2021년 11월 6일
여기서 우리는 전통적인 방법에 록 억제제 Y-27632를 추가하여 인간 칭기발 상피 세포의 격리 및 배양에 대한 변형된 방법을 제시한다. 이 방법은 더 쉽고 시간이 많이 걸리며 줄기 세포 특성을 향상시키며 실험실과 임상 응용 분야에서 더 많은 수의 고잠재 상피 세포를 생성합니다.
따라서 이 세포 기반 프로토콜의 일반적인 목표는 직접 가지 방법의 단점을 개선하기 위해 인간 칭기발 상피 세포를 분리하고 만나는 것입니다. 새로운 수정된 내피법에서, 우리는 우리의 재료 및 장비에 근거를 둔 상대적으로 짧은 시간에 1 차적인 gingival 상피 세포의 더 많은 수를 얻을 수 있습니다. 그래서 이 프로토콜에 사용된 인간 조직은 기관의 인간 연구 윤리위원회의 지침에 따라 맥실로면 외과 부에 있는 영향 받은 치아의 추출에서 버려진 신선한 성인 gingival 조직이었습니다.새로운 수정된 효소 방법.Gingival 조직 전처리.30초 동안 75%에탄올로 조직을 세척합니다. 그리고, 각각 5 분 동안 두 번 세척 용액. 깅기발 티슈의 소화.두 개의 수술 블레이드와 작은 조각으로 조직을 잘라. 1.5 밀리리터 원심분리기 튜브에 2.5mg/밀리리터 디스파스및 콜라게나아제-1 용액을 넣습니다. 조직 조각을 1.5 밀리리터 원심분리기 튜브에 넣습니다. 37분 동안 15-20분 동안 배양
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본 논문은 Rock 억제제인 Y-27632를 도입하여 인간 잇몸 상피 세포를 분리하고 배양하는 개선된 방법을 제시합니다. 이 접근법은 프로세스를 단순화하고 소요 시간을 단축하며, 배양된 세포의 줄기세포 특성을 향상시킵니다.
일차 인간 잇몸 상피 세포의 분리는 구강 조직 재생 및 생체 재료 적합성 테스트의 표적 검증을 뒷받침합니다. Y-27632로 강화된 효소법은 세포 수율을 높이고 배양 시간을 단축하여, 임상적으로 유의미한 샘플 확보의 병목 현상을 해결합니다. 이를 통해 치주 재생 및 상피 장벽 연구를 위한 더욱 신뢰할 수 있는 전임상 모델을 구축할 수 있습니다.
이 방법은 하위 표적 결합 및 표현형 스크리닝 응용 분야에 활용 가능한 검증된 상피 세포를 제공함으로써 초기 발견 워크플로우에 적합합니다.