1-(2-[^18F]플루오로에틸)-L-트립토판의 방사 합성 1-포트, 2단계 프로토콜 사용

이 프로토콜의 전반적인 목표는 한 포트, 두 단계 접근 방식으로 F18 방사성 표지 트립토판 추적기를 방사성 합성하는 것입니다. 방사성 추적기는 트립토판 대사를 이미징하기위한 광범위한 응용 프로그램을 찾을 수 있습니다. 이 기술은 반감기가 길고 반응 전구체가 적으며 반응 부피가 적고 정화를 위해 환경 적으로 양성 인 방사성 동위원소를 사용합니다.

방사선 추적기는 간질, 신경 정신병 장애 및 신경 종양학을 포함하나 이에 한정되지 않는 뇌에 영향을 미치는 다양한 장애의 진단에 사용될 수 있다. 이 방법은 다른 상업적으로 이용가능한 방사성 표지 모듈에 적용될 수 있다. 일단 F18 불소 용액이 수신되면, 표면의 리드 박스를 측량하여 시작하여 1 미터의 거리에서 최대 방사선 피폭률을 기록하십시오.

배송 상자가 오염되지 않았는지 확인하기 위해 닦아 테스트를 수행 한 후 F18 불소 복용량과 시간을 기록하십시오. F18 불소 용액을 방사선 화학 합성 시스템으로 옮깁니다. 아르곤 라인을 짧은 바늘로 연결하고 긴 바늘로 F18 불소 이송 라인을 F18 불소 바이알에 연결하십시오.

그런 다음 핫 셀 유리 도어와 리드 도어를 닫으십시오. 아르곤 공급을 클릭하여 아르곤 공급 라인을 켭니다. 아르곤 압력을 높이고 F18 플루오라이드 푸시 라인을 켜서 QMA 라이트 카트리지를 통해 수성 F18 플루오라이드를 밀어냅니다.

모든 방사능이 QMA 라이트 카트리지에 갇히고 방사능 검출기 판독이 안정되면 아르곤 압력을 증가시키고 카트리지를 통해 아르곤을 다섯 분 동안 불어 넣어 과도한 물을 제거하십시오. F18 불소 추진 라인을 끈 후 아르곤 압력을 0으로 낮추고 6포트 두 위치 밸브를 F18 불소 포획 위치에서 용출 위치로 전환합니다. 반응 바이알을 열고, 입력 MVP 위치 하나의 아르곤 라인을 켜고, 입력 MVP 위치 하나의 바이알에 K222 및 탄산칼륨 용액을 QMA 라이트 카트리지를 통해 하나의 바이알로 밀어 넣어 방사능을 반응 바이알로 용출시킨다.

F18 불소 용출 위치를 트래핑 위치로 전환합니다. Heat 버튼을 클릭하여 반응기를 섭씨 110도에서 가열하고 반응기에 연결되는 출력 MVP 위치 네 아르곤 라인을 켜고 용매를 증발시켜 출력 MVP 위치 네 바이알로 만듭니다. 냉각(Cool) 버튼을 클릭하여 압축된 이산화탄소로 반응기를 실온으로 냉각시킵니다.

스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 하나를 두 위치로 전환하고 바이알 두 개에 무수 아세토 니트릴을 추가하십시오. 스위핑 라인과 히터를 두 번 켜서 섭씨 110도에서 F18 불소를 공비로 건조시킵니다. 반응기가 실온에 도달하면 스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 두 개를 세 번째 위치로 전환한 다음 바이알 셋에 토실레이트 방사성 표지 전구체를 추가합니다.

반응기를 닫고 반응 혼합물을 섭씨 100도에서 10분 동안 가열한다. 반응 용매를 증발시키려면 반응기가 냉각되면 스위핑 라인을 켜고 섭씨 100도에서 반응 용매를 증발시킵니다. 원자로가 냉각되면 스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 세 개를 네 위치로 전환합니다.

염산 아세토니트릴 혼합물이 첨가되면, 반응을 섭씨 100도에서 10분 동안 가열하여 방사성 표지 전구체 내의 tert-부틸 및 tert-부틸옥시카르보닐 보호기를 탈보호한다. 반응을 중화시키기 위해, 반응기가 실온에 도달하면, 입력 MVP 위치 네 개를 다섯 위치로 전환하고 두 몰 수산화나트륨을 반응 혼합물에 첨가하고 입력 MVP 아르곤 라인을 끕니다. 다음으로, 출력 MVP의 F 버튼을 클릭하여 출력 MVP를 배출 위치 네 개에서 다섯 번째 위치로 전환한 다음 입력 MVP의 F 버튼을 클릭하여 입력 MVP를 다섯 위치에서 여섯 위치로 전환하여 반응 혼합물을 중간 파일로 전송하기 시작합니다.

출력 MVP 아르곤 라인을 켠 후, 적층된 중성 산화알루미늄 및 C8 카트리지를 통해 반응 혼합물을 HPLC 샘플 루프 전에 설치된 중간 바이알로 밀어 넣습니다. 반응기를 헹구기 위해, 출력 MVP 위치 다섯 개를 여섯 위치로 전환하고, 반응 바이알, 카트리지 및 중간 바이알을 통해 출력 MVP 위치 여섯 개의 바이알에서 헹굼 용액을 연속적으로 밀어낸다. 다음으로, HPLC 루프를 주입 위치에서 부하 위치로 전환하고 입력 MVP 아르곤 라인을 켜서 혼합물의 정제를 시작하십시오.

혼합물이 다섯 밀리리터 HPLC 루프에로드되면 로드 버튼을 주입으로 전환하고 HPLC 주입을 클릭하여 분당 세 밀리리터의 유속으로 HPLC 크로마토그램을 시작한 다음 HPLC 모니터 버튼을 클릭하여 실시간 HPLC 크로마토그램에 액세스합니다. 전환 MVP 버튼을 클릭하여 약 12분에 표적 HPLC 분획을 짧은 C18 컬럼으로 전환시킨다. 표적 방사능이 C18 컬럼에서 수집된 후, 네 포트 두 위치 전환 밸브를 폐기물 수집 위치로 전환하고, 6분 동안 분당 네 밀리리터의 속도로 키랄 컬럼을 플러시하여 마이너 D F18 FETrp 거울상이성질체 및 기타 자외선 불순물을 제거하였다.

전환 MVP 버튼을 클릭하여 HPLC 이동상을 분당 세 밀리리터에서 하나씩 제형 MVP 위치로 되돌립니다. 이동상이 키랄 컬럼 및 C18 컬럼을 통과하여 C18 컬럼에 잔류된 L-F18 FETrp를 정제하는 것을 관찰한다. 대략 32 내지 34분에, 표적 분획을 제형 MVP 위치 두 바이알 내로 수집한다.

그런 다음 MVP 제형을 두 바이알 용액을 전달 라인 및 멸균 필터를 통해 최종 용량 바이알 내로 밀어 넣습니다. 멸균 필터를 제거한 후 최종 투여량 활성 및 부피를 분석한다. 시스템을 초순수로 세척한 다음 세척 당 최소 15분 동안 분당 네 밀리리터의 유속으로 에탄올을 세척합니다.

HPLC 펌프 및 PLC 상자를 끄고, 프로그램을 닫고, 압축 된 항공사, 아르곤 라인, 이산화탄소 라인 및 모듈의 주 전원을 종료하십시오. 최종 복용량의 약 0.1 밀리리터를 QC 바이알의 0.2 밀리리터 삽입물에 철회하십시오. 부분 시퀀스 프로그램이 텍스트 원고에 설명되는 대로 핫 샘플을 실행하십시오.

거울상이성질체 과잉 값 및 몰 활성에서 화학적 및 방사화학적 순도를 계산함으로써 QC 데이터를 분석한다. pH 값을 결정한 후 모든 검사 결과가 허용 범위를 통과하면 용량을 해제하십시오. QC에 대한 대표적인 HPLC 크로마토그램이 도시되어 있다.

프로그램의 10분에서 공극 부피 사이의 미미한 피크가 빈 크로마토그램에서 검출되었다. 방사성표지된 표준 참조 L-플루오로에틸-트리토판은 그의 D 대응물의 표준 기준으로부터 잘 분리된 단일 이성질체의 존재를 보여주었다. L-F18 트립토판의 최종 용량은 높은 화학적 순도와 방사화학적 순도를 보였다.

최대 8 시간 동안 최고 용량 농도에서 최종 제품의 안정성 테스트는 L-F18 트립토판이 화학적 순도, 방사성 화학 순도, 거울상 이성질체 과잉 및 pH 값 측면에서 안정적이라는 것을 보여주었습니다. 95 % 이상의 화학 및 방사성 화학 순도는이 프로토콜을 사용하여 달성되었습니다. 두 개의 열이 추적기 정화에 사용됩니다.

화학 불순물을 제거하기 위해 C18 컬럼으로 전환하는 것을 잊지 마십시오. 우리는이 방법을 불소 18 표지 트립토판 방사성 추적기의 임상 생산에 신속하게 적용 할 수 있습니다.