2021년 10월 26일
이 작업은 개의 체성 감각 시스템을 평가하기 위한 기계적 및 고온 열 정량적 감각 테스트를 위한 표준 프로토콜을 설명합니다. 감각 역치는 전자 von Frey 마취계, 압력 알고리즘계 및 고온 접촉 열도를 사용하여 측정됩니다.
정량적 감각 테스트 또는 QST를 사용하여 개의 감각 역치를 평가하기 위한 이 프로토콜은 연구를 표준화하는 데 도움이 되어 서로 다른 연구에서 가치 있는 비교를 가능하게 합니다. 이 기술은 개의 감각 역치를 측정하는 비침습적 방법을 제공합니다. 당사의 프로토콜은 연구자가 정확하고 일관된 데이터를 얻기 위한 모범 사례를 안내하는 데 도움이 됩니다.
이 프로토콜은 수술 후 및 만성 통증 상태와 관련된 질병을 포함하여 개의 통증 감각 메커니즘에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 이 기술의 가장 중요한 측면은 개의 행동을 인식하는 것이다. 안전하고 정확한 검사를 위해 관련된 모든 사람은 개의 행동과 불안 수준을 염두에 두어야 합니다.
단단한 0.9mm Von Frey 팁을 로드 셀에 부드럽게 적용하여 로드 셀이 핸드피스에 단단히 나사로 고정되었는지 확인하여 기기 설정을 정렬하는 것으로 시작합니다. 그런 다음 M0 채널을 통해 핸드피스의 코드를 녹음 장치로 연결합니다. 그런 다음 녹음 장치를 켜고 최대 버튼을 눌러 개가 적용된 자극에 반응할 때 달성되는 최대 힘을 기록하고 표시합니다.
CLR 버튼을 눌러 기기를 영점화합니다. 데이터를 수집하고 임계값을 측정하려면 개에게 눕도록 지시한 다음 개가 측면 누운 자세로 가도록 돕습니다. 개를 그 위치에 유지하고 상대적으로 가만히 유지하기 위해 최소한에서 중간 정도의 구속을 가하십시오.
테스트 중인 개의 팔다리를 부드럽게 수동으로 지지하여 팔다리가 바닥에서 떨어지지 않도록 하고 개가 팔다리를 빼는 것을 막지 않으면서 힘을 가할 수 있는 안정적인 지지대를 제공합니다. 개가 침착하고 편안해지면 사지가 70% 확장으로 테스트되고 자극을 한 번 적용합니다. Von Frey 팁을 테스트 부위의 피부에 수직으로 놓습니다.
개가 Von Frey 팁이 피부에 닿는 느낌으로 반사 움직임을 보이면 Von Frey 팁을 다시 바르기 전에 개가 팔다리를 다시 이완시키도록 하십시오. 피부가 반사 운동을 일으키지 않으면 Von Frey 팁을 적용하여 측정하십시오. 개가 팔다리를 빼고 목소리를 낼 때까지 Von Frey 팁으로 초당 20g으로 꾸준히 증가하는 힘을 가하십시오.
자극을 보기 위해 몸을 돌리거나 자극에 대한 의식적 인식을 나타내는 다른 움직임이나 행동 반응을 보입니다. 개가 팔다리를 빼거나 최대 힘에 도달하면 자극을 제거하고 녹음 장치에 표시된 최대 힘을 기록합니다. 5번의 시도에 대해 측정을 반복하고, 개가 아무런 제지 없이 또는 최소한의 구속 없이 비교적 침착하고 편안한 상태를 유지하는 경우 측면 누운 상태로 각 측정 사이에 1분을 허용합니다.
CLR 버튼을 눌러 각 단계 사이에 기기를 영점 조정합니다. 다음으로, 데이터 수집의 용이성을 나타내기 위해 0에서 5까지의 타당성 점수를 기록합니다. 무딘 프로브 압력 알고미터로 측정을 시작하기 전에 개에게 5 분의 휴식을 취하십시오.
기기를 설정하는 동안 작고 뭉툭한 프로브가 장치에 단단히 나사로 고정되어 있는지 확인하십시오. 그런 다음 녹음 장치를 켜고 화면에 메시지가 표시되면 최대 버튼을 눌러 계속합니다. 단위가 화면 상단에 그램으로 표시될 때까지 단위 버튼을 누르고 영점 버튼을 눌러 기기를 영점 조정합니다.
다음으로, 앞에서 언급한 임계값을 측정하기 위해 개를 옆으로 누운 상태로 놓고 준비합니다. 뭉툭한 프로브를 테스트 부위의 피부에 수직으로 적용하여 개가 자극에 대한 의식적 인식을 나타내는 행동 반응을 보일 때까지 초당 20g의 속도로 프로브로 꾸준히 증가하는 힘을 가합니다. 개가 팔다리를 빼거나 최대 힘에 도달하면 자극을 제거하십시오.
기록 장치에서 가해진 최대 힘을 기록한 후 총 5번의 시도에 대해 측정을 반복합니다. 시험이 진행되는 동안 편안함을 유지하기 위해 개가 QST 방에서 앉거나 서거나 움직일 수 있도록 측면 누운 자세를 유지하도록 합니다. 그런 다음 후속 측정 전에 개를 측면 누운 상태로 교체하십시오.
0에서 5까지의 실현 가능성 점수를 기록하여 데이터 수집의 용이성을 나타냅니다. 뜨거운 열 프로브로 측정을 시작하기 전에 개에게 5분의 휴식을 주십시오. 실험을 시작하기 전에 앞에서 설명한 대로 개를 준비하십시오.
그런 다음 테스트 중인 영역의 피부에 thermode를 바르고 테스트 탭의 왼쪽 하단 모서리에 있는 시작 버튼을 클릭하여 테스트를 시작합니다. 개가 자극에 대한 의식적 인식을 나타내는 움직임이나 행동 반응을 보이거나 최대 대기 시간에 도달하면 스톱워치를 중지하는 동시에 온도를 제거하십시오. 인출할 대기 시간을 기록합니다.
먼저 중지 버튼을 클릭한 다음 각 측정 사이에 사전 테스트 버튼을 클릭하여 써모드 가열을 중지하여 총 5번의 시도에 대해 측정을 반복합니다. 이를 통해 소프트웨어는 다음 응용 프로그램을 준비하기 위해 thermode를 재보정할 수 있습니다. 0에서 5까지의 실현 가능성 점수를 기록하여 데이터 수집의 용이성을 나타냅니다.
대표적인 분석은 건강하고 통증이 없는 개 그룹의 기계적 및 고온 열 QST 데이터를 요약합니다. 전자 Von Frey 감각 임계 측정 데이터는 신체 체중이 감각 역치에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났습니다. 체중의 유사한 영향이 무딘 프로브 압력 알고리즘계 감각 임계값의 데이터에서 발견되었습니다.
반면에, 열탐침 감각 잠복기에 대해 수집된 데이터는 체중이 감각 잠복기에 유의한 영향을 미치는 것으로 나타났습니다. 기계적 및 열적 QST에 대한 전체 평균, 표준 편차 및 감각 역치의 범위는 통증이 없는 건강한 개와 동일한 그룹에 요약되었습니다. 이것은 이러한 기술을 사용하는 미래의 연구자들에게 참조 값을 제공합니다: 자극에 대한 의식적 인식을 나타내는 개의 행동 반응을 안정적으로 식별하는 것이 가장 중요합니다.
정량적 감각 테스트 외에도 검증된 주인 설문지와 정서적 반응 테스트를 통해 행동 정보를 수집하면 개의 정서적 상태에 대한 포괄적인 평가를 제공하는 데 도움이 될 수 있습니다.
전체 스크립트를 보고 수천 개의 과학 동영상에 액세스하세요
본 연구는 기계적 및 열적 자극 방법을 이용하여 개의 체성감각계를 평가하기 위한 정량적 감각 검사(QST)의 표준 프로토콜을 제시합니다. 전자 von Frey 마취계 및 압력 통각계와 같은 도구를 활용함으로써, 본 프로토콜은 다양한 연구 간의 비교가 가능하도록 평가 과정을 표준화하는 것을 목표로 합니다.
개에서의 정량적 감각 검사(Quantitative sensory testing, QST)는 체성감각 기능을 평가하기 위한 표준화된 비침습적 접근 방식을 제공하며, 이는 중개 통증 연구 및 비교 모델 개발을 뒷받침합니다. 기준 감각 역치와 행동 종말점을 설정함으로써 진통제 후보 물질에 대한 보다 예측 가능한 전임상 평가와 수의학 및 비교 신경과학 파이프라인에서의 기전적 리스크 감소가 가능해집니다. 표준화된 QST 프로토콜은 연구 간 및 사이트 간 데이터 비교 가능성을 높여, 초기 발견 및 중개 연구 단계에서의 포트폴리오 의사결정을 강화합니다.
QST는 통증 및 감각 장애 파이프라인에서 타겟 검증, 리드 최적화 및 중개 바이오마커 개발을 위한 기능적 판독법으로서 발견 단계부터 전임상 단계까지의 연속 과정에 통합됩니다.