-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

KR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ko_KR

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
재조합 퍼프렌고리신 O-퍼메아빌화 세포에서 미토콘드리아 기질 플럭스 측정
재조합 퍼프렌고리신 O-퍼메아빌화 세포에서 미토콘드리아 기질 플럭스 측정
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Measuring Mitochondrial Substrate Flux in Recombinant Perfringolysin O-Permeabilized Cells

재조합 퍼프렌고리신 O-퍼메아빌화 세포에서 미토콘드리아 기질 플럭스 측정

Full Text
2,810 Views
06:17 min
August 13, 2021

DOI: 10.3791/62902-v

Moustafa Elkalaf1,2, Karolína Vaněčková1,2, Pavla Staňková1, Zuzana Červinková1, Jan Polák*2,3, Otto Kučera*1

1Department of Physiology, Faculty of Medicine in Hradec Králové,Charles University, 2Department of Pathophysiology, Third Faculty of Medicine,Charles University, 3Department of Internal Medicine,University Hospital Kralovske Vinohrady

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a modified protocol for assessing mitochondrial respiratory substrate flux using recombinant perfringolysin O in conjunction with microplate-based respirometry. The research highlights the impact of metformin on mitochondrial respiration across two distinct tumor cell lines, A549 and Hep G2.

Key Study Components

Research Area

  • Mitochondrial metabolism
  • Cellular response to pharmacological treatments
  • Oncology and cancer research

Background

  • The importance of mitochondrial function in various pathologies
  • How drugs like metformin influence cancer cell metabolism
  • Previous methods to assess mitochondrial respiration

Methods Used

  • Microplate-based respirometry
  • A549 and Hep G2 tumor cell lines
  • Recombinant perfringolysin O for permeabilization

Main Results

  • Metformin treatment increased succinate-induced respiration in A549 cells compared to Hep G2 cells.
  • Similar enhancements observed in pyruvate malate and glutamate malate induced respiration.
  • The findings validate the potential of utilizing mitochondrial respiration assays to explore drug impacts in cancer research.

Conclusions

  • The study demonstrates a novel method for evaluating drug effects on mitochondrial function in cancer cells.
  • This could facilitate further research into metabolic targeting in oncology.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using microplate respirometry?
Microplate respirometry allows for high-throughput screening, requiring minimal samples while providing reliable data on mitochondrial function.
How does metformin affect mitochondrial respiration?
Metformin alters mitochondrial respiration, which can reveal important insights into the metabolic adaptation of cancer cells.
What cell lines were used in this study?
A549 and Hep G2 tumor cell lines were analyzed for their mitochondrial respiration responses to metformin treatment.
Why is recombinant perfringolysin O important in this protocol?
Recombinant perfringolysin O is used to permeabilize cell membranes, facilitating the assessment of mitochondrial function without the interference of cellular metabolic processes.
What was a key finding regarding mitochondrial respiration between the two cell lines?
A549 cells exhibited a higher rate of mitochondrial respiration induced by succinate when compared to Hep G2 cells.
Can this method be applied to other types of cancer research?
Yes, this method is versatile and can be adapted to study various cancer types and other conditions affecting mitochondrial metabolism.
How is the assay prepared before measurement?
The assay involves cell seeding, treatment with substrates, and calibration of the respirometry analyzer to ensure accurate results.

이 작품에서는, 우리는 마이크로 플레이트 기지를 둔 호흡측정과 조합하여 재조합 퍼프렌고리신 O를 사용하여 미토콘드리아 호흡 기질 플럭스를 시험하기 위하여 수정된 프로토콜을 기술합니다. 이 프로토콜을 통해 메트포르민이 두 개의 다른 종양 세포주의 미토콘드리아 호흡에 어떻게 영향을 미치는지 보여줍니다.

그것은 다른 병리 또는 치료에 영향을 받을 수 있는 미토콘드리아 기질 플럭스를 테스트 하기 때문에. 예를 들어, 오늘 우리는 메트포르민 치료에 암 세포 반응을 밝히기 위해 그것을 사용할 것입니다. 그것은 각 별개의 물질에 대한 충분한 복제 및 적절한 제어를 하면서 세포의 최소한의 수를 필요로한다.

분석기는 연구용전용입니다. 이 기술은 미토콘드리아 대사의 오류를 식별할 수 있으며 미토콘드리아에 영향을 미치는 전사 약물을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 절차를 시연하는 것은 카롤리나 바네코바 (Karolina Vaneckova)가 내 실험실에서 학부 학생 및 연구 기술자가 될 것입니다.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

생물학 문제 174 마이크로 플레이트 호흡학 미토콘드리아 메트포르민 과미성세포 퍼프렌굴린신 O 미토콘드리아 기질

Related Videos

미토콘드리아 절연 마우스 중심부에 투과율 전환 기공 영업의 다중 매개 변수 측정

13:42

미토콘드리아 절연 마우스 중심부에 투과율 전환 기공 영업의 다중 매개 변수 측정

Related Videos

22.1K Views

살아있는 세포와 투과화된 세포에서 미토콘드리아 호흡을 평가하기 위한 산소 플럭스 측정

05:44

살아있는 세포와 투과화된 세포에서 미토콘드리아 호흡을 평가하기 위한 산소 플럭스 측정

Related Videos

415 Views

높은 처리량 마이크로 호흡 측정을위한 마우스 골격근의 최소 수량에서 미토콘드리아 격리 사용

10:39

높은 처리량 마이크로 호흡 측정을위한 마우스 골격근의 최소 수량에서 미토콘드리아 격리 사용

Related Videos

14.3K Views

고해상도 호흡율은 투과성이 그대로 세포에서 미토콘드리아 기능을 평가하는

08:33

고해상도 호흡율은 투과성이 그대로 세포에서 미토콘드리아 기능을 평가하는

Related Videos

42.8K Views

조직의 최소 금액을 사용 하 여 초파리의 Permeabilized 섬유에 미토 콘 드리 아 산소 소비량의 측정

14:55

조직의 최소 금액을 사용 하 여 초파리의 Permeabilized 섬유에 미토 콘 드리 아 산소 소비량의 측정

Related Videos

12.4K Views

고해상도 호흡 측정법에 의한 좌골 신경의 미토콘드리아 기능 평가

08:19

고해상도 호흡 측정법에 의한 좌골 신경의 미토콘드리아 기능 평가

Related Videos

2.9K Views

호중구의 미토콘드리아 생물에너지 프로파일의 실시간 측정

09:39

호중구의 미토콘드리아 생물에너지 프로파일의 실시간 측정

Related Videos

2.6K Views

포유류의 미토콘드리아 기능을 측정하기 위한 산소 비의존적 분석

05:59

포유류의 미토콘드리아 기능을 측정하기 위한 산소 비의존적 분석

Related Videos

3.5K Views

고분해능 호흡 측정법을 통한 인간 및 생쥐 골격근 섬유의 미토콘드리아 호흡 측정

08:12

고분해능 호흡 측정법을 통한 인간 및 생쥐 골격근 섬유의 미토콘드리아 호흡 측정

Related Videos

2.3K Views

인간 면역 세포에서 미토콘드리아 막 전위의 동적 변화를 평가하기 위한 고분해능 폐활량 측정법

07:18

인간 면역 세포에서 미토콘드리아 막 전위의 동적 변화를 평가하기 위한 고분해능 폐활량 측정법

Related Videos

1.7K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code