비리오크크레아티드 덕트에 타우로콜레이트 나트륨의 역행 주입을 사용하여 마우스 심각한 급성 췌장염 모델의 설립

중증 급성 췌장염의 마우스 모델은 본원에 기재된다. 여기에 제시된 절차는 매우 빠르고 간단하며 접근 가능하므로 잠재적으로 분자 메커니즘및 급성 췌장염의 다른 치료 내정간섭에 대한 연구가 편리한 방법으로 허용됩니다.

이 비디오의 전반적인 목표는 비관 증분 덕트로 나트륨 타우로 콜린산나트륨의 역행 주입을 통해 급성 췌장염의 마우스 모델을 설정하는 것입니다. 동물과 관련된 모든 실험은 소오하우 대학의 동물 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 모든 수술 절차는 완전한 마취하에 수행되었습니다.

진통제는 질병의 자연적인 과정을 방해하지 않기 위하여 사용되지 않았습니다, 이전 문학에 의해 입증되고 Soochow 대학의 동물 윤리 위원회에 의해 승인되었습니다. 수술 전 8~12시간 전에 마우스를 빠르게 합니다. 0.22 마이크로 필터를 통해 5%의 타우로콜레이트 용액 필터를 준비합니다.

집게, 가위, 블레이드 홀더, 바늘 홀더, 혈전 성 클립, 혈관 클램프 및 멸균 커튼을 포함한 수술 기구 및 재료를 자동 클랩합니다. 마이크로 주사기는 조사를 통해 살균되었습니다. 마우스를 사용하면 킬로그램당 50 밀리그램의 투여량으로 1%펜토바르비탈 나트륨 용액의 관면 주사로 전신 마취를 유도하십시오.

조사 된 폼 플랫 플레이트에 마우스를 테이프로 고정합니다. xiphoid 공정 수준에서 제거 크림을 사용하여 마우스의 털을 제거하여 양측 전방 우수한 iliac 척추의 연결 선까지, 좌우측면은 전면 축실선과 평행하게 된다. 0.5%의 요오도프기로 2~3회 피부를 닦고 매번 1~2분 간 건조시키세요.

멸균 커튼으로 마우스를 덮습니다. 열린 피부 층을 잘라내고 피하로 엽니다. 약 2~ 3센티미터 길이의 중앙위부 절개를 합니다.

위장을 따라 십이지장(duodenum)을 왼쪽에서 오른쪽으로 찾습니다. 십이지장과 왼쪽을 외과 용 집게와 소독제에 젖은 면봉을 사용하여 췌장, 이중 성 덕트 및 십이지장 유두를 부드럽게 당깁니다. 8-0 사용 유두 주위의 십이지장과 췌장 사이의 연결을 통과하는 봉합사, 마우스 몸의 왼쪽으로 봉합사를 당겨 십이지장을 고치게 한다.

피부와 간 의 아래 쪽 가장자리를 부드럽게 당깁니다. 일반적인 간 덕트를 고정합니다. 소인주사를 분해 성 빌리오판크레아틱 덕트로 역행하여 관통합니다.

십이지성 유두 근처의 바늘 끝을 클램프로 고정합니다. 분당 5 마이크로리터의 속도로 5%의 타우로콜레이트 나트륨 10마이크로리터를 이중성 덕트에 주입합니다. 안정적인 압력을 달성하기 위해 5 분 동안 비오 판크레틱 덕트를 닫습니다.

클램프를 제거합니다. 마이크로 인젝터를 꺼내 다른 클램프를 제거하고 봉합사를 수정합니다. 십이지드넘을 원래 해부학적 위치로 복원하고 출혈을 확인합니다.

6-0 봉합사로 상처를 닫습니다. 멸균 커튼을 제거합니다. 0.5%의 요오도프로 절개를 소독합니다.

섭씨 37도 열패드에서 마취에서 동물을 회수하십시오. 관리 0.8 밀리 리터의 0.9% 식염수 피하 유체 보충에 대 한 피하. 수술 후 24시간, 동일한 용량과 주사 경로를 사용하여 펜토바르비탈 나트륨으로 마우스를 마취시킵니다.

복부 대어에서 전체 혈액을 수집하고 15 분 동안 1, 500 x g에서 회전하여 혈청을 분리하여 혈청 테스트를 위해 분리하십시오. 조직학 평가를 위해 췌장과 폐 조직을 수집합니다. 췌장에 4%의 파라포름알데히드 용액을 24시간 동안 담가 두면 됩니다.

일련의 알코올 농도에서 탈수하고 파라핀에 포함됩니다. 마이크로토메를 사용하여 5 마이크로 두꺼운 췌장 조직 섹션을 준비하십시오. 췌장의 조직학적 평가를 위해 H&E 염색을 수행합니다.

마우스는 약간 비활성 상태였고 사전 작동에 비해 수술 후 24시간 동안 체중이 감소했습니다. 대조군과 SAP 마우스의 생존율은 수술 후 72시간 동안 각각 100%와 72.7%였다. 췌장 섹션에서 H&E 염색 결과에 따르면, 췌장 조직의 펄프 괴사는 SAP 마우스에서 관찰될 수 있는 반면, 대조마우스에서는 유의한 변화가 발견되지 않았다.

더욱이, 아밀라제, 리파제, 췌장 및 폐 MPO 활성의 현저히 증가된 수준은 대조마우스에 비해 SAP 마우스에서 발견되었다. 또한, ALT, AST, BUN 및 크레아티닌을 포함한 간 및 신장 지수의 상당히 높은 수치가 발견되었습니다. 이중 성 덕트로 타우로 콜린나트륨의 역행 주입을 사용 하 여, 심각한 급성 췌장염 쥐에서 유도 될 수 있습니다.

성공적인 펑크를 보장하기 위해 이중 성원 경작 덕트의 잘 노출. 천자 동안, 이중 성덕의 구멍을 피하기 위해 적절한 각도와 힘을 보장합니다. 여기서 낙담한 TC 유도된 SAP 모델은 가혹한 급성 췌장염에 관여하는 기계장치를 연구하기 위한 적합한 모델이다.

그것은 저렴 한 시약을 사용 하 여 경제 모델 이며이 비디오 초보자 외과 의사를 더 빨리 훈련 하는 데 도움이.