인 비보 큰 동물의 망막 신경 세포 및 시신경 기능 및 구조를 평가하는 방법

안녕 여러분. 원저우안과병원 이쿠이 장입니다. 상부 신경은 오렉스신 신경절 세포에서 엑손이 부족하고, 그 후 뇌에 시각적 신호를 전송합니다.

상부 신경 상해의 더 큰 모형은 로봇 모형에서 림프 응용으로 새로운 처리를 번역하기 위하여 필수적입니다. 여기서, 우리는 큰 동물에서 상부 신경에서 orexin 신경절 세포의 구조 와 기능을 평가하는 생체 내 방법을 설명합니다. 이 방법을 단계별로 제시함으로써 실험적 생식 장애를 증가시키고 더 큰 신경증 모델의 사용을 용이하게 할 수 있기를 바랍니다.

전자 면도기로 면도하십시오. 그리고, 피부를 청소하고 피하 정맥을 노출하기 위해, 세 번 70 %의 알코올로 준비. 주변 정맥 캐스터를 정맥으로 삽입합니다.

그런 다음 아트로핀과 프로포폴을 드립. 6mm 기관관으로 염소를 삽관하고 인공 호흡보호구에 연결합니다. 마취는 일정한 2리터 관리 유량으로 산소에서 3.5%의 이소플루란으로 유지되었다.

온도 센서를 염소의 혀 아래에 놓습니다. 산소 포화도 를 염소 귀의 근위 쪽 끝으로 잘라냅니다. 혈압 커프를 허벅지 바닥에 묶습니다.

전자선 클램프는 팔다리에 순서대로 갈라놓습니다. 그런 다음 염소의 중요한 지표를 모니터링 할 수 있습니다. 모발을 면도하고 전두엽 뼈의 중앙에서 베타딘과 70%의 알코올로 피부를 소독합니다.

가위와 손톱이 들어 있는 멸균기 가방을 엽니다. 가위로 두개골을 노출하기 위해 피부 절개를 합니다. 정면 뼈의 중앙에 이식용 강철 나사.

모발을 면도하고 베타딘으로 피부를 소독하고 후두 뼈에 있는 두 개의 귀의 중간 지점에서 70%의 알코올을 세 번 소독합니다. 피부 절개를 합니다. 후두 뼈에 두 개의 귀의 중간 지점에 이식하기위한 강철 나사.

지상 바늘 전극은 전두엽 두개골 나사 아래에 피하로 삽입됩니다. 활성 전극 및 기준 전극은 전극 발기 부전을 줄이기 위해 악어 클립과 함께 각각 전두엽 및 후두 나사에 연결됩니다. 한쪽 눈을 패치합니다.

안구 표면에 국소 마취 점안액을 적용합니다. 양쪽의 동공은 mydriasis 점안액에 의해 넓혀집니다. 염소의 머리를 가스로 채워진 자극기에 배치하여 외음광을 조준합니다.

자극기와 염소 머리 위에 검은 담요를 5분간 조정합니다. 눈꺼풀 관은 동공을 완전히 노출하는 데 사용됩니다. 전극 조직 접촉 발기 부전을 확인하십시오.

발기 부전이 같은 방에있는 다른 전기 장치에서 전자기 간섭을 피하기 위해 각각 10 킬로미터 미만인지 확인하십시오. 빛 자극 없이 베이스라인 노이즈를 확인합니다. FVEP 레코딩을 시작합니다.

각 광 강도에서 FVEP 레코딩이 두 번 수행됩니다. 마른 것처럼 보이는 경우 인공 눈물로 각막을 촉촉하게 합니다. 반대되는 눈을 위한 단계에 대해 반복합니다.

다른 빛 강도에서 FVEP 레코딩을 연속적으로 시작합니다. 각 레코딩에 대해 64개의 추적이 평균으로 되어 하나의 파 형태를 생성합니다. FVEP 파형의 첫 번째 양성 및 활성 피크는 P1 및 N1로 지정되었습니다. 멸균 된 접지 전극은 귓불에 배치됩니다.

멸균 활성 및 기준 전극은 각각 중간선및 전두엽 및 후두 뼈를 따라 피하적으로 삽입됩니다. 눈꺼풀 관은 동공을 완전히 노출하는 데 사용됩니다. 한쪽 눈을 패치합니다.

다른 눈의 VEP 응답을 연속적으로 다른 공간 주파수에서 기록합니다. 악어 클립으로 접지 전극에 연결합니다. 두 개의 멸균 된 바늘 참조 전극은 양쪽에 측면 캔투스 뒤에 1 센티미터 피부 아래에 배치됩니다.

눈꺼풀 관은 동공을 완전히 노출하는 데 사용됩니다. 소독된 ERG 기록 전극 2개는 인공 눈물의 국소 적용 후 두 각막을 중심으로 한다. 시야거리가 50cm인 각 눈 앞에 두 개의 자극기가 배치됩니다.

발기 부전이 10킬로미터 미만인지 확인합니다. 빛 자극 없이 베이스라인 노이즈를 추적합니다. 외래 의 빛을 목표로합니다.

다양한 공간 주파수에서 두 눈에서 동시에 패턴 ERG 레코딩을 연속적으로 시작합니다. 마지막으로 화면으로 돌아와 시각적 자극기와 능동 제어 없이 패턴 ERG를 기록합니다. 밴드패스 필터는 세 개의 CPD 패턴 ERG에 대해 1개에서 75 헤르츠까지 다양하게 설정됩니다.

밴드패스 필터는 1~50 헤르츠까지 진폭에 영향을 주지 않고 모양을 부드럽게 합니다. 파형의 첫 번째 양성 및 활성 피크는 P1 및 N1로 지정됩니다. N1에서 측정된 ERG 진폭은 전극 발기 부전을 P1.To 감소시키고, 멸균된 바늘 기준이 전두엽 피부 아래에 배치된다. 그리고 멸균된 바늘 기준 전극은 한쪽면에 측면 캔투스 뒤에 1센티미터 의 피부 아래에 배치된다.

소독된 ERG 기록 전극은 인공 눈물의 국소 적용에 각막에 배치된다. 한쪽 눈을 패치합니다. 디스플레이는 50cm의 시야 거리에 배치됩니다.

눈꺼풀 관은 동공을 완전히 노출하는 데 사용됩니다. 그런 다음 염소는 턱 받침대위에 놓입니다. 염소를 카메라와 정렬하여 머리 위치를 수정하여 공초점 스캔 레이저 안과 이미지에서 시신경 머리를 보냅니다.

시작 버튼을 클릭하여 검색 종료 단계를 입력합니다. 기기가 로딩을 완료할 때까지 기다립니다. 노란색 시작 버튼을 눌러 형식 이미징을 시작합니다.

조이스틱을 조정하여 적외선 이미지를 고르게 비추어 이미지 품질을 향상시킵니다. 오른쪽 상단 화면에 수직 망막 OCT 이미지가 표시될 때까지 카메라를 앞으로 밉드합니다. 조이스틱을 수정하여 수평 망막 OCT 이미지에서 균일하게 춤을 추세요.

조이스틱의 버튼을 눌러 이미지를 자동으로 잡습니다. 이 조이스틱을 잡고 이미지 실행이 완료될 때까지 라이브 이미지 화면에서 이미지 품질을 유지합니다. 그런 다음 획득을 누릅니다.

고품질 초기 사진을 선택합니다. 마우스 오른쪽 단추를 클릭하고 참조 를 설정합니다. 후속 버튼을 눌러 프로그램이 현재 스캔을 베이스라인 검사와 자동으로 일치시킬 수 있도록 합니다.

일치하면 조이스틱의 버튼을 눌러 자동 실시간 추적을 활성화했습니다. 측정 버튼을 클릭하여 측정 플랫폼을 입력합니다. 지우개 도구를 선택하고 자동으로 컴퓨터에 레이블이 지정되는 RFL 라인을 지웁울 수 있습니다.

IPL과 INL 사이의 경계를 수동으로 윤곽을 그리려면 선 그리기 도구를 선택합니다. 빨간색과 파란색 선 사이에는 GCC 복합체가 있습니다. rhesus 원숭이에서 망막 변경 된 이미징은 염소에 사용되는 것과 동일한 장비와 절차를 사용하여 수행됩니다.

그림 A는 염소에서 대표적인 FVEP를 보여줍니다. 도 B는 염소에서 대표적인 패턴 ERG 파형을 나타낸다. 도면 C는 rhesus 원숭이에서 대표적인 패턴 FVEP를 나타낸다.

그리고, 도면 D는 rhesus 원숭이에 대표적인 패턴 ERG 파형태를 나타낸다. 그림 2는 시신경 헤드 와 염소와 rhesus 원숭이의 다른 주변 지역에서 GCC 복합체의 두께 를 중심으로 대표적인 망막 OCT 이미지를 보여줍니다. 대형 동물 모델은 번역 연구에서 중요한 역할을 합니다.

많은 경우에, 작은 동물 모형에 있는 유망한 치료 효력은 인간적인 환자에게 번역되지 못했습니다. 이 연구에서는, 우리는 염소와 rhesus 원숭이FVEP, PERG 및 OCT의 비디오 프로토콜을 제시했습니다. 이러한 생체 내 방법은 녹내장 허혈성 또는 외상성 신경병증 및 광학 신경염과 같은 다양한 광학 신경증의 더 큰 모델에 적용될 수 있다.