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생쥐의 심근경색 유도를 위한 수정된 간단한 방법
생쥐의 심근경색 유도를 위한 수정된 간단한 방법
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JoVE Journal Medicine
A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

생쥐의 심근경색 유도를 위한 수정된 간단한 방법

Full Text
4,546 Views
04:29 min
December 3, 2021

DOI: 10.3791/63042-v

Chenglin Jiang*1,2, Jianqing Chen*1,2, Yichao Zhao*2, Dasheng Gao1, Hongju Wang1, Jun Pu1,2

1Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, 2Department of Cardiology, Ren Ji Hospital, School of Medicine,Shanghai Jiao Tong University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

적절한 마취 하에 쥐의 심장은 늑간 공간을 통해 외부화되었고, 대부분의 실험실에서 쉽게 구할 수 있는 재료를 사용하여 좌측 전방 하행 동맥(LAD)을 결찰하여 심근경색을 성공적으로 유도했습니다.

이 보고서는 생쥐의 심근 경색 유도에 대한 독특한 접근 방식을 제시합니다. 현재의 방법은 쉽고 시간을 절약할 수 있으며 대부분의 실험실에서 쉽게 볼 수 있는 수술용 튜브와 장비를 사용합니다. 심근경색 모델의 확립은 MI 이후 리모델링의 과거 메커니즘과 새로운 치료법의 변형을 조사하기 위한 전제를 제공합니다.

제모 크림을 쥐 가슴에 바르고 1분 동안 기다립니다. 그런 다음 젖은 거즈로 제모 크림과 머리카락을 부드럽게 닦아냅니다. 마우스를 앙와위 자세의 수술 플랫폼에 고정합니다.

본문에 설명된 대로 수술 부위를 소독합니다. 그런 다음 소독 부위 주위에 멸균 드레이프를 놓습니다. 시푸스와 겨드랑이를 잇는 선을 따라 0.5cm의 피부를 절개하고 집게로 가슴 대근육과 가슴 소근육을 뭉툭하게 분리한다.

Micro-Mosquito 지혈제를 사용하여 네 번째 늑간 공간을 엽니다. 왼손 검지로 심장을 네 번째 늑간 공간 쪽으로 밀어 심장을 외부화합니다. 왼손으로 심장을 고정하고 원점에서 3mm 떨어진 6/0 봉합사로 왼쪽 전방 하행 가지를 결찰합니다.

심장을 빠르게 흉강에 다시 넣습니다. 흉강을 부드럽게 눌러 흉강에서 공기를 빼냅니다. 수술 후 통증 관리를 위해 수술 후 최대 72시간 동안 4-6시간마다 부프레노르핀을 피하 주사합니다.

마우스를 가열 패드에 올려 놓고 마취에서 회복합니다. 안락사된 쥐를 수술 플랫폼에 누운 자세로 고정합니다. 상복부에 약 3-4cm의 복부 절개를 합니다.

흉강의 양쪽에서 갈비뼈를 잘라낸 다음 횡격막을 제거합니다. 뇌실 내 주사를 통해 섭씨 4도의 차가운 10밀리리터를 심장에 관류합니다. 그런 다음 대동맥 뿌리를 잘라 심장을 채취하고 즉시 섭씨 영하 80도에 보관합니다.

얼어붙은 심장을 면도날을 사용하여 얼음 위에서 1mm 두께로 자릅니다. 준비된 심장 절편을 섭씨 37도에서 10-15분 동안 1X PBS 1개에 용해된 1% TTC 용액에 배양합니다. 그런 다음 디지털 카메라를 사용하여 조각을 촬영합니다.

관상동맥결찰술 후 TTC 염색 분석은 심근경색의 성공적인 유도 및 MI 후 흉터 크기의 시간적 변화를 나타냈습니다. 생존 분석 결과는 수컷 및 암컷 C57BL/6J 마우스에서 MI 후 7일 이내에 명백한 사망률을 보여주었습니다. 심실 파열은 MI 후 사망의 일반적인 원인이었습니다.

MI 후 심장 초음파 평가는 수축 기능 장애 및 심실 리모델링의 성공적인 유도를 보여주었습니다. 심장을 외면화하려고 할 때 먼저 흉강을 누르지 말고, 우리의 저항을 따르는 것은 가중 칭찬에 대한 방향을 조정할 필요가 있음을 나타냅니다. 이 절차에 따라, 심장 질환 문제에서 유전자 치료제 또는 세포 치료제의 효능을 시험하기 위해 바이러스 벡터 또는 세포의 심내막 주사를 수행할 수 있습니다.

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수정된 간단한 방법 심근경색 유도 MI 모델 MI 후 리모델링 새로운 치료법 이소프로테레놀 치료 냉동 손상 관상 동맥 결찰 허혈 반응 만성 리모델링 기술적 과제 쉽게 구할 수 있는 재료 마우스 흉부 피부 늑간 공간 대흉근 소흉근 좌측 전방 하강 분지(LAD) 6-0 봉합사 2 3 5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드(TTC) 흉터 크기 변화 생존 분석 결과 심장 파열 심장 초음파 평가

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