앉아있는 그룹에 비해 운동 그룹에서 9 개월이었다. 운동 분석기를 이용하여 복합 I-II 활성을 위해 48시간 3개월, 6개월 9개월의 다른 연령대로부터 얻은 미토콘드리아 농축 단백질을 분석하였다. 운동 그룹은 앉아있는 그룹의 것과 비교하여 복잡한 I-II 활동을 보여 주었다.냉동 조직 및 세포에서 얻은 미토콘드리아에 대한 기능적 연구의 타당성은 다른 조사자들에 의해 나타난다. 냉동 조직으로부터 얻은 미토콘드리아의 제제는 최소한의 손상으로 다양한 조직에 적용될 수 있다.

measuring-mitochondrial-electron-transfer-complexes-previously-frozen

Research

연구

JoVE Journal

Biochemistry

생화학

광근의 lateralis의 조직 검사, 정제 미토콘드리아의 준비, 호흡계 프로파일 링하는 방법이 설명되어 있습니다. 작은 부피의 근육 사용은 임상 연구 애플리케이션이 기술에 적합하다.

경피적 바늘 생검에 의해 획득 골격근 조직에서 고립 된 미토콘드리아의 준비 및 호흡계 평가

제시된 방법은 최소한의 마우스 골격근에서 분리된 미토콘드리아를 사용하여 마이크로플레이트 기반 호흡 측정 분석 모음의 수행을 위한 단계별 지침을 제공합니다. 이러한 분석은 일반적으로 사용되는 동물 모델에서 미토콘드리아 산소 소비량의 기계론적 변화/적응을 측정할 수 있습니다.

높은 처리량 마이크로 호흡 측정을위한 마우스 골격근의 최소 수량에서 미토콘드리아 격리 사용

여기, 우리는 미토 콘 드리 아 산소 소비, 영양에 너 지론, 및 양성자 누출, 미토 콘 드리 아에서 ATP 비능률적의 주요 원인의 정의 개념을 측정 하기 위한 방법 공유. 이러한 결과 미토 콘 드리 아 기능을 평가할 수 있도록 영양소 사용률에 에너지의 30%에 대 한 계정 수 있습니다.

홀스타인 젖소에서 미토 콘 드리 아 호흡 추정 간 미토 콘 드리 아 산소 소비와 양성자 누출 속도 론 측정

이 프로토콜의 목표는 어떻게 다양 한 요인에에서 산소 소비를 변경할 수 있습니다 검사 마우스 신생아 cardiomyocytes 모델 시스템으로 사용 하는 방법을 보여 줍니다.

세포 외 유출 분석기를 사용 하 여 기본 교양된 마우스 신생아 Cardiomyocytes에 산소 소비 속도 분석

우리는 현장에서 포획한 야생 동물의 고립된 미토콘드리아에서 호흡수를 측정하기 위해 이동식 실험실을 설계하고 건설했습니다. 여기에서는 이동식 미토콘드리아 실험실의 설계 및 의장과 관련 실험실 프로토콜에 대해 설명합니다.

현장에서 미토콘드리아 에너지를 측정하기 위한 이동식 미토콘드리아 생리학 실험실 개발

여기에서는 마우스 골격근으로부터의 미토콘드리아를 분리하는 상세한 방법과 마이크로플레이트 기반 호흡 측정법을 사용하여 산소 소모율(OCR)에 의한 호흡의 후속 분석을 설명한다. 이 파이프 라인은 미토콘드리아 대사에 대한 여러 환경 또는 유전 적 개입의 효과를 연구하는 데 적용될 수 있습니다.

호흡 측정을 위한 마우스 골격근으로부터 미토콘드리아의 분리

이 방법은 야생형 대조군에 비해 증가된 심근세포 미토콘드리아 코엔자임 Q 함량을 갖는 신생아 깨지기 쉬운 X 증후군 마우스에서 기공 개방에 대한 전압 역치를 결정하기 위해 낮은 전도도 양성자 누출에 대한 미토콘드리아 투과성 전이 기공의 기여를 이용한다.

코엔자임 Q 과량의 설정에서 미토콘드리아 투과성 전이 기공의 개방 확률의 평가

말은 뛰어난 유산소 운동 능력을 가지고 있어 말 골격근을 말 운동 생리학 연구와 포유류 미토콘드리아 생리학 연구 모두에 중요한 조직으로 만듭니다. 이 기사에서는 말 골격근의 미토콘드리아 기능을 종합적으로 평가하는 기술을 설명합니다.

말 골격근의 고분해능 불소 호흡 측정

여기에서는 인간 또는 생쥐 근육의 신선한 투과화된 골격근 섬유에서 미토콘드리아 산화 인산화를 측정하는 포괄적인 방법을 설명합니다. 이 방법을 사용하면 미토콘드리아 호흡을 실시간으로 정량화하고 연료 선호도 및 대사 유연성을 평가하는 동시에 기존 미토콘드리아 네트워크와 멤브레인 무결성을 유지할 수 있습니다.

고분해능 호흡 측정법을 통한 인간 및 생쥐 골격근 섬유의 미토콘드리아 호흡 측정

미토콘드리아에 대한 생체 에너지 및 대사체 연구는 많은 질병에서 미토콘드리아의 다면적인 역할을 밝혀냈지만, 이러한 세포 소기관에 대한 분리 방법은 다양합니다. 여기에 자세히 설명된 방법은 여러 조직 소스에서 고품질 미토콘드리아를 정제할 수 있습니다. 품질은 호흡 조절 비율 및 고해상도 호흡 측정법으로 평가된 기타 지표에 의해 결정됩니다.

설치류 심장 조직으로부터 강력한 미토콘드리아 분리 

학습하세요 냉동 보관된 심장 조직에서 미토콘드리아 풍부 샘플을 준비하는 방법을. 부드러운 조직 분쇄 기법을 사용하여 미토콘드리아 수율을 극대화하고 실험 동물 사용을 최소화할 수 있습니다.

소우의 자손에서 이전에 냉동 된 심장 조직에서 미토콘드리아 전자 전송 복합체 측정 : 운동 유발 미토콘드리아 생물 에너지 변화를 평가하는 모델

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